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文档简介

细菌生化反应,概念:用生化的方法来检测细菌对各种基质的代谢作用及代谢产物,借以鉴别细菌种类,这种生化试验称为细菌的生化反应试验。 意义:是鉴别细菌的重要依据。,细菌的生化反应,生化反应,碳水化合物 代谢试验,各种酶类试验,抑菌试验,糖发酵试验,甲基红试验,V-P试验,蛋白质和氨基酸代谢试验,硫化氢试验,吲哚试验,碳源和氮源 利用试验,枸橼酸盐利用试验,IMViC试验,甲基红试验,大肠杆菌分解葡萄糖产生丙酮酸后进行混合酸发酵,产生乳酸、甲酸、乙酸、琥珀酸等多种有机酸,使培养液pH小于4.5,甲基红指示剂呈红色,为甲基红试验阳性。 产气杆菌分解葡萄糖产生丙酮酸,经脱羧后生成中性乙酰甲基甲醇,培养液的pH大于5.4,甲基红指示剂呈橘黄色,为甲基红试验阴性。,原理,葡萄糖,丙酮酸,大量混合酸,pH降至4.4以下,甲基红试剂,培养基变红,甲基红试验,乙酰甲基甲醇(中性),pH5.4,甲基红试剂,培养基橘黄色,方法,滴加甲基红指示剂数滴,立即观察结果,结果,红色为阳性,+ 不出现红色为阴性,-,VP试验,产气杆菌利用葡萄糖时产生中性物质之一就是乙酰甲基甲醇,它在碱性溶液中被空气中的分子氧氧化生成二乙酰,二乙酰与培养基中的含胍基的化合物反应,生成红色化合物,是VP试验阳性;而大肠杆菌不能产生乙酰甲基甲醇,为阴性。,原理,葡萄糖,丙酮酸,乙酰甲基甲醇,二乙酰,V-P试剂,培养基变红,VP试验,与蛋白胨培养基精氨酸中的胍基 反应生成红色化合物,方法,取出试管培养物,加入等量的李氏试剂,摇匀后不加塞,静置30分钟观察结果。,结果,红色为阳性,+ 无红色为阴性,-,枸橼酸盐利用试验,某些细菌能力利用培养基中的枸橼酸盐作为唯一的碳源,也能利用其中的铵盐作为唯一氮源,细菌生长过程中分解枸橼酸盐产生碳酸盐和分解铵盐生成的氨,使培养基变碱性,使指示剂呈碱性反应,指示剂由绿色变为深蓝色是枸橼酸盐利用试验阳性(产气杆菌),反之培养基不变色是为阴性(大肠杆菌)。,原理,枸橼酸盐,铵盐,碳酸盐,氨,培养基pH下降,溴麝香草酚蓝 呈碱性变色

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