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文档简介
实验一:观察植物细胞的有丝分裂 1实验原理。植物的分生组织(如根尖分生区、茎尖生长点等)细胞,能够通过有丝分裂增加其数目。依据植物细胞分裂周期中各个时期细胞中染色质或染色体的形态、数目、位置变化,确定该细胞所处的时期。为了看清染色体和染色质,要用碱性染料将其染色。 2实验目的。 (1)初步掌握制作根尖细胞有丝分裂装片的技术。 (2)观察植物细胞有丝分裂的过程,识别分裂的不同时期。 (3)初步掌握绘制生物图的方法。 3实验材料和用具。洋葱(大蒜也可),质量分数为15的盐酸,体积分数为95的酒精溶液,质量浓度为O01gmL或002gmL龙胆紫溶液(或醋酸洋红液); 显微镜,载玻片,盖玻片,玻璃皿,剪刀,镊子,滴管。 4评分标准。 (1)剪取根尖2-3mm,放入15的盐酸和等量的95的酒精溶液混合液中,在室温下解离3-5分钟。 (2)将酥软的根尖用清水漂洗约10分钟。 (1分) (3)001gmL或O02gmL龙胆紫溶液染色3-5分钟。 (1分) (4)装片。将染色的根尖放在载玻片的清水中,加盖玻片和载玻片轻压。 (1分) (5)显微镜观察。 转动显微镜转换器,使用较大光圈对准通光孔,进行对光。 (1分) 将制好的装片放在载物台上,用压片夹压紧装片的两端。 (1分) 双眼从一侧注视低倍物镜,双手向前转动粗准焦螺旋,使镜筒缓慢下降直至接近装片为止。 (1分) 左眼注视目镜(右眼睁开),反方向转动粗准焦螺旋,使镜筒缓慢上升直至看清物像为止,用细准焦螺旋将物像调清晰,低倍镜下找到分生区细胞。 (1分) (6)将分生区细胞移至视野的中心,直接转换转换器,将低倍物镜移走,使高倍物镜对准通光L,进一步用细准焦螺旋和反光镜将细胞调节清晰。高倍镜下找到处于分裂期的细胞,辨别出某个分裂期的细胞,举手示意。 (1分) (7)绘出有丝分裂中期图(含4个染色体)。 (1分) 5实验整理。用纱布将载物台擦干净,使低倍镜恢复原位,将显微镜放回原处,将实验用具擦拭干净放回原处,摆放整齐,擦净桌面。 6实验简析。 (1)培养洋葱生根时,避免用新采收的洋葱,因它尚在休眠不易生根。培养过程 中,注意每天至少换水一次,以防烂根。如果必须用当年刚采收的新洋葱培养生根,则应设法打破它的休眠。常用的方法是用低浓度的赤霉素溶液浸泡洋葱底盘,这样可以促 使其生根。选择底盘大的洋葱作生根材料。 如果是头年收下的洋葱,剥去外层老皮,用刀削去老根(从底盘中央向四周削),注意不要削掉四周的“根芽”。 如果班级较多,为了防止后用的班级所需的洋葱根长得过长,也可以放入冰箱里(1-2C)培养。 (2)固定时间取材。洋葱根尖细胞有丝分裂的时间是有规律的。通常在每天上午10时至下午2时分裂活跃,尤其以上午11时30分时最活跃,可在这时取材。培养的根尖不宜过长,解离时切取的长度更不能超过3mm。 (3)解离充分是实验成功的关键。解离充分,压片时细胞才能分散开,细胞也不会重叠,才能制出单层细胞的装片。植物细胞之间有胞间层,利用解离液可以溶解胞间层,使原来紧密粘在一起的细胞相互分离。在解离时,细胞已被杀死,永久地处于细胞分裂周期中的某个时期的生活状态。 (4)漂洗的目的是洗去根尖中的酸,利于染色时碱性染料着色。 (5)染色可改在载玻片上进行,其步骤是:将根尖放在载玻片上,滴一滴染液染色35分钟,盖上盖玻片,用吸水纸吸去多余的染液。用龙胆紫染液染色时,染液浓度和时间必须掌握好。染色过深将导致镜下一片紫色,无法观察。 (6)压片时用力要恰当,用力过重过猛可能将组织压烂,压碎玻片等;过轻时,细胞未分散而相互重叠。二者都影响观察。压片时,最好在盖玻片上面放一张吸水纸,然后再在其上面加一块载玻片,再用拇指垂直向下压。这样可以防止上面的载玻片与盖玻片粘在一起。避免根尖细胞各区位置错动。压片的目的是使细胞分散成单层。压片时不可使载玻片移位。(7)在用高倍镜观察时,先用低倍镜观察,再用高倍镜观察,要找根尖分生区的细胞观察。一个视野中一般不会同时有分裂各期的细胞。这时,可通过移动装片去寻找。实验二:探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的水解作用 1实验原理。麦芽糖、葡萄糖和果糖都是还原糖,还原糖都能与斐林试剂发生氧化反应,生成砖红色的氧化亚铜沉淀。 淀粉和蔗糖都不是还原糖,鉴定时不会产生砖红色氧化亚铜沉淀。在酶的作用下能够将淀粉分解成麦芽糖和葡萄糖,蔗糖水解成的葡萄糖和果糖麦芽糖是还原糖。 用淀粉酶分别催化淀粉和蔗糖的水解反应,再与斐林试剂鉴定溶液中是否有还原糖。就可以看出淀粉酶是否只能催化特定的化学反应。 2实验目的。 (1)初步学会探索酶催化特定化学反应的方法。 (2)探索淀粉酶是否只能催化特定的化学反应。 3实验材料和用具。质量分数分别为3的可溶性淀粉溶液和蔗糖溶液,质量分数为2的新鲜淀粉酶(化学试剂商店有售)溶液,斐林试剂; 试管,量筒,滴管,大烧杯,温度计,试管夹,三脚架,石棉网,酒精灯,火柴。 4评分标准。 (1)取两支试管编号(1号和2号),分别加入2mL的可溶性淀粉溶液和蔗糖溶液。随后各加入2mL的新鲜的淀粉酶溶液。 (2分) (2)轻轻振荡两试管,然后60水浴,保温5分钟。 (2分) (3)从水浴中取出试管,各加入2mL斐林试剂(边加边振荡)。 (3分) (4)两试管水浴加热煮沸1分钟,观察颜色变化情况。 (3分) 5实验整理。将实验用具擦拭干净放回原处,摆放整齐,擦净桌面。 6实验简析。 (1)制备的可溶性淀粉溶液,必须完全冷却后才能使用,如果用刚煮沸的可溶性淀粉溶液进行实验,就会因温度过高而破坏淀粉酶的活性。 (2)在实验中,质量分数为3的蔗糖溶液要现配现用(以免细菌污染变质),取唾液时一定要用清水漱口,以免食物残渣进入唾液中。 (3)两支试管保温时,应控制在60左右,低于50或高于75,都会降低化学反应的速度。 (4)如果2号试管也产生了砖红色沉淀,可以考虑以下原因: 蔗糖溶液放置的时间是否过长。因为蔗糖溶液放置时间过长,蔗糖容易被溶液中的微生物分解成还原性糖,影响实验的结果。这时应改用现配制的蔗糖溶液。 试管是否干净。如果上一个班的同学做完实验后未能将试管清洗干净,这次实验又接着用,就可能出现这种情况。为此,教师必须要求学生在实验结束后,一定要将试管洗刷干净,并倒置控干。教师在实验前应对试管统一进行检查,以杜绝上述情况的发生。 蔗糖本身是否纯净。如果蔗糖不纯,就可能产生砖红色沉淀的现象。为保证蔗糖纯净,实验前教师可先配制少量的蔗糖溶液,并用斐林试剂检验一下,确无砖红色沉淀产生,则为纯净蔗糖。也可用市售大块冰糖水洗去表面葡萄糖得到纯净的蔗糖。 容易购买到菊糖的学校,最好用菊糖代替蔗糖。这是因为菊糖是由多个果糖分子缩合而成的,与淀粉同属于多糖。用菊糖与淀粉进行对比实验,更具有说服力。 (5)可以再设一个3号试管,注入2mL可溶性淀粉溶液后,加入2mL清水,并且1、2、3号试管仅此一项不同外,其余如温度、作用时间等实验条件完全相同。这样可以说明在不加酶的情况下,淀粉未分解,不产生砖红色沉淀,要能说明1号试管内最后变成砖红色,是由于加入的淀粉酶催化淀粉成了麦芽糖(还原糖),即1号和3号试管(加酶与不加酶)相对照,1号试管和2号试管(淀粉和蔗糖)都加了淀粉酶相对照,使实验的结果具有说服力。(6)如果实验中,自己的实验结果与理论上的预期结果不一致,应再设计实验,进行进一步的验证或找出问题所在。实验三:叶绿体中色素的提取和分离 1实验原理。由于光合色素位于叶绿体中的片层结构上,要把它提取出来必须破坏叶表皮、细胞壁和细胞膜、叶绿体的双层膜,所以要剪碎后加入二氧化硅和碳酸钙进行研磨。叶绿体中的光合色素是有机物,能够溶解于有机溶剂丙酮(酒精等)中,另外加碳酸钙是为了保护叶绿体中的叶绿素,原因是加碳酸钙可以中和细胞液中的有机酸,防止叶绿素被酸环境破坏。 层析液是一种脂溶性很强的有机溶剂,各种光合色素在层析液中的溶解度不同,在 滤纸条上的附着力也不同,溶解度高而附着力低的随层析液在滤纸上扩散得很快;反之 扩散得慢,根据此原理使各色素分离开来。 2实验目的。 (1)初步掌握提取和分离叶绿体中色素的方法。 (2)探索叶绿体中有几种色素。 3实验材料和用具。新鲜菠菜叶(或其他绿色叶片,如女贞叶,效果相当好),丙酮,层析液,二氧化硅,碳酸钙; 烧杯(100mL),研钵,漏斗,尼龙布,毛细吸管,剪刀,小试管,培养皿,药匙,量筒(10mL),天平。 4评分标准。 (1)提取绿叶中的色素。 称取、剪碎5g叶片,放入研钵中。 (1分)“三加”:加入少许二氧化硅、碳酸钙,5mL丙酮。 (1分) 研磨(快速、充分)。 (1分) 过滤收集滤液(将研磨液迅速倒入基部放一块单层尼龙布的漏斗中过滤,将滤液收集到小试管中,及时用棉塞将试管塞紧备用)。 (1分) (2)制备滤纸条。将干燥过的定性滤纸剪成6cmlcm的条,一端剪去两角,距该端lcm处用铅笔画一条极细的横线。 (1分) (3)画滤液线。用毛细吸管吸取少量滤液,沿铅笔线均匀画一条细而直的滤液线,待干燥后再重复画2-3次(次数越多色素越多)。 (2分) (4)色素分离。将干燥后的滤纸条画线一端朝下放入有少许(2-3mL)层析液的层析瓶(烧杯)中,盖上盖(培养皿)。观察色带条数和各色带的颜色。 (3分) 5实验整理。将实验后的废液、废物倒去,器皿洗净,把材料用具放回原处,摆放整齐,擦净桌面。 6实验简析。 (1)提取5g叶片中的色素,用2mL丙酮是适中的,若丙酮过多,会使色素浓度降低减少滤纸条上色素的量,使分离效果不明显;若丙酮少了,色素提取又不充分。 (2)丙酮容易挥发,研磨要快速充分,尽量减少丙酮挥发。 (3)加二氧化硅和碳酸钙的量不宜过多,书中的少许,一般是用药匙取12勺即可。 (4)拉制毛细吸管,可用细玻璃管在酒精灯上拉成,每段细玻璃管可拉制成2个毛细吸管,将毛细吸管插入水中吸气看是否透气,若不透气,可用镊子夹住尖端折掉一段即可。 (5)剪制滤纸条要用干燥处理的定性滤纸,剪制时尽量注意双手不捏纸面,以免手上的油脂及其他物质污染滤纸。 (6)剪去滤纸一端两个角是为了让滤液色素分离时色素带平行。 (7)画滤液细线,要细而直,待一次干燥后再画第二次,可以用口吹气或晃动加速干燥,用毛细吸管要轻,不可将滤纸划毛。 (8)向烧杯中加层析液时,不要污染烧杯壁,层析液量要少,烧杯(100mL)中加层析液不可超过3mL。 (9)将画有细线的纸条待干燥后放人烧杯层析液中,剪角端朝下,千万不要让色素细线没入层析液中(色素会溶解在里面),然后盖上培养皿。 (10)分离成功后,仔细观察四种色素的颜色,分离层次,待干燥后夹入书本,避光保存。(11)最后要洗手,整理实验台,结束实验。实验四:性状分离比例几率的模拟实验 1实验原理。由于进行有性杂交的亲本,在形成配子时,等位基因会发生分离,受精时,雌雄配子又会随机结合成合子。因此,杂合子杂交后发育的个体,一定会发生性状分离。本实验就是通过模拟雌雄配子随机结合的过程,来探索杂种后代性状的分离比。 2实验目的。 (1)认识形成配子时等位基因分离以及受精时雌雄配子随机结合的过程。 (2)初步认识和理解基因的分离和随机组合与生物性状之间的数量关系。 (3)认识性状分离比例几率的实质,为深刻认识基因分离规律的实质打下牢固基础。 3实验材料。小塑料桶2个,2种色彩的小球各50只(如乒乓球)。 4评分标准。 (1)取甲乙两只小桶,甲桶内放50只白球,并在25只上面用铅笔标上D,另25只上面标上d(代表两种雄配子)。乙桶内放50只黄球,其中25只标上D,另25只标上d(代表两种雌配子)。 (2分) (2)分别充分摇动甲乙两小桶,使桶内小球充分混合。 (1分) (3)分别从两个小桶内随机各抓取一个小球,放一块后看一下它标明的基因是哪两个,并记录下两个小球的字母组合。 (2分) (4)将抓取的各色小球重新放回原来的小桶,按步骤3重复做50-100次(重复次数越多,结果越接近理论值)。 (2分) (5)统计小球组合分别为DD、Dd、dd的数量。 (1分) (6)计算: DD、Dd、dd之间的数量比。 (1分) 含D的组合与dd之间的数量比。 (1分) 5实验整理。把材料用具放回原处,摆放整齐,擦净桌面。 6实验简析。 (1)选择小球大小要一致,质地要统一,抓摸时手感要相同,以免人为误差。 (2)选择盛放小球的容器最好采用小桶或圆柱形容器,而不要采用方形容器,以便摇动小球时能充分混匀。 (3)桶内小球的数量必须相等,D、d基因的小球必须1:1,且每次抓出的2个小球必须统计后各自放回各自的小桶,以保证几率的准确。 (4)不要看着桶内的小球抓,要随机去摸,且要搅拌一下,以增大其随机性,用双手同时去两个桶内各抓一个。 (5)记录时,可先将DD、Dd、dd三种基
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