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gus基因PCR反应程序：94预变性5 min94变性1 min 58退火1 min 30个循环72延伸2min 72延伸7 mingus基因引物序列为：5GCTATACGCCTTTGAAGCC 3和5TTGACTGCCTCTTCGCTGTA 3GUS染色母液:X-Gluc由DMSO溶解，贮存浓度为l0mg/mL,于-20C保存。GUS 染液:500mg/L X-Gluc, 0.1mol/L K3Fe(CN)6，0.lmol/L K4Fe(CN)6，0.0lmol/L，Na2-EDTA, 1% Triton X-100(V/V), 0.14mol/L PBS 缓冲液(pH7.0)。试剂名称母液浓度配置方法工作液浓度工作液配置方法(mL)X-Gluc,l0mg/mL20mg X-Gluc溶于2ml DMSO500mg/L50K3Fe(CN)6，1 mol/L32.9424g100ml水0.1mol/L100K4Fe(CN)61mol/L42.239g100ml水0.lmol/L100Na2-EDTA0.5mol/L18.61g100ml水调pH为80.0lmol/L200Triton X-10010%取10ml Triton X-100 用水定容至100ml1%10PBS 缓冲液100.01 mol/L0.1mol/L2501000mLl 0.5M Na2HPO4配制方法：将17.907g Na2HPO4溶于水，定容至100ml。.5M NaH2PO4的配制方法：将7.800g NaH2PO4溶于水，定容至100mll这是1ml的配方体系：终浓度 药品 分子量 体积 0.5M Na2EDTA 20ul TritonX-100 1ul 1M 磷酸钠缓冲液（PH7.0） 100ul 0.1M K3Fe(CN)6 5ul 0.1M K4Fe(CN)6 5ul 10mg/ml X-Gulc 200ul 去离子水或无菌水 669ul染液配方 0.05M磷酸缓冲液 4.48ml5mM铁氰化钾0.05ml, 5mM亚铁氰化钾0.05ml，Triton-100 0.01ml，水4.64ml，X-Gluc先溶于0.05ml DMF中，终浓度为0.5mg/ml37度染色过夜1.2 染色步骤1) 染色：加入适量配制好的GUS 染液于24孔板的孔中，将待测样品浸到GUS染液中，将24孔板置于37保温箱中放置6h。2) 漂洗：先后用50%，70%，100%的乙醇漂洗样品，每次浸泡5分钟。3) 脱色：加入100%乙醇浸泡直至完全脱色。4) 记录：在体视显微镜下拍照记录。2GUS报导基因的定量检测GUS 能与底物MUG（分子量352.3，4-甲基伞型酮-葡萄糖醛酸苷，4-methylumbelliferyl-D-glucuronide）反应产生荧光物质MU（分子量198.2，4-甲基伞型酮，4-methylumbelliferone）。MU的激发波长为365nm，发射波长为456，其含量可由荧光分光光度计测出。因此，我们可以根据单位质量的植物总蛋白在单位时间内产生的荧光物质的多少来定量的检测GUS含量。2.1 试剂配制1) 1mol/L Na2HPO4溶液：35.814g Na2HPO4溶于100ml水。2) 1mol/L NaH2PO4 溶液：15.601g NaH2PO4 溶于100ml水。3) 0.1M 磷酸缓冲液(PH7.0)：1mol/L Na2HPO4取5.77ml，1mol/L NaH2PO4取4.23ml，定容至100ml。4) 10 SDS溶液：将90ml水稍微加热，加10g SDS，搅拌溶解，加入几滴浓盐酸调节PH至7.2，然后加水定容至100ml。5) 0.5 M EDTA (PH8.0)：在80ml水中加入18.61g Na2EDTA2H2O，用NaOH调PH至8.0（约需2g左右的固体NaOH），溶解后定容至100ml。6) GUS酶提取液：0.1M 磷酸缓冲液（PH7.0）取50ml；10% SDS取1ml； 0.5M EDTA(PH8.0)取2ml； Trit