轮状病毒感染性腹泻与轮状病毒疫苗研究进展.ppt

,婴幼儿轮状病毒感染性腹泻 与轮状病毒疫苗研究进展,1.婴幼儿腹泻的原因及危害 2.轮状病毒及其流行病学进展 3.轮状病毒感染性腹泻的研究进展 4.轮状病毒疫苗的发展进程 5.兰生口服轮状病毒活疫苗,一.轮状病毒感染性腹泻,新生儿37,HIV/AIDS 3,腹泻17,疟疾8,肺炎19,创伤3,全球5岁以下儿童死亡主要原因,麻疹4,其他10,据WHO统计,腹泻病是发展中国家5岁以下儿童死亡的首位或第二位病因,新生人口 1.35 亿 / 年 5岁以下人口 6.62亿/年 5岁以下死亡率 1220万 / 年 腹泻病死亡率 280万 / 年 轮状病毒病死亡率 45200/ 年,全球腹泻病与轮状病毒疾病状况,每年5岁以下儿童总死亡人数的5死于轮状病毒疾病。轮状病毒感染导致全球平均每小时52个儿童死亡。 来自WHO2005年7月北京第二届国际轮状病毒疫苗研讨会,全球轮状病毒疾病导致死亡病例分布,1000例点,85% 死亡发生在发展中国家,我国轮状病毒毒株监测网（1998-2004）,中国5岁以下儿童腹泻的主要原因,轮状病毒是5岁以下婴幼儿腹泻的主要病原,轮状病毒51%,中国轮状病毒腹泻状况,新生人口 2100万/年 5岁以下儿童人口 9230万/年 5岁以下儿童腹泻发病数 1.85亿/年 5岁以下轮状病毒腹泻数 1780万/年 5岁以下儿童死亡数 32万 /年 轮状病毒腹泻死亡数 38405/年（5个/小时）,中国轮状病毒腹泻死亡数占全球8， 占中国5岁以下儿童总死亡人数的12。 中国CDC2005年7月北京第二届国际轮状病毒疫苗研讨会,中国轮状病毒腹泻疾病负担估计,5岁以下轮状病毒腹泻门诊 64248元次 则全国门诊平均费用 100元次 住院治疗 7282156元次 平均住院费用 839元次 仅年用于治疗岁以下轮状病毒腹泻患儿的医疗费近亿元 婴幼儿轮状病毒腹泻所致的经济负担不容忽视！,轮 状 病 毒 的 威 胁,SARS,Rotavirus, 1000,452,000,二.轮状病毒及其流行病学进展,轮状病毒概述,1973年由澳大利亚科学家Bishop首次发现，人轮状病毒是婴幼儿腹泻最重要的病毒病原。 电镜下轮状病毒呈二十面对称球形颗粒,双层衣壳,外型似车轮,故命名为“轮状病毒”（otavirus)。 轮状病毒感染是一种人畜共患性传染病。,轮状病毒概述,人轮状病毒属呼肠孤病毒科,病毒基因组为含11片段的双链RNA. 主要结构蛋白-VP4、VP6和VP7. VP6为群和亚群的特异性抗原.轮状病毒群特异性抗原内壳蛋白VP6分为A.B.C.D.E.F.G七个群. A,B,C群既感染人类也感染动物, D.E.F.G群只在动物中发现;B群主要感染成人,C群主要引起散发病例. A群轮状病毒是婴幼儿腹泻最重要的病毒.,轮状病毒的分子结构 Rotavirus Structure,A组轮状病毒又依据外壳中和抗原VP7和VP4抗原性的不同分为14个G血清型，即G1G14型和19个P血清型. 引起婴幼儿腹泻的主要是G1、G2、G3、G4型轮状病毒。,轮状病毒的流行病学特点,轮状病毒对理化因子有较强的抵抗力。（561小时不能灭活，PH310环境保持稳定耐酸,不宜被胃酸破坏,-20可长期保存） 在自然界及物体表面可存活较长时间。（室温下可保持感染率7个月）,发达国家与发展中国家的分布情况,A群轮状病毒 (民主病毒) 流行病学证实：表明完善的卫生设施及良好的卫生条件并不能阻止轮状病毒的传播。,发达国家,发展中国家,不同地区轮状病毒腹泻住院率比较,发达国家 发展中国家 美国 39 印度 25 英国 40 中国 38 日本 50 巴西 32 澳大利亚 40 墨西哥 25 瑞典 45 印度尼西亚 38,卫生状况的改善不能降低轮状病毒腹泻的发病率！,中国城、乡轮状病毒腹泻分布,城市 农村 5岁以下人口 3,324 万(36%) 5,904万(64%) 腹泻门诊病例 821.4万(24.7%) 893.5万(15.2%) 轮状病毒腹泻门诊病例 230万 (28%) 277万(31%) 轮状病毒腹泻住院病例 36,600(38%) 478,200(39.8%) 轮状病毒腹泻死亡病例 5,881(16%) 32,524(7%) 城、乡轮状病毒腹泻发病率无显著差异。,轮状病毒的流行病学特点,轮状病毒有很高的传染性。 5岁以下的儿童几乎人人都遭受过轮状病毒的侵染。,我国5岁以下儿童轮状病毒腹泻年龄分布 19982004,年龄（月） RV 阳性率 累计RV阳性率 0-2 25.3% 3.2% 3-5 28.5% 11.6% 6-8 42.4% 30.6% 9-11 52.2% 52.6% 12-17 52.8% 84.4% 18-23 46.5% 94% 24-35 33.4% 98.8% 36-47 15.9% 99.7% 48-59 7.4% 100%,轮状病毒的流行病学特点,轮状病毒的流行病学特点,轮状病毒腹泻大多发生在623月龄的婴幼儿 高危人群主要为6个月3岁的婴幼儿。,发病率,轮状病毒腹泻发病率季节分布,轮状病毒感染全年均有发病，以秋冬季多见,月份,轮状病毒的流行病学特点,我国轮状病毒G血清型分布 (1998.4 - 2005.3),轮状病毒的流行病学特点,我国以G1和G3血清型轮状病毒腹泻为主 我国各省、市都有过轮状病毒爆发流行的记载。,轮状病毒的流行病学特点,我国轮状病毒G血清型变化趋势 (1998.4 - 2005.3),G1型轮状病毒感染呈下降趋势，G3型轮状病 毒感染逐年上升。G9型轮状病毒感染引起关注。,轮状病毒的流行病学特点,传染源：患者、无症状者及带病毒者。 42%的RV感染是无症状的。 传播途径：被轮状病毒污染的水、土壤、食物、日用品、空气飞沫及人与人密切接触等进行传播 轮状病毒在自然界及婴幼儿中广泛传播， 防不胜防！,三、轮状病毒感染性腹泻的研究进展,轮状病毒肠道外感染,近年来发现：轮状病毒（ RV）不仅可在肠道内感染导致婴幼儿轮状病毒感染性腹泻。 也可发生病毒血症，导致肠道外多器官感染，主要见于中枢神经系统、呼吸系统、循环及血液系统、其它消化器官。 轮状病毒肠道外感染已成为是导致婴幼儿 轮状病毒感染死亡的主要原因。,轮状病毒感染性疾病,轮状病毒感染性腹泻 中枢神经系统损害-脑炎、脑膜炎良性惊厥（无热惊厥）。 呼吸道损害-40%伴有呼吸道症状。 血液、循环系统损害-心肌炎、血小板减少性紫癜等。 肠道外的消化器官损害-肝炎及肝脓肿 、急性胰腺炎、儿童I型糖尿病 其它脏器功能损害-肾脏,初步调查显示：免疫低下、肠道混合感染可能是诱发和加重RV肠道外扩散和感染的重要原因之一。,轮状病毒感染的实验室诊断,1、电镜技术 2、酶联免疫吸附试验（ELISA） 3、PAGE 4、核酸杂交 5、RTPCR 6、实时定量PCR,四、轮状病毒疫苗发展进程,全球发展轮状病毒疫苗计划,1985年 WHO建议轮状病毒疫苗研究，美国医学研究所 将轮状病毒疫苗列为优先发展计划。 1999年 WHO、CVP Gates Foundation将轮状病毒疫苗 列入儿童免疫程序 2001年 轮状病毒疫苗列入GAVI免疫发展规划，计划在 10年内使全世界儿童接种轮状病毒疫苗率达到6080。,WHO对轮状病毒口服活疫苗推荐,能防护婴幼儿对轮状病毒的感染。 有效预防重症轮状病毒感染。 对缺乏母体抗体的婴幼儿具有更高的免疫 保护效果。 在服用疫苗前或同时服用缓冲剂，有助于增强疫苗的免疫效果。,轮状病毒活疫苗研究策略 -琴纳氏种痘法原理,人和动物轮状病毒的VP6具有相同的抗原性， 且动物毒株比人RV毒株易于在组织培养中生长,且对人天然减毒.这是研究轮状病毒减毒活疫苗的理论基础. 利用动物轮状病毒对人无致病性并有良好免疫原性（与HRV有共同抗原) 预防人类A群轮状病毒腹泻.,同一群内轮状病毒可发生基因重配,不同群之间则不可能发生基因重配.是研究动物-人轮状病毒减毒基因重配多价疫苗的理论基础.,轮状病毒活疫苗研究策略,轮状病毒疫苗研究历史与现状,已注册 LLR羊轮状病毒疫苗（兰州生物制品研究所,中国） 减毒人轮状病毒株疫苗（GSK） 基因重配5价牛株轮状病毒疫苗（Merk) 临床试验 UK基因重配4价牛轮状病毒株疫苗（NIH,USA） RV3新生儿人轮状病毒株疫苗（TBD， Australian) 新生儿人轮状病毒株疫苗（Bharat, USA/Indian ) 放弃 RIT4237牛轮状病毒株疫苗（Smithnine,Belgium) WC3牛轮状病毒株疫苗（Wistar/Merenx,USA/France) MMV-18006猴轮状病毒株疫苗（NIH,USA) RotaShield基因重配猴轮状病毒疫苗（Wyeth Lederle, USA）,五、口服轮状病毒活疫苗,国家一类新药 我国唯一获准上市的 轮状病毒疫苗 我国唯一的液体口服疫苗,(一)、口服轮状病毒活疫苗简述,口服轮状病毒活疫苗,商品名：罗特威 用 途：预防婴幼儿A群轮状病毒感染性腹泻,口服轮状病毒活疫苗,规 格：3ml/瓶/每人份 病毒滴度: 5.50 CCID50 / ML 接种对象: 2个月3岁的婴幼儿 有效期: 1年 储存温度: 2-8,口服轮状病毒活疫苗,毒株: LLR株 （LanZhou Lamb Rotavirus） 1985从腹泻羔羊肠内容物和粪便中用新生小牛肾原代细胞培养分离和适应传代获得.,羊轮状病毒LLR-85株,口服轮状病毒活疫苗,LLR株的特点: （1）病毒由原代细胞分离:新生小牛肾原代细胞; （2）传代历史清楚，疫苗生产代数37代； （3）细胞培养病毒滴度高（105.0107.5）； （4）病毒抗原式清楚:经测序鉴定为A 群，亚群I，血清型G10和P12型，电泳型为长型； （5）毒种遗传性状稳定；,口服轮状病毒活疫苗,1982年兰州生物制品研究所开始研制。 1998年获得中国SFDA国家一类新药证书， 试生产生产文号。 2000年获得中国SFDA GMP认证。 2000年获得中国SFDA正式生产文号。 2001年获得国家科技进步二等奖； 2001年Du Pond Award。,(二)、口服轮状病毒活疫苗 -的安全性和免疫效果,口服轮状病毒活疫苗安全性,轮状病毒口服活疫苗已免疫接种5岁以下婴幼儿800万人。 服苗后未见严重不良反应及异常反应。 疫苗安全。,Phase _ FEVER REACTIONS _ GROUP NO. MILD MEDIUM SEVERE _ VACCINE 340 20 (5.9%) 2 (0.6%) 0 (0.0%) PLACEBO 300 20 (6.7%) 3 (1.0%) 0 (0.0%) _,Reactogenicity of LLR Rotavirus Vaccine Clinical Study,Phase _ SYSTEMIC REACTIONS _ GROUP NO. VOMITING DIARRHEA OTHERS _ VACCINE 340 0 (0.0%) 0 (0.0%) 0 (0.0%) PLACEBO 300 0 (0.0%) 0 (0.0%) 0 (0.0%) _,Reactogenicity of LLR Rotavirus Vaccine Clinical Study,Phase _ FEVER REACTIONS _ GROUP NO. MILD MEDIUM SEVERE _ VACCINE 1506 85 (5.64%) 17 (1.13%) 0 (0.0%) PLACEBO 1583 68 (4.30%) 12 (0.76%) 1 (0.06%) _,Reactogenicity of LLR Rotavirus Vaccine Clinical Study,Phase _ DIARRHEA ( times/day ) _ GROUP NO. VOMITING 3 4 5 _ VACCINE 1506 3 (0.20%) 5 (0.33%) 0 (0.0%) 0 (0.0%) PLACEBO 1583 2 (0.13%) 5 (0.32%) 0 (0.13%) 0 (0.0%) _,Reactogenicity of LLR Rotavirus Vaccine Clinical Study,Reactogenicity of LLR Rotavirus Vaccine Extensive Clinical Study,2002,Beijing _ FEVER REACTIONS _ GROUP NO. MILD MEDIUM SEVERE _ VACCINE 20000 6.30% 1.8% 0.32% _,Reactogenicity of LLR Rotavirus Vaccine Extensive Clinical Study,2000, Zhejiang _ DIARRHEA ( times/day ) _ GROUP NO. VOMITING 3 4 5 _ VACCINE 94 0 (0%) 1 (1.06%) 0 (0%) 0 (0.0%) PLACEBO 93 1 (1.07%) 1(1.07%) 0 (0%) 0 (0.0%) _,Reactogenicity of LLR Rotavirus Vaccine Extensive Clinical Study,2000, Zejiang _ FEVER REACTIONS _ GROUP NO. MILD MEDIUM SEVERE _ VACCINE 94 8 (8.51%) 0 (0%) 1 (1.06%) PLACEBO 93 4(4.30%) 1 (0.75%) 1 (1.07%) _,口服轮状病毒活疫苗的 免疫效果,SEROCONVERSION RATE LLR ROTAVIRUS VACCINE SHANDONG PROVINCE, 1992(PHASE) YUNNAN PROVINCE,1993 、1995(PHASE ), 1996(PHASE ). DALIAN CITY CDCs,1993、1995 (PHASE ), 1996(PHASE ).,抗体阳转率,；,轮状病毒抗体阳转率达45-70%,2000广西 组 别 例 数 发病例数 发病率 服苗组 19 2 10.5% 安慰剂组 17 8 47.1 % NO IMMUNE 247 130 45.9%,口服轮状病毒活疫苗免疫效果 流行季节的回顾性调查,口服轮状病毒活疫苗免疫效果,2002, （成都中心医院） 组 别 例 数 发病例数 发病率 服苗组 207 2 0 .97% 安慰剂组 445 26 5.84 %,口服轮状病毒活疫苗免疫效果,2003-2004, （山东） 组 别 例 数 发病例数 发病率 病 程 服苗组 68 2 2.94% 病程短（5-10天） 安慰剂组 76 17 22.37 % 病程不一5天,口服轮状病毒活疫苗免疫效果,2004, （河南） 组 别 例 数 SIgA 腹泻天数 住院天数 服苗组 26 0.6130.131 5.31.0 3.20.9 未服苗组 20 0.4300.125 10.22.1 7.01.5 t值 0.813 2.814 2.712 p值 0.05 0.05 0.05,口服轮状病毒活疫苗免疫效果 对轮状病毒性胃肠炎住院保护效果,2002-2004年选择广州市儿童医院确诊的轮状病毒性胃肠炎住院儿童按1：1配对对照，共有838对纳入了解口服轮状病毒疫苗对重症轮状病毒性胃肠炎的保护效果。 结果: 口服轮状病毒活疫苗对轮状病毒性胃肠炎住院病例的保护效果为75%. 口服一剂轮状病毒活疫苗的保护效果为86%. 口服两剂轮状病毒活疫苗的保护效果为98.5%. 口服一剂轮状病毒活疫苗一年的保护效果未见明显下降. 口服一剂轮状病毒活疫苗对1223月龄儿童的保护作用高于2-11月龄 结论：1剂口服轮状病毒活疫苗可有效预防住院儿童轮状病毒性胃肠炎。 摘自Vaccine;2007,25:8756-8761,口服轮状病毒活疫苗 -免疫效果,十年的临床观察和市场应用表明： 口服轮状病毒活疫苗具有良好的免疫原性 口服一次轮状病毒抗体阳转率达70%； 明显降低RV腹泻的发病率、住院率、死亡数。 口服一次重症轮状病毒性胃肠炎儿童的保护效果为75%.口服两次 对重症轮状病毒性胃肠炎儿童的保护力达98.5%.口服三次对重症轮状病毒性胃肠炎儿童的保护力达100%. 未见严重不良反应，疫苗安全有效，值得推广应用。 疫苗稳定性良好,4效期1年. 是预防轮状病毒感染性腹泻最经济有效的方法。,口服轮状病毒活疫苗的 稳定性,疫苗2-8放置不同时间后效价检测,批 号 0月 6月 9月 12月 15月 20030605 5.50 5.50 5.50 5.50 5.50 20030606 5.50 5.50 5.50 5.50 5.50 20030607 5.50 5.50 5.50 5.50 5.50 20040603 5.50 5.50 5.50 5.50 5.50 20040604 5.75 5.75 5.75 5.75 5.75 20040605 5.50 5.50 5.50 5.50 5.50 结果表明:口服轮状病毒活疫苗2-8放置1年内, 疫苗稳定性良好,效期过后3个月疫苗滴度 5.5LogCCID50/1.0ml。,疫苗37放置不同时间后效价检测,批 号 0天 7天 14天 21天 28天 20030605 5.50 4.50 4.00 2.50 2.75 20030606 5.50 4.75 4.00 2.50 2.50 20030607 5.50 4.50 3.50 2.50 2.50 20040603 5.50 4.50 4.00 2.50 2.50 20040604 5.75 5.00 4.25 2.50 2.50 20040605 5.50 4.50 4.00 2.50 2.50 结果表明:口服轮状病毒活疫苗37放置1周内, 疫苗滴度4.5LogCCID50/1.0ml。符合国家规程要求。 37放置1周以上,疫苗滴度下降超过1个对数值。 则在疫苗运输和使用过程中，一定要注意冷链,RATE OF LLR VACCINE (38TH PASSAGE) WITH SEROCONVERSION DIFFERENT TITERS,抗体阳转率,SEROCONVERSION RATE OF LLR VACCINE (Lg 5.0CCID50) WITH STRAIN DIFFERENT PASSAGES,抗体阳转率,口服轮状病毒活疫苗的 使用及注意事项,口服轮状病毒活疫苗,规 格：3ml/瓶/每人份 病毒滴度: 5.50 CCID50 / ML 接种对象: 2个月3岁的婴幼儿 有效期: 1年 储存温度: 2-8,口服轮状病毒活疫苗,用法用量:启开瓶盖，用吸管吸取疫苗，直接喂于婴幼儿。用量为每人一次口服3ml。每年应服一次。（3岁之前每年服一次，为有效建立免疫屏障，防止爆发流行建议35岁服一次）。 服苗时间：市场应用表明 全年接种比流行高峰前接种效果更好。,口服轮状病毒活疫苗的禁忌症,身体不适，发热，腋温37以上者。 服苗前1-2天有腹泻者. 有免疫缺陷性疾病和接受免疫抑制治疗者. 急性传染病或其它严重疾病患者。,口服