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文档简介

生物选修1(人教版),专题2微生物的培养与应用课题1微生物的实验室培养,要点突破,一、制备培养基,1配制原则(1)目的明确:不同微生物需求不同,根据培养目的进行配制。(2)营养要协调:营养物质的浓度和比例要适宜。(3)pH要适宜:为维持pH的相对恒定,可在培养基中加入缓冲剂,常用磷酸氢二钾或磷酸二氢钾。,栏目链接,2培养基的营养成分及功能,栏目链接,特别提醒,对异养微生物来说,含C、H、O、N的化合物既是碳源又是氮源、能源。一些天然营养物质,如酵母膏、蛋白胨、动植物组织提取液等可为微生物提供生长因子。不同微生物对营养的需求不同,因此,首先根据不同微生物的营养需求配制针对性强的培养基。营养物质过少不能满足微生物的营养需要,过多对微生物的生长有抑制作用。,栏目链接,例1下列关于微生物培养基的说法,正确的是()A同一种物质不可能既作碳源又作氮源B凡是碳源都能提供能量C除水以外的无机物仅提供无机盐D无机氮源也能提供能量,栏目链接,解析:对异养微生物来说,含C、H、O、N的化合物既是碳源,又是氮源。CO2是光能自养细菌的碳源,但不能提供能量。CO2和N2是无机物,也是微生物的碳源和氮源。硝化细菌所利用的氮源是无机氮源氨,同时氨也为硝化细菌提供用以化能合成作用的能源。答案:D,栏目链接,变式训练1不同培养基的具体配方不同,但一般都含(C)A碳源、磷酸盐和维生素B氮源和维生素C水、碳源、氮源和无机盐D碳元素、氧元素、氢元素、氮元素,二、消毒与灭菌的比较,栏目链接,栏目链接,特别提醒,酒精消毒时,70%的酒精杀菌效果最好。原因是浓度过高,菌体表面蛋白质变性过快从而凝固成一层保护膜,乙醇分子不能渗入其中;浓度过低,杀菌能力减弱。,栏目链接,例2细菌培养过程中分别采用了高压蒸汽、酒精、火焰灼烧等几种不同的处理方法,这些方法依次用于杀灭哪些部位的杂菌()A接种针、手、培养基B高压锅、手、接种针C培养基、手、接种针D接种针、手、高压锅,栏目链接,解析:高压蒸汽灭菌锅是灭菌的一个设备,通常用于培养基的灭菌。用酒精擦拭双手是消毒的一种方法。火焰灼烧,可以迅速彻底地灭菌,适用于微生物的接种工具,如接种环、接种针。答案:C,栏目链接,变式训练2下列操作与消毒和灭菌无关的是()A接种前用火焰灼烧接种环B接种前用酒精擦拭双手C将平板倒置,放入培养箱中培养D接种在酒精灯的火焰旁完成,解析:A、B、D都是实验操作过程中常用的消毒和灭菌方法。将平板倒置,放入培养箱中培养与消毒、灭菌无关,是为了防止杂菌污染。答案:C,三、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基及纯化大肠杆菌,栏目链接,2纯化大肠杆菌操作过程中的注意事项(1)平板划线法中几次灼烧接种环的目的:,栏目链接,(2)稀释涂布平板法操作比较复杂,且各个细节均需保证无菌操作,应特别注意:酒精灯与培养皿的距离要适宜。吸管头不要接触其他任何物体。吸管要在酒精灯火焰周围使用。涂布器末端浸在盛有70%酒精的烧杯中,取出时,要让多余的酒精在烧杯中滴尽,然后将沾有少量酒精的涂布器在酒精灯火焰上引燃,注意防火。,栏目链接,特别提醒,在稀释涂布平板法操作中,每个步骤都要注意无菌操作,以防培养基被污染,影响实验效果。每一稀释倍数菌液都至少要涂布三个平板,作为实验重复,求平均值,若其中有菌落数与其他实验差距悬殊者,应舍弃该实验数据,不进行统计、计算。平板冷凝后,皿盖上会凝结成水珠。凝固后的培养基表面的温度也比较高,将平板倒置,既可以使培养基表面的水分更好地挥发,又可以防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染。,栏目链接,例2关于平板划线法操作的叙述正确的是()A使用已灭菌的接种环、培养皿,在操作过程中不需要再灭菌B打开含菌种的试管,需通过火焰灭菌,取出菌种后,需马上塞上棉塞C将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内,划三至五条平行线即可D最后将平板倒置,放在培养箱中,栏目链接,解析:使用已灭菌的接种环、培养皿,操作过程仍要灭菌;打开含菌种的试管需要通过火焰灭菌,取出菌种后含菌种的试管需要通过火焰灭菌后再塞好棉塞;将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内,划三至五条平行线后盖上皿盖;最后应将平板倒置,放入培养箱中培养。答案:D,栏目链接,变式训练3稀释涂布平板法是微生物培养中的一种常用的接种方法。下列相关叙述错误的是()A操作中需要将菌液进行一系列的浓度梯度稀释B需将不同稀释度的菌液分别涂布到固体培养基表面C不同浓度的菌液均可在培养基表面形成单个的菌落D操作过程中对培养基和涂布器等均需进行严格灭菌处理,栏目链接,解析:只有在稀释度足够大的菌液才能在培养基表面形成单个的菌落。答案:C,本节小结,栏目链接,栏目链接,核心归纳1培养基的成分一般包括水、碳源、氮源、无机盐,除此之外,还应满足微生物对pH、特殊营养物质及氧气的需求。2获得纯净培养

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