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课时跟踪检测(三十九) 微生物的利用一、选择题1(2018如皋期初考试)消毒和灭菌是两个不同的概念。下列各项中必须进行灭菌处理的是()A牛奶B培养基C离体培养的植物组织D注射药物时的皮肤解析:选B培养基必须用高压蒸汽法进行灭菌。2产生每个标准菌落的细菌的最初数目和培养基分别是()A一个细菌,液体培养基B许多细菌,液体培养基C一个细菌,固体培养基D许多细菌,固体培养基解析:选C在微生物的培养中产生每个标准菌落的细菌的最初数目是一个细菌,用的培养基为固体培养基。3某研究小组从有机废水中分离微生物用于废水处理。下列叙述正确的是()A培养基分装到培养皿后进行灭菌B转换划线角度后需灼烧接种环再进行划线C接种后的培养皿须放在光照培养箱中培养D培养过程中每隔一周观察一次解析:选B培养微生物过程中应先灭菌再倒平板;每一次划线前都要进行接种环的灼烧灭菌;接种后的培养皿应在恒温培养箱中进行培养,光照会影响温度等条件;培养过程中观察间隔的时间一般不超过24 h。4(2017苏锡常镇二模)下列有关“微生物的分离与培养”实验的叙述,正确的是()A利用平板划线法可对微生物进行接种、纯化、分离和计数B对培养皿进行编号或对菌种进行标注时,应使用记号笔在皿底标记C倒平板时,应将打开的培养皿盖放到一边,以免培养基溅到皿盖上D将好氧型菌株接种到培养液中需静置培养,防止培养液沾染试管壁引发污染解析:选B利用平板划线法可对微生物进行接种、纯化和分离,但不能计数;在微生物的培养中,一般将培养皿倒置,在皿底上用记号笔做标记;倒平板时左手拿培养皿,右手拿锥形瓶,左手将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙,倒入培养基后立即盖上培养皿皿盖;将好氧型菌株接种到培养液中需振荡培养,以增加溶液的溶氧量。5在分离、纯化大肠杆菌实验中,划线接种(甲)、培养结果(乙)如图。有关叙述错误的是()A接种前应对培养基进行高压蒸汽灭菌B连续划线的目的是获得单个细菌形成的菌落C接种过程中至少需要对接种环灼烧5次D甲中a区域为划线的起始位置解析:选D在分离、纯化大肠杆菌实验中,接种前应对培养基进行高压蒸汽灭菌;连续划线的目的是获得单个细菌形成的菌落;接种过程中,接种前要对接种环灼烧,每次划线后均需灼烧,据图甲可知至少需要对接种环灼烧5次;据甲和乙对比,甲中d区域为划线的起始位置。6(2017南京二模)某化工厂的污水池中含有一种有害的难以降解的有机化合物A,研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素等配制的培养基,成功筛选到能高效降解化合物A的细菌(目的菌)。实验的主要步骤如图所示。下列有关叙述错误的是()A培养基中加入化合物A作为唯一碳源,目的是为了筛选目的菌B实验培养过程中进行振荡培养,可使目的菌和培养液充分接触C实验操作过程中,获得纯净“目的菌”的关键是防止外来杂菌污染D将固体培养基得到的目的菌重复多次上述实验的目的是获得大量菌种解析:选D培养基中加入化合物A作为唯一碳源,可以筛选能高效降解化合物A的细菌;实验培养过程中进行振荡培养,既可使目的菌和培养液充分接触,又可以增加培养液中溶氧量;微生物培养过程中要进行无菌操作,防止外来杂菌的污染;将固体培养基得到的目的菌重复多次上述实验,目的是为了纯化高效降解化合物A的细菌。7(2018南通一模)养殖池中存在的有毒物质主要是氨及亚硝酸,这两种物质可被硝化细菌吸收利用。在“养殖池底泥中硝化细菌的分离与计数”实验中()A需要配制添加一定浓度氨盐的牛肉膏蛋白胨培养基,以筛选硝化细菌B应对采集底泥使用的工具进行灭菌,全部接种过程均需在酒精灯火焰旁进行C可以采用平板划线法进行接种,还需与未接种的空白培养基同时培养D应将培养基置于30 恒温下培养12 h后,统计培养基中全部菌落数解析:选B分离硝化细菌应用以铵盐为唯一氮源的培养基,牛肉膏蛋白胨本身含有氮源,无法筛选硝化细菌;平板划线法可以分离菌种,但不能用于计数;应将培养基置于37 恒温下培养2448 h,培养过程中应每隔一段时间观察,直到菌落稳定时开始计数。8(2018苏锡常镇调研)下列有关菌种保藏的叙述,错误的是()A频繁使用的菌种,可用斜面培养基保藏在4 的冰箱中B临时保藏菌种的培养基不需要定期更换C长期保藏的菌种,需要降低代谢和变异发生概率D长期保藏菌种时,可各取1 mL灭菌甘油和培养菌液混合后保存在冷冻箱中解析:选B频繁使用的菌种,可用斜面培养基保藏在4 的冰箱中临时保藏,但需要定期更换培养基,以保证营养物质的供应;长期保藏的菌种,需要采用1 mL灭菌甘油和培养菌液混合后保存在冷冻箱中进行甘油管藏,降低代谢和变异发生的概率。9下列关于微生物培养所需营养物质的叙述正确的是()A凡是碳源都能提供能量B碳源物质不可能同时是氮源C无机氮源也能提供能量D除水以外的无机物只提供无机盐解析:选C无机碳源不提供能量;有些物质可以既作碳源又作氮源,如牛肉膏;自然界中一些微生物可进行化能合成作用,如硝化细菌,能以无机氮源合成自身物质,同时通过氧化外界无机物获得生长所需的能量;无机物也可提供碳源和氮源,如碳酸盐和硝酸盐等。10下列有关常见无菌操作的叙述,错误的是()A用酒精擦拭双手B用氯气对水源消毒C实验操作应在酒精灯火焰附近进行D玻璃器皿(吸管、培养皿)可用酒精擦拭解析:选D用酒精擦拭双手属于使用化学药剂消毒;用氯气消毒水源也属于使用化学药剂消毒;实验操作应在酒精灯火焰附近进行,因为高温可防止杂菌污染;玻璃器皿(吸管、培养皿)等应用干热灭菌法灭菌,利用酒精擦拭不能将所有微生物杀灭。11(2017盐城三模)如图为纤维单胞菌(能产生纤维素酶)的获取过程。下列有关叙述错误的是()A培养基都应以纤维素为唯一碳源B图中所用培养基灭菌常用的方法是高压蒸汽灭菌C所用的接种方法可对培养的微生物进行计数D可用刚果红染料鉴定,看菌落周围是否出现透明圈解析:选C所用的接种方法是平板划线法,只能分离微生物,而不能用于计数,对微生物进行计数应采用稀释涂布平板法。12(2017南通三模)如图是研究人员从红棕壤中筛选高效分解尿素细菌的过程示意图,有关叙述错误的是()A在配制步骤的培养基时,应先调pH后高压蒸汽灭菌B步骤纯化分解尿素的原理是将聚集的细菌分散,可以获得单细胞菌落C步骤采用涂布平板法接种,并需向牛肉膏蛋白胨培养基中加入尿素D步骤是挑取中不同种的菌落分别接种,比较细菌分解尿素的能力解析:选C制备固体培养基的主要步骤:计算称量溶解调pH高压蒸气灭菌倒平板;筛选高效分解尿素细菌只能以尿素为唯一氮源,牛肉膏蛋白胨培养基中含有氮源,不适合。13(2018扬州一模,多选)下列有关“微生物的分离与培养”实验的叙述,错误的是()A高压蒸汽灭菌锅加盖时应按顺时针方向依次旋紧螺栓B选择培养基可以鉴定某种微生物的种类C待培养基冷却至室温时倒平板D统计样品中活菌数量时,接种方法可采用稀释涂布平板法解析:选ABC高压蒸汽灭菌锅加盖时,将盖上的排气软管插入内层灭菌桶的排气槽内,再以两两对称的方式同时旋紧相对的两个螺栓,使螺栓松紧一致;鉴别培养基可以鉴定培养基中某种微生物的种类;待培养基冷却至50左右时倒平板。14(2018泰州一模,多选)下列操作中,能防止杂菌污染的有()A早期胚胎的培养液中添加维生素B分离酵母菌的培养基中添加青霉素C腐乳装瓶腌制时在近瓶口处加大用盐量D微生物培养时在酒精灯火焰旁倒平板解析:选BCD早期胚胎的培养液中添加维生素是为了提供营养,加入抗生素能防止杂菌污染;青霉素可以抑制细菌、放线菌的生长从而防止杂菌污染;腐乳装瓶腌制时在近瓶口处加大用盐量及在酒精灯火焰旁倒平板都能防止空气中的杂菌污染。15(多选)下列有关微生物实验室培养的叙述,正确的是()A在溶化琼脂时,需要控制火力并不断搅拌,以免发生焦糊B灼烧、高压蒸汽灭菌、紫外线照射等都属于无菌技术C样品中活菌数量统计时,接种方法应采用划线法D用平板培养基培养微生物时,应将平板倒过来放置解析:选ABD溶化琼脂时要小火加热并不断搅拌,否则易糊底。灭菌和消毒都属于无菌技术,常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌,紫外线照射也属于无菌技术。统计活菌时,应该用稀释涂布平板法进行接种,而不是用平板划线法。培养微生物时,将培养皿倒置,既可以使培养基表面的水分更好地挥发,又可以防止培养皿盖上的水珠落入培养基,造成污染。二、非选择题16(2018南京一模)如图为果酒、果醋工厂化生产流程。请据图回答问题:(1)家庭自制葡萄酒所用菌种常来自_,图中的候选菌A、B经筛选和纯化分别获取_和_菌种。(2)图中所用的培养基都需要在接种前用_法进行灭菌。(3)在纯化菌种A时接种了5个平板,每个平板均接种0.1 mL样品并培养。其中乙平板的菌落分布如图,纯化菌种A的接种方法是_,推测出现平板乙可能的操作失误是_。其余的甲、丙、丁、戊平板操作正常,其菌落数分别是210、230、470、190,则样品中菌种A的数量为_个/mL。(4)果酒发酵罐与果醋发酵罐需要控制的温度条件差异是_。解析:(1)家庭自制葡萄酒所用菌种常来自葡萄皮表面的酵母菌。候选菌A、B筛选和纯化后可以分别用于制作果酒和果醋,所以分别获取的是酵母菌和醋酸菌。(2)培养基常用高压蒸汽灭菌法进行灭菌。(3)分析图乙中培养基培养结果,可推知采用的纯化接种方法是稀释涂布平板法。出现平板乙可能的操作失误是涂布不均匀。平板上菌落数量在30300之间可以用于计算,所以有效的菌落数是210、230、190,平均值为210。因为接种了0.1 mL,所以菌种A的数量为2 100个/mL。(4)果酒发酵的适宜温度是1825 ,果醋发酵的适宜温度是3035 。答案:(1)葡萄皮表面的酵母菌酵母菌醋酸菌(2)高压蒸汽灭菌(3)稀释涂布平板法涂布不均匀2 100(4)前者1825 ,后者3035 17(2018苏州期初)微生物接种是微生物培养中非常重要的技术环节。下图是关于接种的操作步骤示意图。请据图回答有关问题:(1)图中接种工具的名称是_,步骤中,灼烧后必须先将接种工具冷却的原因是_。(2)步骤中进行划线操作的目的是_,划线时一般不能划破培养基的原因可能是_。(3)分别用三个平板培养三种细菌(E.coli、S.albus、B.subtilis),然后在培养基上分别滴一滴一定浓度的青霉素溶液,经过一定时间培养后,可以观察到一圈清晰区,这是抑制细菌生长所致。测量清晰区的直径,数据如下表。细菌不同浓度甲抗生素条件下清晰区直径(mm)5 g/mL7.5 g/mL10 g/mL15 g/mL20 g/mLE.coli710161616S.albus0581317B.subtilis5791419该实验的目的是_。从表中数据可以看出,10 g/mL青霉素和20 g/mL青霉素在抑制E.coli、S.albus上的区别是 _、_。(4)利用选择培养基可以筛选微生物,制备培养基时,灭菌和调pH的先后顺序是_,在利用高压蒸汽灭菌锅对培养基灭菌时,锅内水加热煮沸后,必须_,以保证灭菌温度达到121 。解析:(1)图中的接种工具是接种环,步骤中,灼烧后必须先将接种工具冷却的原因是避免高温杀死接种物。(2)步骤是采用平板划线法对微生物进行接种,其中进行划线操作的目的是分离微生物(或分离细菌、分离菌种)。划线时一般不能划破培养基的原因可能有:微生物接种于裂口内,摄取营养受限,生长空间变小,培养基的沟槽造成菌落形态改变,从而影响对菌落形态的观察及特征鉴别。(3)依题意和表中信息可知:该实验的目的是探究不同浓度青霉素对不同细菌的抑制作用。在控制S.albus方面,20 g/mL青霉素的效用是10 g/mL青霉素的两倍;在控制E.coli方面,10 g/mL和20 g/mL青霉素的效用没有差异。(4)制备培养基时,应先调pH,再灭菌。在

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