生化检验实验室基本知识课件

生化检验实验室基本知识,邓益斌,一、生化检验标本 二、生化试剂盒 三、检验项目 四、生化仪器 五、室内质量控制 六、实验室信息系统（LIS） 七、常用生化分析技术,一、生化检验标本,生化检验最常用的标本为血液标本，其他有尿液、脑脊液和胸腹水等 不恰当的标本收集与保存，不注意影响标本成分变化的各种因素，往往是导致实验结果不可靠的主要原因,（一）标本采集,1.血标本采集方法 采血部位：静脉、动脉、毛细血管 2.血标本类型与选择 血标本可分为全血、血浆与血清 血清与血浆有何区别,？,血清与血浆有何区别？,1.血浆是抗凝血释出，而血清是非抗凝血释出 2.血浆中含有纤维蛋白原，而血清中不含有纤维蛋白原 3. 血清与血浆中：ALT、AST、GLU、CK、TBIL、BUN、Ca2+等无统计学意义;Alb、TG、ALP、UA、钠磷等有统计学意义无临床意义,（二）影响血标本成分变化因素,1.生理因素：年龄、性别、体型、情绪、运动 2.饮食因素： 3.药物因素： 4.溶血因素： 5.储存因素：,Cho/UA/ALP,性激素,TG,皮质醇、催乳素、生长素、GLU,下降：Alb、铁、钾、总胆,增高：ALT/AST/ACP/ALP/TP/BUN/CR/UA/GLU/AMY,受饮食影响的项目,项目：GLU、TG、ALP、血酯、丙酮酸、乳酸、BUN、UA、转氨酶等 原则：空腹6-12h后采血,受储存条件影响的项目,原则：采血后，2h内尽快将血清与细胞分离，并检测完毕。为什么 受放置时间影响最大的项目有： 增高：TP、ALB、CHO、K+、Na+、AST、ALP、GGT 降低：GLU、TBIL、CL-、ALT,因为细胞仍然活着，仍进行代谢活动，消耗能量，并产生代谢产物，影响血清成分变化,3h:GLU、CO2 8h：GLU、CO2、TP、K+、AST 24h:GLU、CO2、TP、K+、AST、ALB、TBIL、CHO、Na+、CL-、ALT、ALP、GGT,二、生化试剂盒,商品化试剂盒的广泛应用，对检验医学的发展产生了深远的影响，它不仅使检验操作更简便，而且使试剂生产和检验操作更易标准化和规范化，尤其是有利于提高检验质量,二、生化试剂盒,化学法,酶 法,方法学,免疫法,物理性状,液体型试剂（自配）,冻干型试剂,片剂或冻干粉剂,液体型试剂（商品）,组合方式,多剂型试剂,单剂型试剂,双剂（多剂）试剂,操作方式,手工多步骤操作,离心式自动分析仪,分列式多功能分析仪,二、生化试剂盒,（一）液体型试剂与粉剂型试剂,二、生化试剂盒,（二）单试剂与双试剂,比如：TG测定，试剂1（含甘油激酶、3-磷酸甘油氧化酶、辣根过氧化物酶、坏血酸氧化酶，但不含脂蛋白脂肪酶），消耗游离甘油。试剂2（含脂蛋白脂肪酶）起动TG反应。比如酶法测定GLU、CHO、UA、HDL等，试剂1含维生素C氧化本科酶，清除维C对Trinder反应的干扰,二、生化试剂盒,（三）试剂盒质量评价 1.线性范围 2.酶促反应时间曲线或化学反应速度时间曲线 （1）终点法：空白值、反应时间 （2）连续监测法：空白、斜率、反应曲线 3.稳定性试验,三、生化检验项目,(一)常规检验项目 1.单检验项目 实用性：经济、快速 可靠性：针对性强 2.组合检验项目 全面性：提供全面的检验信息 高效性：提高检验和诊断效率,三、生化检验项目,（二）急诊生化检验项目 急诊项目：指对临床危急、重症病人的诊断、抢救和治疗有重要指导意义的检验项目。一般要求从“标本采取”到“检验报告”发出控制在2h内。如血气分析、肾功、电解质、心功等,常规项目,急诊项目,危急值,检验项目,三、生化检验项目,（三）特殊项目 指标本采集技术高，或标本数量少，或含有传染性病毒或细菌的标本，这些标本中的项目不管是急诊还是常规项目均属于特殊项目,四、生化仪器,(一)离心机 (二)电解质分析仪 (三)血气分析仪 (四)生化分析仪,（一）离心机,离心机：利用离心力分 离液体与固体颗粒或液 体与液体的混合物中各 组分的机械,（一）离心机,利用离心机转子高速旋转产生的强大离心力， 加快液体中颗粒的沉降速度，把样品不同沉降 系数和浮力物质的密度分离开来。微粒移动速 度与其大小、形态和密度有关，又与重力场的 强度及液体的粘度有关,1.按分离因素：常速、高速和超速 2.按操作方式：间隙式、连续式,（一）离心机,注意事项 1.离心前要平衡 2.离心机套管底部要垫棉花或试管垫 3.离心管必须对称放入套管中，防止机身振动 4.电动离心机如有噪音或机身振动时，应立即切断电源，即时排除故障 5.启动离心机时，应盖上离心机顶盖后 6.分离结束后，先关闭离心机，在离心机停止转动后，方可打开离心机盖，取出样品,(二)电解质分析仪,溶液中被测离子接触电极时 ，在离子选择电极基质的含 水层内发生离子迁移，迁移 离子的电荷改变存在电势， 使膜面间的电位发生变化， 在测量电极与参比电极间产 生一个电位差，测量电位差 大小可求得待测离子浓度,(三)血气分析仪,血气分析仪不仅能在几分钟 内检测出病人血液中的氧气、 二氧化碳等气体的含量和血 液酸碱度及相关指标的变化， 还能快速反映血液中钾、钠、 钙的含量，为危重病人抢救 中快速、准确的检测提供了 有利的保障。,(四)生化分析仪,日立7060 v:400T/h,日立7600 v:3200T/h,五、室内质量控制,1.标本质量控制 2.试剂质量控制 3.仪器质量控制 4.操作过程质量控制（标准化与规范化） 5.质量控制标准的建立 6.失控原因分析与处理,六、实验室信息系统,LIS:laboratory information system,实验室信息系统，是通过计算机对实验室日常工作、科研管理、学科建设等多个方面所需信息，进行收集、处理、存储和应用的系统 HIS：hospital information system,医院信息系统,六、实验室信息系统,七、常用生化分析技术,（一）光谱分析技术 （二）电泳技术 （三）离心技术 （四）层析技术 （五）电化学分析技术 （六）生物芯片技术,（一）光谱分析技术,定义：利用各种化学物质所具有的发射、吸收或散射光谱谱系的特征，来确定其性质、结构或含量的技术，称之为光谱分析技术。根据光谱谱系特征，可分为发射光谱分析、吸收光谱分析和散射光谱分析三大类,（一）光谱分析技术,（一）光谱分析技术,影响光谱分析的主要因素： 1.化学因素：浓度、pH、时间、杂质 2.主观因素：操作不当有关 3.光学因素：仪器性能有关,（二）电泳技术,定义：在电场中，带电粒子向所带电荷相反的电板移动的现象称为电泳。根据电泳原理可分为移动界面电泳、区带电泳和稳态电泳等,（二）电泳技术,（二）电泳技术,影响电泳的因素：颗粒性质、电场强度、溶液性质、pH、离子强度、溶液粘度等 影响电泳的三大要素：电场、带电粒子和促使粒子移动的介质,（三）离心技术,定义：根据颗粒的密度不同，在受到同一离心力的作用下可分成不同界面的技术 根据原理可分为平衡离心法、等密度离心法和沉降平衡离心法 根据速度可分为低、高、超速离心机,（三）离心技术,（四）层析技术,定义：利用不同物质理化性质的差异而建立起来的技术，由固定相和流动相组成 原理：当待分离的混合物随流动相通过固定相时，由于各组分与固定相的吸附、溶解、结合等能力不同，在两相中的分配也不同。与固定相相互作用弱的组分，受阻力小，移动速度快，先分离出来，反之，后分离出来,（四）层析技术,按两相所处状态分为液-液、液-固、气-液和气-固层析法 按层析原理分为吸附、分配、离子交换、凝胶和亲和层析法 按操作模式分为柱层析、薄层层析、纸层析和薄膜层析法,（四）层析技术,（五）电化学分析技术,定义：利用物质的电化学性质，测定化学电池的电位、电流或电量的变化进行分析的方法。主要有电位法、电导法和电容量分析法等 离子选择性电极分析法是电位分析法中发展最快的一支，主要用于电解质和血气分析,（六）生物芯片技术,定义：通过微加工技术和微电子技术在固体芯片表面构建的微型生物化学分析系统，具有高能量、微型化和自动化的特点，可对细胞、蛋白质、DNA等生物分子进行检测