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,赖氨酸的发酵流程,目 录,一、赖氨酸的简介 二、菌种的选育 三、赖氨酸的发酵工艺流程 四、赖氨酸的提取与精制工艺,一、赖氨酸的简介,赖氨酸是人体必需氨基酸之一,能促进人体发育、增强免疫功能,并有提高中枢神经组织功能的作用。缺乏赖氨酸的症状包括疲劳,虚弱,恶心,呕吐,头晕,没有食欲,发育迟缓,贫血等。赖氨酸为碱性必需氨基酸。由于谷物食品中的赖氨酸含量甚低,且在加工过程中易被破坏而缺乏,故称为第一限制性氨基酸。,二、菌种的选育,根据赖氨酸的发酵机制(图1)菌种的选育遵循: 1)切断或减弱支路代谢,选育高丝氨酸缺陷型(Hom)突变株,或蛋氨酸和苏氨酸或异亮氨酸缺陷型(Met + Thr、Ile)突变株; 2)解除赖氨酸和苏氨酸的协同反馈抑制作用,选育结构类似物抗性突变株,使赖氨酸大量积累,,赖氨酸发酵机制,图 1 高产赖氨酸菌的遗传标记位置,三、赖氨酸的发酵工艺流程,参数控制 温度:发酵前期 32,中后期 34 pH :6.57.5 种龄和接种量:二级种子接种量约 2%,种龄812h 三级种子接种量10%,种龄628h 通风供氧:Lys的最大生成量是在供氧充足、细菌呼 吸充足的时候,生物素:要充足,2030g/L以上 维生素B1 :有促进作用 醋酸:加入醋酸比单独采用糖质原料Lys产量高 硫酸铵:适当增加,4%4.5% Cu2+:一定浓度的CuSO45H2O,可提高产量 流加糖和其它生长因子,四、赖氨酸的提取与精制工艺,1)发酵液的处理:用草酸除去发酵液中的Ca3+ ,调节pH至23 2)菌体分离:用碟片式自动卸渣高速离心机,分离菌体和草酸钙等 3)离子交换吸附及洗脱:铵型阳离子交换树脂,洗脱剂为氨水加氯 化铵;用茚三酮检查流出液,pH9.512,得率可达90%95% 4)真空浓缩:去除氨,并提高Lys含量,真空时温度65,浓度22 23B 5)中和结晶:加入工业盐酸,搅拌,pH5.2,自然冷却结晶,至5结 晶完全(粗结晶,含一分子结晶水的粗L-Lys盐酸盐) 6)重结晶:用蒸馏水溶解,1112B,加入活性炭脱色,压滤,再真空浓缩至22B,再结晶、冷却、离心分离并水洗 7)干燥:60热风干燥,去结晶水,得到L-Lys盐酸盐,含水0.1%以下,五、灭菌操作,自从发酵技术应用纯种培养后,要求发酵全过程只能有生产菌,不允许其他任何微生物共存,因此所有发酵过程必须进行纯种培养。为了确保纯种
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