（内科学专业论文）左氧氟沙星在copd患者对多索茶碱血药浓度影响的研究.pdf

2 呷工3 【：l t 目录 1 1 1 11 11i wi i iii ii i i iiji 17 7 9 6 3 2 中文摘要0 0ooodoo0 1 英文摘要o o6 ooooooaoo 3 研究论文左氧氟沙星在c o p d 患者对多索茶碱血药浓度影响的研究 前言- 一“一“”“一“一6 刚舌”“”“”“”“”“”一”一“一“”“一“”。o 材料与方法”o ooooo o i ooo oooo oooooo oodooo 7 结果“”“一一”一”一“”一9 附图u goooo a m oooo o0o 1 1 附表1 3 讨论“”“”一”一一1 9 结论o oooooooo ”一一”一”“2 2 参考文献2 3 综述多索茶碱作用的研究进展2 5 致谢- “”一”“”“”一“”一”4 2 个人简历4 3 中文摘要 左氧氟沙星在c o p d 患者对多索茶碱血药浓度影响的研究 摘要 目的：茶碱用于抗支气管痉挛已有5 0 多年的历史，为世界范围内应 用最广泛的抗支气管痉挛药物之一。多索茶碱( d o x o p h y l l i n ed o x ) 为茶 碱的n - 7 位连接1 、3 二氧环戊基2 甲基的衍生物。其与传统药物茶碱和 氨茶碱相比，起效快，作用时间较长，且具有镇咳作用，但无腺苷拮抗作 用，因而无茶碱的中枢和胃肠道不良反应，亦无药物依赖性。多索茶碱有 效药物浓度在1 0u g m l 以内，2 0u g m l 以上易发生中毒反应，该药通过 肝脏药物代谢酶系统中的细胞色素p 4 5 0 酶类代谢，所以凡影响肝代谢酶 p 4 5 0 的药物均会影响多索茶碱的代谢，导致血药浓度增加或减少。 喹诺酮类药物主要作用机制在于抑制细菌d n a 旋转酶，干扰细菌 d n a 的合成而引起细菌死亡。研究认为，作为旋转酶抑制剂，可能通过 抑制细胞色素氧化酶p 4 5 0 的某一亚类而抑制茶碱的代谢。茶碱类药物与 喹诺酮类药物为呼吸系统疾病治疗中的常用药物，尤其是慢性阻塞性肺疾 病患者，而关于两种药物联合应用于a e c o p d 患者时，对茶碱类药物的 影响程度如何目前报道较少，本文拟通过对左氧氟沙星对多索茶碱的稳态 血药浓度的影响，研究两种药物在a e c o p d 患者临床应用的安全性。 方法：随机选取a e c o p d 患者共1 2 0 例( 所有患者诊断均符合中华 医学呼吸病学分会2 0 0 7 年指定的诊断标准，且肝肾功能正常) ，其中男性 7 5 例，女性4 5 例，年龄6 0 1 4 岁。患者入院后均给予1 3 内酰胺类抗生素， 如美洛西林、头孢美唑、头孢西丁、哌拉西林、阿洛西林、氨苄西林、亚 胺培南、氟康唑等针对已知和可疑病原学的治疗，并且对症的化痰、雾化 吸入等治疗。( 1 ) 试验采用平行对照试验设计，分设d o x 单用组及其与 l v f x 合用组各6 0 例。单用组：静脉滴注d o x 2 0 0 m g ( 溶于1 0 0 m l 生理盐 水) ，q 1 2 h ；合用组：同时静脉滴注d o x 2 0 0 m g ( 溶于1 0 0 m l 生理盐水) ， q 1 2 h ，和l 、硬x 2 0 0 m g ，q 1 2 h ；两组均分别于用药第4 天、第7 天、第 1 0 天、第1 4 天取肘静脉血3 m l ，分离出纯血清，于4 0 低温保存待测。 ( 2 ) 以高效液相色谱法( h p l c ) 检测血清中d o x 浓度，流动相：甲醇与水( 体 积比3 0 ：7 0 ) ，流速：1 0 m l m i n ，柱温：3 0 ，检测波长：2 7 2 n m 。( 3 ) 所有采 中文摘要 集血样经二氯甲烷与异丙醇混合萃取液提取，氮气流吹干，流动相溶解进 样。本法测得血清中d o x 可达基线分离，在合用l v f x 后，d o x 的色谱 峰无其它组分干扰。用峰面积与浓度进行回归，标准曲线示d o x 在0 0 5 8 0 u g m l 范围内有良好的线性关系( 产o 9 9 9 8 ) 。稳定性好，血清中d o x 。平均回收率为9 9 7 。精密度高，日内标准差 8 9 6 、日问标准差 9 。合并 用药在内标咖啡因和多索茶碱的6 m i n 内9 m i n 内均无峰，对浓度测定无 影响。( 4 ) 试验数据采用s p s s v e r s i o n l 6 0 统计软件处理，进行非参数检 验，以q = o 0 5 为水准，即p o 0 5 认为两组数据有差别。 结果：d o x 单用及其与l v f x 合用时的稳态血药浓度均在2 1 0u g m l ， 波动范围较大。随机区组设计多个样本比较的非参数检验显示4 天、7 天、 1 0 天、1 4 天的平均秩次分别为2 5 3 、2 5 7 、2 5 1 、2 3 9 。卡方检验统计 量为1 2 5 0 ，概率为p = - o 7 4 1 ，按q = o 0 5 水准，可认为两组数据无差别， 即左氧氟沙星和多索茶碱合用对多索茶碱稳态血药浓度无影响。 结论：在本试验给药剂量下，合用l v f x 后，c o p d 病人体内d o x 平均 血药浓度升高均无显著性差异( 乃o 0 5 ) ，提示临床上两药合用时，虽然 l v f x 对d o x 的分布动力学有所影响，但l v f x 不影响人体内d o x 药物稳态 血药浓度，合用时d o x 不需要进行给药剂量的调整。临床合用是相对安全 关键词：多索茶碱；左氧氟沙星；高效液相色谱法；稳态血药浓度 英文摘要 一- - _ 一 l e v o f l o x a c i ni nc o p d p a t i e n t sd o x o f y l l i n ee f f e c t o fs e r u mc o n c e n t r a t i o n a b s t r a c t o b j e c t i v e ：t h e o p h y l l i n ef o rt h ea n t i b r o n c h o s p a s mt h a n 50y e a r so f h i s t o r y , a st h ew o r l d sm o s tw i d e l yu s e da n t i b r o n c h o s p a s md r u g s d o x o f y l l i n e ( d o x ) t ot h e o p h y l l i n en 7b i tc o n n e c t i o n1 , 3 d i o x o c y c l o p e n t y l 一2 一m e t h y l d e r i v a t i v e s d o x o f y l l i n ew i t ht h e o p h y l l i n ea n da m i n o p h y l l i n ec o m p a r e dw i t h t r a d i t i o n a l m e d i c i n e s ，r a p i do n s e t ，l o n g e r d u r a t i o no fa c t i o n ，a n dh a s a n t i t u s s i v ee f f e c t ，b u tw i t h o u ta d e n o s i n ea n t a g o n i s m ，a n d t h e r e f o r en o t h e o p h y r l l i n e i nt h ec e n t r a la n dg a s t r o i n t e s t i n a la d v e r s er e a c t i o n ，n od r u g d e p e n d e n c e d o x o f y l l i n ee f f e c t i v ed r u gc o n c e n t r a t i o n i n10u g | m lo rl e s s ，2 0 u g | m l o rm o r ep r o n et ot o x i cr e a c t i o n s t h ed r u gt h r o u g ht h eh e p a t i cd r u g m e t a b o l i z i n ge n z y m es y s t e mc y t o c h r o m ep 一4 5 0e n z y m e si nm e t a b o l i s m ，s o t h a tt h o s ea f f e c t e dl i v e re n z y m e sp 450d r u g sw i l la f f e c tt h em e t a b o l i s mo f d o x o f y l l i n e ，r e s u l t i n gi na ni n c r e a s eo rd e c r e a s ei np l a s m a c o n c e n t r a t i o n i st h em a i nm e c h a n i s mo fa c t i o no fq u i n o l o n e si n h i b i tb a c t e r i a ld n a g y r a s e ，b a c t e r i a ld n as y n t h e s i si n t e r f e r e n c ec a u s e db y t h ed e a t ho fb a c t e r i a s t u d ys u g g e s t st h a t ，a sag y r a s ei n h i b i t o r , m a yi n h i b i tt h ec y t o c h r o m eo x i d a s e p 4 5 0i n h i b i t i o no fap a r t i c u l a r s u b c l a s so ft h e o p h y l l i n e m e t a b o l i s m t h e o p h y l l i n ea n dq u i n o l o n e sf o rt 1 1 et r e a t m e n to fr e s p i r a t o r yd i s e a s e si nt h e c o m m o n l yu s e dd r u g s ，p a r t i c u l a r l y i n p a t i e n t s w i t hc h r o n i co b s t r u c t i v e p u l m o n a r yd i s e a s e ，a n d o fc o m b i n a t i o no ft w od r u g so np a t i e n t s w i t h a e c o p d ，t h ei m p a c to fd r u g so nt h e o p h y l l i n ee x t e n to f t h er e p o r t e dl e s s ，t h i s p a p e rb yl e v o f l o x a c i nd o x o f y l l i n es t e a d y s t a t eb l o o dd r u gc o n c e n t r a t i o nt o s t u d yt h et w od r u g si nc l i n i c a la p p l i c a t i o ni np a t i e n t s w i t ha e c o p d s a f e t y m e t h o d s ：a e c o p dp a t i e n t sr a n d o m l ys e l e c t e d12 0p a t i e n t s ( a l lp a t i e n t s a r ei nl i n ew i t hc h i n e s em e d i c i n ed i a g n o s i so fr e s p i r a t o r yd i s e a s ec r e d i t sw i l l b ed e s i g n a t e di n2 0 0 7t h ed i a g n o s t i cc r i t e r i a ，a n dl i v e ra n dk i d n e yf u n c t i o n w a sn o r m a l ) ，7 5p a t i e n t sw e r em a l ea n d4 5f e m a l e s ，a g e6 04 - 1 4y e a r s 英文摘要 p a t i e n t sa d m i t t e dt oh o s p i t a lw e r et r e a t e dw i t h1 3 - 1 a c t a ma n t i b i o t i c s ，s u c ha s m e z l o c i l l i n 。c e f r n e t a z o l e ， c e f o x i t i n ，p l p e r a c i l l i n ， a z l o c i l l i n ， a r n p l c l l l m ， 一一一 - i m i p e n e m ，f l u c o n a z o l ea g a i n s t k n o w na n ds u s p e c t e dp a t h o g e n ss u c ha s s t u d i e so ft r e a t m e n t ，a n ds y m p t o m a t i co ft h ep h l e g m ，s u c ha si n h a l a t i o n t h e r a p y ( 1 ) c o n t r o l l e dt r i a lw i t hp a r a l l e ld e s i g nt r i a l ，g r o u p e dd o xs i n g l e g r o u pa n dc o m b i n e dg r o u p w i t h6 0c a s e so fl v f x s i n g l eg r o u p ：i n t r a v e n o u s i n f u s i o nd o x 2 0 0 m g ( d i s s o l v e di n10 0 m ls a l i n e ) ，q 12 h ；c o m b i n a t i o ng r o u p ： a d d i t i o no fi n t r a v e n o u sd o x 2 0 0 m g ( d i s s o l v e di n ，10 0 m ls a l i n e ) ，q 12 h ，a n d l v f x 2 0 0 m g ，q 12 h ；m e d i c a t i o ni nb o t hg r o u p sw e r et h ef i r s t4d a y st h ef i r s t7 d a y s ，10d a y s ，1 4d a y st ot a k ev e n o u sb l o o ds a m p l e sw e r e3m l ，i s o l a t e dp u r e s e r u mt e s t e da t 4 0 c r y o p r e s e r v a t i o n ( 2 ) h i g hp e r f o r m a n c el i q u i d c h r o m a t o g r a p h y ( h p l c ) d e t e c t i o no fs e r u mc o n c e n t r a t i o n so fd o x ，m o b i l e p h a s e ：m e t h a n o la n dw a t e r ( v o l u m er a t i o3 0 ： 7 0 ) ，f l o wr a t e ：1 0 m l m i n ， c o l u m nt e m p e r a t u r e ：3 0 ，d e t e c t i o nw a v e l e n g t h ：2 7 2 n m ( 3 ) a l lb l o o d s a m p l e sc o l l e c t e db yt h e d i c h l o r o m e t h a n ee x t r a c tm i x e dw i t hi s o p r o p y l a l c o h o le x t r a c t i o n ，d r yn i t r o g e ns t r e a m ，d i s s o l v e di nm o b i l ep h a s es a m p l i n g l a wd o xm e a s u r e du pt ot h eb a s e l i n es e p a r a t i o no fs e r u m ，i nc o m b i n a t i o n ， a r e rl v f x d o xc h r o m a t o g r a p h i cp e a k sw i t h o u ti n t e r f e r e n c e o fo t h e r c o m p o n e n t s w t l lm ep e a ka r e aa n dc o n c e n t r a t i o nr e g r e s s i o n ，s t a n d a r dc u r v e s h o w i n gd o x a to 0 5w i t h i na8 0 u g m lg o o dl i n e a rr e l a t i o n s h i p ( r = o 9 9 9 8 ) g o o ds t a b i l i t yi ns e r u md o xa v e r a g er e c o v e r yw a s9 9 7 h i g hp r e c i s i o n ，d a y s t a n d a r dd e v i a t i o n 8 ，d a ys t a n d a r dd e v i a t i o no f 9 s t a n d a r dc o m b i n a t i o n t h e r a p y , i n c l u d i n gc a f f e i n ea n d w i t h i nd o x o f y l l i n eo f6 m i n 9 m i nw e l lw i t hn o p e a k ，n oe f f e c to nt h em e a s u r e dc o n c e n t r a t i o n ( 4 ) t e s td a t ap r o c e s s i n gu s i n g s p s s v e r s i o nl6 0s t a t i s t i c a ls o f t w a r e ，n o n p a r a m e t r i ct e s t ，w i t ha = o 0 5f o r t h es t a n d a r d ，t h a ti s ，p 3 计算，d o x 的最低检出浓度为0 0 1 u g m l 。 2 1 4 方法回收率 分别配制o 2 5 ，1 0 ，4 0 u g m l 的d o x 血清样品，按标准曲线方法处 理后进样，将样品与内标物峰高的比值代入回归方程，计算回收率，共测 定5 次，取平均值。 2 1 5 精密度考察 研究论文 分别配制o 2 5 、1 0 、4 0 u g m l 的d o x 血清样品，按标准曲线方法处 理后进样。日内差：于一日内测定5 次，记录浓度值，计算标准差。日问 差：连续5 日，每日测定一次，记录浓度值，计算标准差。 2 2 d o x 单用及其与l v f x 合用在a e c o p d 患者药物浓度稳定性研究 2 2 1 试验分组 a e c o p d 患者1 2 0 例，随机分为两组，两组患者在性别、年龄上无 差异。试验组：在基础治疗上，联合应用多索茶碱和左氧氟沙星7 1 4 天； 对照组：在基础治疗上，单用多索茶碱。 2 2 2 给药方案及样品采集 单用组：静脉滴注d o x 2 0 0 m g ( 溶于1 0 0 m l 生理盐水) ，q 1 2 h ，分别 于用药4 天、7 天、1 0 天、1 4 天后取肘静脉血3 m l ，分离出纯血清，于一4 0 低温保存待测。 合用组：同时静脉滴注d o x 2 0 0 m g ( 溶于l o o m l 生理盐水) ，q 1 2 h ， 和l v f x 2 0 0 m g ，q 1 2 h ；分别于用药第4 天、第7 天、第1 0 天、第1 4 天 取肘静脉血3 m l ，分离出纯血清，于一4 0 低温保存待测。 2 2 3 样品制备与测定 吸取0 4 m l 血清样品于离心管中，加入2 0 u g m l 的内标咖啡因液 1 0 u l ，再加入萃取液( 二氯甲烷：异丙醇- - - - 9 5 ：5 ) 5 m l ，旋涡混合l m i n ， 4 0 0 0 r m i n 离心1 0 m i n 。吸取下清液4 m l 于5 m l 离心管中，在5 0 水浴 下氮气流吹干。残渣加入0 1 m l 流动相溶解，进样2 0 u l ，将样品与内标 物峰面积的比值代入回归方程，计算血药浓度。 2 2 4 数据处理 试验数据采用s p s s v e r s i o n l6 0 统计软件处理，进行非参数检验，以 q = o 0 5 为水准，即p 0 0 5 认为两组数据有差别。 结果 1 1 方法可行性 图l 为空白血清和d o x 、内标咖啡因及l v f x 色谱图，图2 为内标咖 啡因色谱图，图3 为d o x 色谱图。图示血清中d o x 可达基线分离，在合 用l v f x 后，d o x 的色谱峰无其它组分干扰，可确保血清中d o x 分离及检 研究论文 测方法的专一性和准确性。另患者合并应用的头孢美唑、头孢西丁、美洛 西林、哌拉西林、阿洛西林、氨苄西林、亚胺培南、氟康唑的药物在内标 和多索茶碱的6 m i n 内和9 m i n 内均无峰，对浓度测定无影响。 1 2 标准曲线 d o x 标准品血清浓度在0 0 5 - - 8 0 u g m l 范围内，以峰面积比y 对浓 度x ( u g m l ) 进行回归，得回归方程y = 0 9 11 1 x + o 0 2 2 8 ( n = 8 ) ，最低检测浓 度为0 0 1 u g m l 。结果显示d o x 在0 0 5 - - 8 0 u g r n l 范围内与峰面积有良好 的线性关系( 剐9 9 9 8 ) ，见图4 。 ， 1 3 稳定性 血清中d o x 的平均回收率为9 9 6 7 ( n = 5 ) ，见表1 。 1 4 测定日内精密度差 8 ，日间精密度差 9 ( n - 5 ) ，见表2 。 2 d o x 单用及其与l v f x 合用c o p d 病人的血药浓度测定 单用组及合用组c o p d 人体血清测定结果表明d o x 单用及其与l v f x 合用时的稳态血药浓度均在2 - 一1 0u g m l 之间，见表3 、表4 。 3 、数据处理 3 1 正态性检验如下，单用组和合用组在4 天、7 天、1 0 天和1 4 天的p o 1 ，不符合正态性检验，见表5 。 3 2 根据本实验设计为随机区组设计多个样本比较，且呈非正态性分布， 不能对其进行总体均数进行t 检验或f 检验的参数检验，故适合应用非参 数检验 f r i e d m a nt e s t 主要输出结果( 见表6 ) 显示4 天、7 天、1 0 天、1 4 天的 平均秩次分别为2 5 3 、2 5 7 、2 5 l 、2 - 3 9 。卡方检验统计量为1 2 5 0 ，概率 为p = - 0 7 4 1 ( 表7 ) ，按a = 0 0 5 水准，可认为两组数据无差别，即左氧氟沙 星和多索茶碱合用与单用多索茶碱对多索茶碱稳态血药浓度无影响。 研究论文 一 附图 l l i n e f i g 2c h r o m a t o g r a mo f ac a f f e i n es e r u ms a m p l e 研究论文 f i g 3c h r o m a t o g r a mo fad o x o p h y l l i n es e l a l ms a m p l e f i g 4 s t a n d a r dc u r v eo fd o xi ns e i - u m 研究论文 附表 t a b l e lr e c o v e r yo fd o x o p h y l l i n e ( n = 5 ) t a b l e 2p r e c i s i o no fi n t r a d a ya n di n t e r d a y ( n = 5 ) t a b l e 3s e r u ml e v e lo fd o xg i v e na l o n ei nc o p d 3 1 7 9 0 4 6 1 5 0 2 4 8 9 研究论文 堕壅垒查一 t a b l e 4s e r u ml e v e lo fd o x c o m b i n e dw i t hl v f xi nc o p d 2 5 2 6 4 3 3 5 3 7 3 - 2 1 3 4 8 2 4 9 8 5 4 7 4 5 3 4 7 9 1 6 0 2 7 2 4 5 1 8 5 7 3 4 4 6 4 4 1 7 7 1 1 6 5 8 2 6 3 4 4 4 5 5 9 1 73 7 8 4 6 9 7 5 7 4 4 8 8 8 6 5 7 3 23 9 9 4 8 2 9 4 0 3 4 5 8 6 2 7 3 4 5 1 0 5 5 8 4 5 9 4 5 7 7 4 5 l l 4 1 7 4 9 6 5 9 5 3 7 1 2 4 6 4 4 6 6 4 9 4 5 3 0 1 3 5 0 2 6 3 0 4 1 7 5 0 6 1 4 4 1 6 6 4 7 6 3 5 6 0 4 1 5 8 3 9 5 9 9 4 8 2 4 5 5 1 6 4 4 5 5 3 4 1 7 4 2 7 1 7 5 8 6 3 7 8 7 1 2 5 8 1 8 5 3 1 8 0 8 7 5 6 9 8 6 1 9 5 5 7 4 6 6 7 4 7 7 5 4 2 0 4 2 7 3 7 8 1 6 1 4 2 1 5 0 5 1 5 5 3 4 5 0 1 2 2 3 7 9 3 7 4 4 7 9 4 6 4 2 3 3 9 0 4 2 8 3 9 8 5 9 9 2 4 4 7 8 5 0 3 4 4 0 6 - 4 5 2 5 3 5 1 3 6 1 3 2 0 3 6 4 2 6 4 0 7 3 7 1 3 9 1 4 0 1 2 76 5 6 4 3 7 4 4 7 3 8 7 2 85 3 6 4 8 2 8 6 1 3 7 8 2 94 9 8 5 1 8 6 7 3 6 5 1 3 0 3 7 8 3 9 8 5 5 3 5 0 研究论文 t a b l e 5t e s t so f n o r m a l i t k o l m o g o r o v s m i r n o v 4 s h a p i r o w il k 组别s t a t i s t d fp s t a t i s t d f p i c 1 c 一一单用组o 1 1 3 6 00 0 5 5 0 9 3 3 6 00 0 0 3 一一合用组0 1 4 6 6 00 0 0 3 0 8 8 6 6 00 0 0 0 + 单用组o 1 2 2 6 00 0 2 6 0 9 5 36 0 0 0 2 1 w 合用组0 1 4 6 6 0 0 0 0 30 9 1 9 6 0 0 0 0 1 + 单用组0 1 1 0 6 0 o 0 7 l0 9 3 0 6 0 0 0 0 2 。八合用组0 1 2 6 6 0 0 0 1 80 9 5 4 6 0 0 0 2 4 一+ 单用组0 1 5 8 6 00 0 0 1 0 8 8 9 6 0 0 - 0 0 0 1 = 二盒旦丝2 ：翌一皇2 2 ：2 2 三一竺2 1 兰一一旦2 ：竺竺 一一_ l 一一一一_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ i _ _ _ _ _ _ - _ _ - _ _ _ - _ _ - _ _ _ _ - 一。 t a b l e 6r a n k s 平均秩 四天 2 5 3 七天 2 5 7 十天 2 5 1 一一一婴主一一一 一一! ：兰旦一一 - _ i - _ _ l _ - - _ _ _ _ _ _ _ _ - i _ - _ i l l _ l _ l _ - _ _ _ _ _ _ _ _ _ l _ - 。一一 t a b l e 7 t e s ts t a t i s t i c s n 1 2 0 卡方 1 2 5 0 d f 3 p 0 7 4 1 l _l l _ - _ l i _ _ _ l _ _ _ - _ _ - i - l _ _ - _ _ _ _ l _ _ i _ _ _ _ l - - 研究论文 讨论 一、喹诺酮类药物对茶碱类药物药动学影响中茶碱血药浓度测定方法 的研究目前测定茶碱血药浓度的方法主要有：紫外分光光度法、高效液相 色谱法、荧光偏振免疫法及均相酶免疫法等。 有关氧氟沙星与茶碱联用的报道表明，氧氟沙星对茶碱的影响情况说 法不一。实验证明，传统测定茶碱血药浓度的u v 双波长法受到氧氟沙星 共存的干扰，使测定值较实际值明显偏低。为此，黄显等哺1 设计了一种 新的双波长测定法，通过改变等吸收波长，优化血清蛋白沉淀条件等，可 排除氧氟沙星等多种抗生素对测定的干扰。另有文献报道_ 刀，u v 法较h p l c 测得的茶碱血药浓度偏低，但此差异并不影响茶碱的主要药动学参数及由 此预测的给药剂量。 高效毛细管电泳( h p c e ) 是近年来发展迅猛的新型分析分离技术，因 为其具有电泳和色谱技术的双重优点，以高效、高速、高灵敏度、高自动 化和低运行成本被公认为当今分析化学领域的前沿哺1 。目前已有将毛细管 电泳法应用于茶碱血药浓度测定的研究汐1 0 。这样，毛细管电泳法作为 一种快速、准确和可靠的分析方法，在临床治疗药物监控( t d m ) q b 起到重 要作用。在临床用于分析体液药物含量的方法中，毛细管电泳法能够克服 免疫方法分析时间长，成本高，并且抗体可能与药物的代谢产物发生交叉 反应或污染的缺点；也能够克服h p l c 常需要繁杂的样品制备过程，相当 长的平衡过程和分析时间，及需要昂贵的色谱柱及大量试剂的缺点。 。 应用h p l c 法测定茶碱血药浓度的方法应用较为广泛，此法不仅具 有灵敏度和选择性高的优点，而且能同时测定茶碱及其代谢产物含量 1 1 1 ， 提高了研究效率。 二、试验条件的选择 本试验选择检测多索茶碱血药浓度的常规应用的流动相甲醇与水 n 羽，在3 0 ：7 0 比例下能使药物峰与内标峰很好分离。此时，药物峰与内 标峰分离度好，峰形对称，但峰较宽，通过减少进样量，进样量为2 0 u l ， 使得峰宽变窄，峰高增高。另外，通过选择较短柱长的色谱柱，1 5 0 r a m 的柱长，使药物与内标的保留时间为9 m i n 和6 m i n ，大大节省了检测时间， 提高了效率。 研究论文 生物样品的提取，本试验采用了液一液萃取法引，后用氮气流吹干。 提取液预选了常规应用的二氯甲烷，然而提取物在低浓度下无法检出，故 选用了二氯甲烷和异丙醇混合提取液，体积比为9 5 ：5 。本试验分别在室温、 3 0 、5 0 下吹干提取物，结果表明，吹干时温度为室温, - - - , 5 0 c ，对多索 茶碱和咖啡因无影响，为加快吹干速度，提取后用5 0 c 水浴加热，氮气 流吹干。 在上述试验条件下，所得d o x 色谱峰能与杂质峰良好分离，无干扰， 符合系统适用性要求所得标准曲线线性关系良好( 产o 9 9 9 8 ) ，精密度高， 日内标准差 5 0 岁) 【2 3 】茶碱清除率低，应适应减少用量， 静脉注射应缓慢，定期作血药浓度监测。 2 病理因素 哮喘病患者在病毒感染期间用茶碱治疗后，患者出现呕吐、头痛、惊 综述 厥等现象，可能是茶碱的毒性反应，而不是病毒造成的，这一点必须明确， 因为病毒是干扰素诱导剂，而干扰素诱导剂可纯化肝细胞色素p 4 5 0 的活 性。这很可能是流感病毒改变茶碱药动学的机理 2 4 】。充血性心力衰竭、 急慢性通气功能障碍、肺源性心脏病、肝硬变疾病患者的茶碱清除率会发 生很大变化。肝硬变患者血浆白蛋白低于2 9 m g d l ，或胆红质高于 1 5 m g d l ，茶碱清除率明显下降，半衰期可长达2 0 一- 3 0 h 。随着心衰消失， 茶碱清除明显增加，急性肺水肿患者半衰期延长至1 9 h 1 2 5 1 。 3 食物和饮料因素【2 6 】 主要有三种食物和饮料可改变茶碱的代谢，它们是：烧牛肉、含甲基 黄嘌呤的饮料、( 茶、咖啡、巧克力和可乐饮料) 以及高蛋白低碳水化合物 饮食。以上食物和饮料都能使茶碱的半衰期缩短。因此，哮喘患者饮食， 不宜过大改变蛋白或糖的比例，以免引起茶碱的变化。高脂食物能延续茶 碱的吸收，但不影响其吸收量和体内代谢的过程。所以，哮喘患者晚饭可 用一些高脂肪食物，以延续茶碱的吸收，避免哮喘夜间的发作。 4 药物因素 茶碱是依靠肝药酶系统中的细胞色素p 4 5 0 酶类而代谢的药物。细胞 色素p 4 5 0 ( c y p 4 5 0 ) 属血红蛋白类酶，是微粒体混合功能氧化酶系中最重 要的一族氧化酶，分布在多种器官、组织，它参与的生化反应有固醇类生 物合成、脂肪酸和类固醇激素等内源性底物的氧化代谢、大部分药物和外 源物的生物氧化等；它使进入机体的外源物经代谢后向两个方向发展，代 谢解毒和代谢活化，代谢活化后的产物有较强的毒性，甚至产生致畸、致 癌效应。所有影响c y p 4 5 0 合成和代谢的药物均影响茶碱的代谢1 2 7 1 。另有 一些药物与茶碱竞争结合蛋白也可影响茶碱的代谢。 4 1 使茶碱血药浓度升高的药物1 2 8 j 及作用机制 4 1 1 头孢菌素类 关于头孢菌素类抗生素对茶碱代谢的研究表明，大多数头孢菌素类抗 生素对茶碱代谢影响不大，但李胜岐等【2 9 】通过测定肺心病急性发作及肺心 病伴心衰患者氨茶碱与头孢噻肟钠联用后2 h 血药浓度，发现2 药联用后 氨茶碱血药浓度显著上升，而头孢噻肟钠血清浓度比单用显著降低。可能 与肺心病患者体内肝细胞色素p 4 5 0 的活性降低有关。 4 1 2 氨基糖苷类 综述 氨茶碱与庆大霉素在肾小球中协同重吸收，增加了庆大霉素的全身作 用时间延长，抗菌效力增强的同时，茶碱血药浓度升高【3 0 1 。 4 1 3 四环素类 四环素为p 4 5 0 酶抑制剂，主要抑制c y p 2 c 1 9 酶的活性，可抑制茶碱 的代谢，使其药理作用和毒性反应均增强【3 0 1 。 4 1 4 氯霉素类 氯霉素为肝p 4 5 0 酶抑制剂，干扰茶碱在肝脏的代谢转化，延缓其在 体内的清除。实验结果表明【3 ，2 药联用后，t l 2 延长，曲线下面积( a u c ) 增大，与单用茶碱时相比较其k 值、t l 2 、a u c 均有明显差异，提示2 药长期联用，茶碱的血药浓度不易控制，毒副作用容易发生。 4 1 5 大环内酯类 许多研究报道大环内酚抗生素类对茶碱的药代动力学有不良影响。 c u m m i n g s 等人( 1 9 7 7 ) 首次报道了合用红霉素时茶碱的毒性。他们发现3 名青年的哮喘病人，在同时应用红霉素后，茶碱的血浓度从7 8 、1 4 3 和 1 3 5 u g m l 上升到1 6 、2 4 5 和2 8 4 u m l 。大环内酯类抗生素为1 4 - - 1 6 元环 的内酯化合物，可与c y p 3 a 4 酶进行n 脱甲基化，其代谢物与酶形成一 个稳定的化合物，使酶失去活性。一般1 4 元环的红霉素、克拉霉素与 c y p 3 a 4 形成复合物的作用最强，发生的不良反应也最严重；罗红霉素和 1 6 元环的交沙霉素、螺旋霉素次之；1 5 元环的阿奇霉素最弱。 叶丽卡等【3 2 】试验结果显示红霉素与氨茶碱联用5 d 、1 0 d 对茶碱药动学 参数有显著或非常显著的影响，而且联用的时间越长，剂量越大，发生茶 碱中毒的危险性越显著。有作者认为f 3 0 1 ，茶碱与红霉素联用4 d 即可发生 相互作用，联用1 周以上茶碱的血药浓度升高。国外报道 3 3 , 3 4 】认为，在每 日给红霉素1 5 9 以上与茶碱同服时发生干扰，血内茶碱清除率下降约 2 5 ，半衰期延长1 5 - - 2 6 。用药2 - 3 d 后可出现心悸、兴奋、心率快、 血压下降。血药浓度2 5 m g l 时可全身抽搐，以至于心律紊乱。大部分文 献认为联用红霉素使茶碱血药浓度升高，也有个别报道红霉素与茶碱没有 相互作用【3 5 】。 螺旋霉素在体内有明显的蓄积作用，在胆汁中的浓度远大于血药浓 度，且维持时间长，它亦在肝脏与茶碱产生竞争性抑制而影响茶碱的代谢。 一般认为联用4 d 后，茶碱的血药浓度明显升高，而临床上为达到有效浓 综述 度，往往2 药联用1 0 d 或更长。因此，在联用该药时，应适时