论文：随着社会和人民生活水平的提高.doc

DB33/T 2005啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊,人们对畜产品安全的要求越来越高.为禁止非法使用莱克多巴胺药物饲喂动物,确保动物产品安全,保障人体健康和促进畜牧业持续健康发展,根据国家有关法律和标准,制定本.啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊随着社会和人民生活水平的提高啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊福建省质量技术监督局 发布2007-03-1实施2007-02-1发布动物尿液中莱克多巴胺残留量的测定酶联免疫吸附法Determination of ractopamineremain in animal urine-ELISADB 福建省地方标准1前 言随着社会和人民生活水平的提高，人们对畜产品安全的要求越来越高。为禁止非法使用莱克多巴胺药物饲喂动物，确保动物产品安全，保障人体健康和促进畜牧业持续健康发展，根据国家有关法律和标准，制定本标准。本标准由福建省农业厅提出并归口。本标准由福建省质量技术监督局批准。本标准由福建省动物卫生监督所、福州市兽医卫生监督检验所负责起草。本标准主要起草人： I动物尿样中莱克多巴胺的测定1 范围本标准规定了以酶联免疫（ELISA）法检测动物尿液中莱克多巴胺残留量的方法。本标准适用于饲养场动物和调运、交易及屠宰前动物尿液中莱克多巴胺残留量的测定。2 规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法3 试样制备采集的尿样应保存于4左右的冰箱中。尿样如有混浊，应经离心处理。4 原理本方法是酶联免疫法中的竞争性测定法，其主要原理是：微孔先用莱克多巴胺多抗包被，标准或样品中的莱克多巴胺和酶标记的莱克多巴胺竞争性地与吸附在微孔内的莱克多巴胺多抗相结合，未结合的酶标记物被洗涤去除后，只剩下与微孔内抗体相结合的酶标记物，其再与加入的酶底物相结合，酶底物在酶作用下产生蓝色产物，吸光度的高低与样品中莱克多巴胺的含量成反比。5 试剂和材料5.1 莱克多巴胺酶联免疫试剂盒或类似产品。5.2 水为去离子水，符合GB/T 6682二级水的规定。6 仪器与设备6.1 微孔板酶标仪(带450nm滤光片)。6.2 微量振荡器。6.3 离心机。6.4 微量加样器及配套吸头：10200L不同的微量加样器, 50100L多通道加样器 。6.5 冰箱。7 测定步骤（不同品牌的试剂盒可能略有差别，具体可根据试剂盒使用说明书略作调整）。7.1 样品处理7.1.1清澈尿样直接用于检测直接加入微孔进行ELISA测定。7.1.2尿液样品比较混浊时2000g离心5min或过滤，用上清液检测。7.2 试剂准备（所有试剂应贮存于26，不得冷冻，并在使用前将所有试剂恢复到室温）。 7.2.1莱克多巴胺标准溶液：已备用或根据实际需要按试剂盒说明配置相应浓度的莱克多巴胺标准溶液。7.2.2酶标记物：在冻干粉瓶中精确加入12mL酶标物溶解液，正反摇晃，充分溶解（最好在使用前至少4小时配置）。7.2.3洗涤液：用蒸馏水按1：10（19）稀释7.3测试程序7.3.1根据所测定样品及标准数，计算出所需微孔条数，将微孔条插入微孔架，标准和样品做两个孔的平行重复，记录标准和样品的位置。7.3.2加入50L的标准品和处理好的样品到各自的微孔中，标准和样品做两个平行重复。7.3.3在所有孔中加入100L酶标记物，轻轻晃动酶标板。在室温下（20-25）孵育10分钟。7.3.4倒出孔中的液体，将微孔架倒置在吸水纸上拍干，再加入工作洗液300L，再倒掉洗液，重复操作3遍以上。最后用吸水纸拍干。7.3.5在所有孔中加入100L显色剂，充分混合并在室温孵育10min。7.3.6在所有孔中加入50L反应终止液，混合后在450nm处10分钟内测量吸光度值。8 结果计算8.1计算每个标准品和样品的平均吸光度值。8.2以空白（浓度为0的标准溶液）吸光度值为100%计算，计算出各标准和样品的相对吸光度值。标准的吸光度值(或样品) 相对吸光度值（%） = 100 空白的吸光度值8.3用标准品浓度为横坐标，450nmi波长的吸光度值为纵坐标在对数坐标纸上绘制标准曲线图，以待测样品的相对吸光度值在标准曲线上读出相应样品的浓度。3啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊随着社会和人民生活水平的提高啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊,人们对畜产品安全的要求越来越高.为禁止非法使用莱克多巴胺药物饲喂动物,确保动物产品安全,保障人体健康和促进畜牧业持续健康发展,根据国家有关法律和标准,制定本.啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊