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第3章 微生物细胞的破碎 Chapter 3 Cell Disruption,知识点:细胞壁的组成和结构,微生物细胞的破碎技术,破碎率的测定。 重点:工业生产中常用的几种细胞破碎方法的原理,操作过程常用设备,并能就实际生产情况予以合理的选择。 难点:常用破碎方法的合理选用。,目录,1微生物细胞的破碎技术概述 2细胞壁的组成和结构 3微生物细胞的破碎技术 4 破碎方法的影响因素,胞外产品:各种胞外酶、胞外多糖、细胞代谢物 细胞本身: 单细胞蛋白(SCP) 胞内产品:碱性磷酸酯酶,基因工程产物,植物细胞产物等,1 微生物细胞的破碎技术概述,2 细胞壁的组成和结构,1.细胞壁的组成和破碎阻力 2.细胞壁的结构,2.1 细胞壁的组成和破碎阻力,细菌:肽聚糖,多糖,磷壁酸,主要阻力来自于肽聚糖的网状结构。 酵母菌:葡聚糖,甘露聚糖,蛋白质,主要阻力来自于壁结构交换的紧密程度和厚度。 真菌:多糖,蛋白质,脂类,葡聚糖,几丁质,主要阻力来自于壁强度和聚合物网状结构。,back,2.2 细胞壁的结构,细菌的细胞壁 酵母菌的细胞壁 真菌的细胞壁,back,back,back,各种微生物细胞壁的结构与组成,3 微生物细胞的破碎技术,3.1 微生物细胞的破碎技术,细胞破碎主要方法,细胞破碎机理图,机械破碎法与非机械法比较,破碎技术的未来发展方向,多种破碎方法相结合: 与上游过程相结合: 与下游过程相结合:,破碎方法选择原则,(1)仅破坏或破碎存在目标生化物质的位置周围: (2)选择性溶解目标生化物质:,3.2 常用的破碎设备,机械法: 研磨,匀浆器,组织捣碎法,压榨器 物理处理法: 化学法: 酶解法: 干燥法:,砂磨机,高速珠磨机,高压匀浆器,撞击破碎器,电声超声波发生器,4 破碎方法的影响因素,细胞的数量 破碎条件 破碎目标,破碎率的测定,1.直接测定法 2.测定释放的蛋白质量或酶的活力,5. 包含体的破碎,包含体定义 包含体中目标蛋白的制备步骤 蛋白质的复性操作方法 提高目标蛋白质复性效率的对策,作业,高速湿法珠磨 高压匀浆 超声波破碎 组织捣碎 酶解 自溶 化学溶胞 渗透压冲击 冻结-融化 干燥 撞击破碎 每人请任选一种破碎方法,通过若干个典型实
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