（中西医结合基础专业论文）血瘀证模型的相关蛋白质组学研究.pdf

1 1 1 1 l 洲删i 帆 y 1 7 7 8 6 6 1 原创性声明 本人郑重声明：所呈交的学位论文，是在导师的指导下独立完成的， 文中除注明引用的内容外，不包含其他已经发表的科研成果。对本文研究 做出重要贡献者，已在文中以明确方式表明。本声明的法律责任完全由自 己承担。 论文作者签名堑兰导师签名 关于学位论文使用授权的声明 本人完全知道中国中医科学院有关保留使用学位论文的规定，同意学 校保留或向国家有关部门机构送交论文的复印件和电子版，允许被查阅和 借阅。本人授权中国中医科学院可以将本学位论文的全部或部分内容编入 有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其他复印手段保存和汇编本 学位论文。 ( 保密论文在解密后应遵此规定) 论文作者签名茧兰 中文摘要 a b s t r a c t 英文缩略词 综述 目录 1 5 1 0 1 3 综述一蛋白质组学主要技术的研究进展1 3 综述二血瘀证与分子生物学2 3 前言 总体技术路线图 第一部分气滞血瘀证模型大鼠血清蛋白质组学初步研究 3 l 3 3 材料与方法3 3 结果3 9 讨论4 3 参考文献4 4 第二部分气虚血瘀证模型大鼠血清蛋白质组学初步研究4 7 材料与方法4 7 结果。4 7 j 寸论。5 2 参考文献5 4 第三部分实验型小型猪痰瘀互结证冠心病蛋白质组学研究 材料与方法6 l 结果。6 3 讨论一7 7 参考文献8 3 结语 致谢。 个人简历。9 5 中文摘要 中文摘要 本课题在前期建立稳定的气滞和气虚血瘀证大鼠、痰瘀互结证冠心病小型猪模型基 础上，应用双向凝胶电泳( 2 - d e ) 、基质辅助激光解析一飞行时间质谱( m a l d i t o f - m s ) 等先进的蛋白质组学技术方法，对正常和气滞血瘀、气虚血瘀及痰瘀互结证冠心病三种 不同血瘀证模型动物的血清、心脏血管和心肌组织分别进行蛋白提取、分离及鉴定，利 用比较蛋白组学研究方法，寻找与血瘀证形成相关的特异表达蛋白质，以期获得潜在的 血瘀证的诊断标记和治疗靶标，进一步揭示血瘀证发生、发展过程中的分子生物学基础。 第一部分气滞血瘀证模型大鼠血清蛋白质组学初步研究 正常组、气滞血瘀证模型组大鼠各1 0 只，将每组大鼠的血清混合，去除血清白蛋白。 应用p h 4 7 ，长2 4 c m 的i p g 胶条进行等电聚焦电泳，为保证重复性，每组分别进行3 次 双向电泳。利用i m a g e m a s t e r 2 de l i t e 6 0 1 分析软件对正常组和模型组大鼠的血清蛋白质 表达谱进行差异比较。实验结果显示：在相同条件下，模型组和正常组平均检测出 3 4 7 3 7 、3 5 4 2 0 个蛋白点；选择好参照胶后，将其他凝胶与参照胶相匹配，平均匹配 上的蛋白点数为2 8 0 _ _ _ 2 3 ，匹配率为7 5 3 ；找出蛋白体积百分比值( v 0 1 ) 差异大于两倍 以上的蛋白点，发现气滞血瘀证大鼠血清与正常组相比共有7 个差异蛋白点，其中1 个蛋 白质下调，5 个蛋白质上调，1 个蛋白表达缺失。 从制备胶中挖取这些差异蛋白点进行胶内酶解，酶解后的肽段用m a l d i t o f m s 分析，所得m z 数据送入n c b i 非冗余数据库，通过m a s c o t 搜索引擎检索，检索分值在 7 1 分以上视为可信结果。检索i s o v a l e r y l - c o ad e h y d r o g e n a s e 、s t a t 3 一i n t e r a c t i n gp r o t e i n 2 个蛋白，其中i s o v a l e r ) ，l c o ad e h y d r o g e n a s e 下调，s t a t 3 i n t e r a c t i n gp r o t e i n 调。 s t a t 3 - i n t e r a c t i n gp r o t e i n - 与细胞因子的信号转导通路密切相关，它们在气滞血瘀证的形 成中所起的作用有待于进一步研究。 中文摘要 第二部分气虚血瘀证模型大鼠血清蛋白质组学初步研究 正常大鼠和气虚血瘀证大鼠各l o 只，利用2 一d e 图谱分析软件对正常组和模型组的血 清蛋白表达谱进行差异分析，实验结果表明：气虚血瘀证模型组平均检测出4 1 3 1 3 个 蛋白点，而正常组平均检测出4 0 1 3 7 个蛋白点；与参照胶相匹配，平均匹配上的蛋白 点数为3 6 8 1 2 ，匹配率为8 8 5 ；选出蛋白v 0 1 值差异大于2 倍以上的蛋白点，发现气 虚血瘀证大鼠血清与正常组相比共有7 个差异蛋白点，其中1 个蛋白质下调，5 个蛋白质 上调，1 个蛋白表达缺失。 经质谱分析及m a s c o t 检索，鉴定c d 5a n t i g e n - l i k e 、h a p t o g l o b i n 、c o m p l e m e n t c o m p o n e n tc 3 等6 个蛋白，其中1 个蛋白下调，5 个蛋白上调，这些蛋白的功能与炎症反 应、免疫调控等病理过程相关，与已知的气虚血瘀证的发生、发展过程基本相符。 第三部分小型猪痰瘀互结证冠心病的蛋白质组学研究 正常组和模型组小型猪各6 只，通过高脂饲料喂养结合球囊拉伤在小型猪体内建立 冠心病痰瘀互结模型。血清、冠状动脉和心肌组织总蛋白均进行双向电泳分离，每种样 。品分别进行3 次双向电泳以保证重复性。利用i m a g em a s t e r2 de l i t e6 0 1 分析软件对正常 组和模型组的蛋白质表达谱进行差异分析。在相同分析条件下，3 组样品实验结果分别 如下： 1 、血清样品2 d e 图中，模型组和正常组分别平均检测出3 9 4 _ _ _ 2 3 、4 4 0 _ _ _ 2 5 个蛋白 点；与参照胶平均匹配上的蛋白点数为3 6 3 2 5 ，平均匹配率为8 2 8 ；痰瘀互结证冠心 病小型猪血清与正常组相比共有1 7 个差异蛋白点，6 个上调点，1 个下调点，7 个缺失点， 3 个特异表达的点。 2 、冠状动脉样品2 d e 图中，模型组平均检测出1 0 9 8 3 7 个蛋白点，而正常组平均 检测出9 6 7 _ 4 4 个蛋白点；与参照胶平均匹配上的蛋白点数为8 9 5 4 5 ，平均匹配率为 8 6 。痰瘀互结证冠心病小型猪冠状动脉与正常组相比共有蛋白差异点3 5 个，1 4 个上调 点，1 7 个特异表达点，另外模型组中有4 个点发生未知修饰变化。 j ： ： 、 2 中文摘要 3 、心肌组织样品2 d e 图中，模型组、正常组平均检测出9 7 8 3 2 和8 9 0 + 3 8 个蛋白 点；平均匹配上的蛋白点数为7 2 5 + 4 3 ，匹配率为7 6 7 ；痰瘀互结证冠心病小型猪心肌 组织与j 下常组相比共有1 4 个差异蛋白点，1 3 个上调点，1 个特异表达点。 经质谱分析及m a s c o t 检索，血清样品鉴定c o m p l e m e n tc o m p o n e n t4b i n d i n g p r o t e i n 、a p o l i p o p r o t e i nep r e c u r s o r 等3 个蛋白；冠状动脉组织鉴定出t r a n s g e l i n 、 c o a c t o s i n l i k e1 等1 7 个蛋白；心肌组织鉴定出h s p a 8p r o t e i n 、a p o l i p o p r o t e i na i v 等9 个蛋 白。以上鉴定出来的蛋白有半数是a l b u m i n ，部分蛋白质与炎症反应、血管重构、脂质 代谢等病理过程相关，推测这些蛋白可能与痰瘀互结证冠心病的发生、发展相关。 结论 1 、气滞血瘀证和气虚血瘀证大鼠的血清与正常健康大鼠相比，蛋白表达谱存在明显的 差异，表明多种差异蛋白参与上述两种证候的发生发展。气滞血瘀证和气虚血瘀证大鼠 血清分别鉴定出与这两种证候的实质相关的2 个和6 个差异蛋白，分别是 s t a t 3 i n t e r a c t i n gp r o t e i n 、h a p t o g l o b i n 、z n a l p h a - 2 g l y c o p r o t e i n 等，这些蛋白的功能与 炎症反应、免疫调控等病理过程相关。 2 、与正常健康小型猪相应组织比较，痰瘀互结证冠心病小型猪的血清、冠状动脉和心 肌组织的蛋白表达谱均有明显差异，3 种不同样品共鉴定出的3 0 个差异表达蛋白质， 分别是c o m p l e m e n tc o m p o n e n t4b i n d i n gp r o t e i n 、t r a n s g e l i n 、c o a c t o s i n l i k el 、h s p a 8 p r o t e i n 、a p o l i p o p r o t e i na - i v 等，其参与了痰瘀互结证冠心病炎症反应、血管重构、脂 质代谢等病理过程。 3 、上述不同证候模型蛋白质组学的鉴定结果，一方面佐证了这些动物模型基本符合临 床疾病的发病特点；一方面表明部分鉴定出的差异蛋白确实与以上三种血瘀证的形成有 着密切的关系。部分蛋白有望做为临床上潜在的、有应用价值的分子标志物，用于气滞 血瘀证、气虚血瘀证及痰瘀互结证冠心病的诊断和预测。 中文摘要 关键词：气滞血瘀证；气虚血瘀证；痰瘀互结证；冠心病；双向凝胶电泳( 2 - d e ) ；基质 辅助激光解析飞行时间质谱( m a l d i t o f m s ) ；蛋白质组学 t h e t h e m a t r i x a s s i s t e dl a s e r d e s o r p t i o n i o n i z a t i o n t i m eo f f l i g h t m a s s s p e c t r o m e t r y ( m a l d i t o f m s ) t oe x p l o r et h ep r o t e o m i cp r o f i l e si nt h es y n d r o m eo fq i s t a g n a n c ya n d b l o o ds t a s i s 、q i d e f i c i e n c ya n db l o o ds t a s i sa n ds y n d r o m eo fp h l e g ma n db l o o ds t a s i so f c o r o n a r yh e a r td i s e a s e t h ep r o t e i ni ns e r u m ，b l o o dv e s s e l sa n dm y o c a r d i a lt i s s u ef r o mt h e n o r m a la n dt h r e ed i f f e r e n tm o d e l sw a sr e s p e c t i v e l ye x t r a c t e d ，i s o l a t e d ，a n di d e n t i f i e dt oi nt h e r e s e a r c h b yac o m p a r a t i v ep r o t e o m i c sa p p r o a c hw ec o m p a r e dp r o t e i ne x p r e s s i n gp a t t e r ni n n o r m a la n ds y n d r o m ea n i m a l s t h ec o n f i r m e ds p e c i f i cp r o t e i ne x p r e s s i o n sa s s o c i a t e dw i t h t h es y n d r o m eo fb l o o ds t a s i sw i l lb er e c o g n i z e da st h ep o t e n t i a ld i a g n o s t i cb i o m a r k e ra n dt h e t h e r a p e u t i ct a r g e t ，a n dw i l lb eh e l p f u lt ou n c o v e rt h em o l e c u l a rm e c h a n i s m so ft h ep r o c e s s e s i n t h es y n d r o m eo fb l o o ds t a s i s p a r t0 n e p r i m a r ys e r u mp r o t e o m i c sa n a l y s i so fr a tm o d e lw i t h s y n d r o m eo fq i s t a g n a n c ya n db l o o ds t a s i s t h er a t sw e r er a n d o m l yd i v i d e di n t on o r m a la n dm o d e lg r o u pw i t hq i s t a g n a n c ya n d b l o o ds t a s i s ，10i ne a c hg r o u p t h er a ts e r u mf r o mt h es a m eg r o u pw a sm i x e da n da l b u m i n w a sr e m o v e d i p gs t r i p e ( 2 4 c m ，p h 4 - 7 ) w a su s e di ni s o e l e c t r i cf o c u s i n ge l e c t r o p h o r e s i sa n d e a c he x p e r i m e n tw a sr e p e a t e d3t i m e sf o rb e t t e rr e p e a t a b i l i t y s e r u mp r o t e i ne x p r e s s i n g 5 a b s t r a c t p a t t e r ni nn o r m a la n dm o d e lg r o u pw a sc o m p a r e db yi m a g em a s t e r2 de l i t e6 01a n a l y s i s s o f t w a r e t h er e s u l t ss h o w e dt h a tu n d e rt h es a m ec o n d i t i o n s ，3 4 74 - 3 7a n d3 5 44 - 2 0p r o t e i n s h a db e e no b s e r v e di nm o d e lg r o u pa n dt h en o r m a lg r o u p a f t e ro n eg e lw a sc h o s e na st h e r e f e r e n c e ，t h eo t h e rg e l sw e r em a t c h e dw i t ht h er e f e r e n c eo n e t h ea v e r a g en b m a t c h e sw a s 2 8 04 - 2 3 t h ep e r c e n t m a t c h e sw a s7 5 3 a m o n gt h ep r o t e i ns p o t ss h o w i n g2o rm o r et h a n2 f o l dd i f f e r e n c ei np r o t e i nv o l u m ep e r c e n t a g e ( v 0 1 ) ，c o m p a r e dw i t hn o r m a lg r o u p ，7 c h a n g e dp r o t e i n sh a d b e e nd e t e r m i n e d ：ip r o t e i nd o w n - r e g u l a t e d ，5p r o t e i n su p - r e g u l a t e da n d 1p r o t e i nl o s ti nr a ts e r u mo fm o d e lg r o u p t h e s ed i f f e r e n t i a lp r o t e i n ss p o t sw e r ee x c i s e df r o mp r e p a r a t i v eg e l sa n dd i g e s t e di n t o p e p t i d e s t h e s ep e p t i d e sw e r ea n a l y z e db ym a l d i - t o f - m s d a t aw e r et h e ns e a r c h e dw i t h t h es e a r c he n g i n em a s c o ta g a i n s tan c b in o n r e d u n d a n tp r o t e i ns e q u e n c ed a t a b a s e t h e c i t e d p r o t e i n s c o r e s g r e a t e r t h a n7 1w e r ec r e d i b l e 2 p r o t e i n s w e r ei d e n t i f i e d b y m a l d i t o f m s ，i nw h i c hi s o v a l e r y l c o ad e h y d r o g e n a s ew a sd o w n - r e g u l a t e d ，a n d s t a t 3 一i n t e r a c t i n gp r o t e i nw a su p - r e g u l a t e d t oo u rb e s tk n o w l e d g e ，r e l e v a n tr e p o r t sw i t h t h e s et w op r o t e i n sa r er a r e ，s t a t 3 一i n t e r a c t i n gp r o t e i ni sc l o s e l yr e l a t e dt oc y t o k i n es i g n a l i n g p a t h w a y h o wt h e y p l a yt h er o l ei nt h ef o r m a t i o no f t h es y n d r o m eo fq i s t a g n a n c ya n db l o o d s t a s i sn e e d sf u r t h e rs t u d y p a r tt w 0 p r i m a r ys e r u mp r o t e o m i c sa n a l y s i so fr a tm o d e lw i t h s y n d r o m e o fq i d e f i c i e n c ya n db l o o ds t a s i s t h e r ea r e10r a t si nt h en o r m a lg r o u pa n dt h er a tm o d e lg r o u pw i t hq i d e f i c i e n c ya n d b l o o ds t a s i s w ec o m p a r e ds e r u n lp r o t e i ne x p r e s s i n gp a t t e r ni nn o m a la n dm o d e lg r o u pb y i m a g em a s t e r2 de l i t e6 0 1a n a l y s i ss 0 1 a r e t h er e s u l t ss h o w e dt h a t4 1 3 4 - 1 3a n d4 0 1 4 - 3 7 p r o t e i n sh a db e e no b s e r v e di ns e r u mo fm o d e la n dn o r m a lg r o u p m a t c h e dw i t ht h er e f e r e n c e 6 a b s t r a c t g e l ，t h ea v e r a g en b m a t c h e sw a s3 6 8 + 1 2 ，t h ep e r c e n t m a t c h e sw a s8 8 5 a m o n gt h ep r o t e i n s p o t ss h o w i n g2o rm o r et h a n2f o l dd i f f e n e r c ei n v o lo fp r o t e i n ，c o m p a r e dw i t hn o r m a l g r o u p ，7c h a n g e dp r o t e i n sh a db e e nd e t e r m i n e d ：1p r o t e i nd o w n r e g u l a t e d ，5p r o t e i n s u p r e g u l a t e da n d1p r o t e i nl o s ti nr a ts e r u mo fm o d e lg r o u p b ym a l d i t o f - m sa n dt h e nw i t ht h e s e a r c he n g i n em a s c o t , 6p r o t e i n sw e r e i d e n t i f i e d ，i nw h i c hc d 5a n t i g e n - l i k ew a sd o w n r e g u l a t e d ，o t h e r5p r o t e i n si n c l u d i n g h a p t o g l o b i n ，c o m p l e m e n tc o m p o n e n tc 3 ，e t c w e r eu p r e g u l a t e d t h ef u n c t i o n sa n df e a t u r e s i nt h e s ep r o t e i n sh a dr e l e v a n c et ot h e p a t h o l o g i c a lp r o c e s so fi n f l a m m a t i o n , i m m u n e r e g u l a t i o n ，w h i c hi sc o n s i s t e n tw i t ht h ek n o w no c c u i t e n c ea n dd e v e l o p m e n to ft h es y n d r o m e o fq i - d e f i o e n c ya n db l o o ds t a s i s p a r tt h r e e p r o t e o m i c sr e s e a r c ho fe x p e r i m e n t a lm i n i - p i gm o d e lw i t hs y n d r o m e o fp h l e g ma n db l o o ds t a s i so f c o r o n a r yh e a r td i s e a s e 12m i n i - p i g sw e r eu s e di nt h er e s e a r c h , 6f o rn o r m a lg r o u pa n dt h eo t h e r6f o rm o d e l g r o u pw i t hp h l e g ma n db l o o ds t a s i so fc o r o n a r yh e a r td i s e a s e t h em o d e lw a se s t a b l i s h e di n m i n i - p i gb yh i g h f a td i e tc o m b i n e dw i t hb a l l o o ni n j u r y s e r u m ，c o r o n a r y a r t e r ya n d m y o c a r d i a lt i s s u e sw e r ea l ls e p a r a t e db yt w od i m e n s i o n a lg e le l e c t r o p h o r e s i s ，u s i n gi p g s t r i p e ( 2 4 c m ，p h 4 7 ) a n d 12 5 s d s - p a g e ，r e p e a t e d l y3t i m e s w ec o m p a r e dp r o t e i n e x p r e s s i n gp a t t e r ni nn o r m a la n dm o d e lg r o u pb yi m a g em a s t e r2 de l i t e6 0 1a n a l y s i s s o f t w a r e 1 i ns e r u mp r o t e i np r o f i l e ，a v e r a g e3 9 4 + 2 3 ，4 4 0 - a ：2 5p r o t e i n sh a db e e nr e s p e c t i v e l yo b s e r v e d i nt h em o d e lg r o u pa n dt h en o r m a lg r o u p m a t c h e dw i t ht h er e f e r e n c eg e l ，t h e a v e r a g e n b m a t c h e sw a s3 6 3 士2 5 ，t h ep e r c e n t m a t c h e sw a s8 2 8 ；c o m p a r e dw i t hn o r m a lg r o u p ，17 c h a n g e dp r o t e i n sh a db e e nd e t e r m i n e d ：1p r o t e i nd o w n - r e g u l a t e d ，6p r o t e i n su p r e g u l a t e d ，7 7 a b s t r a c t p r o t e i n sl o s ta n d3p r o t e i n ss p e c i f i ce x p r e s s e di nm i n i p i gs e r u mo ft h es y n d r o m e o fp h l e g m a n db l o o ds t a s i so fc o r o n a r yh e a r td i s e a s e 2 i n2 - d ec o r o n a r ya r t e r yt i s s u ep r o t e i np r o f i l e ，a v e r a g e10 9 8 4 - 3 7 ，9 6 7 士4 4p r o t e i n sh a db e e n o b s e r v e di nt h em o d e lg r o u pa n dt h en o r m a lg r o u p m a t c h e dw i t ht h er e f e r e n c eg e l ，t h e a v e r a g en b m a t c h e sw a s8 9 5 4 - 4 5 ，t h ep e r c e n t m a t c h e sw a s8 6 ；c o m p a r e dw i t hn o r m a lg r o u p ， 35c h a n g e dp r o t e i n sh a db e e nd e t e r m i n e d ：14p r o t e i n su p - r e g u l a t e d ，17p r o t e i n ss p e c i f i c e x p r e s s e da n d4p r o t e i n sw e r em o d i f i e di nm i n i - p i gc o r o n a r ya r t e r yt i s s u eo f t h es y n d r o m e 3 i n2 - d em y o c a r d i a lt i s s u ep r o t e i np r o f i l e ，a v e r a g e9 7 8 4 - 3 2 ，8 9 0 4 - 3 8p r o t e i n sh a db e e n o b s e r v e di nt h em o d e lg r o u pa n dt h en o r m a lg r o u p t h ea v e r a g en b m a t c h e sw a s7 2 5 4 - 4 3 ，t h e p e r c e n t m a t c h e sw a s7 6 7 ；c o m p a r e dw i t hn o r m a lg r o u p ，1 4c h a n g e dp r o t e i n sh a db e e n d e t e r m i n e d ：13p r o t e i n s u p r e g u l a t e d a n d1 p r o t e i n ss p e c i f i ce x p r e s s e d i n m i n i 。p i g m y o c a r d i a lt i s s u r eo ft h es y n d r o m e b ym a l d i - - t o f m sa n dt h e nw i t ht h es e a r c he n g i n em a s c o t , 3p r o t e i n si ns e r u m s a m p l ew e r ei d e n t i f i e d ，i n c l u d i n gc o m p l e m e n tc o m p o n e n t 4b i n d i n g p r o t e i n 、a p o l i p o p r o t e i ne p r e c u r s o re r e a n d18p r o t e i n si nc o r o n a r ya r t e r yt i s s u ew e r ei d e n t i f i e d ，t h a tw a st r a n s g e l i n 、 c o a c t o s i n 1 i k e le t c a sf o rt h em y o c a r d i a lt i s s u e ，9p r o t e i n si n c l u d i n gh s p a 8p r o t e i n 、 a p o l i p o p r o t e i na - i ve t c ，w e r ei d e n t i f i e d m o r et h a nh a l f o ft h ea b o v ei d e n t i f i e dp r o t e i n sw e r e c l a s s i f i e da sa l b u m i n ，w h i c hi n v o l v e di nt h ep a t h o l o g i c a lp r o c e s so fi n f l a m m a t i o n ，v a s c u l a r r e m o d e l i n ga n dl i p i dm e t a b o l i s me t c t h e s ep r o t e i n sm a yp l a ya ni m p o r t a n t r o l ei np r o c e s so f t h ef o r m a t i o n ，o c c u r r e n c ea n dd e v e l o p m e n to ft h es y n d r o m eo fp h l e g ma n db l o o ds t a s i so f c o r o n a r yh e a r td i s e a s e c o n c l u s i o n 1 t h ep r o t e i np r o f i l eo fs y n d r o m eo fq i - s t a g n a n c ya n db l o o ds t a s i s 、q i - d e f i c i e n c ya n db l o o d s t a s i sr a ts e r u md i s p l a y e do b v i o u s l yd i f f e r e n c ec o m p a r e dw i t hn o r m a lr a ts e r u m t h er e s u l t s i m p l i e dt h a tv a r i o u sd i f f e r e n tp r o t e i n sl e dt ot h ed e v e l o p m e n to ft h e s et w os y n d r o m e s 2a n d 8 p h l e g ma n db l o o ds t a s i so fc o r o n a r yh e a r td i s e a s e 3 t h ei d e n t i f i e dp r o t e i n si nt h ea b o v es y n d r o m em o d e l s ，f o ro n et h i n g ，c o n s t i t u t et h e e v i d e n c et h a tt h e s ea n i m a lm o d e lh a v ec o i n c i d e n c ew i t hc l i n i c a lf e a t u r e so ft h ed i s e a s e ，a n d f o ra n o t h e rt h i n g ，i n d i c a t et h a tp a r to fd i f f e r e n tp r o t e i n sd e f i n i t e l yh a v ec l o s er e l a t i o nt ot h e f o r m a t i o no ft h e s et h r e es y n d r o m e so fb l o o ds t a s i s c e r t a i np r o t e i n sm a y b eb e c o m ep o t e n t i a l a n dv a l u a b l ec l i n i c a l l ym o l e c u l a rm a r k e r sc a nb eu s e df o rc l i n i c a ld i a g n o s i sa n dp r e d i c t i o no f t h e s et h r e es y n d r o m e so fb l o o ds t a s i s k e y w o r d s ：s y n d r o m eo fq i - s t a g n a n c ya n db l o o ds t a s i s ；s y n d r o m eo fq i - d e f i c i e n c ya n d b l o o ds t a s i s ；s y n d r o m eo fp h l e g ma n db l o o d s t a s i s ；c o r o n a r y h e a r td i s e a s e ；2 - d e ； m a l d i - t o f - - m s ；p r o t e o m i c s 9 英文缩略词 英文缩略词 英文缩写英文全称中文名称 a c n a c r a g a p s b i s c a c b b c h a p s 2 d e d i g e d t t e s i g 1 y h c c a l 蚣 i e f i p g a c e t o n i t r i l e a c r y l a m i d e a g a r o s e a d e n o s i n ep h o s p h o s u l f a t e n ，n - m e t h y l e n eb i s a c r y l a m i d e c a r r i e ra m p h o l y t e s c o o m a s s i eb r i l l i a n tb l u e 3 一 ( 3 - p r o p y l b i l i a r ya m i d e ) d i m e t h y la m i n o - cs u l f o n a t e t w o d i m e n s i o n a lg e le l e c t r o p h o r e s i s d i f f e r e n c eg e le l e c t r o p h o r e s i s d i t h i o t h r e i t o l e l e c t r o s p r a yi o n i z a t i o n g l y c i n e a c y a n o - 4 - h y d r o x y c i n n a m i ca c i d i o d o a c e t a m i d e i s o e l e c t r i cf o c u s i n g i m m o b i l i z e dp hg r a d i e n t m a l d i - t o f m sm a t r i x a s s i s t e dl a s e r d e s o r p t i o n i o n i z a t i o n t i m eo ff l i g h tm a s ss p e c t r o m e t r y m w p a g e m o l e c u l a rw i e g h t p o l y a c r y l a m i d eg e le l e c t r o p h o r e s i s 乙腈 丙烯酰胺 琼脂糖 过硫酸铵 n ，n7 一甲叉双丙 烯酰胺 载体两性电解质 考马斯亮蓝 3 一 ( 3 一胆酰胺基 丙基) 二甲氨基卜 丙磺酸盐 双向凝胶电泳 差异凝胶电泳 二硫苏糖醇 电喷雾 甘氨酸 q 一氰基一4 一羟基 肉桂酸 碘代乙酰胺 等电聚焦 固相p h 梯度 基质辅助激光解 吸电离飞行时间 质谱 分子量 聚丙烯酰胺凝胶 电泳 英文缩