输血前传染性疾病指标的临床运用课件

术前术前/ /输血前传染性输血前传染性 疾病疾病 指标的临床运用指标的临床运用 l 按照卫生部临床输血技术规范相关规定,要求对输血前和 手术前(包括产前)患者进行血液传播性疾病的血清指标检测， 即乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒抗体(抗HCV)、人类免疫缺 陷病毒(型,型)抗体(抗HIV l/2)、梅毒抗体（TP）四项传 染性指标。 l 我国2012年发布的中国丙型病毒性肝炎医院感染防控指南 中要求：进行外科手术及侵入性诊疗操作(所有涉及外科操 作的内科、内镜以及妇科、产科、牙科等的常规医疗操作)患 者在进行操作前筛查丙肝病毒抗体；血液透析患者首次血液 透析前应进行丙肝病毒抗体检测，丙肝病毒抗体阴性者在血 透中建议定期(半年)进行丙型病毒性肝炎的筛查 l 这对于避免医源性感染、预防医务人员的职业感染， 防止出 现医疗纠纷有积极意义。 l 为保障广大人民群众的身体健康，提高人口素质，有效控制病毒性 肝炎（HBV、HCV）艾滋病和梅毒等传染性疾病的传播，加强肝 炎、艾滋和梅毒等传染病的预防与控制工作，国家制定了中华人 民共和国传染病防治法、艾滋病防治条例及最新的中国预 防与控制梅毒规划（2010-2020年）。 主要内容 nHBV感染与检测 nHCV感染与检测 nHIV感染与检测 nTP感染与检测 HBsAg Prevalence 8% - High 2-7% - Intermediate 100 IU/L (20%)-无须复种 乙肝疫苗注射效果评价 -定量是应答水平评价标准 血清HBsAb定量可用于评价乙肝疫苗接种的效果 主要内容 HBV感染与检测 HCV感染与检测 HIV感染与检测 TP感染与检测 HCV-沉默的杀手 全球感染率2.8%，中国感染率0.43% 慢性化比例高达70% 2004 HCV audio web conference, Dr.ER Schiff, Miami University, Florida Symptoms +/- Time after Exposure Titer anti-HCV ALT Normal 01234561234 YearsMonths HCV-RNA HCV Core Ag Symptoms +/- Time after Exposure Titer anti-HCV ALT Normal 01234561234 YearsMonths HCV-RNA HCV Core Ag Persistent Case: 70%Cured Case: 30% HCV 感染的典型血清学模式 急性HCV感染被完全治愈急性HCV感染转为慢性感染 急性HCV感染的两种临床结果（血清学模式）： 2015年版中国丙型肝炎防治指南推荐以 抗-HCV作为HCV感染者的筛查 抗-HCV检测检测的窗口期 3rd generation HCV antibody tests HCV感染 3rd gen 二代试剂82天 一代试剂140-150天 3代试剂70天 强生第三代，Roche、Sysmex、Abbott、Siemens等均为第二代 化学发光与ELISA检测敏感度比较 几种丙肝抗体检测的临床应用评价，现代检验医学杂志，2012 本试验中所有初筛阳 性及三种方法检测不 一致标本均以HCV- RNA进行确认，结果 仅有1例HCV-RNA为 阴性，其余均为阳性 ，可能是由于窗口期 导致发光法漏检，无 误诊，而两种ELISA 方法漏检隶属分别为 14例和12例，两例 误诊（RF强阳性/较 严重溶血） 高危人群筛查：血透患者 血透患者感染 丙肝屡见报道 为什么血透患者为丙肝高危人群？ 长期血液透析病人多为慢性肾功能衰竭病人，机体免疫 力低下，免疫系统较难发生免疫应答产生抗体，导致 HCV抗体检测的窗口期延长。 对于血透人群只用HCV抗体筛查，会导致大量漏检， 增加血透病人感染风险！ 丙肝血清学图谱 核心抗原检测:12-15天 抗体检测：70天 明显缩短窗口期！ 有条件建议对高风险人群开展HCV核心抗原检测 主要内容 HBV感染与检测 HCV感染与检测 HIV感染与检测 TP感染与检测 中国HIV的流行分布 l 截至2013年9月，联合 国艾滋病规划署（ UNAIDS）公布中国HIV 感染人数850，000 l 中国艾滋病每天死 8000人，每天新患1.5 万 0 20 30 40 50 60 70 80 90 100 IgG HIV1IgG HIV1 病毒裂解病毒裂解产产产产物物 敏感性敏感性 特异性特异性 无无 IgM IgM 无无 HIV 2HIV 2 1983-85 Sensitivity % 2002 P24+ IgG+IgM HIV1&HIV2 重组抗原 合成多肽 敏感性99.9% 特异性99.9% 第4代 IgG + IgM HIV1&HIV2 重组抗原 合成多肽 1994 P24 抗原 IgG HIV1+HIV2 重组抗原 敏感性 特异性 无 IgM 1987-90 第3代 第2代 第1代 敏感性 特异性 HIV-1 O 组组 血清学检测 HIV 技术的进展 01020405060708090100 365 30 1代抗体检测 3代抗体检测 P24抗原检测 4代 Ag+Ab检测 17 22 31 窗口期: 3-5天灵敏的联检 3代HIV抗体EIA HIV p24 Ag p24 Ag EIA 抗HIV抗体 1代 HIV抗体EIA HIV Ag+Ab 联合检测缩短窗口期 Adapted from: Fiebig et al AIDS, 17:1871-1879 (2003) 感染早期，在HIV抗体产生之前就可以检出HIV p24抗原。HIV抗原抗体 (Ag+Ab)联检检出HIV感染的时间比HIV抗体检测早3-5天 化学发光与ELISA检测敏感度比较 CLIAECLIAELISA 三种不同技术原理的第4代HIV诊断试剂的临床检测性能比较研究 中华检验医学杂志 2013年 雅培 罗氏 佰乐 注：血清转换盘来源于已经确诊HIV感染，且已知感染HIV的时间 编号血清盘结果 ABBOTT 结果 ROCHE 结果Sysmex结果 SIMENS 结果 2R702.25R374.9R361.157R50R 3R887.257R1834R500.000R50R 5R35.387R44.17R49.821R50R 6R100.847R78.74R59.879R3.96R 8R57.587R35.69R69.446R50R 9R435.559R247.1R500.000R0.08N 10N0.101N0.264N0.019N0.08N 11R57.321R18.07R61.642R500.000R0.27N 15R36.643R18.76R104.201R0.11N 17R160.909R89.34R419.387R14.71R 19R87.388R37.41R166.591R0.09N 20N0.107N0.282N0.043N0.15N 21R27.169R9.42R61.493R50R 22R7.243R3.52R16.17R1.23R 23R3.329R2.3R6.998R0.05N 25R2.569R1.35R7.094R0.07N 血清转换盘检测结果 主要内容 HBV感染与检测 HCV感染与检测 HIV感染与检测 TP感染与检测 l 诊察临床症状 初期硬结、硬性下疳、扁平湿疣等 l 病原学检查 原理：一期、二期梅毒时，取硬下疳、扁平 湿疣、黏膜斑等皮损部位组织液或淋巴结穿 刺术得到的组织液，在暗视野显微镜下，光 线从聚光器的边缘斜射到涂片上的梅毒螺旋 体而发出亮光，从而根据其特殊形态和运动 方式进行检测。 方法： （1）暗视显微镜检查 （2）镀银染 色法 （3）核酸检测 l 血清学检查 梅毒螺旋体抗体（TP）检测法 脂质抗体检测法 梅毒诊断方法 l 感染梅毒4周左右产生IgG型抗梅毒螺旋体抗体，即使经足量抗梅治疗，梅毒螺旋 体抗原消失后很长时间，IgG抗体仍可通过记忆细胞的作用继续产生，甚至终生在 血清中可测出 l 另一种具有抗体性质的物质叫反应素(reagin)，是梅毒螺旋体破坏人体组织过程 中释放出的一种抗原性心磷脂刺激机体所产生的抗体。反应素一般在感染后57周 （或下疳出现后23周）产生，经正规治疗后可逐渐消失。 l 感染梅毒后，首先 产生IgM型抗梅毒螺 旋体抗体，感染2周 后即可测出，早期 梅毒抗梅治疗39 个月后或晚期梅毒 治疗2年后，大部分 病人IgM可转阴性， 再感染时又出现阳 性，故IgM型抗体的 存在是活动性梅毒 的表现 梅毒血清学标记物 梅毒血清学诊断流程 特异性梅毒血清学试验（CLIA, ELISA, TPPA等） （-） 阴性报告 （+ ） 非特异性梅毒血清学试验（RPR等） （+ ） 现症梅毒 抗梅治疗，疗效观察 （-） 询问梅毒既往感染和治疗史 （+ ） 既往感染 （-） 随访或抗梅治疗 l 先进行梅毒螺旋体抗原血清学试验，阳性时再进行非螺旋体抗原血清学 试验 梅毒螺旋体 血清学检测 非梅毒螺旋体 血清学检测 参考结果解释* TPPA/TPHA/ELISA/CLI A RPR/VDRL 排除梅毒或极早期感染 晚期梅毒或梅毒既往感染 非特异性或非梅毒螺旋体 血清学试验假阳性 梅毒感染，可能为现症梅 毒 l 该结果解释不适用于胎传梅毒、神经梅毒 l 检测结果阳性，临床无症状和体征，否认感染史的人群，可能存在隐性感染和 既往感染，少数存在非特异性抗体干扰，如老年人群。 l 对于检测结果阴性，承认有高危性行为的人群，建议随访复查。 梅毒血清学检测结果解释 几种梅毒螺旋体抗体检测方法的应用评价 检验与临床2009（49）16：108-110 CLIA和ELISA均为98.73%，CLIA方法特异性为100%，其主要优势在于特异性高， 抗干扰能力强 实验室：化学发光 VS 酶免试剂(ELISA) 化