（作物遗传育种专业论文）多年多点条件下大豆脂肪酸含量qtl分析.pdf

1 3 2 脂肪酸遗传机制18 1 3 3 大豆种子油分组分q t l 定位研究进展2 l 1 3 4 大豆脂肪酸种质资源筛选- 3 0 2 材料与方法：3 2 2 1 大豆脂肪酸测定方法研究3 2 2 1 1 材料。3 2 2 1 2 实验方法3 2 2 2 大豆脂肪酸q t l 定位及q t l 之间互作3 3 2 2 1 实验材料及种植3 3 2 2 2 脂肪酸组分测定3 3 2 2 3 遗传图谱3 3 2 2 4q t l 的命名方法3 5 2 2 5 连锁作图和统计分析3 5 2 2 6q t l 之间互作分析3 6 2 3 大豆脂肪酸种质资源筛选3 6 i ipi i ijiij 5 5 0 东北农业人学农学博_ f 学位论文 2 3 1 材料3 6 2 3 2 实验方法3 6 2 4 大豆脂肪酸表型与s s r 标记间的关联分析3 7 2 4 1 材料3 7 2 4 2 实验方法3 7 3 结果与分析3 9 3 1 快速脂肪酸测定方法3 9 ， 3 1 1 与传统方法比较3 9 3 1 2 主要脂肪酸测定结果3 9 3 1 3 精确度分析4 0 3 2 脂肪酸组分的q t l 定位。4 1 3 2 1 脂肪酸性状的表型变异4 l 3 2 2 软脂酸q t l 分析4 7 3 2 3 硬脂酸q t l 分析5 3 3 2 4 油酸q t l 分析5 9 3 2 5 砸油酸q t l 分析j ：一6 5 3 2 6 亚麻酸q t l 分析：7 l 3 3 大豆脂肪酸种质资源筛选7 7 33 1 东北大豆脂肪酸种质资源情况；7 7 3 3 2 脂肪酸含量相关性分析7 9 3 4 大豆脂肪酸组分表型与s s r 标记间的关联分析8 0 4 讨论8 2 4 1 关于s s r 标记和s n p 标记一8 2 4 2 快速脂肪酸分析方法8 2 4 3 三年三点条件下脂肪酸组分q t l 8 2 4 4 大豆脂肪酸q t l 可靠性8 3 4 5 主效q t l 、上位性互作和环境互作效应是数量性状遗传基础8 4 4 6 大豆脂肪酸组分相关q t l 对m a s 的作用8 4 4 7 东北地区大豆品种脂肪酸含量的差异8 5 。 5 结j 沦8 6 5 1 大豆脂肪酸组分快速分析8 6 5 2 大豆脂肪酸含量主效q t l ：8 6 5 3q t l 与环境互作和上位性互作8 6 i i 目录 5 4 大豆脂肪酸种质资源情况、相关分析及关联分析8 7 致谢8 8 参考文献8 9 攻读博士期间发表的论文：10 8 i i ；f?，- c o n t e n t s c o n t e n t s c h i n e s ea b s t r a c t i e n g l i s ha b s t r a c t 1i n t r o d u c t i o n 1 1p u r p o s ea n ds i g n i f i c a n c e 1 1 2 a d v a n c e s o f r e s e a r c ho f q u a n t i t a t i v e t r a i t s i np l a n t s ：2 1 2 1a d v a n c e so f r e s e a r c ho f q u a n t i t a t i v et r a i t s 3 1 2 2a d v a n c e si ng e n e t i cm a r k e r s 3 1 2 3g e n e t i cm a p p i n gp o p u l a t i o n 7 1 2 4a d v a n c eo f r e s e a r c hi nq t lm a p p i n gm e a n s 9 1 2 5r e s e a r c he v o l u t i o no f q t l e p i s t a t i ca n dq ei n t e r a c t i o n 16 1 3 f a t t ya c i d sc o n t e n ti ns o y b e a n ，；1 7 1 3 1p r o g r e s si nd e t e r m i n a t i o no f f a t t ya c i d s 1 8 1 3 2t h eg e n e t i cm e c h a n i s mo f f a t t 3 a c i dc o m p o n e n tc o n t e n ti ns o y b e a n 1 8 1 3 3r e s e a r c he v o l u t i o no f q t lm a p p i n gw i t hf a t t ya c i d sc o m p o s i t i o ni ns o y b e a n 2 1 1 3 4s c r e e n i n go fs o y b e a ng e r m p l a s mr e s o u r c e so ff a t t ya c i d s 3 0 2m e t h o d sa n dm a t e r i a i s 3 2 2 1r e s e a r c ho f d e t e r m i n a t i o no f f a t t ya c i d si ns o y b e a n ：3 2 2 1 1m a t e r i a l s ：3 ：1 2 1 2e x p e r i m e n t a lm e t h o d ：；：1 2 2q t lm a p p i n ga n de p i s t a s i sa n a l y s i so ff a t t ya c i d ss i ns o y b e a n 3 3 2 2 1m a t e r i a l sa n dp l a n t e d 3 3 2 2 2d e t e r m i n a t i o no ff a t t ya c i dc o m p o s i t i o n 3 3 2 2 3g e n e t i cm a p 3 3 2 2 4q t ln a m i n g 3 5 2 2 5c h a i nm a p p i n ga n ds t a t i s t i c a la n a l y s i s 一3 5 2 2 6e p i s t a t i ca n dq ei n t e r a c t i o n 3 6 2 3s c r e e n i n go f s o y b e a ng e r m p l a s mr e s o u r c e so f f a t t ya c i d s 3 6 2 3 1m a t e r i a l s 3 6 2 3 2 e x p e r i m e n t a lm e t h o d 3 6 2 4s o y b e a n f a t t ya c i dp h e n o t y p ea n da s s o c i a t i o na n a l y s i sb e t w e e nt h es s rm a r k e r s 3 7 2 4 1m a t e r i a l s 3 7 2 4 2e x p e r i m e n t a lm e t h o d 3 7 3r e s u l ta n da n a l y s i s 3 9 i v 东北农业i = = 学农学博l j 学位论文 3 1r a p i dd e t e r m i n a t i o no f f a t t ya c i d s 3 9 3 1 1c o m p a r i s o nb e t w e e nt h et r a d i t i o n a lm e t h o d 3 9 3 1 2t h em a i nf a t t ya c i dd e t e r m i n a t i o nr e s u l t s 3 9 3 1 3p r e c i s i o no f a n a l y s i s 4 0 3 2q t lm a p p i n go f f a t t ya c i d s 4 0 3 2 1f a t t ya c i dt r a i t sp h e n o t y p i cv a r i a t i o n 4 0 3 2 2a n a l y s i so f q t lf o ro fp a l m i t i ca c i dc o n t e n t 一4 7 3 2 3a n a l y s i so f q t lf o rs t e a r i ca c i dc o n t e n t 5 3 3 2 4a n a l y s i so f q t lf o ro l e i ca c i dc o n t e n t 5 9 3 2 5a n a l y s i so f q t lf o rl i n o l e i ca c i dc o n t e n t 6 5 3 2 6a n a l y s i so f q t lf o rl i n o l e n i ca c i dc o n t e n t 7 1 ：；3 s c r e e n i n go f s o y b e a n g e r m p l a s mr e s o u r c e so f f a t t ya c i d s 7 7 33 1f a t t ya c i d so fs o y b e a ng e r m p l a s m r e s o u r c e si nn o r t h e a s t 7 7 3 3 2c o r r e l a t i o na n a l y s i so f f a t t ya c i dc o n t e n t 7 9 3 4f a t t ya c i dc o m p o s i t i o no f s o y b e a np h e n o t y p ea n da s s o c i a t i o n a n a l y s i sb e t w e e nt h es s r m a r k e r s 4d i s c u s s i o n j 二 8 ( ) ；：1 4 1s s rm a k e r sa n ds n pm a k e r s 8 2 4 2r a p i dd e t e r m i n a t i o no nf a t t ya c i d sc o n t e n t 8 2 4 3f a t t ya c i dc o m p o s i t i o nq t li nt h r e ey e a r sa n dt h r e es i t e s 8 2 4 4t h er e l i a b i l i t yq t lo ff a t t ya c i d so fs o y b e a n 8 3 4 5 m a i n e f f e c t q t l 、e p i s t a t i ca n dq ei n t e r a c t i o n a lef u n d a m e n t a lw i t hi n h e r i t a n c e o f q u a n t i t a t i v ec h a r a c t e r 8 4 4 6f a t t ya c i d sc o m p o s i t i o nq t lr e l a t e di ns o y b e a nt ot h er o l eo fm a s ：8 4 4 7n o r t h e a s td i f f e r e n c e si nf a t t ya c i dc o n t e n to fs o y b e a nv a r i e t i e s 8 5 5c o n l u s i o n 8 6 5 1f a s ta n a l y s i so f f a t t ya c i dc o m p o s i t i o no f s o y b e a n 8 6 5 2q t lm a i ne f f e c to f s o y b e a nf a t t ya c i dc o n t e n t 8 6 5 3 e p i s t a t i ca n dq ei n t e r a c t i o n 8 6 5 4 s o y b e a ng e r m p l a s mr e s o t l r c e s ，r e l a t e d t o f a t t y a c i d a n a l y s i s a n d c o r r e l a t i o n a n a l y s i s 8 7 a c k n o w l e d g e m e n t 8 8 r e f e r e n c e 8 9 p a p e r sp u b l i s h e di nt h ep e r i o do fp h d e d u c a t i o n v 研究生学位论文独创声明和使用授权书 独创声明 本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的 研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含 其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含未获得一 ( 洼；翅遗直墓丝奄要挂剔直明的! 奎拦亘窒2 或其他教育机构的学位或 证书使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文 中作了明确的说明并表示谢意。 学位论文作者签名：铂玖乃日期：刃励年f 月多日 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，学校有权 保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借 阅。本人授权学校可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索， 可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。( 保密的学位论文 在解密后适用本授权书) 学位论文作者签名：葫坎掺日期：咖年朋衫日 导品签蒯文晔嗍m 蝴勺日 捅要 摘要 大豆是重要的经济作物，即是人类重要的植物蛋白和油分来源之一，又是重要的饲料作 物。目前我国生产上脂肪酸品种还不能满足生产生活需要，迫切需要利用现代分子育种技术 改良现有大豆品种的五种脂肪酸含量。大豆五种脂肪酸含量都属于多基因控制的数量性状， 对其数量性状位点进行分析和定位，在分子辅助育种上具有重要指导意义。 本研究利用源自美国大豆c h a r l e s t o n 和中国优质品系东农5 9 4 杂交获得的1 5 4 个株系组 成的重组自交系群体，在2 0 0 7 - - 2 0 0 9 年和3 个不同的地点对大豆的脂肪酸含量进行了分析。 得到了控制大豆五种脂肪酸含量的q t l 。 1 改进了大豆肪肪酸快速气相色谱分析方法。直接将磨碎豆粉中的脂质皂化、甲脂化 后，利用色谱柱h p 5 1 9 0 9 1 j 4 1 3 ，进行气相色谱分析。结果表明：软脂酸、硬脂酸、油酸、 亚油酸和亚麻酸的出峰时间依次为6 5 7 、7 8 3 、8 7 3 、8 8 6 、9 0 6m i n 。这种方法的优点是快 速、操作方便、节省药品，即使在较低的杂交世代样品很少，用普通法不易提取脂质时，此 法也能顺利地完成分析工作。 2 在三年三点条件下用气相色谱法测得大豆各株系子粒5 种脂肪酸的含量，利用w i n q t lc a r t o g r a p h e r2 5 复合区间作图法( c i m ) 进行了q t l 分析：结果共检测到6 8 个相关的q t l 位点，分布在1 8 个连锁群上。多年多点同时检测到的q t l 共有2 0 个，其中控制软脂酸性状 的3 个q t l ，包括q p a l - c 2 2 、q p a l - a i - 1 和q p a l - n 1 ；控制硬脂酸性状的5 个q t l ，包括 q s t c 2 1 、q s t - d l a - 1 、q s t - b i - l 、q s t - b 1 2 和q s t f l ；控制油酸性状有5 个，包括q o l e - b 2 - l 、 q o l e - c 2 3 、q o l e - g - l 、q o l e h l 和q o l e m - l ；控制亚油酸性状的有3 个，包括q l i n - b 1 一l 、 q l i n c 2 一i ，q l i n n l 和q l i n h l ；控制亚麻酸性状的有3 个，包括q l i n o b 1 - 1 、q l i n o - c 2 一l 和q l i n o j 1 。这些q t l 的一致性较高，为特异脂肪酸含量标记辅助育种奠定了基础。 在三年三点7 个环境下，共定位了6 8 个与大豆脂肪酸含量含量相关的q t l ，有4 8 个 q t l 只在一个环境中检测到，有2 0 个q t l 被多次检测到。说明在不同的环境条件下，控制 大豆脂肪酸含量q t l 的表达不同，进一步说明了大豆脂肪酸含量q t l 受环境影响。 3 本研究在三年三点7 个环境下，有1 9 个q t l 存在环境互作，共发现4 5 对脂肪酸q t l 上位互作，发生在1 8 个连锁群上。在上位互作中，检测到8 对影响大豆软脂酸含量的上位互 作位点，8 对影响大豆硬脂酸含量的上位互作位点，1 2 对影响大豆油酸含量的上位互作位点， 1 1 对影响亚油酸含量的上位互作位点，7 对影响麻酸含量的上位互作位点，几乎覆盖所有 连锁群。在这些上位互作位点中，绝大部分发生在不同的两条连锁群上，也有在一条连锁群 上的两个位点，也发现同一位点与多个q t l 位点发生互作。证明了上位互作方式的广泛性和 东北农业大学农学博l j 学位论文 复杂性。检n - n y 主效q t l 也参与了上位性互作，进一步证实了主效q t l 和上位性互作是 数量性状重要的遗传基础之一。 4 东北大豆品种五种脂肪酸含量在不同地区品种间差异均十分显著，并有较明显的地区 性分布趋势。其中，软脂酸和油酸分布趋势是黑龙江 吉林 辽宁。硬脂酸和皿油酸是辽宁 吉林 黑龙江，亚麻酸为吉林 辽宁 黑龙江。 脂肪酸组分相关分析结果：软脂酸与硬脂酸( r = 一0 5 7 ) 、软脂酸与亚油酸( r = 0 5 6 ) 呈显著 负相关，软脂酸与油酸正相关，与亚麻酸负相关，但是都未达显著水平。硬脂酸与油酸负相 关，与亚油酸和亚麻酸负相关，但是均未达显著水平。油酸与亚油酸负相关达到极显著水平 ( r = 0 8 5 3 ) ，与亚麻酸负相关未达到显著水平。亚油酸与亚麻酸负相关达n - ；显著水平“= 一0 4 7 ) 。 通过关联分析，筛选到与脂肪酸组分关联的s s r 标记共有3 3 个。其中。与软脂酸相关 联的有1 2 个s s r 标记；与硬脂酸含量相关联的标记有1 3 个，与油酸相关联的s s r 标记有 1 8 个，与亚油酸相关联的s s r 标记有1 8 个，与亚麻酸相关联的s s r 标记有1 6 个。本研究 筛选到的与脂肪酸性状q t l 共分离或紧密连锁的分子标记可供大豆脂肪性状品质性状育种 中使用标记辅助选择时参考。 本论文在以下获得了创新： 1 改进一种快速测定大豆脂肪酸方法，首次使用色谱柱h p 5 1 9 0 9 1 j 4 1 3 在大豆脂肪酸含 量的分析，且操作简便，需样品量少，分析时间短。 2 在多年多点条件下，定位了大豆脂肪酸含量q t l 6 8 个j 其中被多次检n - n 的有2 0 个， 将环境影响因素降低到最小，多次被检测到的q t l 和筛选出的与s s r 标记紧密连锁；并发 现4 5 对脂肪酸q t l 上位互作，1 9 个与环境互作位点。对大豆特异脂肪酸品种选育分子辅助 育种有重要的意义。 关键词大豆；脂肪酸；q t l ；上位性效应；q e 互作；关联分析 l i a b s t r a c t q t la n a l y s i so ff a t t ya c i d sc o n t e n to fs o y b e a ni nm u l t i p l e y e a r sa n ds i t e s a b s t r a c t s o y b e a ni sa l li m p o r t a n te c o n o m i c a lc r o p ，w h i c hi st h em a j o rp l a n tp r o t e i na n do i lf o rp e o p l e c o n s u m p t i o n ，a n dm a t e r i a lo ff e e d i n gs t u f f n o w a d a y s ，t h ev a r i e t i e so fh i g hf a t t ya c i d ss o y b e a n ，c a l l n o ta f f o r dt h en e e do fp e o p l e sl i f ea n dp r o d u c t i o n t h e r e f o r e ，i ti si m p e r i o u sd e m a n dt ou s em o d e m b r e e d i n gt e c h n o l o g yt om o d i f yt h ec o n t e n to ff a t t ya c i d si ns o y b e a n f a t t ya c i d sa r eq u a n t i t a t i v e t r a i t sw h i c hw e r ec o n t r o l l e db ym a n yg e n e s i th a si m p o r t a n tm e a n i n gf o rb r e e d i n ga p p l i c a t i o nt o m a pt h e s eq u a n t i t a t i v et r a i t si ns o y b e a nl i n k a g eg r o u p s t h ep o p u l a t i o no f15 4r e c o m b i n a t i o ni n b r e dl i n e sd e r i q e df r o mt h ec r o s so fa m e r i c ac u l t i v a r c h a r l e s t o na n dc h i n e s ee l i t el i n ed o n g n o n g5 9 4 f a t t ya c i d sc o n t e n to ft h ep o p u l a t i o n ，p l a n t e di n t h r e ed i f f e r e n ts i t e s ，w e r ea n a l y z e dd u r i n g2 0 0 7t o2 0 0 9 q t lt h a tu n d e r l y i n gf a t t ya c i d sc o n t e n t o fs o y b e a nw e r ef o u n d 1 t h i sp a p e ri m p r o v e dt h ea n a l y s i sm e t h o d ，t h er a p i dd e t e r m i n a t i o no nf a t t ya c i d sc o n t e n tb y g a sc h r o m a t o g r a p h y ( g c ) i ns o y b e a n t h e 鲥n d e ds o y b e a nm e a lw a su s e d + a sm a t e r i a l f o r s a p o n i f i c a t i o na n dm e t h y le s t e r i f i c a t i o nd i r e c t l y , t h e nm e a s u r e db yc h r o m a t o g r a p h y c o l u m n h p 5 1 9 0 9 1 j - 4 1 3 t h er e s u l t ss h o w e dt h a t ：t h ep e a kt i m eo fp a l m i t i ca c i d ，s t e a r i ca c i d ，o l e i ca c i d , l i n o l e i ca c i d ，a n di i n o l e n i ca c i dw e r e6 5 7 ，7 8 3 ，8 7 3 ，8 8 6 ，a n d9 0 6m i n t h ea d v a n t a g e so ft h i s m e t h o df a s t ，o p e r a t i n ge a s i l y , a n dm e d i c i n e - s a v i n g f u r t h e r m o r e ，i tc o u l do b t a i ng o o dr e s u l t sw i t h f e ws a m p l e s ，w h i c hi sd i f f i c u l tt or e c o v e rt h el i p i d sf r o mc o m m o nw a y s 2 f i v ek i n d so ff a t t ya c i dc o n t e n t so f15 4f t 4a n df t 5l i n e sc r o s s e db yc h a r l e s t o n ( 早) x d o n g n o n 9 5 9 4 ( d ) w e r em e a s u r e db yg cu n d e rt h ec o n d i t i o no ft h r e ey e a r sa n dt h r e es i t e s t h e q t lo ff a t t ya c i d sc o n t e n t sw e r ea n a l y z e dw i t hm e t h o do fc o m p o s i t ei n t e r v a lm a p p i n g ( c i m ) b y w i nq t lc a r t o g r a p h e r2 5 i nt o t a l 6 8r e l a t e dq t ld i s t r i b u t e do nt h e18l i n k a g eg r o u p sw e r e o b t a i n e d 2 0q t l sw e r ed e t e c t e di nd i f f e r e n ty e a r so rd i f f e r e n ts i t e s ，i n c l u d i n g3q t l sr e l a t e dw i t h p a l m i t i ca c i dc o n t e n t s ，q p a l - c 2 2 ，q p a l a i - 1 a n dq p a l - n 一1 ；5q t l sr e l a t e dw i t hs t e a r i ca c i d c o n t e n t s ，q s t bl - i ，q s t b1 2 ，q s t dla - 1 ，q s t c 2 一l a n dq s t f - l ；5q t l sr e l a t e dw i t ho l e i ca c i d c o n t e n t s ，q o l e - b 2 - 1 、q o l e - c 2 3 、q o l e g 一1 、q o l e h 一1a n d q o l e - m - 1 ；4q t l sr e l a t e dw i t hl i n o l e i c i i i 东北农业人学农学博l 学位论文 暑曼寡曼毫曼曼鼍曼皇皇曼皇鼍i ! 曼! 苎! ! ! ! 皇喜! 皇! 曼! ! ! 皇暑苎! 苎! ! ! 鼍! ! ! ! ! ! ! 曼皇詈! 苎曼皇! ! ! ! ! ! ! ! 皇! ! ! ! ! ! ! 曼詈曼苎! ! ! 曼曼量 t h e m ，4 8q t l sw e r el o c a t e di no n ee n v i r o n m e n t , 2 0w e r ed e t e c t e dr e p e a t e d l y t h er e s u l t si m p l i e d t h a td i f f e r e n tq t lc o n t r o ll e dt h ee x p r e s s i o no fs o y b e a nf a t t ya c i dc o n t e n ta n dt h ef a t t ya c i dc o n t e n t o fs o y b e a nq t l su n d e r d i f f e r e n te n v i r o n m e n t a lc o n d i t i o n s 3 19w e r ee n v i r o n m e n t a li n t e r a c t i o nq t l sa n d4 5p a i r se p i s t a t i cq t l s ，r e l a t e dw i t hs o y b e a n u n d e r7e n v i r o n m e n t so f3y e a r sa n d3s i t e s ，w e r el o c a t e do ne i g h t e e nl i n k a g eg r o u p s 8p a i r s e p i s t a t i cq t l sw e r er e l a t e dw i t hs o y b e a np a l m i t i ca c i dc o n t e n t s ，a n d8p a i r se p i s t a t i cq t lw e r e r e l a t e dw i t hs o y b e a ns t e a r i ca c i dc o n t e n t s 12p a i r se p i s t a t i cq t l sw e r er e l a t e dw i t hs o y b e a no l e i c a c i dc o n t e n t s 11p a i r se p i s t a t i cq t l sw e r er e l a t e dw i t hs o y b e a nl i n o l e i ca c i dc o n t e n t si na l ll i n k a g e g r o u p s 。i nt h e s ee p i s t a t i cl o c i ，t h ev a s tm a j o r i t yo c c u r e di nt w od i f f e r e n tl i n k a g eg r o u p s ，o ri na l i n k a g eg r o u po nt w os i t e s ，i ta l s of o u n dt h a tw i t hal o c u sw e r ei n t e r a c t e dw i t hm a n yq t l l o c i i t c o n f i r m e dt h ee x t e n s i o na n dc o m p l e x i t yo fe p i s t a t i cw a y m a j o re f f e c tq t l s ，i n v o l v e di nt h e e p i s t a t i c ，c o n f i r m e dt h em a i ne f f e c ta n de p i s t a t i cq t l si st h eg e n e t i cb a s i so fq u a n t i t a t i v et r a i t s 4 i tr e a c h e dv e r ys i g n i f i c a n to ff i v ef a ya c i d sc o n t e n ta m o n gv a r i e t i e sf r o md i f f e r e n tr e g i o n s i nn o r t h e a s tc h i n a , a n dam o r ev i s i b l et r e n dw a sf o u n di nt h er e g i o n a ld i s t r i b u t i o n t h et r e n d so f p a l m i t i ca c i da n do l e i ca c i dd i s t r i b u t i o nw e r eh e i l o n g i i a n g j i l i n l i a o n i n g s t e a r i ca c i da n d l i n o l e i ca c i dd i s t r i b u t i o nw e r el i a o n i n g j i l i n h e i l o n g i i a n g a n dl i n o l e n i ca c i dd i s t r i b u t i o n w e r el i a o n i n g j i l i n h e i l o n g j i a n g c o r r e l a t i o na n a l y s i sr e s u l t so ff a t t ya c i dc o m p o s i t i o n ：p a l m i t i ca c i da n ds t e a r i ca c i dw a s s i g n i f i c a n t l yn e g