普鲁卡因对齐口裂腹鱼鱼苗麻醉效果的研究毕业论文.doc

普鲁卡因对齐口裂腹鱼鱼苗麻醉效果的研究 摘要：在研究鱼类的生理、疾病或运输时，常需要捕捞鱼类，使其离开所生活的水环境，进行检查、采血、采卵、采精进行人工繁殖等手术。在这些操作过程中，常因捕捞时鱼的挣扎及鱼的应激性反应，造成缺氧或皮肤损伤，导致水霉感染等疾病的发生而引起鱼类死亡。为减少这些危害，常需要对鱼进行麻醉。齐口裂腹鱼是四川省省级保护动物、有名的珍贵鱼类属鲤科裂腹鱼属动物，别名雅鱼、岷江鱼、细鳞鱼。广泛分布于长江上游、金沙江、岷江、大渡河、青衣江、酋水、任河及乌江下游等水域最大个体可达8公斤以上肉味鲜美。是我国特有的重要经济鱼类。随着人工繁殖的成功,其养殖面积快速增加。但是其鱼苗运输过程中依然存在着所有鱼类活苗运输共同存在的死亡问题。笔者认为适度的麻醉能够降低运输过程中的死亡问题。本实验选择常用的神经麻醉药品普鲁卡因进行不同条件下的实验探索。在研究鱼类的生理、疾病或运输时，常需要捕捞鱼类，使其离开所生活的水环境，进行检查、采血、采卵、采精进行人工繁殖等手术。在这些操作过程中，常因捕捞时鱼的挣扎及鱼的应激性反应，造成缺氧或皮肤损伤，导致水霉感染等疾病的发生而引起鱼类死亡。为减少这些危害，常需要对鱼进行麻醉。齐口裂腹鱼是四川省省级保护动物、有名的珍贵鱼类属鲤科裂腹鱼属动物，别名雅鱼、岷江鱼、细鳞鱼。广泛分布于长江上游、金沙江、岷江、大渡河、青衣江、酋水、任河及乌江下游等水域最大个体可达8公斤以上肉味鲜美。是我国特有的重要经济鱼类。随着人工繁殖的成功,其养殖面积快速增加。但是其鱼苗运输过程中依然存在着所有鱼类活苗运输共同存在的死亡问题。笔者认为适度的麻醉能够降低运输过程中的死亡问题。本实验选择常用的神经麻醉药品普鲁卡因进行不同条件下的实验探索。麻醉原理麻醉是指药物或非药物方法使机体或机体一部分暂时失去感觉，以达到无痛的目的，多用于手术或某些疾病的治疗，而能可逆的抑制中枢神经系统功能或者能在局部阻断神经冲动传导的药物，称为麻醉剂。麻醉是一种人为的生理过程，这一过程是暂时性的，并且是可逆的，当解除麻醉手段或药物在体内被拮抗、代谢或排除后即可复苏。动物麻醉是保证手术中动物安全无痛，运输过程中降低应激性反应，为手术、运输创造良好的操作条件，保证和调整或控制手术及运输过程中动物的各种生理功能，促进动物术后迅速恢复健康。麻醉过浅会使动物感到疼痛，在手术中产生无法预料的活动，对手术不利；麻醉过深则造成循环、呼吸抑制，对动物生命安全造成威胁。麻醉剂的种类与使用方法通常将麻醉剂分为全身性麻醉剂和局部麻醉剂，全身性的例如乙醚、氯胺酮、巴比妥，局部的例如利多卡因、普鲁卡因、苯佐卡因等。目前鱼用的麻醉剂主要是Ms222、苯巴比妥、盐酸普鲁卡因、丁香酚等。通常在鱼的运输、人工繁殖、催产注射、称量等情况下使用。而鱼类麻醉的方法众多，除利用物理，如电流或低温的方法外，还有利用注射药剂的方法，其中最方便常用的还是以药物溶液浸泡为主，使药物经鳃部吸收进入血液而达到麻醉或镇静的目的。鱼类麻醉存在的问题：对于鱼类麻醉的研究，国内外的科研工作者多侧重于对麻醉效果和对血液成分影响的研究，对麻醉作用机制，代谢途径，麻醉剂的安全范围，反复麻醉对鱼类、人体的危害等则研究的很少。目前鱼用麻醉剂有近30种，但现有的麻醉剂各有优缺点，有些存在麻醉效果不理想，有些对鱼体或人体安全性不可靠，或者价格昂贵，因而研制一种麻醉效果好、药物残留少、安全范围大、易于急救、反复使用危害小、廉价的新型麻醉剂是科研的方向.注射用盐酸普鲁卡因：分子式：C13H20N2O2HCl分子构形本品为白色结晶性粉末，在水中极易溶解，为水溶性局麻药，它能阻断神经冲动传导，短效。毒性仅为可卡因的l6-1l0，刺激性小。90mg/L 为最适浓度(草鱼苗存活时间可达152h)。投入盐酸普鲁卡因后30min左右，鱼苗按浓度高低依次进入麻醉状态，经14-28h相继苏醒。使用本药，鱼活动较碳酸麻醉更弱，当浓度高于l10mg/L 时，一部分鱼始终处于麻醉状态，注入清水后，80的草鱼苗恢复正常。本品的水解主要发生在血浆中，仅小部分在肝脏水解，对鱼、人无毒副作用。为防止迅速吸收，可加入少量肾上腺素，这样可延长作用时间。作为鱼种运输的麻醉剂是否可行，尚待研究。实验目的：通过各种不同条件下普鲁卡因对齐口裂腹鱼鱼苗麻醉效果的观察，确定出对齐口裂腹鱼鱼苗麻醉最佳效果。并且确定出鱼体大小对麻醉效果的影响，以及麻醉时间与苏醒时间之间是否存在关系。实验原理：通过对药品浓度，实验温度，鱼苗大小，麻醉与复苏时间等多个实验指标的分析。确定出普鲁卡因对齐口裂腹鱼鱼苗麻醉效果最佳的条件。以及鱼体自身因素对普鲁卡因麻醉效果的影响。实验材料与药品：齐口裂腹鱼鱼苗（养殖场取得，8月龄左右） 普鲁卡因注射液（2ml:40mg）烧杯（1L规格） 塑料小盆 生物培养箱 电子天平 直尺 记时器 玻璃渔缸 增氧机实验步骤：一、 普鲁卡因对齐口裂腹鱼鱼苗麻醉浓度的初步确定与鱼苗麻醉过程观察：由于没有太多的参考资料，所以首先大致确定能够对齐口裂腹鱼鱼苗起到麻醉效果的浓度。采用方法为首先量取1L水于塑料小盆中，取3条鱼苗放入盆。逐步加大普鲁卡因的浓度，直到鱼苗出现麻醉朕兆为止。通过实验初步确定浓度160mg/L时对齐口裂腹鱼鱼苗开始有麻醉效果。通过观察能够清楚的发现鱼苗被麻醉的全过程如下：1. 刚入实验液时一切正常，与清水中无异2. 逐渐表现出兴奋的状态，四处乱窜，游动迅速3. 之后活动逐渐减弱4. 出现麻痹征兆，敲击盆壁鱼没有反映，手触摸鱼体鱼也不躲闪。5. 失去平横，开始侧翻6. 完全失去意识，仅进行呼吸二、 普鲁卡因对齐口裂腹鱼鱼苗麻醉最佳效果的浓度研究：实验在常温下进行（测量水温为20），选择大小较均匀一致的鱼苗，每个浓度组用5条鱼苗进行重复实验，取每组平均值进行数据分析，实验从160mg/L浓度组开始，每个浓度组的浓度差为40mg，实验共设8个实验梯度。时间从鱼苗放入实验液体开始到鱼苗完全侧翻为止。实验结果列表如下： 不同浓度普鲁卡因对齐口裂腹鱼鱼苗麻醉效果 160mg/L编号麻醉时间体重体长111m12.711.5212m15.913323m9.810.5430m1412542m14.512平均23m36s13.3811.8 200mg/L编号麻醉时间体重体长110m13.811.5211m12.812311m12.611.2416m12.410.8532m9.79.9平均16m12.2611.08 240mg/L编号麻醉时间体重体长17m19.612.328m1110.739m11.610.9411m11.810.8513m8.810.1平均9m36s14.3210.96 280mg/L编号麻醉时间体重体长13m12.311.323m13.51136m12.211.2410m11.611.2512m1210.5平均6m48s12.3211.04 320mg/L编号麻醉时间体重体长15m13.511.527m1411.538m11.310.249m17.612.1514m11.810.1平均8m36s13.6411.08 360mg/L编号麻醉时间体重体长13m13.11124m10.39.937m11.710.448m11.214.558m10.411.3平均6m11.3411.42 400mg/L编号麻醉时间体重体长14m88.724m13.310.935m11.710.645m57.256m10.610平均4m48s9.729.48 440mg/L编号麻醉时间体重体长11m3410.29.421m521210.633m0112.51144m067.59.154m169.99.4平均2m5810.429.9通过实验所得出的数据对各组的平均值作出线形图如下：由图中可以看出基本成一条反比例函数的线形关系，即随着普鲁卡因浓度的增加，麻醉所需时间减少。由线型结合时间可以得出最佳的麻醉浓度为360mg/L。因为此浓度区域内麻醉需时较为平稳，而且平均6min的麻醉时间也便于观察。三、 不同温度条件下普鲁卡因对齐口裂腹鱼鱼苗的麻醉效果：该实验选择麻醉效果最佳浓度360mg/L为所有组的实验浓度。根据齐口裂腹鱼的适应生存温度共设计15、17、20、23四个温度组进行实验。每个实验组取5尾鱼苗进行平行实验，取每组平均值进行数据分析。实验温度用生物培养箱控制，每次实验需等水温达到设立温度时才开始进行，而不是生物培养箱指示的温度达到就进行。时间同样从鱼苗入液开始到完全侧翻为止。通过实验，将各温度组的结果列表如下： 15编号麻醉时间体重体长14m0612.311.224m421110.235m419.29.746m0510.29.8511m4713.311.7平均6m2811.210.52 17编号麻醉时间体重体长13m471310.925m1510.49.837m3810.79.848m059.89.758m148.39.7平均6m3610.449.98 20编号麻醉时间体重体长13m13.11124m10.39.937m11.710.448m11.214.558m10.411.3平均6m11.3411.42 23编号麻醉时间体重体长16m3216.812.126m436.89.736m467.810.348m348.39.9510m3319.112.3平均7m5011.7610.86通过实验数据对各组平均值做线形图如下： 根据线形图可以看出在15-20范围内麻醉时间比较平稳，20以上时所需时间增加。从图中可以看出20时麻醉效果最好。分析原因可能为：温度过低时生理代谢活动较慢，因此麻醉时间相对要长，但温度范围比较小，所以不明显。而温度过高时，加快了药液的挥发，因此麻醉所需时间延长。综合以上因素，实验结果测得20条件下麻醉效果最好。四、 鱼苗大小对麻醉效果的影响：由于实验用鱼大小存在差别，设计鱼苗大小对麻醉效果的影响。本实验用鱼均为同年鱼苗，因此实验只测定鱼苗体重是否对麻醉效果产生影响。实验选取环境条件为20浓度为360mg/L进行。选取体形相差悬殊的两组鱼进行对照实验，每个对照组设立5尾鱼进行平行实验。时间计算从鱼苗入液开始至完全侧翻为止，实验结果列表如下： 较大组编号麻醉时间体重体长13m13.11124m10.39.937m11.710.448m11.214.558m10.411.3平均6m11.3411.42 较小组编号麻醉时间体重体长13m78.824m3.76.735m5.67.246m4.67.158m5.97.8平均5.2m5.367.52通过实验数据，较大组平均体重比较小组重越大2.1倍，体长约长1.5倍。实验结果平均麻醉时间越多0.8min。为了更加清楚的观察结论，将所有的实验鱼所得结果列散点图如下：通过散点图可以发现，鱼体体重基本上对麻醉时间无明显的影响。因此同年鱼苗其体形的大小不会对麻醉效果造成明显影响，运用中可以不考虑鱼苗大小差别不同的问题，只要是同年鱼苗可以用同一浓度普鲁卡因进行麻醉。五、 麻醉时间与复苏时间关系的研究：本实验通过每尾鱼苗麻醉所需时间与复苏所需时间的观察，研究麻醉与复苏所需时间之间是否存在关系。实验环境为20、浓度360mg/L。从鱼苗投入麻醉液开始记时，到鱼苗完全侧翻为止停止记时。此段时间为鱼苗麻醉所需时间。待鱼苗完全侧翻后立即将鱼苗捞出麻醉液，放入清水中并开始记时，直到鱼苗恢复正常游泳姿势为止，停止记时。此段时间为复苏时间。实验共设立5个对照组进行，实验结果列表如下： 麻醉与恢复时间编号麻醉时间恢复时间16m3220s26m4329s36m4631s48m3452s510m331m59s 根据列表作线形图如下：从图中可以看出麻醉时间与复苏时间存在着明显的线形关系，即麻醉用时多的鱼苗其复苏用时也相对较长，麻醉用时短的鱼苗其复苏用时也相对较短。结果与讨论：国际上已采用麻醉类药物进行大规格的活鱼运输，但我国应用的历史不太长，尚未广泛使用。目前国内对各种麻醉药物在鱼体内的作用机理、代谢途径研究的少，对许多问题，诸如诱导期、麻醉时间、肌肉内药物残留量、安全范围、毒性、对人体的危害等还没有可信的评判依据。目前应用于鱼类的各种麻醉药，尚存在效果不理想、对鱼和人体的安全性不可靠、以及价格昂贵等各种弊端。所以，选择诱导期短、麻醉时间长、肌肉内残留量少、安全范围大、麻醉过深后易于急救、反复使用对人和鱼的危害小、价格低的新型麻醉剂是推广应用的关键，也是科研工作的方向。通过本实验可以确定普鲁卡因对齐口裂腹鱼鱼苗有较明显的麻醉效果。其麻醉的最佳效果为320mg/L、20条件下。而且对于同一年的鱼苗其麻醉效果不受鱼苗体形大小的影响。而其从麻醉状态苏醒的时间与麻醉所需的时间成明显的正比例关系。通过实验虽然证实了普鲁卡因对齐口裂腹鱼鱼苗有较明显的麻醉效果，但是由于所需浓度较高才能达到麻醉效果。在生产上考虑到成本问题实际使用还存在着一些困难。但是在实验等条件情况下由于其效果快恢复快能够很便利的运用。参考文献：1 /view/458562.htm2 范林军 李志琼 杜综君特色经济鱼类齐口裂腹鱼 农村百事通2006.143 莆运秋 低温麻醉运贵鱼 农家顾问2003年10期4 刘双凤 蔡勋 鱼用麻醉剂的研究进展 黑龙江水产2008年 6期5 安