金黄色葡萄球菌知识培训课件

致病菌基础知识培训 内容索引 金黄色葡萄球菌的生物 学特性 金黄色葡萄球菌的培养 特性及生长 金黄色葡萄球菌的检测 与鉴定 金黄色葡萄球菌的计数 金黄色葡萄球菌的概述 按葡萄球菌的生理化学组成，将葡萄球菌分为金黄色 (Staphylococcus aureus)、表皮葡萄球菌(S. epidermidis)和腐 (S.saprophyticus)，其中金葡多为致病性菌，表葡偶尔致病。 金黄色葡萄球菌是人类化脓性感染中最常见的病原菌。可引起局 部化脓性感染，外科切口及烧伤创面的感染；也可引起肺炎、伪膜性 肠炎、肾盂肾炎、心包炎等多系统的化脓性感染；还可引起败血症、 脓毒血症等全身性感染。葡萄球菌的致病力强弱主要取决于其产生的 毒素和侵袭性酶。 金黄色葡萄球菌生物学特性 金黄色葡萄球菌呈球形，直径0.8m左右，排列成葡萄串状 ，无芽孢， 无荚膜。 革兰氏染色阳性，但衰老、死亡或被白细胞吞噬的菌体，常呈革兰氏阴 性。 金黄色葡萄球菌生长特性 金黄色葡萄球菌在肉汤中呈浑浊生长，在胰酪胨大豆肉汤内有时液体澄 清，菌量多时呈浑浊生长。 l血平板上金黄色葡萄球菌呈金黄色，有时也为白色，大而突起、圆形、 不透明、表面光滑湿润，周围有透明溶血圈。 Baird-Parker平板上金黄色葡萄球菌圆形突起、直径为2mm-3mm、光滑、 湿润，颜色呈灰色到黑色，边缘淡色，周围为一浑浊带，在其外层有一 透明圈。用接种针接触菌落似有奶油树胶的硬度。 金黄色葡萄球菌检验方法适用性 增菌培养法：适用于检查含有受损伤的金黄色葡萄球菌的加工食品。 直接平板计数法：适用于金黄色葡萄球菌含量较高（不小于10/g（ml） 的食品。 MPN法：适用于金黄色葡萄球菌含量较低杂菌含量较高的食品及其原料和 未经处理的含少量金黄色葡萄球菌的食品。 金黄色葡萄球菌PetrifilmTM纸片测试法 ：适用于肉及其制品、奶制品 定 量 方 法 定性 检样（25g或25ml+225mL7.5%氯化钠肉汤或10%氯化钠胰酪胨大豆肉汤,均质 361 18h-24h(45h-48h) Baird-Parker平板 血平板 金黄色葡萄球菌定性检验金黄色葡萄球菌定性检验 涂片染色 361 18h-24h(45h-48h) 观察溶血 BHI肉汤和营养琼脂斜面 血浆凝固酶试验 报告 报告 361 18h-24h 金黄色葡萄球菌生化试验 1.革兰氏染色 对所有的可疑培养物都要进行革兰氏染色。 2.凝固酶试验 方法：从平板上至少挑取1个可疑金黄色葡萄球菌菌落，移种到TSB/BHI肉汤中 ，置35培养18-24h。取肉汤培养物0.3mL同0.5mL凝固酶试验兔血浆充分混 合，置35培养，定时观察是否有凝块形成，至少观察6h。 试验中需同时做已知阳性和阴性对照。 结果判定：以内容物完全凝固，使试管倒置或倾斜时不流动为阳性。部分凝固 的必须进行生化鉴定加以证实。凝固酶试验 凝固酶试验结果判定 金黄色葡萄球菌生化试验 3.生化鉴定 过氧化氢酶试验 葡萄糖厌氧利用试验 甘露醇厌氧利用试验 耐热核酸酶试验（辅助 特性S. aureusS.epidermidisMicrococci 过氧化氢酶+ 凝固酶+- 耐热核酸酶+- 厌氧利用葡萄糖+- 甘露醇+- 金黄色葡萄球菌Baird-Parker平板法 25g或25ml样品+225mL稀释液 均质 十倍系列稀释 选择3个适宜的连续稀释度的样品均液，接种Baird-Parker平板 361 45h-48h 计数及血浆凝固酶试验 4 2 . 5 2 4 2 h 报告 25g或25ml样品+225mL稀释液 均质 十倍系列稀释 选择3个适宜的连续稀释度的样品均液，各吸取1ml,分别接种于3管胰酪胨大豆肉汤 361 45h-48h Baird-Parker平板 361 45h-48h 血浆凝固酶试验 查MPN表 报告结果 金黄色葡萄球菌MPN法 金黄色葡萄球菌PetrifilmTM纸片测试法 25g或25ml样品+225mL稀释液 均质 十倍系列稀释 选择2-3个连续适宜稀释度的样品均液，各取1ml,分别加入PetrifilmTM纸片 判读 在