实验一果蝇的形态、生活周期及其饲养.ppt

1/37 遗传学实验 实验01 植物染色体常规压片技术及核型分析 实验02 减数分裂与配子形成 实验一 果蝇的形态、生活周期及其饲养 实验二 遗传学中的人类味觉研究 实验三 果蝇唾腺染色体标本的制备和观察 实验四 性染色质：人体X-染色质观察 实验五 果蝇的单因子杂交实验 实验六 果蝇的伴性遗传 实验七 实验五的检验 实验八 实验六的检验 实验九 植物有性杂交技术 实验十 人工诱发多倍体植物 实验十一 诱变物质的微核测试 实验十二 简易法提取植物总DNA 2/37 实验一 果蝇的形态、生活周期及其饲养 一、实验目的： l了解果蝇生活周期中各阶段的形态特征。 l掌握区别雌雄果蝇的方法。 二、实验原理： 3/37 实验一 果蝇的形态、生活周期及其饲养 二、实验原理： l 果蝇的分类：昆虫纲，双翅目，果蝇科，果蝇属。果 蝇属(Drosophila)有3000多种，我国已发现800多种 ，遗传学研究中常用的是黑腹果蝇（D.melanogaster) 。 l 果蝇的优点：形体小，生长迅速，繁殖率高，饲养方 便，世代周期短（12天可繁殖一代），突变性状多， 染色体数目少，基因组小，实验处理方便，容易重复 实验，便于观察和分析。 l 意义：是遗传学、细胞生物学、分子生物学、发育生 物学等研究中的模式动物。 4/37 实验一 果蝇的形态、生活周期及其饲养 三、实验材料：野生型和常见的突变型果蝇 四、实验用具药品 1.仪器用具：显微镜、放大镜、小镊子、培养瓶 、麻醉瓶、白瓷板、培养皿、毛笔 2.药品试剂： 乙醚、琼脂、玉米粉、蔗糖、酵母 粉、丙酸。 5/37 五、实验步骤： 1.生活周期的观察： l果蝇的一个完整生活周期包括：卵幼虫蛹成虫 。其中卵和幼虫期5天，蛹4天，成体果蝇可活几周（ 37天）。 实验一 果蝇的形态、生活周期及其饲养 6/37 五、实验步骤： 1.生活周期的观察： l在25条件下，羽化后的雌蝇一般在8小时后开始交 配，两天后开始产卵。受精卵经2224小时就可孵化 成幼虫。幼虫生活4天左右即开始化蛹，化蛹前的三龄 幼虫停止摄食，爬到相对干燥的表面（如培养瓶壁） ，起初颜色淡黄、柔软，以后逐渐硬化变成深褐色， 此时即将要羽化了。刚从蛹壳中羽化出来的果蝇，虫 体较肥大，呈半透明的乳白色，约1小时，蝇体即变为 粗短椭圆形，双翅伸展，体色加深。 实验一 果蝇的形态、生活周期及其饲养 7/37 五、实验步骤： 1.生活周期的观察： 实验一 果蝇的形态、生活周期及其饲养 8/37 实验一 果蝇的形态、生活周期及其饲养 五、实验步骤： 2. 成体果蝇 9/37 实验一 果蝇的形态、生活周期及其饲养 五、实验步骤： 3. 成体果蝇雌雄性别的辨别 大小与形态：雌体通常比雄体大些。雄体腹部呈钝圆 形，而雌体腹端稍尖，向后突出。 颜色：雌体腹部背面外观呈宽度相近的5条黑色条纹 。雄体腹部背面只能看到3条，上部两条较窄，后一 条宽且延伸至腹面，呈一明显黑斑。 性梳：只有雄体在第一对足的跗节基部有一黑色鬃毛 结构，形似一小梳，称为性梳。而雌体没有性梳。性 梳的有无是鉴别雌雄成蝇的可靠标志之一，只是需要 放大后才易观察。 10/37 实验一 果蝇的形态、生活周期及其饲养 五、实验步骤： 3. 成体果蝇雌雄性别的辨别 11/37 实验一 果蝇的形态、生活周期及其饲养 五、实验步骤： 3. 成体果蝇雌雄性别的辨别 12/37 实验一 果蝇的形态、生活周期及其饲养 五、实验步骤： 3. 成体果蝇雌雄性别的辨别 13/37 实验一 果蝇的形态、生活周期及其饲养 五、实验步骤： 3. 成体果蝇雌雄性别的辨别 14/37 实验一 果蝇的形态、生活周期及其饲养 五、实验步骤： 3. 成体果蝇雌雄性别的辨别 15/37 实验一 果蝇的形态、生活周期及其饲养 五、实验步骤： 3. 成体果蝇雌雄性别的辨别 雌蝇雄蝇 体形较大体形较小 腹部椭圆型末端稍尖腹部末端钝圆 腹部背面5条黑纹 腹部背面3条黑纹，最后一条延 伸至腹面成一黑斑 无性梳第一对足第一跗节有性梳 16/37 实验一 果蝇的形态、生活周期及其饲养 五、实验步骤： 4. 性状观察方法：观察性状或进行果蝇杂交时，须将果 蝇进行麻醉处理，具体如下： 轻拍培养瓶使果蝇落于培养瓶底部。 取下培养瓶塞，迅速将麻醉瓶口与培养瓶对接严密。 倒转使培养瓶在上，轻拍培养瓶或用黑纸或双手遮光 将果蝇驱赶到麻醉瓶中。迅速分开两瓶，盖好瓶塞。 17/37 实验一 果蝇的形态、生活周期及其饲养 五、实验步骤： 4. 性状观察方法：观察性状或进行果蝇杂交时，须将果 蝇进行麻醉处理，具体如下： 将麻醉瓶的果蝇拍到瓶底，在塞子上滴上几滴乙醚， 重新盖好。约半分钟后果蝇便不再爬动。麻醉后即可 倒在白瓷板或培养皿上进行观察。麻醉状态一般可维 持5-10分钟。如观察中苏醒，可在培养皿内放一个 滴有乙醚的滤纸条补救。 18/37 一些常见的突变性状 19/37 20/37 21/37 一些常见的突变性状：眼色突变 22/37 一些常见的突变性状：眼形突变 23/37 一些常见的突变性状：翅形突变 24/37 一些常见的突变性状 25/37 一些常见的突变性状 26/37 一些常见的突变性状 27/37 一些常见的突变性状 28/37 一些常见的突变性状：勺翅及平衡棒 29/37 一些常见的突变性状 30/37 一些常见的突变性状 31/37 实验一 果蝇的形态、生活周期及其饲养 五、实验步骤： 5. 果蝇的生殖行为及变态： 32/37 实验一 果蝇的形态、生活周期及其饲养 五、实验步骤： 5. 果蝇的生殖行为及变态： 33/37 实验一 果蝇的形态、生活周期及其饲养 五、实验步骤： 5. 果蝇的生殖行为及变态： 34/37 实验一 果蝇的形态、生活周期及其饲养 五、实验步骤： 5. 果蝇的生殖行为及变态： 35/37 实验一 果蝇的形态、生活周期及其饲养 五、实验步骤： 6. 果蝇的培养及杂交： 雌果蝇受精囊内可贮存大量的精子，因此在做品系 间杂交时，母本必须选用处女蝇。雌蝇孵出12小时后才 会交配（8小时更为可靠），所以将老果蝇清除后，12 小时内所收集到的雌蝇就是处女蝇。在实验中，可收集 孵出10-12小时的果蝇，特别需收集好雌蝇。按杂交需 要，接上一定对数雌雄果蝇。当F1代子蝇即将孵化出来 以前，即25培养7-8天，倒去亲本果蝇，以免和亲代 混淆。另外应注意，杂交F1代的计数安全期是自培养开 始的20天内，再晚些时，就可能有F2成蝇了。 36/37 实验一 果蝇的形态、生活周期及其饲养 五、实验步骤： 6. 果蝇的培养及杂交： 单倍量10倍量20倍量30倍量40倍量50倍量 A 糖 (g)6.20 62.00 124.00 186.00 248.00 310.00 琼脂 (g)0.62 6.20 12.40 18.60 24.80 31.00 H2O (ml)38.00 380.00 760.00 1140.00 1520.00 1900.00 B 玉米粉 (g)8.25 82.50 165.00 247.50 330.00 412.50 H2O (ml)38.00 380.00 760.00 1140.00 1520.00 1900.00 酵母粉