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实验二、细菌的制片和染色,实验报告存在问题,实验结果 画图:菌体空心,不规范,实验目的: 1、复习显微镜油镜的使用; 2、掌握细菌制片和单染色方法; 3、了解革兰氏染色法的基本原理和掌握细菌的革兰氏染色法,细菌的制片和单染色过程,问题 在细菌制片时是否可以不干燥而直接固定? 干燥了是否仍然还必须固定?,细菌的制片和单染色过程,染色12min,水洗、干燥,镜检,结晶紫 番红,细菌的革兰氏染色,革兰染色法(Gram stain)是细菌学上最经典的、使用最广泛的一种染色方法。由丹麦细菌学家革兰(Christian Gram)于1884年创立。 主要由于细菌细胞壁的结构和组成不同,将绝大多数的细菌分成革兰氏阳性菌(G+)和革兰氏阴性菌(G-) 一种复染色的方法,革兰氏染色的主要过程,肽聚糖,革兰氏染色原理,操作步骤,沙黄或石炭酸复红 1min,结晶紫1min,I-KI 1min,95%乙醇脱色5 20s,镜检,制 片,水洗、稍干,水洗、稍干,水洗、稍干,水洗、干燥,革兰氏染色注意事项,涂片务求均匀,切忌太厚 染料必须覆盖所有涂片区域, 染料不要干枯 脱色时间要把握好 必须选用适龄菌体 设置对照,实验内容,1、对大肠杆菌( 0.5 m 2 m )进行制片和单染色, 用油镜观察其形态,2、对大肠杆菌、苏云金芽孢杆菌 进行革兰氏染色(混合涂片、单独涂片), 通过油镜观察染色结果,实验报告,1、图示大肠杆菌显微镜观察结果。 2、用文字说明两种细菌革兰氏染色结果,并进行分析讨论。 3、思考题
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