糖类物质的测定2

(二)高锰酸钾滴定法第一国标法（贝尔德蓝Bertrand法） 本法由Bertrand于1906年提出，故名。,1原理 还原糖+碱性酒石酸铜试剂（斐林试剂） Cu2O(沉淀) 过滤（古氏坩埚） 洗涤（热水，60） 溶解（酸性硫酸铁溶液）Fe3+ Fe2+（与Cu2+等当量） （用KMnO4标准溶液滴定生成的Fe2+，根据消耗的ml数，计算Cu2O量）,将一定量的样液与一定量过量的碱性酒石酸铜溶液反应，在加热条件下，还原糖把二价铜盐还原为氧化亚铜。反应式同直接滴定法。 经抽气过滤，得到氧化亚铜沉淀，加入过量的酸性硫酸铁溶液将其氧化溶解，而三价铁盐被定量地还原为亚铁盐， 反应式： Cu2O+ Fe2(SO4)3+H2SO4=2CuSO4+2FeSO4+H2O,用高锰酸钾标准溶液滴定生成的亚铁盐。 10FeSO4+2KMnO4+8H2SO4 = 5Fe2(SO4)3+2MnSO4+K2SO4+8H2O 根据滴定时高锰酸钾标准溶液消耗量，计算氧化亚铜含量。 再从检索表(附表10)中查出与氧化亚铜量相当的还原糖量，即可计算出样品中还原糖含量。（162166页）,结果计算：,还原糖（%）,式中：c-高锰酸钾标准溶液的浓度，mol/L; V-测定用样液消耗高锰酸钾标准溶液体积，ml; V0-试剂空白消耗高锰酸钾标准溶液体积，ml; 143.08-氧化亚铜的摩尔质量，g/mol; x-与滴定时所消耗的高锰酸钾标准溶液相当的氧化亚铜量，mg; A-由x查附表10得出的氧化亚铜相当于还原糖的质量, mg V1-样品处理液总体积，ml; V2-测定用样品溶液体积，ml; m-样品质量，g。,2适用范围及特点 本法是国家标准分析方法，适用于各类食品中还原糖的测定，有色样液也不受限制。 方法的准确度高，重现性好，准确度和重现性都优于直接滴定法。 但操作复杂、费时，需使用特制的高锰酸钾法糖类检索表。 163页 古式坩埚 垂融漏斗,GB/T 5009.72003食品中还原糖的测定 1. 直接滴定法（先标定再测定） 2. 高锰酸钾法,三、蔗糖的测定,蔗糖是葡萄糖和果糖组成的双糖，没有还原性，不能用碱性铜盐试剂直接测定，但在一定条件下，蔗糖可水解为具有还原性的葡萄糖和果糖（转化糖）。因此，可以用测定还原糖的方法测定蔗糖含量。 对于纯度较高的蔗糖溶液，其相对密度、折光率、旋光度等物理常数与蔗糖浓度都有一定关系，故也可用物理检验法测定。 这里介绍还原糖法。,1原理 样品脱脂后，用水或乙醇提取，提取液经澄清处理以除去蛋白质等杂质，再用盐酸进行水解，使蔗糖转化为还原糖。然后按还原糖测定方法分别测定水解前后样品液中还原糖含量，两者差值即为由蔗糖水解产生的还原糖量，乘以一个换算系数即为蔗糖含量。,实际上测定还原糖包括两部分：一是样品中原有的还原糖、二是蔗糖经酸水解后的还原糖。,测定食品中蔗糖量，可分别测定样品水解前的还原糖量以及水解后的还原糖量，两者之差再乘以校正系数0.95，即为蔗糖量。 C12H22O11+H2OC6H12O6+C6H12O6 蔗糖 葡萄糖 果糖 342g 180g 180g 342/（180+180）=0.95 即1g转化糖量相当于0.95g蔗糖量。,2. 试剂 用 0.1转化糖标准溶液标定斐林试剂。 3测定方法 样品的转化： 取一定量样品，按直接滴定法或高锰酸钾滴定法中的样品处理方法处理。 吸取处理后的样液2份各50ml，分别放入l00ml容量瓶中。,一份加入5ml 6molL盐酸溶液，置6870水浴中加热15分钟，取出迅速冷却至室温，加2滴甲基红指示剂，用NaOH溶液中和至中性，加水至刻度，混匀。 另一份直接用水稀释到100m1。 然后按直接滴定法或高锰酸钾滴定法测定还原糖含量。,GB/T 5009.82003食品中蔗糖的测定 转化为还原糖再测定,四、总糖的测定 食品生产中通常需要测定其总量，这就提出了“总糖”的概念。 总糖：是指具有还原性的糖（葡萄糖、果糖、乳糖、麦芽糖等）和在测定条件下能水解为还原性单糖的蔗糖的总量。 总糖还原糖蔗糖 总糖是食品生产中常规分析项目。它反映的是食品中可溶性单糖和低聚糖的总量，其含量高低对产品的色、香、味、组织形态、营养价值、成本等有一定影响。,总糖是麦乳精、糕点、果蔬罐头、饮料等许多食品的重要质量指标。 总糖的测定通常是以还原糖的测定方法为基础的，常用的是直接滴定法，此外还有蒽酮比色法等。常以转化糖计。,测定方法 样品处理 蔗糖水解（样品及蔗糖标准液） 还原糖法测定, 样品处理：按还原糖测定法中的方法进行。 样品中总糖量测定：吸取50ml样品处理液于100mL容量瓶中，加6mol/L盐酸5mL，在6870水浴中加热15min，冷却后加2滴甲基红指示剂，用200g/L（体积分数）氢氧化钠中和至中性，加水至刻度，混匀，按还原糖测定方法中直接滴定法或高锰酸钾法进行测定。,结果计算,式中-以转化糖计，总糖的质量分数，%； m2-直接滴定法中10mL碱性酒石酸铜相当于转化糖量，mg,或高锰酸钾法中查表得出相当的转化糖量，mg; m-样品质量，g; V1-样品处理液总体积，mL; V2-测定总糖量取用水解液体积，mL;,说明与讨论: 总糖测定结果一般以转化糖计，但也可以以葡萄糖计，要根据产品的质量指标要求而定。 如用转化糖表示，应该用标准转化糖溶液标定碱性酒石酸铜溶液，如用葡萄糖表示，则应该用标准葡萄糖溶液标定。 食品分析中的总糖与营养学中总糖的概念不同。 食品分析中的总糖：=还原糖+蔗糖 营养学中的总糖：=还原糖+蔗糖 +淀粉 ；总糖是指能彼人体消化、吸收利用的糖类物质的总和，包括淀粉。 这里所讲的总糖不包括淀粉，因为在测定条件下