医学免疫学c4免疫球蛋白课件

1,第四章 免疫球蛋白,Immunoglobulin, Ig,曾 霞,2,内容提要,概述 免疫球蛋白的结构 抗体的异质性 免疫球蛋白的生物学特性 人工制备抗体,3,概 述,一、概念 是血液和组织液中一类糖蛋白， 由B细胞接受抗原刺激后增殖分 化为浆细胞所产生，是体液免疫 的重要效应分子。 抗体（antibody,Ab）= 免疫球蛋白,掌握,4,类型 分泌型（secreted Ig, sIg） 膜 型（membrane Ig, mIg） 理化性质 属球蛋白，在电泳图谱上大部分 抗体活性在球蛋白区；,掌握,5,Functions of mIg,Ag,6,2.Secreted Ig, sIg,as antibody(Ab),plasma,7,8,第1节 免疫球蛋白的结构,重链与轻链 可变区和恒定区 铰链区 功能区 其它成分 水解片段,掌握,以IgG为例,9,由两条相同的重链和两条相同的轻链通过二硫键连接而成的四肽链分子。,掌握,一、基本结构,flash1,10,11,1.重链与轻链,1）重链（heavy chain, H链） 约450-550氨基酸 重链分为5种：、。 其相应Ig为IgG、IgM、IgA、IgD、IgE 每类又可分为不同亚类,掌握,12,13,1.重链与轻链,2）轻链（light chain, L链） 约214个氨基酸 轻链有两型：及 但每一Ig分子的两条轻链 总是同型的。,掌握,14,2.可变区和恒定区,掌握,15,恒定区 （constant region,C区),位于免疫球蛋白分子的C端，占轻链1/2和重链3/4（IgA、IgG）或4/5（IgM、IgE）。在同一种属中，同一类重链和同一类轻链C区氨基酸的组成或排列比较恒定。介导免疫球蛋白多种生物学功能。,掌握,16,可 变 区 （variable region，V区）,位于Ig分子N端，占轻链1/2和重链1/4或1/5；不同抗体其Ig V区氨基酸组成和排列有较大差异，并决定抗体与抗原结合的特异性；,掌握,17,高变区 （hypervariable region, HVR）,在VL和VH中，某些局部区域的氨基酸组成更高变化程度，此为HVR。轻、重链各有3个HVR。,18,互补决定区 （complementarity-determining region, CDR）,高变区乃抗体与抗原（表位）特异性结合的位置，此为CDR。,高变区=互补决定区,19,骨架区 （framework region, FR）,V区中非HVR部位的氨基酸组成和排列相对保守，此为FR。VH和VL各有4个FR。,20,恒定区,可变区,高变区,骨架区,21,22,位于CH1和CH2之间，含丰富的脯氨酸，易伸展弯曲，有利于免疫球蛋白V区与抗原互补性结合；有利于暴露补体结合位点；,3.铰 链 区,23,24,Flash 2,25,26,4.免疫球蛋白的功能区(结构域),27,结构域的二级结构是“三明治”,28,免疫球蛋白超家族（IgSF）,29,结合抗原,遗传标记,结合补体,结合细胞,功能区或结构域,30,其它成分 J链（joining chain） 分泌片（secretory piece, sp） 水解片段 功能区,31,32,33,由粘膜上皮细胞合成的一条多肽链，是上皮细胞膜上的多聚Ig受体的胞外区部分，为分泌型IgA产生所必需，可保护sIgA免受蛋白酶的水解破坏。,2、分泌片,34,35,第2节 抗体的异质性,抗体在结构和功能上差异的总和。,36,一、免疫球蛋白的分类,类（class）：根据CH不同 IgG IgM IgA IgD IgE 亚类： IgG1-G4； IgA1-A2； IgM1-M2。,37,型（type）： 根据CL不同分为两个型： 型和型 亚型： 型有亚型,38,二、抗体的多样性,39,免疫球蛋白既可与抗原特异性结合，本身又可作为抗原，激发机体特异性免疫应答。,三、内源性因素所致抗体异质性 免疫球蛋白的血清型,40,免疫球蛋白的双重身份,41,免疫球蛋白的血清型,同种型 同种异型 独特型,42,同种型（isotype） 指同一种属所有个体的Ig分子共有的 抗原特异性标志，位于Ig C区。 为种属标志 （颜色不一样）,43,同种异型（allotype） 指同一种属不同个体间Ig分子所具有的不同的抗原特异性标志。为个体标志 （花纹不一样）,44,独特型（idiotype） 指每个Ig分子所特有的抗原特异性标志，其决定簇又称为独特位，主要存在于V区。,45,46,第3节 免疫球蛋白的生物学特性,免疫球蛋白的主要功能 各类免疫球蛋白的特性和功能,掌握,47,一、免疫球蛋白的主要功能,免疫球蛋白V区的功能 免疫球蛋白C区的功能,48,1.免疫球蛋白V区的功能,特异性识别结合抗原 中和毒素 阻断病原体入侵,49,50,中和毒素,51,阻止病毒入侵,52,阻止细菌入侵,Flash 4,53,1）、激活补体 IgM、IgG13 激活补体经典途径 凝聚的IgA或IgG4 激活补体旁路途径,2.免疫球蛋白C区的功能,54,Flash 5,55,与细胞表面FcR结合 调理作用（opsonization)； IgFc段与吞噬细胞表面FcR结合促吞噬； 抗体依赖的细胞介导的细胞毒作用 （Ab-dependent cell-mediated cytotoxicity,ADCC) 介导I型超敏反应,2）细胞亲嗜性,56,Flash 6,57,抗体依赖的细胞介导的细胞毒作用,Flash 7,58,与细胞表面Fc受体结合,59,与细胞表面Fc受体结合,60,61,二、各类免疫球蛋白的特性和功能,IgG IgM IgA IgD IgE,62,63,IgG的特性和功能,血清中的主要抗体成分（80%）；半衰期长（20-23天）； 多数抗菌、抗病毒、抗毒素抗体均属IgG类 具有调理作用、ADCC作用等； 具有活化补体经典途径的能力（IgG3IgG1IgG2）；,64,出生后3个月开始合成，3-5岁接近成人水平 是唯一能通过胎盘的Ig，发挥自然被动免疫功能； 参与型、型超敏反应，某些自身免疫病的抗体也属IgG 再次免疫应答的主要抗体,Flash 8,65,IgM的特性和功能,为五聚体，分子量最大，称为巨球蛋白（macroglobulin）； 个体发育中最先出现的Ig，胚胎晚期即能产生，脐带血IgM增高提示宫内感染（如风疹病毒、巨细胞病毒感染等）；,66,抗原初次刺激机体时，是体内最先产生的Ig；血清IgM升高说明有近期感染； 有强大激活补体能力和调理作用，在机体早期免疫防御中具有重要作用； 天然血型抗体是IgM；,67,68,69,IgA的特性和功能,分为单体的血清型和二聚体的分泌型IgA（ SIgA ）；,70,分泌型IgA 主要由粘膜相关淋巴组织产生，存在于唾液、泪液、乳汁及呼吸道、消化道、泌尿道的分泌液中和粘膜表面，是机体粘膜局部抗感染免疫的重要因素。 初乳中的sIgA可对婴幼儿发挥自然被动免疫作用,71,IgD的特性和功能,血清中含量低，其生物学作用尚不清楚 mIgD可作为B细胞分化成熟标记，成熟B细胞同时表达mIgM和mIgD,mIgM,mIgM,mIgD,成熟B细胞,活化B细胞,未成熟B细胞,72,IgE的特性和功能,是血清中含量最低的Ig； 与抗寄生虫免疫有关 属嗜细胞抗体，可与肥大细胞、嗜碱性粒细胞表面FcR结合，介导I型超敏反应。,Flash 9,73,初次接触 花粉,B细胞产生特异性IgE,IgE结合于肥大细胞的FcR,再次接触花粉,脱颗粒 花粉症,74,第4节、人工制备抗体,多克隆抗体 单克隆抗体 基因工程抗体,75,多克隆抗体 （polyclonal antibody）,用含多种抗原决定簇的抗原物质免疫动物，刺激多个B细胞克隆所获得的免疫血清（含多种抗体的混合物），此为多克隆抗体。 来源广泛，制备容易；特异性不高。,76,单克隆B细胞应答,多克隆B细胞应答,77,带有多个表位,针对不同表位的B细胞,克隆增殖,多种抗体的混合物 （多克隆抗体）,刺激小鼠,78,单克隆抗体 monoclonal antibody, mAb,由一个识别一种抗原表位的B细胞克隆产生的同源抗体 纯度高、特异性强、可大量生产。,79,带有多个表位,针对不同表位的B细胞,克隆增殖,多种抗体的混合物 （多克隆抗体）,刺激小鼠,80,81,基因工程抗体,又称重组抗体 借助DNA重组技术和蛋白质工程技术，按人们的意愿在基因水平上对Ig进行切割、拼接或修筛，重新组装成为新型抗体分子,82,Human-mouse chimeric Ab,83,Recombinant single chain Ab:VH-linker-VL,84,?,研究抗体有什么用？ 如何获得抗体？ 如果你有一个已知的抗体，它能实现你的什么意图？,85,Bexxra是一个具有双重作用的癌症新疗法，它将靶向作用于肿瘤，具有细胞毒作用的单克隆抗体和具有治疗潜能，为病人量身制定剂量的放疗法（碘 I131）相结合，形成一个用放射物作标记的单克隆抗体（碘 I 131 Tositumomab）,此抗体可靶向结合NHL 细胞上表达的CD20抗原，激发对癌细胞的免疫反应，将一定的放射剂量直接传输到肿瘤细