基因工程高考试题汇编.doc

专业资料为你而备2005-2011年基因工程高考试题汇编考点一 限制酶 DNA连接酶1.(2005全国I)镰刀型细胞贫血症的病因是血红蛋白基因的碱基序列发生了改变。检测这种碱基序列改变必使用的酶是 （ ）A、解旋酶 B、DNA连接酶 C、限制性内切酶 D、RNA聚合酶（注：解析见12页江苏38题）2.（2005天津理综31）（1）限制性内切酶的识别序列和切点是GGATCC，限制性内切酶的识别序列和切点是GATC。在质粒上有酶的一个切点，在目的基因的两侧各有1个酶的切点。请画出质粒被限制酶切割后所形成的黏性末端。答：请画出目的基因两侧被限制酶切割后所形成的黏性末端。答：在DNA连接酶的作用下，上述两种不同限制酶切割后形成的黏性末端能否连接起来？为什么？（注：考察同尾酶的知识）3.(2007广东生物)7现有一长度为1000碱基对(by）的DNA分子，用限制性核酸内切酶Eco R1酶切后得到的DNA分子仍是1000 by，用Kpn1单独酶切得到400 by和600 by两种长度的DNA分子，用EcoRI、Kpnl同时酶切后得到200 by和600 by两种长度的DNA分子。该DNA分子的酶切图谱正确的是答案：D（2007理综II）4下列有关基因工程中限性制内切酶的描述，错误的是A一种限制性内切酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列 B限制性内切酶的活性受温度的影响C限制性内切酶能识别和切割RNA D限制性内切酶可从原核生物中提取答案：C4.(08理综)4已知某种限制性内切酶在一线性DNA分子上有3个酶切位点，如图中箭头所指，如果该线性DNA分子在3个酶切位点上都被该酶切断，则会产生a、b、c、d四种不同长度的DNA片段。现在多个上述线性DNA分子，若在每个DNA分子上至少有1个酶切位点被该酶切断，则从理论上讲，经该酶切后，这些线性DNA分子最多能产生长度不同的DNA片段种类数是A3 B4 C9 D124、(9分)在植物基因工程中，用土壤农杆菌中的Ti质粒作为运载体把目的基因重组人Ti质粒上的T-DNA片段中，再将重组的T-DNA插入植物细胞的染色体DNA中。(1)科学家在进行上述基因操作时，要用同一种 分别切割质粒和目的基因，质粒的黏性末端与目的基因DNA片段的黏性末端就可通过 而黏合 答案： (1)限制性内切酶 碱基互补配对2011江苏(4)用限制酶EcoRV、Mbol单独或联合切割同一种质粒，得到的DNA片段长度如下图(1 kb 即1000个碱基对)，请在答题卡的指定位置画出质粒上EcoRV、Mbol的切割位点。答案：2006江苏41(8分)基因工程又叫基因拼接技术。(1)在该技术中，用人工合成方法获得目的基因的途径之一是：以目的基因转录的_为模板，_成互补的单链DNA，然后在酶的作用下合成_。(2)基因工程中常用的受体细胞有细菌、真菌、_。若将真核基因在原核细胞中表达，对该目的基因的基本要求是_。(3)假设以大肠杆菌质粒作为运载体，并以同一种限制性内切酶切割运载体与目的基因，将切割后的运载体与目的基因片段混合，并加入DNA连接酶。连接产物至少有_种环状DNA分子，它们分别是_。【题目一句话】考查的内容是细胞工程，考查的能力是比较、判断、推理、分析、综合等思维能力。【答案】1）信使RNA（mRNA） 逆转录（反转录） 双链DNA（目的基因） （2）动植物细胞 除去内含子 （3）3 运载体自连的、目的基因片段自连、运载体与目的基因片段相连的环状DNA分子【分析】真核细胞的基因中有内含子，在转录过程中内含子和外显子都要转录，在形成成熟NRA时，要把与内含子相应的NRA片断切除掉，而原核细胞中没有这类酶，所以若将真核基因在原核细胞中表达，先要把真核细胞基因的内含子去掉。当把切割后的运载体与目的基因片段混合，在加入DNA连接酶后，有可能是两个目的基因片段相连成一个环状DNA，或是可能是一个目的基因片段与运载体相连成一个环状DNA或是两个运载体相连，所以会产生三种环状DNA分子。19.(08海南)26（18分）（选修模块3：现代生物科技专题）图为某种质粒表达载体简图，小箭头所指分别为限制性内切酶EcoRI、BamHI的酶切位点，ampR为青霉素抗性基因，tctR为四环素抗性基因，P为启动因子，T为终止子，ori为复制原点。已知目的基因的两端分别有包括EcoRI、BamHI在内的多种酶的酶切位点。（1）将含有目的基因的DNA与质粒表达载体分别用EcoRI酶切，酶切产物用DNA连接酶进行连接后，其中由两个DNA片段之间连接形成的产物有 、 、 三种。若要从这些连接产物中分离出重组质粒，需要对这些连接产物进行 。（注：见前页2006江苏41）（2）用上述3种连接产物与无任何抗药性的原核宿主细胞接种到含四环的培养基中，能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物是 。（3）目的基因表达时，RNA聚合酶识别和结合的位点是 ，其合成的产物是 。（4）在上述实验中，为了防止目的基因和质粒表达载体在酶切后产生的末端发生任意连接，酶切时应选用的酶为 。答案：（18分）（1）目的基因载体连接物 载体-载体连接物 目的基因-目的基因连接物 分离纯化（每空2分，共8分）（其他合理答案也给分） （2）载体-载体连接物（2分）；目的基因-载体连接物（1分）、载体-载体连接物（1分）（3）启动子 mRNA（每空2分，共4分）（4）EcoRI和BamHI（2分）（只答一个酶不给分）（注：用两种酶来切，体会用意）（09江苏生物）34(7分)苏云金杆菌(Bt)能产生具有杀虫能力的毒素蛋白。下图是转Bt毒素蛋白基因植物的培育过程示意图(为抗氨苄青霉素基因)，据图回答下列问题。 (1)将图中的DNA用HindIII、BamH I完全酶切后，反应管中有 种DNA片段。 (2)图中表示HindIII与Bam I酶切、DNA连接酶连接的过程，此过程可获得 种重组质粒；如果换用Bst l与BamH l酶切，目的基因与质粒连接后可获得 种重组质粒。 (3)目的基因插人质粒后，不能影响质粒的 。 (4)图中的Ti质粒调控合成的vir蛋白，可以协助带有目的基因的TDNA导人植物细胞，并防止植物细胞中 对TDNA的降解。 (5)已知转基因植物中毒素蛋白只结合某些昆虫肠上皮细胞表面的特异受体，使细胞膜穿孔，肠细胞裂解，昆虫死亡。而该毒素蛋白对人类的风险相对较小，原因是人类肠上皮细胞 。 (6)生产上常将上述转基因作物与非转基因作物混合播种，其目的是降低害虫种群中的 基因频率的增长速率。答案：(7分)(1)4 (2)2 1 (3)复制 (4)DNA水解酶 (5)表面相应的特异性受体(6)抗性（10江苏卷）27（8分）下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，圈l、圈2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题： （1）一个图1所示的质粒分子经Sma 切割前后，分别含有 个游离的磷酸基团。 （2）若对图中质粒进行改造，插入的Sma酶切位点越多，质粒的热稳定性越 。 （3）用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒，不能使用Srna 切割，原因是 。 （4）与只使用EcoR I相比较，使用BamH 和Hind 两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止 。 （5）为了获取重组质粒，将切割后的质粒与目的基因片段混合，并加入 酶。 （6）重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了 。 （7）为了从cDNA文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因，将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体，然后在 的培养基中培养，以完成目的基因表达的初步检测。【答案】（1）0、2（2）高（3）Sma会破坏质粒的抗性基因、外源DNA中的目的基因（4）质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化（5）DNA连接（6）鉴别和筛选含有目的基因的细胞（7）蔗糖为唯一含碳营养物质【解析】本题考查基因工程的限制性内切酶的作用特点（1） 质粒切割前是双链环状DNA分子，所有磷酸基团参与形成磷酸二酯键，故不含游离的磷酸基团。从图1可以看出，质粒上只含有一个Sma的切点，因此被改酶切割后，质粒变为线性双链DNA分子，因每条链上含有一个游离的磷酸基团，因此切割后含有两个游离的磷酸基团。（2） 由题目可知，Sma识别的DNA序列只有G和C，而G和C之间可以形成三个氢键，A和T之间可以形成二个氢键，所以Sma酶切位点越多，热稳定性就越高（3） 质粒抗生素抗性基因为标记基因，由图2可知，标记基因和外源DNA目的基因中均含有Sma酶切位点，都可以被Sma破坏，故不能使用该酶剪切含有目的基因的DNA（4） 只使用EcoR I，则质粒和目的基因两端的粘性末端相同，用连接酶连接时，会产生质粒和目的基因自身连接物，而利用BamH 和Hind 剪切时，质粒和目的基因两端的粘性末端不同，用DNA连接酶连接时，不会产生自身连接产物。（5）质粒和目的基因连接后获得重组质粒，该过程需要连接酶作用，故混合后加入DNA连接酶。（6）质粒上的抗性基因为标记基因，用于鉴别和筛选含有重组质粒的受体细胞。（7）将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体后，含有重组质粒的个体才能吸收蔗糖，因此可利用蔗糖作为唯一碳源的培养基进行培养受体细胞，含有重组质粒的细胞才能存活，不含有重组质粒的因不能获得碳源而死亡，从而达到筛选目的。（11天津理综卷）6、某致病基因h位于X染色体上，该基因和正常基因H中的某一特定序列BclI酶切后，可产生大小不同的片段（如图1，bp表示碱基对），据此可进行基因诊断。图2为某家庭病的遗传系谱。下列叙述错误的是A h基因特定序列中Bcl 1酶切位点的消失是碱基序列改变的结果B II-1的基因诊断中只出现142bp片段，其致病基因来自母亲C II-2的基因诊断中出现142bp，99bp和43bp三个片段，其基因型为XHXhD II-3的丈夫表现型正常，其儿子的基因诊断中出现142bp片段的概率为1/2.答案：D考点二 与遗传学原理之间综合1、细菌的某个基因发生了突变，导致该基因编码的蛋白质肽链中一个氨基酸替换成了另一个氨基酸。该突变发生在基因的（ ）BA外显子 B编码区 CRNA聚合酶结合的位点 D非编码区2.江苏(2)将携带抗除草剂基因的重组Ti质粒导入二倍体油菜细胞，经培养、筛选获得一株有抗除草剂特性的转基因植株。经分析，该植株含有一个携带目的基因的T-DNA片段，因此可以把它看作是杂合子。理论上，在该转基因植株自交F1代中，仍具有抗除草剂特性的植株占总数的 ，原因是 。(2)34 雌雄配子各有12含抗除草剂基因；受精时，雌雄配于随机结合（以上是转基因的后代不一定能稳定遗传的实例，表面上是考察基因工程，实际上是考察基因的分离定律）（2007天津理综）30（14分）在培育转基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因（kan）常作为标记基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。下图为获得抗虫棉的技术流程。侵染抗虫基因含kan质粒重组质粒土壤农杆菌含重组质粒土壤农杆菌 A构建导入 B培养选择转基因抗虫植株再生植株愈伤组织离体棉花叶片组织 C诱导选择分化 D检测请据图回答：（1）A过程需要的酶有_。（2）B过程及其结果体现了质粒作为运载体必须具备的两个条件是_。（3）C过程的培养基除含有必要营养物质、琼脂和激素外，还必须加入_。（4）如果利用DNA分子杂交原理对再生植株进行检测，D过程应该用_作为探针。（5）科学家发现转基因植株的卡那霉素抗性基因的传递符合孟德尔遗传规律。将转基因植株与_杂交，其后代中抗卡那霉素型与卡那霉素敏感型的数量比为1：1。若该转基因植株自交，则其后代中抗卡那霉素型与卡那霉素敏感型的数量比为_。若将该转基因植株的花药在卡那霉素培养基上作离体培养，则获得的再生植株群体中抗卡那霉素型植株占_%。答案：30（14分） （1）限制性内切酶和DNA连接酶 （2）具有标记基因；能在宿主细胞中复制并稳定保存 （3）卡那霉素 （4）放射性同位素（或荧光分子）标记的抗虫基因（5）非转基因植株 3：1 100（09四川理综）31（20分）大豆是两性花植物。下面是大豆某些性状的遗传实验：（1）大豆子叶颜色（BB表现深绿；Bb表现浅绿；bb呈黄色，幼苗阶段死亡）（注：考察显性不完全和隐性致死）和花叶病的抗性（由R、r基因控制）遗传的实验结果如下表：组合母本父本F1的表现型及植株数一子叶深绿不抗病子叶浅绿抗病子叶深绿抗病220株；子叶浅绿抗病217株二子叶深绿不抗病子叶浅绿抗病子叶深绿抗病110株；子叶深绿不抗病109株；子叶浅绿抗病108株；子叶浅绿不抗病113株组合一中父本的基因型是_，组合二中父本的基因型是_。用表中F1的子叶浅绿抗病植株自交，在F2的成熟植株中，表现型的种类有_，其比例为_。用子叶深绿与子叶浅绿植株杂交得F1，F1随机交配得到的F2成熟群体中，B基因的基因频率为_。将表中F1的子叶浅绿抗病植株的花粉培养成单倍体植株，再将这些植株的叶肉细胞制成不同的原生质体。如要得到子叶深绿抗病植株，需要用_基因型的原生质体进行融合。请选用表中植物材料设计一个杂交育种方案，要求在最短的时间内选育出纯合的子叶深绿抗病大豆材料。（2）有人试图利用细菌的抗病毒基因对不抗病大豆进行遗传改良，以获得抗病大豆品种。构建含外源抗病毒基因的重组DNA分子时，使用的酶有_。判断转基因大豆遗传改良成功的标准是_，具体的检测方法_。（3）有人发现了一种受细胞质基因控制的大豆芽黄突变体（其幼苗叶片明显黄化，长大后与正常绿色植株无差异）。请你以该芽黄突变体和正常绿色植株为材料，用杂交实验的方法，验证芽黄性状属于细胞质遗传。（要求：用遗传图解表示）答案：31.（20分）(1) BbRRBbRr （2分） 子叶深绿抗病：子叶深绿不抗病：子叶浅绿抗病：子叶浅绿不抗病 （1分）3：1：6：2 （2分）80 （2分）BR与BR、BR与Br （3分）用组合一的父本植株自交，在子代中选出子叶深绿类型即为纯合的子叶深绿抗病大豆材料。 （2分）（2）限制性内切酶和DNA连接酶 （1分）培育的植株具有病毒抗体 （1分） 用病毒分别感染转基因大豆植株和不抗病植株，观察比较植株的抗病性 (2分)（3） （4分）3.（2007）（重庆理综）30（21分）李振声院士获得了2006年度国家最高科技奖，其主要成就是实现了小麦同偃麦草的远缘杂交，培育成了多个小偃麦品种，请回答下列有关小麦遗传育种的问题：（1）如果小偃麦早熟（A）对晚熟（a）是显性，抗干热（B）对不抗干热（b）是显性（两对基因自由组合），在研究这两对相对性状的杂交试验中，以某亲本与双隐性纯合子杂交，F1代性状分离比为1：1，请写出此亲本可能的基因型：_。（2）如果决定小偃麦抗寒与不抗寒的一对基因在叶绿体DNA上，若以抗寒晚熟与不抗寒早熟的纯合亲本杂交，要得到抗寒早熟个体，需用表现型为_的个体作母本，该纯合的抗寒早熟个体最早出现在_代。（3）小偃麦有蓝粒品种，如果有一蓝粒小偃麦变异株，籽粒变为白粒，经检查，体细胞缺少一对染色体，这属于染色体变异中的_变异，如果将这一变异小偃麦同正常小偃麦杂交，得到的F1代自交，请分别分析F2代中出现染色体数目正常与不正常个体的原因：_。（4）除小偃麦外，我国也实现了普通小麦与黑麦的远缘杂交。普通小麦（六倍体）配子中的染色体数为21，配子形成时处于减数第二次分裂后期的每个细胞中的染色体数为_;黑麦配子中的染色体数和染色体组数分别为7和1，则黑麦属于_倍体植物；普通小麦与黑麦杂交，F1代体细胞中的染色体组数为_，由此F1代可进一步育成小黑麦。答案：30.（21分）（1）AaBB、Aabb、AABb、aaBb （2）抗寒晚熟；F2（或子二）（3）数目原因：F1代通过减数分裂能产生正常与不正常的两种配子；正常配子相互结合产生正常的F2代；不正常配子相互结合、正常配子与不正常配子结合产生不正常的F2代（4）42 二 4（2007四川理综）31（22）（1）下面是某基因的部分碱基序列，序列I为内含子的一部分，序列II为外显子的一部分。序列 序列TACGTCGACCGTCTACTG ATGCGGGAGGCGGATGTCATGCAGCTGGCAGATGAC TACGCCCTCCGCCTACAG 上列片段所编码蛋白质的氨基酸序列为“甲硫氨酸精氨酸谷氨酸丙氨酸天冬氨酸缬氨酸”（甲硫氨酸的密码子是AUG）。该基因表达过程中，RNA的合成在 中完成，此过程称为 。ATCG请写出编码上述氨基酸序列的mRNA序列： 。如果序列I中箭头所指碱基对 被替换为 该基因上列片段编码的氨基酸序列为：CG 如果序列II中箭头所指碱基对 缺失，该基因上列片段编码的氨基酸序列为： 答案：（1）细胞核 转录 AUG CGG GAG GCG GAU GUC 甲硫氨酸精氨酸谷氨酸丙氨酸天冬氨酸缬氨酸甲硫氨酸精氨酸谷氨酸精氨酸甲硫氨酸13.(08上海生物)28下列大肠杆菌某基因的碱基序列的变化，对其所控制合成的多肽的氨基酸序列影响最大的是（不考虑终止密码子）A第6位的C被替换为T B第9位与第10位之间插入1个TC第100、101、102位被替换为TTT D第103至105位被替换为1个T答案：B15.(08重庆)31、2007年我国科学家率先完成了家蚕基因组精细图谱的绘制，将13000多个基因定位于家蚕染色体DNA上，请回答以下有关家蚕遗传变异的问题：（）在家蚕的基因工程实验中，分离基因的做法包括用对DNA进行切割，然后将DNA片段与结合成重组DNA，并将重组DNA转入大肠杆菌进行扩增等。（）家蚕的体细胞共有56条染色体，对家蚕基因组进行分析（参照人类基因组计划要求），应测定家蚕条双链DNA分子的核苷酸序列。（）决定家蚕丝心蛋白H链的基因编码区有16000个碱基对，其中有1000个碱基对的序列不编码蛋白质，该序列叫；剩下的序列最多能编码个氨基酸（不考虑终止密码子），该序列叫。（）为了提高蚕丝的产量和品质，可以通过家蚕遗传物质改变引起变异和进一步选育来完成，这些变异的来源有。（）限制酶（或限制性内切酶）；运载体（或质粒）（）29（）内含子；5000；外显子（）基因突变、基因重组、染色体变异11.(08天津)30（20分）下图为人珠蛋白基因与其mRNA杂交的示意图，表示基因的不同功能区。珠蛋白基因DNA单链mRNA据图回答：（1）上述分子杂交的原理是；细胞中珠蛋白基因编码区不能翻译的序列是（填写图中序号）。（2）细胞中珠蛋白基因开始转录识别和结合中调控序列的酶是。（3）若一个卵原细胞的一条染色体上，珠蛋白基因基因的编码区中一个A替换成T，则由该卵原细胞产生的卵细胞携带该突变基因的概率是。（4）上述突变基因的两个携带者婚配，其后代中含该突变基因的概率是。答案：30、（20分）、（10分）碱基互补配对原则和RNA聚合酶 1/4 3/4（10浙江卷）30苏云金芽孢杆菌产生的毒蛋白能使螟虫死亡。研究人员将表达这种毒蛋白的抗螟虫基因转入非糯性抗稻瘟病水稻的核基因组中，培育出一批转基因抗螟水稻。请回答：（1）染色体主要由组成，若要确定抗螟基因是否已整合到水稻的某一染色体上，方法之一是测定该染色体的。（2）选用上述抗螟非糯性水稻与不抗螟糯性水稻杂交得到F1，从F1中选取一株进行自交得到F2，F2的结果如下表： 表现型抗螟非糯性抗螟糯性不抗螟非糯性不抗螟糯性个体数142485016分析表中数据可知，控制这两对性状的基因位于染色体上，所选F1植株的表现型为。亲本中抗螟非糯性水稻可能的基因型最多有种。（3）现欲试种这种抗螟水稻，需检验其是否为纯合子，请用遗传图解表示检验过程（显、隐性基因分别用B、b表示），并作简要说明。（4）上表中的抗螟水稻均能抗稻瘟病（抗稻瘟病为显性性状），请简要分析可能的原因。解析：本题主要考查遗传方面的知识，需要掌握两对等位基因的遗传性状和遗传图解的规范书写，该题从染色体的组成开始，借助转基因的相关知识，然后就研究两对相对性状的遗传性、（9:3:3:1），但是特别需要弄清出在这个题目中有三个相对性状抗螟虫和不抗螟虫、非糯性和糯性、抗稻瘟病和不抗稻瘟病，审题仔细了第（4）小题就不会做错。（3）把改抗螟水稻和不抗螟水稻进行杂交，若出现性状分离则为杂合子，若没有性状分离，则为纯合子。（1） 抗螟虫基因能够抑制稻瘟病的病原体的表达 抗螟虫基因表达产生的毒蛋白也能杀死稻瘟病的病原体（11年北京卷）31.（16分）T-DNA可能随机插入植物基因组内，导致被插入基因发生突变。用此方法诱导拟南芥产生突变体的过程如下：种植野生型拟南芥，待植物形成花蕾时，将地上部分浸入农杆菌（其中的T-DNA上带有抗除草剂基因）悬浮液中以实现转化。在适宜条件下培养，收获种子（称为T1代）。（1）为促进植株侧枝发育以形成更多的花蕾，需要去除 ，因为后者产生的 会抑制侧芽的生长。（2） 为筛选出已转化的个体，需将T代播种在含 的培养基上生长，成熟后自交，收获种子（称为T代）。（3） 为筛选出具有抗盐性状的突变体，需将T代播种在含 的培养基上，获得所需个体。（4）经过多代种植获得能稳定遗传的抗盐突变体。为确定抗盐性状是否由单基因突变引起，需将该突变体与 植株进行杂交，再自交 代后统计性状分离比。（5）若上述T-DNA的插入造成了基因功能丧失，从该突变体的表现型可以推测野生型基因的存在导致植物的抗盐性 。答案：31（16分）（1）顶芽 生长素（2）（一定浓度的）除草剂（3）（一定浓度的）盐（4）野生型 1（降低（11年重庆卷）31 （16分）拟南芥是遗传学研究的模式植物，某突变体可用于验证相关的基因的功能。野生型拟南芥的种皮为深褐色（TT），某突变体的种皮为黄色（tt）,下图是利用该突变体验证油菜种皮颜色基因（Tn）功能的流程示意图。（1）与拟南芥t基因的mRNA相比，若油菜Tn基因的mRNA中UGA变为，其末端序列成为“”，则Tn比多编码个氨基酸（起始密码子位置相同，、为终止密码子）。（）图中应为。若不能在含抗生素的培养基上生长，则原因是 若的种皮颜色为 ，则说明油菜基因与拟南芥T基因的功能相同。（3）假设该油菜基因连接到拟南芥染色体并替换其中一个t基因，则中进行减数分裂的细胞在联会时的基因为 ；同时，的叶片卷曲（叶片正常对叶片卷曲为显性，且与种皮性状独立遗传），用它与种皮深褐色、叶片正常的双杂合体拟南芥杂交，其后代中所占比列最小的个体表现为 ；取的茎尖培养成16颗植珠，其性状通常 （填 不变或改变）。（4）所得的转基因拟南芥与野生型拟南芥 （填是或者不是）同一个物种。答案：31（16分）（1）2（2）重组质粒（重组DNA分子） 重组质粒未导入 深褐色（3）TnTntt； 黄色正常、黄色卷曲； 不变（4）是解析：通过对基因工程和遗传知识相结合来考查学生对该部分知识的掌握，属中档题，较难。油菜Tn基因的mRNA中UGA变为AGA，而末端序列为“AGCGCGACCAGACUCUAA”，在拟南芥中的UGA本是终止密码子不编码氨基酸，而在油菜中变为AGA可编码一个氨基酸，而CUC还可编码一个氨基酸，直到UAA终止密码子不编码氨基酸。假设油菜Tn基因连接到拟南芥染色体并替换其是一个t基因，注意拟南芥是指实验有的突变体tt，所以转基因拟南芥基因型为Tnt，减数分裂联会时形成四分体是由于染色体进行了复制，基因也进行了复制，因而基因型为TnTnt t。设转基因拟南芥的叶片卷曲与正常叶是由B、b基因控制，正常叶为显性，而该对性状与种皮性状为独立遗传，则这两对性状遵循基因的分离与自由组合定律。则：转基因拟南芥 双杂合拟南芥Tntbb TtBb进行逐对分析：TntTt 1/4TnT 、 1/4Tnt、1/4 Tt 、1/4tt由于Tn和T的功能相同，所以表示为3/4T-（深褐色）、1/4tt（黄色）bbBb 1/2 Bb（正常叶）、1/2 bb（卷曲叶）所以后代中有四种表现型；3/8种皮深褐色正常叶；3/8种皮深褐色卷曲叶1/8种皮黄色正常叶；1/8种皮黄色卷曲叶取转基因拟南芥的茎尖培养为植物组织培养为无性生殖，所以后代性一般不变。（排除基因突变）由上可知所得转基因拟南芥Tnt和野生型拟南芥TT两个品种相当于发生基因突变，没有隔离，能杂交产生可育后代，因此是同一个种。此套题难度不大，考查识记的偏多，理解推理分析较少，而填空题中类似判断题型的填空又多，降低了难度，而不能很好考查学生能力，区分度不明显。考点三 基因污染4、 (3)种植上述转基因油菜，它所携带的目的基因可以通过花粉传递给近缘物种，造成“基因污染”。如果把目的基因导人叶绿体DNA中，就可以避免“基因污染”，原因是 。 (9分) (3)叶绿体遗传表现为母系遗传，目的基因不会通过花粉传递而在下一代中显现出来（10江苏卷）18下列关于转基因植物的叙述。正确的是 A转入到油菜的抗除草剂基因，可能通过花粉传人环境中 B转抗虫基因的植物不会导致昆虫群体抗性基因频率增加 C动物的生长激素基因转人植物后不能表达 D如转基因植物的外源基因来源于自然界，则不存在安全性问题【答案】A【解析】本题考查了转基因技术的安全性问题。转入到油菜的基因，可以通过花粉传入环境中，A项正确；由于植物与害虫间是相互选择的，转抗虫基因植物可使昆虫群体抗性基因频率增加，B项错误；动物生长素基因转入植物后也能表达，C项错误；转基因技术的安全性问题，要通过验证才能得到证实，D项错误。考点四 基因工程综述1.（2005）够使植物体表达动物蛋白的育种方法是（ ）CA单倍体育种 B杂交育种 C基因工程育种 D多倍体育种6（2005广东生物22）以下有关基因工程的叙述，正确的是 D （ ） A、基因工程是细胞水平上的生物工程 B、基因工程的产物对人类都是有益的 C、基因工程产生的变异属于人工诱变 D、基因工程育种的优点之一是目的性强（2005）5、科学家通过基因工程的方法，能使马铃薯块茎含有人奶蛋白。以下有关该基因工程的叙述错误的是AA采用反转录的方法得到的目的基因有内含子B基因非编码区对于目的基因在块茎中的表达是不可缺少的C马铃薯的叶肉细胞可作为受体细胞D用同一种限制酶，分别处理质粒和含有目的基因的DNA，可产生黏性末端而形成重组DNA分子（2006）1、全国统一考试理科综合能力测试（全国一）采用基因工程技术将人凝血因子基因导入山羊受精卵，培育出了转基因羊。但是，人凝血因子只存在于该转基因羊的乳汁中。以下有关叙述，正确的是BA人体细胞中凝血因子基因编码区的碱基对数目，等于凝血因子氨基酸数目的3倍B可用显微注射技术将含有人凝血因子基因的重组DNA分子导入羊的受精卵C在该转基因样中，人凝血因子基因存在于乳腺细胞，而不存在于其他体细胞中D人凝血因子基因开始转录后，DNA连接酶以DNA分子的一条链为模板合成mRNA2006 年普通高等学校招生全国统一考试（四川卷）用基因工程技术可使大肠杆菌合成人的蛋白质。下列叙述不正确的是 BA常用相同的限制性内切酶处理的基因和质粒 BDNA连接酶和 RNA聚合酶是构建重组质粒必需的工具酶 C可用含抗生素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了重组质粒 D导入大肠杆菌的目的基因不一定能成功表达 (2007北京理综)2利用外源基因在受体细胞中表达，可生产人类所需要的产品。下列各项中能说明目的基因完成了在受体细胞中表达的是 A棉花二倍体细胞中检测到细菌的抗虫基因 B大肠杆菌中检测到人胰岛素基因及其mRNAC山羊乳腺细胞中检测到人生长激素DNA序列 D酵母菌细胞中提取到人干扰素蛋白答案：D（09浙江理综）3下列关于基因工程的叙述，错误的是DA目的基因和受体细胞均可来自动、植物或微生物B限制性核酸内切酶和DNA连接酶是两类常用的工具酶C人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原无生物活性D载体上的抗性基因有利于筛选含重组DNA的细胞和促进目的基因的表达（10浙江卷）2.在用基因工程技术构建抗除草剂的转基因烟草过程中，下列操作错误的是（A）A. 用限制性核酸内切酶切割烟草花叶病毒的核酸B. 用DNA连接酶连接经切割的抗除草剂基因和载体C. 将重组DNA分子导入原生质体D. 用含除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞解析：本题考查基因工程的有关知识，基因工程的一般过程：用限制性核酸内切酶切割含目的基因的DNA分子（除草剂基因）和运载体（质粒），用DNA连接酶连接切割好的目的基因和运载体重组DNA分子导入受体细胞，因为是植物可以说是原生质体用相应的试剂和病原体帅选转基因细胞用植物组织培养技术抗除草剂的转基因烟草（表达）。所以答案A。（09安徽理综）4.2008年诺贝尔化学奖授予了“发现和发展了水母绿色荧光蛋白“的三位科学家。将绿色荧光蛋白基因的片段与目的基因连接起来组成一个融合基因，再将该融合基因转入真核生物细胞内，表达出的蛋白质就会带有绿色荧光。绿色荧光蛋白在该研究中的主要作用是A追踪目的基因在细胞内的复制过程B追踪目的基因插入到染色体上的位置C. 追踪目的基因编码的蛋白质在细胞内的分布D追踪目的基因编码的蛋白质的空间结构。答案：C（10广东卷）22.新技术的建立和应用对生物学发展至关重要。下列技术（或仪器）与应用匹配正确的是 A. PCR技术扩增蛋白质 B.杂交瘤技术制备单克隆抗体 C.光学显微镜观察叶绿体的基粒 D.花粉离体培养培育单倍体植物【解析】本题主要考查学生的理解能力。PCR技术只能用来扩增核酸，不能用来扩增蛋白质；利用光学显微镜无法观察到叶绿体的内部。【答案】BD（10全国2）5. 下列叙述符合基因工程概念的是AB淋巴细胞与肿瘤细胞融合，杂交瘤细胞中含有B淋巴细胞中的抗体基因B将人的干扰素基因重组到质粒后导入大肠杆菌，获得能产生人干扰素的菌株C用紫外线照射青霉菌，使其DNA发生改变，通过筛选获得青霉素高产菌株D自然界中天然存在的噬菌体自行感染细菌后其DNA整合到细菌DNA上【解析】A:属于动物细胞工程的内容C: 属于微生物的发酵工程的内容D:自然状态下，不是人工操作的不是基因工程，但也类似“转基因”。（11年四川卷）5.北极比目鱼中有抗冻基因，其编码的抗冻蛋白具有11个氨基酸的重复序列，该序列重复次数越多，抗冻能力越强，下图是获取转基因抗冻番茄植株的过程示意图，有关叙述正确的是A过程获取的目的基因，可用于基因工程和比目鱼基因组测序B多个抗冻基因编码区依次相连成能表达的新基因，不能得到抗冻性增强的抗冻蛋白，C过程构成的重组质粒缺乏标记基因，需要转入农杆菌才能进行筛选D应用DNA探针技术，可以检测转基因抗冻番茄植株中目的基因的存在及其完全表达答案：B（2011年浙江卷）6、ada（酸脱氨酶基因）通过质粒pET28b导入大肠杆菌并成功表达腺苷酸脱氨酶。下列叙述错误的是A. 每个大肠杆菌细胞至少含一个重组质粒 B. 每个重组质粒至少含一个限制性核酸内切酶识别位点C. 每个限制性核酸内切酶识别位点至少插入一个adaD. 每个人的ada至少表达一个腺苷酸脱氨酶分子答案：C16.(08山东)35【生物现代生物技术专题】为扩大可耕地面积，增加粮食产量，黄河三角洲等盐碱地的开发利用备受关注。我国科学家应用耐盐基因培育出了耐盐水稻新品系。（1）获得耐盐基因后，构建重组DNA分子所用的限制性内切酶作用于图中的 处，DNA连接酶作用于 处。（填“a”或“b”）（2） 将重组DNA分子导入水稻受体细胞的常用方法有农杆菌转化法和 法。（3）由导入目的基因的水稻细胞培养成植株需要利用 技术。该技术的核心是 和 。（4）为了确定耐盐转基因水稻是否培育成功，既要用放射性同位素标记的 作探针进行分子杂交检测，又要用 方法从个体水平鉴定水稻植株的耐盐性。 答案：(1)a a(2)基因枪法(花粉管通道法)(3)植物组织培养(1分) 脱分化(去分化) 再分化(4)耐盐基因(目的基因) 一定浓度的盐水浇灌(移裁到盐碱地中) 18.(08广东生物)39（现代生物科技专题，10分）天然酿酒酵母菌通常缺乏分解淀粉的酶类，用作发酵原料的淀粉需经一系列复杂的转化过程才能被利用。研究者从某丝状真菌中获取淀粉酶基因并转入酿酒酵母菌，获得的酿酒酵母工程菌可直接利用淀粉产生酒精。请回答下列问题：（1）将淀粉酶基因切割下来所用的工具是 ，用 将淀粉酶基因与载体拼接成新的DNA分子，下一步将该DNA分子 ，以完成工程菌的构建。（2）若要鉴定淀粉酶基因是否插入酿酒酵母菌，可采用的检测方法是 ，若要鉴定淀粉酶基因是否翻译成淀粉酶，可采用 检测或将该工程菌接种在含淀粉的固体平板培养基上，培养一段时间后，加入碘液，工程菌周围出现透明圈，请解释该现象发生的原因。（3）如何进一步鉴定不同的转基因工程菌菌株利用淀粉能力的大小？（4）微生物在基因工程领域中有哪些重要作用？答案：限制酶（限制性内切酶） DNA连接酶 导入受体细胞 （2）DNA分子杂交技术 抗原抗体杂交解析：载体上的抗性基因主要起着标记基因的作用，有利于筛选含重组DNA的细胞，并不能促进目的基因的表达。答案：D。10(2009年高考天津卷)水稻种子中70%的磷以植酸形式存在。植酸易同铁、钙等金属离子或蛋白质结合排出体外，是多种动物的抗营养因子；同时，排出的大量磷进入水体易引起水华。为从根本上解决水稻中的高植酸问题，可将植酸酶基因导入水稻，培育低植酸转基因水稻品种。下图是获取植酸酶基因的流程。据图回答：(1)图中基因组文库_(小于/等于/大于)cDNA文库。(2)B过程需要的酶是_；A、C过程中_(可以/不可以)使用同一种探针筛选含目的基因的菌株。(3)目的基因I和除从构建的文库中分离外，还可以分别利用图中_和_为模板直接进行PCR扩增，该过程中所用酶的显著特点是_。解析：由图示可知，mRNA是酵母菌DNA上的基因选择性转录获得的产物，因此二者对应的文库大小情况是基因组文库大于cDNA文库。B过程mRNADNA为逆转录过程，需要逆转录酶的催化。由于两种方法选择的目的基因相同，都是植酸酶基因，且都是从酵母菌体内提取的(DNA或mRNA)，因此碱基序列相同，可用同一种探针来筛选含目的基因的菌株。PCR技术中需要在高温条件下进行DNA的解旋，因此所用的酶要耐高温。答案：(1)大于(2)逆转录酶可以(3)DNAcDNA耐高温11(2009年高考福建卷)转基因抗病香蕉的培育过程如图所示。质粒上有Pst、Sma、EcoR、Apa等四种限制酶切割位点。请回答：(1)构建含抗病基因的表达载体A时，应选用限制酶_，对_进行切割。(2)培养基中的卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长，欲利用该培养基筛选已导入抗病基因的香蕉细胞，应使基因表达载体