中药材中农药多残留检测操作规程.doc

/sundae_meng中药材中农药多残留检测操作规程一、 有机氯类农药残留量测定方法1 简述有机氯类农药是农药史中使用量最大，使用历史最长的一类农药，其化学性质稳定，脂溶性强，残效期长，容易在脂肪组织中蓄积，造成慢性中毒，严重危害人体健康。本方法通过提取、净化等步骤制备供试品溶液，采用气相色谱法，电子捕获检测器测定。2 仪器与试剂2.1 气相色谱仪，电子捕获检测器，载气为高纯氮，超声波处理器，快速溶剂萃取仪，旋转蒸发仪，高速离心机，氮吹仪，CP Sil 5CB毛细管柱(30.0m 250m 0.25m )2.2 试剂和标准品五氯硝基苯、P,P-DDD、P,P-DDE、P,P-DDT、O,P-DDT、甲体六六六、乙体六六六、丙体六六六、丁体六六六以上标准品均由中国计量科学研究院研制，丙酮（分析纯）、正己烷（色谱级）、石油醚（分析纯）、氯化钠（分析纯）、浓硫酸（分析纯）、助滤剂Celite 545、超纯水。3 色谱条件程序升温：初始100，每分钟10升至220，每分钟8升至250，保持10分钟，进样口温度230；检测器温度300，载气为高纯N2，流速1.0ml/min，尾吹：30ml/min，采用不分流进样，进样体积1.0L。4 操作方法4.1对照品储备液的配制 对照品储备液制备 精密称取六六六 (BHC)-BHC，-BHC，-BHC，-BHC),滴滴涕 (DDT) PP-DDE，PP-DDD，OP-DDT，PP-DDT及五氯硝基苯 (PCNB)农药对照品适量，用正己烷分别制成每 1ml约含45g的溶液，即得。 混合对照品储备液的制备 精密量取上述各对照品储备液0.5ml置10ml量瓶中,用正己烷稀释至刻度，即得。 混合对照品溶液的制备 精密量取上述混合对照品储备液，用正己烷制成每 1L含0g、1g、5g、10g、50g、100g、250g的溶液，即得。4.2供试品溶液制备4.2.1 样品的提取采用快速溶剂萃取仪进行萃取，萃取池底部先放置抗溶剂隔片，称量2g制备好的样品与2g无水硫酸钠，混合均匀后装入30ml萃取池中，加助滤剂Celite 545补足。出口处放置抗溶剂隔片，之后拧紧池盖。用正己烷进行提取，选择系统压力为1200psi，温度为105，预热5分钟，静态提取5分钟，循环两次，萃取结束后用氮气吹扫，压力为120psi，时间为1分钟，提取液收集到收集瓶中备用。4.2.2 样品的净化将上述提取液转移到100毫升分液漏斗，加2毫升浓硫酸磺化3次，去除磺化层，加40毫升4%硫酸钠水溶液洗正己烷层3次，去除硫酸钠水溶液层，正己烷层过5克无水硫酸钠脱水，转移置旋转蒸发仪，浓缩到适量体积定容待测。4.3测定法按上述色谱条件操作，分别精密吸取供试品溶液和混合对照品溶液各1.0L，分别连续进样3次，取平均值，按外标法计算供试品中9种有机氯类农药残留量。二、 有机磷类农药残留量测定方法1 简述有机磷农药是继有机氯农药之后在我国大量使用的一类农药，在我国农药产量中占有十分重要的地位，农药残留的分析研究近年来发展迅速，因此开展这类农药在中药中进行分析研究很有必要。本方法通过提取、净化等步骤制备供试品溶液，采用气相色谱法，脉冲火焰检测器测定。2 仪器和试剂2.1仪器：美国VARIAN GC-450气相色谱仪，带PFPD检测器，CP Sil 8CB毛细管柱(30.0m530m0.32m )，BUCHI-R210旋转蒸发仪，KQ-3200超声波清洗器，高速离心机，氮吹仪，快速溶剂萃取仪，玻璃层析柱，其他常用的实验室装置和器皿。2.2 试剂和标准品试剂：二氯甲烷（分析纯）、丙酮（分析纯）、乙酸乙酯（分析纯）经全玻璃仪器重蒸；无水硫酸钠（分析纯，650灼烧4小时后备用）助滤剂Celite 545；活性炭；超纯水；农药标准品：敌敌畏、甲胺磷、马拉硫磷、速灭磷、甲基嘧啶磷、乙硫磷、倍硫磷、杀扑磷、二嗪农，以上标准品由中国计量科学研究院和国家标准物质研究中心提供。3 色谱条件程序升温：初始120，每分钟10升至220，每分钟5升至240，保持2分钟，每分钟20升至270，保持1.0分钟，进样口温度240；PFPD检测器温度300，氮气流速2ml/min，氢气14ml/min，空气117ml/min，空气210ml/min；光电倍增管压500mv，门电压300mv,不分流进样，进样体积1.0L。4 操作方法4.1对照品储备液的配制对照品储备液制备 精密称取敌敌畏、甲胺磷、马拉硫磷、速灭磷、甲基嘧啶磷、乙硫磷、倍硫磷、杀扑磷、二嗪农农药对照品适量，用乙酸乙酯分别制成每1ml约含100ug的溶液，即得。 混合对照品储备液的制备 精密量取上述各对照品储备液1ml，置20ml棕色量瓶中,加乙酸乙酯稀释至刻度，即得。 混合对照品溶液的制备 精密量取上述混合对照品储备液，用乙酸乙酯制成每 1mL含0.1g、0.5g、1g、2g、5g的溶液，即得。4.2 样品的制备4.2.1 样品的提取采用快速溶剂萃取仪进行萃取，萃取池底部先放置抗溶剂隔片，称量2g制备好的样品与2g无水硫酸钠，混合均匀后装入萃取池中，加助滤剂Celite 545补足。出口处放置抗溶剂隔片，之后拧紧池盖。用乙酸乙酯进行提取，选择系统压力为1500psi，温度为80，预热5分钟，静态提取5分钟，循环两次，萃取结束后用氮气吹扫，压力为120psi，时间为1分钟，提取液收集到收集瓶中备用。4.2.2 样品的净化取玻璃层析柱(25cm1.5cm，柱底部自带玻璃砂芯，带活塞，)，自下而上依次装填lcm厚无水硫酸钠，5g活性碳+celite545助滤剂(1：3)， 2cm厚无水硫酸钠，装填各部分均轻轻敲打，使填充均匀。用20mL乙酸乙酯预洗，待液面下降至上层硫酸钠层时，将上述浓缩液转移至层析柱上，并用正己烷-乙酸乙酯（1：1）混合液50m1洗脱，收集淋洗液，置氮吹仪上浓缩至近干，精密加入乙酸乙酯1ml使溶解，即得待测。4.3测定法按上述色谱条件操作，分别精密吸取供试品溶液和混合对照品溶液各1.0L，分别连续进样3次，取平均值，按外标法计算供试品中9种有机磷类农药残留量。三、 拟除虫菊酯类农药残留量测定方法1 简述拟除虫菊酯虽具有高效、广谱、低毒、低残留等优点，但也存在着大部分品种对鱼具有毒性大、杀伤天敌、无内吸作用及对瞒类药效不高等缺点。本方法通过提取、净化等步骤制备供试品溶液，采用气相色谱法，电子捕获检测器测定。2 仪器与试剂2.1 气相色谱仪，电子捕获检测器，载气为高纯氮，超声波处理器，快速溶剂萃取仪，旋转蒸发仪，高速离心机，氮吹仪，CP Sil 5CB毛细管柱(30.0m 250m 0.25m )2.2 试剂和标准品试剂：丙酮（分析纯）、正己烷（色谱级）、石油醚（分析纯）、乙酸乙酯（色谱级）、氯化钠（分析纯）、氟罗里硅土、无水硫酸钠（分析纯）、助滤剂Celite 545、超纯水。农药标准品：氟胺氰菊酯、顺式氯菊酯、氯氟氰菊酯、S-氰戊菊酯、溴螨酯，以上标准品由中国计量科学研究院和国家标准物质研究中心提供。3 色谱条件程序升温：初始160， 保持1分钟，每分钟10升至270，保持0.5分钟，每分钟1升至290，保持5分钟，进样口温度260，检测器温度300载气为高纯N2，流速1.0ml/min，尾吹：30ml/min，分流比20：1，进样体积1.0L。4 操作方法4.1标准储备液的配制 分别精密称取顺式氯菊酯、氯氟氰菊酯、S-氰戊菊酯适量，用石油醚配制成1.00mg/ml的溶液，备用，准确量取以上溶液及氟胺氰菊酯、溴螨酯100L置100ml容量瓶中，用石油醚稀释至刻度，配制成1.0g/mL的混合农药标准储备液，于冰箱中保存，使用时根据实际需要配制成不同浓度的标准使用液。4.2 样品的制备4.2.1 样品的提取：采用快速溶剂萃取仪进行萃取，萃取池底部先放置抗溶剂隔片，称量2g制备好的样品与2g无水硫酸钠，混合均匀后装入30ml萃取池中，加助滤剂Celite 545补足。出口处放置抗溶剂隔片，之后拧紧池盖。用石油醚进行提取，选择系统压力为1200psi，温度为95，预热5分钟，静态提取5分钟，循环两次，萃取结束后用氮气吹扫，压力为120psi，时间为1分钟，提取液收集到收集瓶中备用。4.2.2 样品的净化： 选用lcm厚无水硫酸钠+l.0g弗罗里硅土+O.5g中性氧化铝