pcr的临床应用知识课件_第1页
pcr的临床应用知识课件_第2页
pcr的临床应用知识课件_第3页
pcr的临床应用知识课件_第4页
pcr的临床应用知识课件_第5页
已阅读5页，还剩14页未读， 继续免费阅读

下载本文档

版权说明：本文档由用户提供并上传，收益归属内容提供方，若内容存在侵权，请进行举报或认领

文档简介

基本原理,以DNA为例 （1）DNA变性： （2）降温退火： （3）引物延伸：,PCR的基本原理,PCR反应条件 PCR过程 PCR的特点,重复13步 2530轮,目的DNA片段 扩增100万倍以上,DNA双螺旋,DNA单链 与引物复性,DNA变性 形成2条单链,子链延伸 DNA加倍,原理 第一步 加热变性,预处理,第二步 引物与靶序列退火,第三步 - 引物延伸,第1个 PCR 循环完成后 得到两个拷贝的靶序列,30次循环后靶序列扩增的数量,No. of No. Amplicon Cycles Copies of Target 1 2 2 4 3 8 4 16 5 32 6 64 20 1,048,576 30 1,073,741,824,30次循环扩增后可达10亿的基因片段,PCR技术的特点,灵敏度高 特异性强 快速简便 应用范围广,临床应用,肝炎病毒(HBV、HCV) 优生优育(HCMV、TOX、RV、HSVI、HSVII) 性病病原体(CT、UU、NGH、 HPV、 TP) 呼吸道病原体(TB、MP、CP、SARS、H1N1) 其他病原体(EB、HP、EV71、EV、Cox A16),肝炎病原体检测的意义,HBV、HCV 1、了解肝炎病毒在体内存在的数量。 传染？复制？治疗？ 2、肝功能异常是否由肝炎病毒引起？早 期诊断（窗口期）的感染者。 3、基因分型可选抗病毒药物 。（选用分型试剂） 4、判断药物治疗的效果。 5、进行HBV分子流行病学研究。,乙肝DNA与肝功的关系,1.乙肝DNA报告单所描述的结果是代表在送检的样本中检测到乙肝病毒的遗传物质（DNA）。 2.乙肝DNA阳性与阴性与肝功能没有直接关系。 3.用辩证的思维理解每一份检测结果。,不合格标本带来的后果,PCR结果单位的换算,3.5E+005 IU/ml(3.5105基因/拷贝)-表示一毫升血清中有35万个HBV病毒微粒。,HBVDNA的变化,在患者治疗过程中检测HBVDNA定量，一般认为：其结果相差5倍属正常波动，结果相差降低10倍以上才算治疗有效。,例如1,有一患者治疗前检测HBV-DNA定量为8.8E+006 IU/ml，治疗一月后复查为2.3E+007 IU/ml，两结果相差2.6倍。（不一定是高了？） 如何向病人解释： 属正常波动或者检测误差（允许误差）,例如2,一患者治疗前检测HBV-DNA定量为9.2E+006 IU/ml；治疗一月后复查为2.8E+006 IU/ml，两结果相差3.3倍，不能说明治疗有效，需要继续观察。要有明显的下降趋势。,PCR技术的新认识,PCR 技术诞生以来，应用广泛，同时不断发展与完善，解决了以往PCR 的瓶颈问题：灵敏度、假阳性。 防污染问题：假阳性的解决。它将作为常规检验方法进行全面普及，发挥积极的作用。,临床基因扩
人人文库> 全部分类> 教育资料 > 辅导培训

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明，都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等，如果需要附件，请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸，网页内容里面会有图纸预览，若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间，仅对用户上传内容的表现方式做保护处理，对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑，并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容，请与我们联系，我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

最新文档

评论

0/150

提交评论