实验十一细胞凝集反应.ppt_第1页
实验十一细胞凝集反应.ppt_第2页
实验十一细胞凝集反应.ppt_第3页
实验十一细胞凝集反应.ppt_第4页
实验十一细胞凝集反应.ppt_第5页
已阅读5页,还剩4页未读 继续免费阅读

下载本文档

版权说明:本文档由用户提供并上传,收益归属内容提供方,若内容存在侵权,请进行举报或认领

文档简介

实验十一 细胞凝集反应,细胞与显微技术实验,了解细胞膜的表面结构; 掌握凝集素促使细胞凝集的原理; 学习研究细胞凝集反应的方法。,一、实验目的和要求,细胞质膜:蛋白质不同程度镶嵌在脂双层中所形成的动态流动结构 糖蛋白和糖脂分子:蛋白质和脂类与寡糖链结合形成 细胞外被:又称糖萼,糖蛋白和糖脂分子伸至细胞表面的分枝状寡糖链 研究表明,细胞间的分子识别、细胞生长和分化、免疫反应和肿瘤发生等均与细胞外被有关。,二、实验原理,凝集素(lectin)是一类可逆结合特异糖基的蛋白质,具有凝集细胞和刺激细胞分裂的作用。目前已发现近千种植物中含有凝集素,在各种真菌、无脊椎动物、脊椎动物,人体的各种组织和器官中及某些病毒体内也含有凝集素。常用的有植物凝集素 (phytohemagglutinin, PNA),通常一起被提取的植物命名,如伴刀豆凝集素A、麦胚凝集素、花生凝集素和大豆凝集素等,凝集素是他们的总称。,二、实验原理,细胞凝集是指细胞彼此聚集在一起,成为一簇不规则的细胞团。 凝集素使细胞凝集的原理是:它可以与细胞表面的糖分子连接,在细胞间形成“桥”的结果。人们利用凝集素与不同的糖蛋白特异性结合的原理,识别和研究不同类型膜结构的生物学特征,以及进行血型鉴定。,二、实验原理,三、实验用品,材料 土豆块茎、家兔。 2. 器具: 显微镜、离心机、托盘天平、研钵、剪刀、离心管、细滴管、载片、盖片。 3. 试剂: PBS缓冲液:NaCl 7.2 g、Na2HPO4 1.48 g、KH2PO4 0.43 g,加蒸馏水,定容至1 L,调pH至7.2。 1%肝素液:0.1 g肝素溶解于10 mL 0.9%氯化钠溶液中。 0.9% NaCl液 硫酸铵,1. 2%家兔红细胞悬液的制备 以无菌方法抽取兔子耳缘静脉血液(5 mL注射器先吸取3 mL 1%肝素溶液)1 mL,用生理盐水洗5次,每次3000 r/min,离心5 min,最后按沉淀的红细胞体积用生理盐水配成2%红细胞悬液。 2. 凝集素制备 土豆块茎: 称取去皮土豆块茎2 g,切成薄片, 加10 mL PBS缓冲液,浸泡2 h,浸出的粗提液中含有可溶性土豆凝集素。 3. 细胞凝集反应 土豆凝集素1滴、2%兔血红细胞液1滴,在载玻片上混匀,静置20 min;以PBS缓冲液加2%血细胞悬液作为对照,低倍镜下观察。,四、实验步骤,低倍镜下可以看到对照组红细胞分布均一,无凝集;实验组中红细胞凝集在一起。,五、结果观察,对照,阳性,六、实验报告及思考题,1. 绘图简图表示血细胞凝集过程,并说明原因。

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明,都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等,如果需要附件,请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸,网页内容里面会有图纸预览,若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑,并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容,请与我们联系,我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

评论

0/150

提交评论