肾上腺素对内毒素致雄性大鼠炎症性肝损害的保护作用.ppt

肾上腺素对内毒素致雄性大鼠炎症性肝损害的保护作用,柴敏、姚渊、徐蓉、谢珊珊,前言：,我国肝炎发病率不断呈上升趋势，临床上对于治疗肝炎的新药物的研究也在不断发展，肾上腺素(EPI)作对于肝炎症性损伤的保护作用在临床上尚处于研发阶段，有很大的临床应用前景。本实验利用内毒素脂多糖(LPS)会造成小鼠肝脏炎症性损伤，比较是否给予EPI的不同组小鼠间的肝脏是否形成炎症性损伤及其损伤程度，不同剂量的EPI对肝脏的保护作用是否存在剂量关系。,实验材料与试剂,实验对象：50只SPF级SD大鼠（由实验室提供）,实验动物介绍： SD大鼠：由美国的Sprague & Dawley农场的R.W.Dawley用杂合的雄性大鼠和Wistar雌性大鼠杂交后育成的一个白化封闭群大鼠。 SPF级动物：机体内无特定的微生物和寄生虫存在的动物，但非特定的微生物和寄生虫是容许存在的。一般指无传染病的健康动物，是目前国外使用最广泛的实验动物。 筛选标准：体重为200g左右的雄性大鼠,实验仪器与试剂,实验仪器与器材：Beckman全自动生化分析仪CX-5型，静脉注射器，剪刀，镊子，自动分析天平，小试管，移液管 实验试剂：LPS（同一厂家生产，同批号）,EPI （同一厂家生产，同批号）,生理盐水，标记染料（苦味酸，品红）,实验动物分组及处理方式,分组方法：分为5组，每组10只。采用完全随机分组法。,1、编号：按动物体重从小到大编号并标记。 2、取随机数：给每个编号一个随机数（查随机数表或从计算机获得）。 3、确定组别：根据受试对象获得的随机数决定受试对象的组别。,处理方式：,第一组：为空白对照组，先静脉注射生理盐水6mg/kg，再静脉点滴生理盐水2.4ml/kg/h,持续6小时。 第二组：为LPS组，先静脉注射LPS 6mg/kg，再静脉点滴生理盐水2.4ml/kg/h,持续6小时。 第三组：为EPI低剂量组，先静脉注射LPS 6mg/kg,再静脉点滴肾上腺素0.12g/kg/min,持续6小时。 第四组：为EPI中剂量组，先静脉注射LPS 6mg/kg，再静脉点滴肾上腺素0.3g/kg/min,持续6小时。 第五组：为EPI高剂量组，先静脉注射LPS 6mg/kg，再静脉点滴肾上腺素0.6g/kg/min,持续6小时。 备注：对照组所用生理盐水及其剂量为参考文献所得。,实验相关检测指标的取样及观察,1、于LPS注射前、注射后两小时采用内眦静脉取血法分别取适量血，检测血清ALT、AST、TNF、IL-1和IL-10水平。 2、于LPS注射后六小时断头处死并取血，检测血清ALT、AST、TNF、IL-1和IL-10水平。 3、对实验动物进行解剖，取肝脏，观察其组织病理学改变。,结果的分析方法,1、比较第一组与第二组的各项指标：LPS是否对大鼠肝脏造成炎症性损伤及其损伤程度。 2、比较第二组与第三、四、五的各项指标：EPI对LPS造成的大鼠肝脏炎症性损伤是否具有一定的保护作用。 3、对第三、四、五组的各项指标进行比较：不同剂量的EPI对大鼠肝脏炎症性损伤的保护作用是否存在剂量关系。 统计分析：采用SPSS软件作各组间的方差分析比较其差异性。,参考文献：,1、杨文敏，曾其毅中国循证儿科杂志2007年2卷四期 2、Bozkurt S, Ersoy E, Tekyn HE. The cytoprotective effect of iloprost against carbon tetrachloride induc