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文档简介
第6章肠道杆菌p67(enterobacteriaceae),1.肠道杆菌的共性。2.大肠埃希菌的致病性。3.沙门菌引起的疾病及分离与鉴定程序。4.Widaltest,结果判断。,重点:,肠道杆菌:寄生于肠道的一大群生物学性状相似的G-中等大小杆菌的总称。,多数,正常菌群,部分,条件致病菌,少数,致病菌,肠道杆菌,2.培养:兼性厌氧,普通琼脂平板培养,肠道SS培养基(选择培养基)分离培养,结果:肠道非致病菌:红色大菌落,肠道致病菌:无色透明小菌落。,肠道杆菌的共同特征:,形态特征:G-中等大小的杆菌,无芽胞,多数有周鞭毛及菌毛。,基础培养基,乳糖(底物),胆盐、煌绿(抑制非致病菌),中性红(指示剂)。,SS培养基:,沙门菌属(Salmonella),志贺菌属(Shigella),SS平板(鉴别/选择培养基),肠道非致病菌乳糖()肠道致病菌乳糖(-),3.生化反应:活泼,分解多种糖类、蛋白质。乳糖发酵试验初步鉴别肠道致病菌与非致病菌。,代表种动力葡萄糖乳糖靛基质H2S尿素酶埃希菌属大肠埃希菌+-志贺菌属痢疾志贺菌-+-+/-沙门菌属伤寒沙门菌+-/+-变形杆菌属变形杆菌+-+,四类肠道杆菌的生化反应:,菌体抗原(O-Ag)鞭毛抗原(H-Ag)毒力抗原(Vi-Ag、K-Ag),5.抵抗力:弱。胆盐和煌绿对非致病性肠道杆菌有选择性抑制作用。,4.抗原构造,6.变异:耐药性变异。,维生素(营养)细菌素(拮抗),条件,免疫力寄居部位改变,第1节埃希菌属(Escherichia),大肠埃希菌(大肠杆菌,E.coli),2.特殊菌株:腹泻。,1.正常菌群:人类出生不久进入肠道,并延续终身,合成,条件致病菌,肠外感染。,一、生物学特性,形态染色:G-中等大小杆菌,周鞭毛及普通菌毛和性菌毛。,2.培养特性:SS培养基上形成红色大菌落。,3.生化特点:葡萄糖+、乳糖+,动力+,H2S-,O抗原:170种4.抗原构造H抗原:56种K抗原:100种血清型表示方式:O:k:H如:O111:k58:H2,二、致病性,(一)致病物质,1.黏附素:定植因子抗原,2.外毒素,志贺毒素耐热肠毒素(ST)不耐热肠毒素(LT),3.其他致病物质,内毒素荚膜载铁蛋白型分泌系统:,LTST对热稳定性不耐热耐热65C30min灭活耐100C20min亚单位A、Ba、b黏膜受体GM1神经节苷脂不清致泻机理活化腺苷酸环化酶活化鸟苷酸环化酶ATPcAMPGTPcGMP,B亚单位与肠黏膜上皮细胞膜表面GM1神经节苷脂结合,A亚单位穿过细胞膜激活腺苷酸环化酶,使ATPcAMP肠液分泌致泻。,型分泌系统:,犹如分子注射器,是指细菌接触宿主细胞后,能向宿主细胞内输送毒性基因产物的细菌效应系统,约由20余种蛋白组成。,1.肠外感染(条件致病菌):,(二)所致疾病,寄居部位改变,肠外感染,化脓性感染,泌尿道感染,肠内正常菌群,腹膜炎阑尾炎败血症新生儿脑膜炎,尿道炎膀胱炎肾盂肾炎,ETEC:婴幼儿、旅游者腹泻EIEC:大儿童、成人腹泻EPEC:婴儿腹泻EHEC:O157:H7,2.肠内感染(某些血清型):,胃肠炎(腹痛、腹泻、恶心、呕吐),外源性大肠杆菌,污染的食物、饮水,三、卫生细菌学检查,大肠菌群数:作为饮水、食品等粪便污染的指标之一。,我国卫生标准规定:,每1000ml饮水3个每100ml瓶装汽水、果汁5个,大肠菌群,细菌总数,每ml样品100个,第3节沙门菌属(Salmonella),沙门菌属:血清型2500余种,甲型付伤寒沙门菌肖氏沙门菌希氏沙门菌,伤寒沙门菌付伤寒沙门菌鼠伤寒沙门菌肠炎沙门菌猪霍乱沙门菌等。,常见致病性沙门菌:,一、生物学性状,1.形态染色:G-,有菌毛及周鞭毛。2.培养特性:SS培养基:无色透明小菌落。,3.生化反应:,葡乳尿靛H2S动力伤寒沙门菌+-+甲型副伤寒沙门菌-+乙型副伤寒沙门菌-+,4.抗原结构:,O抗原/菌体抗原(脂多糖):耐热100C1h,数种沙门菌共有,产生IgM型抗体。H抗原/鞭毛抗原(蛋白质):不耐热60C30min灭活,具特异性,产生IgG型抗体。Vi抗原/毒力抗原:抗原性弱,Vi抗体可用于检测带菌者。,二、致病性与免疫性,(一)致病物质,1.侵袭力,菌毛型分泌系统侵袭蛋白Vi抗原,2.内毒素:白细胞下降,3.外毒素:肠毒素(某些菌株产生),沙门菌粪口途径肠壁、肠系膜淋巴结血(第1W:第1次菌血症)全身各脏器(肝、脾、肾、胆囊等)血(第2W:第2次菌血症)肠壁再次侵入肠壁淋巴组织随粪便排出体外肠壁坏死、溃疡、出血(第23W:型超敏反应)病情开始好转(34W后),(二)所致疾病,1.肠热症(伤寒、副伤寒),并发症:肠出血、肠穿孔,2.食物中毒:最常见的沙门菌感染:鼠伤寒沙门菌、肠炎沙门菌、猪霍乱沙门菌感染。3.败血症:鼠伤寒沙门菌、肠炎沙门菌、猪霍乱沙门菌感染。4.无症状带菌者:15%。,(三)免疫性,胞内寄生菌,细胞免疫,一定程度免疫力。,三、微生物学检查,(一)病原菌的分离与鉴定,1.标本采取:,2.步骤:,1W血发病第2W粪便或尿全程骨髓,粪便、尿SS培养基无色可疑菌落血、骨髓肉汤培养基双糖铁培养基(增菌)生化反应玻片凝集反应,(二)血清学诊断:肥达试验(Widaltest),概念:用已知伤寒杆菌O、H抗原和甲副、肖氏、希氏伤寒杆菌H抗原与病人血清作试管凝集试验,检查患者血清中有无相应抗体及其效价。原理:试管凝集试验诊断菌液未知抗体定性、定量,实验方法:,1:201:801:3201:1280,1:401:1601:640阴对,伤寒O-Ag,伤寒H-Ag,甲副H-Ag,乙副H-Ag,TO,PB,PA,TH,正常抗体水平:当TO1:80TH1:160有诊断意义PA、PB1:80动态观察:逐周复查,抗体效价逐次递增4倍有诊断价值。,判定结果时要考虑因素:,OH抗体型:IgMIgG出现时间:早晚消失时间:快慢特异性:弱强,O、H均高:伤寒、副伤寒可能性大O、H均低:
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