小篮子法测呼吸(1).ppt

小篮子法测定呼吸速率小篮子法测定呼吸速率 广口瓶法或滴定法 目的和意义目的和意义 v呼吸作用是反应植物生命活动强弱的重要指标之一。常用于 植物生理研究及农业生产实践等方面。 v有氧呼吸的方程式: C6H12O6 + 6O2 6CO2 + 6H2O v测定CO2 释放量的方法: 滴定法、红外线CO2分析仪法 v测定 O2吸收量的方法: 氧电极法 小篮子法测定呼吸速率的原理小篮子法测定呼吸速率的原理 v在广口瓶中，放入一定量的Ba(OH)2溶液，用其吸收植物材料呼吸过程 中释放的CO2。然后用草酸溶液滴定剩余碱量，由空白和样品二者消耗 草酸溶液之差，计算出呼吸过程中释放的CO2量。 v 反应如下： v Ba(OH)2 + CO2 BaCO3H2O （1） v Ba(OH)2(剩余)+H2C2O4 BaC2O42H2O（2） 实验材料：萌发的小麦和大麦种子 主要实验仪器： 1、广口瓶测呼吸装置： 广口瓶一只，加一只三孔橡皮塞，一孔插入装有碱石灰的漏斗，漏斗口塞棉花，将压 碎的碱石灰粉末覆盖于棉花上，能吸收进入瓶中的CO2，另一小孔供滴定用，平时用 一小橡皮塞塞紧；第三孔插入温度计，记录测定时的温度。瓶盖下面装一小钩，以悬 挂小筐，供装植物材料用。 2. 酸式滴定管：装草酸 四、试剂四、试剂 vBa(OH)2溶液 v1/44 mol/L草酸溶液：每ml溶液相当于1mg的CO2 v0.05 mol/L-1Ba (OH)2溶液(密封保存) ，溶液配好后先 过滤到试剂瓶中，塞紧试剂瓶，尽量减少溶液曝露在 空气中的时间，以减少BaCO3 沉淀的产生 v酚酞指示剂：1g 酚酞溶于100 ml 95%乙醇中 五、实验步骤五、实验步骤 1 1、空白滴定：、空白滴定： v 通过滴定孔向广口瓶内放入Ba(OH)2溶液20 ml ，加入2滴酚酞试剂。 v 塞紧小橡皮塞，摇动广口瓶几分钟，使瓶内 CO2 充分吸收。 v待瓶内CO2吸收后，拔出小橡皮塞，把酸式滴定 管插入小孔中，用草酸滴定，至红色刚刚消失为 止。 v记下草酸溶液用量的毫升数，即为空白滴定值。 2 2、准备植物材料：、准备植物材料： 取待测小麦或大麦种子8 g(约100粒) ，在天平上称出重量，装在小篮中。 vv3 3、正式滴定：、正式滴定： v 3.1 萌发的种子 倒出废液，用蒸馏水洗凈 广口瓶，重加20 ml Ba(OH)2 溶液于瓶内，将装有待测种 子的小篮迅速挂在小钩上， 塞紧瓶塞。 v 3.2 煮熟的种子 方法同上。 v开始记录时间，30分钟后，小 心打开瓶塞，迅速取出小篮， 立即重新盖紧瓶塞，充分摇动 2分钟，使瓶内CO2的完全被 吸收，从滴定孔中滴入2滴酚 酞。其余操作如前，记下草酸 用量，即为样品滴定值。 vv六、计算呼吸速率六、计算呼吸速率 v (空白滴定值-样品滴定值) mg CO2 v呼吸速率= 植物组织鲜重 时间 v呼吸速率的单位一般可采用mg(CO2) g-1 FW h-1， vmg CO2ml-1草酸1 vv七、注意事项七、注意事项 v操作时勿使口中呼出的气体进入瓶中。 v测定期间轻轻