（内科学专业论文）beta+igh3在胃癌中的表达及意义.pdf

目录 中文摘要l 英文摘要3 研究论文b e t ai g 柏3 在胃癌中的表达及意义 1 l j 一 日i j 舌，5 材料与方法6 结果一9 附图l o 附表1 4 讨 念1 5 结论1 8 参考文献1 9 综述b e t ai g _ h 3 在肿瘤发生中作用机制的研究现状2 2 致谢。3 7 个人简历3 8 f 黜必 y 19 0 i c ：| i 。舌4 答。 中文摘要 b e t aig h 3 在胃癌中的表达及意义 摘要 b e t ai g - h 3 是一种细胞外基质蛋白，由多种细胞分泌，由四个高度同 源的结构域组成。其c 端含有一精氨酸甘氨酸天冬氨酸( a r g g l y a s p ， r g d ) 结构，这一结构可以和细胞膜表面一种糖蛋白整合蛋白结合，从 而调节细胞与细胞外基质的相互作用，调节细胞的粘附、迁移、增殖甚至 分化。b e t ai g h 3 广泛表达于人体组织，但在脑组织中无表达，在各种肿 瘤中的表达也不一。在不同组织和不同细胞中b e t ai g h 3 的i d 结构可 以和不同的整合蛋白结合从而发挥不同的作用：其与整合蛋白0 l v p 5 结合 促进结肠癌细胞的迁移，其与整合蛋白0 【3 p 1 结合促进肝癌细胞的侵袭， 等等。编码这种蛋白的人b e t ai g - h 3 基因位于第五染色体长臂3 l 位点，在 多种肿瘤及疾病中b e t ai g - h 3 基因突变或者丢失。b e t ai g h 3 基因的缺失可 以促进小鼠自发性肿瘤的产生。将b e t ai g _ h 3 转导入c h o 成纤维细胞中 可以抑制其在裸鼠中的致癌作用。这些均表明b e t ai g - h 3 与肿瘤有关。但 是其在不同组织与不同类型肿瘤中的表达却不一，在不同肿瘤中的作用也 不同，包括促进作用和抑制作用。其中在结肠癌，肝癌中高表达促进肿瘤 细胞的粘附，迁移。在神经母细胞瘤中抑制其生长。 目的：本实验测定b e t ai g - h 3 在胃癌中的表达情况，为更好的研究胃 癌发生机制提供帮助，及为胃癌的治疗提供新的靶点。 方法：采用免疫组织化学染色方法测定2 0 个病人的胃癌组织，癌旁 组织，正常组织中b e t ai g - h 3 的表达。每张切片随机照取五张照片，用 i m a g e - p r o p l u s 软件计算每张照片的阳性面积占整张照片面积的比例，及 每组( 胃癌、癌旁、正常) 的平均阳性面积比，统计学软件s p s s1 7 o 处 理各组之间的统计学差异。 结果：b e t ai g h 3 在胃癌中低表达，平均阳性面积比为o 0 4 7 l o 0 4 8 3 ， 在正常组织，癌旁组织高表达，平均阳性面积比分别为o 1 9 1 3 o 0 8 1 5 o 1 6 9 2 o 1 2 8 7 。三者比较差别有统计学意义p o 0 5 。表达部位位于正常 胃腺组织上皮细胞细胞质中。胃癌组织与正常组织比较差别有统计学差异 尸 o 0 5 。在不同类型的胃肿瘤中b e t ai g - h 3 均低表达。 结论：b e t ai g h 3 在胃癌组织中低表达，在胃高分化腺癌和中低分化 腺癌中表达无差异，b e t a 培h 3 可能抑制胃癌的发展。 关键词：b e t ai g h 3 ，胃癌，免疫组织化学，t g f b ，肿瘤抑制因子。 英文摘要 r n 1 一 j 。l 。n ee x d r e s s l o na n ds l g n l n c a n t0 tb e t al g n jl ng a s t r l cc a n c e r a b s t r a c t b e t ai g - h 3i sae x 仃ac e l l u l a rm a t r i xp r o t e i n ，w h i c hi ss e c i i e t e db ym a n y c e l l s i tc o n s i s t so ff o u rc o n s e r v e di n t e m a lh o m o l o g o u sd o m a i n s i tc o n t a i n sa a r g g l y - a s p ( r g d ) s e q u e n c ea tct e m i n a lt h a tc a nc o m b i n ei n t e g r i nw h i c hi s ag l u c o p r o t e i nl o c a t i n ga tc e l ls u r f a c e ，t h e nt h ec o m p l e xm e d i a t e si n t e r a c t i o n b e t w e e nc e na n dc x 仃ac e l l u l a r m a t r i x ， a n dm e d i a t e sc e l l a d h e s i o n ， p r 0 1 i f e r a t i o n ，m i g r a t i o n ，a i l dd i f f e r e n t i a t i o n b e t ai g - h 3g e n ei su b i q u i t o u s l y e x p r e s s e di nm a n y h u m a nn o m a lt i s s u e se x c 印tf o rb r a i nt i s s u e i t sd i 虢r c i n t l y e x p r e s s e di nm a n yt u m o rt i s s u e s t h er g ds e q p e n c ec a nc o m b i n ed i f j e ：酹e n t i n t e 哂n si nd i 疏r e n tc e l l sa n dt i s s u e s ，m e np l a yd i 行e r e n tr o l e s ，i tc a nc o m b i n e i n t e r i g i n0 【v p 5 ，t h e np r o m o t ec o l o nc a n c e rc e l l m i g r a t i o n ；c o m b i n e si n t e 打g i n 仅3pl ，t h e np r o m o t eh e p a t o m ac e l l s i n v a s i o n t h eg e n ee n c o d i n gb e t ai g - h 3 p r o t e i nl o c a t e si nc h r o m o s o m e5 q 31 ，t h a ts o m e t i m e sm u t a t i o n so rl o s e si n m a n yt u m o r sa n dd i s e a s e s t h em o u s ed e l e t e do fb e t ai g - h 3g e n ep r o d u c e d s p o n t a n e o u st u m o re a s i l y t r a n s f e c t i n g6 9 细谤办3g e n ei n t oc h i n e s eh 锄s t e r o v a 叫( c h o ) f i b r o b l a s t sh a sb e e ns h o w nt o m a r k e d l y r e d u c et h e i r t u m o 订g e n i c i t yi nm l d em i c e t h a ts h o w sb e t ai g h 3i sa s s o c i a t e dw i t ht u m o r b u te x p l e s s i o no fb e t ag i h 3d 印e n d so nt h et y p eo fc e na n dt i s s u e ，a l s ot h e e f f e c to fb e t ai g - h 3d e p e n d so nt h et y p eo ft i l m o r ，i n c l u d i n gp r o m o t i n ga n d s u p p r e s s i o n b e t ai g - h 3c o u l dp r o m o t ea d h e r s i o na n dm i g r a t i o no fc a n c e rc e l l i nc o l o nc a i l c e ra n dh 印a t o m a ，a n ds u p p r e s sn e u r o b l a s t o m ad e v e l o p i n gi n 1 ，玉旷口 o b je c t i v e ：w - em e a s u r e dt h ee ) 【p r e s s i o no f b e t ai g - h 3i ng a s t r i cc a n c e r t i s s u e t h e ns u p p l yh e l p sf o rs t u d 姐n gm o l e c u l a rm e c h a n i s mo fg a s t r i c t u m o r i g e n e s i sa n d t h et h e r a p y t a 唱e to fg a s t r i cc a n c e r m e t h o d ：m e a s u r e dt h ee x p r e s s i o no f b e t ai g - h 3i ng a s t r i cc a n c e rt i s s u e ， p a r a g a s t r i c c a r c i n o m at i s s u ea n dn o 衄a l g a s t r i c t i s s u ew i t h i m m u n o h i s t o c h e m i s t 叫e v e 拶s l i c eh a sb e e nt a k e nf i v ep i c t u r e sr a n d o m l y ，a n d 3 英文摘要 m e 豳u r e dt 1 1 ep r o p o n i o no fp o s i t i v ea r e ai ne v e wp i c t l l r cw i t l li m a g e - p r o - p l u s s o 脚a r e ，m e nc o m p u t e dt h ea v e r a g ep r o p o n i o no fp o s i t i v ea r e ao fe v e 拶 p a t i e n ta n do fe v e 巧g r o u p e v a l u a t e ds t a t i s t i cd i f f e r e n c e sa m o n gt h eg r o u p s w i t hs t a t i s t i cs o f h a r es p s sl7 0 r e s u l t ：t h ee x p r e s s i o no fb e t ai g h 3i sd o w n r e g u l a t e di ng a s t r i cc a n c e r t i s s u e ，a n du p r e g u l a t e di nn o n n a lg a s t r i ct i s s u ea n dp a r a g a s t r i cc a r c i n o m a t i s s u e ，t h ep r o p o r t i o no fp o s i t i v ea r e ao ft h et l l i e eg r o u p sr e s p e c t i v e l yi s o 1913 士o 0 814 ，o 16 9 2 士o 12 8 7 ，o 0 4 71 1 1 1 e r ei ss t a t i s t i c d i f f e r e n c e 锄o n g t h e m ( p o 0 5 ) t h e r ei ss t a t i s t i cd i f - f e r e n c eb e t w e e ng a s t r i cc a r c i n o m at i s s u e a n dn o 咖a lg a s t r i ct i s s u e ( 户l o 0 5 ) ，a n da m o n g d i f f e r e n t t y p e s o f g a s t r i c c a 蚤c i n o m a c o n c l u s i o n ：t h ee x p r e s s i o no f b e t ai g - h 3i sd o w n r e g u l a t e di ng a s t r i c c a n c e rt i s s u e ，t h e r ei si l od i f f e r e n c eb e 陬r e e nh i g h - g r a d ea d e n o c a r c i n o m aa n d 1 0 w m i d d l e g r a d ea d e n c o r c i n o m a ，b e t ai g - h 3m a y b es u p p r e s st h ep r o d u c t i o n a n dd e v e l o p m e n to fg a s t r i cc a n c e r k e yw o r d ：b e t ai g - h 3 ，g a s t r i cc a n c e r ，i 1 1 1 】m l l n o h i s t o c h e m i s 仃y ，t g f - p ， n l m o ri n h i b i t o r 4 研究论文 b e t aig h 3 在胃癌中的表达及意义 - j 一 刖曷 b e t ai g h 3 最早发现于转化生长因子b e t a ( t r a n s f o m i n gg r o 州h f a c t o r - b e t a ，t g f b ) 诱导人肺腺癌细胞产生的一种细胞外基质蛋白【1 1 ， 6 3 8 个氨基酸组成，6 4 l 大小。其内部由四个结构相同的高度保守结构 域组成，其碳端含有一个精氨酸甘氨酸天冬氨酸结构( a r g g l y - a s p ， r g d ) ，r g d 结构在不同组织中和不同的整合蛋白结合从而调节b e t ai g - h 3 与细胞外基质其他的组成成分结合及调节细胞、肿瘤细胞的粘附、增殖、 迁移、分化【2 矧。b e t ai g - h 3 广泛存在于机体的多种器官中【7 】，在机体的损 伤、炎症反应及一些疾病状态均有高表达【8 。1 们。其可以抑制血管的发生， 尤其是肿瘤血管【5 1 。人b e t ai g - h 3 基因位于第五染色体长臂31 位点，在多 种疾病及肿瘤中其常常突变、丢失【1 1 。1 3 】。其对于细胞的生长及迁移作用说 法不一。基于b e t ai g - h 3 的这些特点，其与肿瘤的关系也相当密切。z h a n g y 等人指出b e t ai g - h 3 基因的缺失可以促进自发性肿瘤的产生【1 4 】。肿瘤的生 成、发展及转移是一个复杂的过程，其包括了血管的生成，细胞的粘附， 细胞外基质蛋白水解酶的降解，及多种活性因子促进细胞的转移。b e t a 涪h 3 在肿瘤中起到促进作用还是抑制作用依赖于组织来源与肿瘤的类型 而定，b e t ai g - h 3 的表达高低情况与肿瘤的形成及肿瘤获得转移的能力有 关。已经有人研究b e t ai g - h 3 在多种肿瘤中的表达及其与肿瘤发生及转移 的关系，但在胃癌中b e t ai g - h 3 的表达及相关机制尚未有人研究，本实验 主要研究b e t ai g - h 3 在胃癌中的表达情况。 研究论文 材料与方法 1 材料 人的胃组织( 癌、癌旁、正常) 石蜡标本河北医科大学第四医院 2 仪器 z d 8 5 气浴恒温振荡器 a 1 2 0 4 电子天平 保湿盒 海尔l c 1 5 9 冰箱 b x 5 1 电子显微镜 3 试剂 b e t a 涪h 3 多克隆抗体 s p 9 0 0 1 试剂 d a b 显色试剂盒 磷酸氢二钠 磷酸二氢钠 柠檬酸 柠檬酸三钠 氯化钠 二甲苯 无水乙醇 4 主要试剂配方 江苏金坛亿通电子有限公司 梅特勒一托利仪器有限公司 协力塑料制品厂 青岛海尔集团 日本o l y m p u s 圣克鲁斯生物技术公司 北京中衫金桥有限公司 北京中衫金桥有限公司 北京益利精细化学品有限公司 北京北化精细化学品有限公司 北京益利精细化学品有限公司 = 匕京北化精细化学品有限公司 天津市红岩化学试剂厂 天津永大化学试剂有限公司 天津永大化学试剂有限公司 p b s ：磷酸二氢钠o 4 5 9 磷酸氢二钠3 2 3 9 氯化钠8 o g 加蒸馏水至1 0 0 0 “ 调p h 值为7 2 7 4 柠檬酸缓冲液：柠檬酸o 4 9 柠檬酸三钠3 o g 加蒸馏水水至1 0 0 0 m l 研究论文 调p h 值为6 o 5 实验方法 将标本分为三个组即：正常组，癌旁组，胃癌组，同时设立阴性对照 组：p b s 代替一抗。 5 1 切片 5 2 脱蜡浸水 5 2 1 二甲苯i2 0 m i n 5 2 2 二甲苯i i2 0 m i n 5 2 3 1o o 酒精5 m i n 5 2 4 1 0 0 酒精5 m i n 5 3 59 5 酒精5 m i n 5 3 69 0 酒精5 m i n 5 2 78 0 酒精5 m i n 5 2 87 0 酒精5 m i n 5 3 高压热修复 先高压锅内蒸馏水加热至沸腾，然后将柠檬酸缓冲液用微波炉高火加 热1 m i n ，将组织切片放入缓冲液中，再置于高压锅中。待高压锅安全阀 压起后两分钟即刻放气，取出自然冷却。 蒸馏水冲洗5 m i n p b s 冲洗3 m i n 木3 5 4 滴加3 过氧化氢3 7 孵育l o m i n p b s 冲洗3 m i n 木3 5 5 滴加正常山羊血清封闭液3 7 孵育2 5 m i n 倾去勿洗 5 6滴加稀释的一抗既b e t ai g - h 3 多克隆抗体1 蚓2 0 0 0 山，阴性对照组采 用p b s ，4 孵育3 - 4 h ，然后3 7 孵育1 1 5 h p b s 冲洗3 m i n 宰3 5 7 滴加生物素化的二抗3 7 孵育1 5 m i n p b s 冲洗3 m i n 水3 5 8 滴加辣根酶标记的卵白素工作液3 7 孵育1 5 m i n p b s 冲洗3 m i n 宰3 研究论文 5 9d a b 显色3 4 m i n ，自来水终止显色 5 1 0 核复染1 5 m i n ( 苏木素) 盐酸酒精分化3 0 s 氨水反蓝3 0 s 5 1 1 梯度酒精脱水 5 1 1 17 0 酒精l m i n 5 1 1 28 0 酒精l m i n 5 1 1 39 0 酒精1 m i i n 5 1 1 49 5 酒精1 m i n 5 1 1 51 0 0 酒精l m i n 5 1 1 61 0 0 酒精1 m i n 5 1 2二甲苯透明 5 1 2 1二甲苯1 1 2 m i n 5 1 2 2 二甲苯i2 m i n 5 1 3 中性树胶封片 5 1 4 显微镜下观察结果 6结果处理 6 1 每张切片随机取五个视野并拍摄照片4 0 0 。 6 2 用i m a g ep r 0 p l u s 软件计算每张切片的阳性表达占整个切片的面积 比。计算每组标本的平均阳性面积比。 6 3 s p s s1 7 o 统计学软件处理数据，采用多个相关样本的非参数衔e d m a n 检验，正常组与癌旁组采用两相关样本非参数w i l c o x o n 检验，正常组与 癌组采用两相关样本非参数w i l c o x o n 检验，癌旁组与癌组采用两相关样 本非参数w i l c o x o n 检验。 研究论文 结果 lb e t ai g - h 3 在胃癌组织中低表达 我们得到在正常胃组织中b e t ai g - h 3 高表达，f i g 1 a 可见大量的黄褐 色颗粒沉积物。在胃癌旁组织中b e t a 涪h 3 亦有表达( f i g 2 a ) 。在胃癌组 织中b e t ai g h 3 低表达，少见黄褐色颗粒沉积物( f 培3 a ) 。在阴性对照组 中未见黄褐色颗粒( f i g 1 b ，f i g 2 b ，f i g 3 b ) 。胃癌、癌旁、正常组织各个标 本的阳性面积比见t a b l e 1 。三组间差别有统计学意义( 尸 o 0 5 ) 。 4b e t ai g - h 3 的表达与胃不同类型肿瘤的关系 我们实验的标本中有胃腺癌、胃小细胞癌、胃透明细胞癌等。而b e t a i g - h 3 在不同类型的胃癌中均低表达( f i g 6 ) 。限于非腺癌的标本较少，未 作统计学分析。 9 研究论文 附图 f i g 1t h en o r m a ig a s t r i ct i s s u e ( a 4 0 0 ) a n dt h ec o n t r o ln o r m a l g a s t r i ct i s s u e ( b4 0 0 ) t h et i s s u e sw e r ei m m u n o s t a i n e dw i t ha na m i b e t a i g 。h 3p o l y c l o n a la n t i b o d y ，t h ep o s i t i v es t a j n i n gf o rb e t ai g - h 3p r o t e i ni ss h o 、n i nar e d d i s h b r o 、v nc o l o r ，w h i l et h er e d d i s h - b r o 、】mc o l o ri s o b s e e dm n 0 1 m a l g a s t r i ct i s s u e ( a ) ，b u tn o ti nc o n t r o ln o r m a lg a s t r i ct i s s u e i ts h o w s e x p r e s s i o no fb e t ai g - h 3i nn o r m a lg a s t r i ct i s s u e f i g 2p a r a g a s t r i cc a n c e rt i s s u e ( a 4 0 0 )a n dc o n t r o ip a r a g a s t r i c c a n c e rt i s s u e ( b 4 0 0 ) r e d d i s h - b r o w nc o l o ri so b s e e di np 哪g a s t r i c c a n c e rt i s s u e ，b u tn o ti nc o n t r o lp a r a g a s t r i cc 锄c e rt i s s u e i ts h o w s e x p r e s s i o n l o 研究论文 o fb e t a i g h 3 i i l p a r a g a s t r i cc a n c e rt i s s u e i n f a c tt h e r ei sn od i f 诧r e n c e o td e t al g h 3m p a r a g a s t r l cc a n c e rt i s s u e i nf a c tt h e r ei sn od if 凫r e n c e b e 俩e e nn o m a la n dp a u r a g a s m ct i s s u ef o r p a t l l o l o g y f i g 3 g a s t r i cc a n c e rt i s s u e ( a 4 0 0 ) a n dc o n t r o lg a s t r i cc a n c e rt i s s u e ( b 4 0 0 ) t h e r ei sn or e d d i s h - b r o w nc o l o ri nb o t hg a s t r i cc a n c e rt i s s u ea n d c o n t l o lg a s t r i cc a n c e rt i s s u e ，i ts h o w sl i t t l e e x p r e s s i o no fb e t ai g _ h 3i 1 1t h e t i s s u eo f g a s t r i cc a n c e r ( a ) 1 1 研究论文 f ig 4t h en o m a l g a s t r i ct i s s u ei m m u n o s t a i n e dw i t ha na n t i - b e t ai g _ h 3 p o l y c l o n a la n t i b o d y ，a n dt h ep o s i t i v es t a i ni sr e d d i s h - b r o w nc o l o r t h en u c l e u s s h o wb l u ec o l o r t h ea n t i g e n - a n t i b o d y c o m p l e xd 印o s i t s a tc y t o p l a s m ( a 4 0 0 ) ，n o ts h o wa te x t r ac e l lm 撕x ( b 4 0 0 ) a n da tc e ns u r f a c e ( c 4 0 0 ) fig 5h i g h - g r a d ea d e n o c a r c i n o m a ( a 4 0 0 )a n d m i d d i e 1 0 w g r a d e a d e n o c a r c i n o m a ( b 4 0 0 ) t h e r ei sn os p e c i a ls t a i ni nb o t ho ft h et i s s u e s 1 2 研究论文 fig 6t h es m a uc e i ic a n c e r ( a 4 0 0 ) a n dt h ec i e a nc e l ic a n c e r ( b 4 0 0 ) 1 1 1 e r ei sn os p e c i a ls t a i ni nb o t ho ft h et i s s u e s 1 3 研究论文 附表 7 i a b l elt h em e a n p o s i t i v ea r e ar a t e so f 2 0p a t i e n t s 1 4 研究论文 讨论 胃癌是我国最常见的恶性肿瘤之一，其发生率居于癌症发生率中的第 四位，约占胃恶性肿瘤的9 5 以上。胃癌的发生是一个多步骤，多因素 共同作用的结果，其中癌基因与抑癌基因保持相对的平衡，一旦这种平衡 被打破，及其他一些生长因子的参与胃粘膜会发生病变逐渐进展，胃癌即 发生【15 1 。同样其他一些肿瘤的发生均是机体平衡被打破，一些基因突变 或者丢失，多种因子相互作用使得细胞与细胞间，细胞与细胞外基质问发 生了病态的作用，从而促使了肿瘤的产生及转移。那么细胞与细胞之间， 细胞与细胞外基质间的相互作用由一些因子调控，b e 协i g - h 3 即是一种细 胞外基质蛋白，其作用如何呢? b e t ai g 1 1 3 是一种细胞外基质蛋白，由6 3 8 个氨基酸组成的蛋白质， 6 4 l 大小。b e t ai g h 3 内部氨基酸序列中含有四个相同的结构域，每个 结构域由1 4 0 个氨基酸序列构成，为高度保守的同源结构( f a s l ) ，与 成束蛋白同源。人的b e t ai g - h 3 其n 端是含有2 3 个氨基酸的信号序列，提 示b e t ai g h 3 是一种分泌蛋白。其c 端有一个精氨酸甘氨酸天冬氨酸的 序列( a r g g l y - a s p ，r g d ) 【l 2 】，这一基序多见于纤维连接蛋白、胶原等 细胞外基质成分，可与整合蛋白( 一种细胞膜跨膜蛋白由ab 两条链组成， 是细胞表面粘附受体) 结合并调节其与其他细胞外基质组成部分结合，从 而与细胞的粘附、增殖、迁移、分化有关【2 棚。b e t ai g - h 3 广泛的表达于人 的正常组织，在心脏、胎盘、肝脏、脾脏、小肠和外周血白细胞中均高表 达，而在胰腺、肾脏、胸腺、睾丸和卵巢中表达相对于前者较低r 7 1 。b e t a i g - h 3 在机体的一些疾病下高表达，如在组织损伤，动脉粥样硬化，心肌 损伤，及血栓形成【l o 1 7 】。 b e t ai g - h 3 起初是由t g f p 诱导肺腺癌细胞产生的【l 】，t g f p 是调节 细胞生长和分化的t g f p 超家族，机体多种细胞均可分泌非活性状态的 t g f p ，一般在细胞分化活跃的组织常含有较高水平的t g f d ，如成骨细 胞、肾脏、骨髓和胎肝的造血细胞。几乎所有肿瘤细胞内可检测到t g f d m 对峪。t g f p l 与原癌基因表达有关：t g f p 1 能诱导c s i s 的表达，但 抑制c m y c 的表达，这种诱导或抑制作用与作用细胞种类及t g f b 的不 同功能有关。如t g f p 诱导成纤维细胞中c s i s 基因表达，与促进其在软 研究论文 琼脂中生长有关；而对上皮角朊细胞生长的抑制则与抑制c m y c 基因表达 有关。那么由t g f b 诱导出来的b e t ai g - h 3 与肿瘤关系又如何呢? b e t a i g - h 3 基因在多种肿瘤中突变或者丢失，如：食管癌、肺癌【1 2 - 1 3 】。将b e t ai g - h 3 基因转导入石棉诱导的成肿瘤细胞中抑制其在小鼠中的生长【7 1 。体内研究 指出将b e t ai g - h 3 基因转导入c h o 成纤维细胞中也可以减少其在裸鼠中 的致癌作用【1 9 】，b e t ai g _ h 3 基因的缺失可以促进自发性肿瘤的产生【1 4 】，这 些都表明b e t ai g - h 3 与肿瘤的关系密切。 m ac v l 2 】等人做的实验证实b e t ai g - h 3 在结肠癌中高表达且通过改变 血管的通透性促进结肠癌细胞的转移【2 0 1 。但b e t ai g h 3 在食管癌中低表达。 同样是消化道的肿瘤，但b e t ai g - h 3 的表达不一，那么在胃癌中表达如何 呢? 不希望看到的是，通过我们的实验表明b e t ai g - h 3 在胃癌中低表达。 然而这却也表明了b e t ai g - h 3 在组织中的表达依赖于组织与肿瘤的类型。 那么到底b e t ai g h 3 与肿瘤的关系如何呢? 是促进作用还是抑制作用呢? 目前的研究尚无定论。在结肠癌、肝癌中b e t ai g - h 3 表达上调【2 0 2 1 1 ，并促 进细胞的粘附、侵及。在肺癌、乳腺癌中b e t ai g - h 3 表达下调抑制肿瘤的 生长僻，2 4 1 ，且b e t ai g h 3 在肺非小细胞癌中反应肿瘤对化疗药物的疗效反 应【2 4 1 。此外b e t ai g _ h 3 还调节血管内皮细胞问的链接，从而破坏血管内皮 的完整性，利于肿瘤细胞的穿过【2 0 】，还可以抑制肿瘤血管的发生【5 】。前面 已经提到在食管癌中低表达【1 2 】，在结肠癌，及转移结肠癌中高表达【2 0 1 ， 且其在结肠癌中在高分化腺癌中过表达。那么同样是消化道黏膜上皮，同 样是消化腺体组织，为什么表达不一呢? 这也在一定程度上反映了b e t a i g - h 3 在不同肿瘤中的作用不一，在结肠癌中其高表达促进癌细胞的迁移， 而b e t ai g - h 3 在胃癌中的低表达，我们猜想其可能起到抑制胃癌生长、转 移的作用。那么b e t ai g h 3 在胃癌中起什么作用，机制如何呢? 这引发了 我们一系列的思考：b e t ai g - h 3 基因在胃癌中被沉默了还是突变、丢失? b e t ai g - h 3 在胃癌中是抑制细胞的粘附，迁移? 还是对血管上皮细胞间的 链接起作用? 还是调节肿瘤血管的发生呢? 这些还有待进一步的实验证 实。 在我们的实验标本中有高分化腺癌，中低分化腺癌。在不同分化肿 瘤中b e t ai g h 3 均低表达。在这些肿瘤中有不典型增生的，有侵及黏膜下 层的，有侵及肌层的，有侵及全层的，这表明b e t ai g - h 3 在胃肿瘤发生伊 研究论文 始即低表达，而在正常组织高表达，那么在一定程度上反映b e t ai g - h 3 与 胃癌的发生有关，而不是胃癌的发生及进展过程中产生的相关因子使得 b e t ai g - h 3 基因突变、丢失，沉默，从而影响b e t ai g - h 3 的表达情况。可能 在胃癌发生前b e t ai g - h 3 基因突变或者丢失，进而产生的影响促进了肿瘤 的发生。z 1 1 a oy l 【1o 】等人指出b e t ai g - h 3 是一个抑癌因子，其缺失表达在 肿瘤形成中起到了重要作用。z h a n gy 【1 4 】等人指出b e t ai g - h 3 基因的缺失 可以促进自发性肿瘤的产生。那么我们猜想b e t ai g h 3 基因很可能是一个 抑癌基因，其与癌基因平衡关系被一些致癌因子打破，从而导致了胃癌的 发生。 b e t ai g - h 3 是一种分泌蛋白，同时是一种细胞外基质蛋白。在我们的 实验结果中可以看出b e t ai g h 3 表达在细胞质中，在细胞核，细胞膜，及 细胞外基质中未见表达。这在一定程度上表明b e t ai g - h 3 是由胃腺上皮细 胞分泌。然而b e t ai g - h 3 可以和一些细胞外基质的其他组成成分结合，如 与胶原、粘连蛋白结合【2 5 1 ，其r g d 结构可以和不同的整合蛋白结合【4 蛔， 而整合蛋白是一个细胞膜表面的受体，那么在细胞膜表面应该有b e t a i g - h 3 与整合蛋白的结合复合物，在细胞外基质中也可以见到b e t ai g h 3 与胶原等细胞外基质成分结合的复合物，但在我们的结果中不想看到的是 在细胞外基质及细胞膜表面中未见表达。有研究指出b e t ai g - h 3 与胶原结 合很松弛，需要一些大分子糖蛋白如：核心二聚多糖等，来稳固这种结合 复合物【2 5 1 ，在我们的这种石蜡标本固定，保存及标本的热修复中这些大 分子糖类物质可能丢失而导致b e t ai g - h 3 与胶原等细胞外基质的一些组成 成分结合松弛至断开，从而得到b e t ai g - h 3 在细胞外基质中未见表达的结 果。 我们的实验指出在腺癌，透明细胞癌，胃小细胞癌中均低表达，然 而由于非胃腺癌的标本量太少，所以未行统计学分析，但可以一定程度上 反映b e t ai g 1 1 3 在原发于胃的未转移的肿瘤中低表达。在转移的结肠癌中 b e t ai g - h 3 高表达【2 0 】，那么在转移的胃癌中表达如何及其起到什么作用 呢? 尚待进一步的实验证实。 研究论文 结论 b e t ai g - h 3 在胃癌组织中低表达，在高分化与中低分化胃腺癌组织中表 达无差异，b e t ai g h 3 可能抑制胃癌的生长。 研究论文 参考文献 1 s k o n i e rj ，n e u b a u e rm ，m a d i s e nl ，e ta 1 c d n ac l o n i n ga n ds e q u e n c e a n a l y s i 多o f b e t ai g - h 3 ，an o v e lg e n ei n d u c e di nah u m a na d e n o c a r c i n o m a c e l ll i n ea r e rt 陀a t m e n tw i t ht 啪s f o 彻i n gg r o 、玑hf a c t o r _ b e t a ，d n ac e n b i o l ，1 9 9 2 ，1 1 ( 7 ) ：5 l1 5 2 2 2k i mj e ，k i ms j ，l e eb h ，e ta 1 i d e n t i f i c a t i o no fm o t i f sf o rc e l la d h e s i o n w i t h i nt h er e p e a t e dd o m a i n so ft r a n s f o n n i n gg r o w t hf a c t o 卜b e t a - i n d u c e d g e n e ，b e t a i g - h 3 ，jb i o lc h e m ，2 0 0 0 ，2 7 5 ：3 0 9 0 7 15 3k i mj e ，k i ms j ，j e o n gh w ：e ta 1 r g dp 印t i d e sr e l e a s e df b mb e t ai g - h 3 ， at ( 3 f - b e l a i n d u c e dc e l l - a d h e s i v em o l e c u l e ，m e d i a t ea p o p t o s i s ，o n c o g e n e ， 2 0 0 3 ，2 2 ( 13 ) ：2 0 4 5 - 2 0 5 3 4p a r ks w ：b a ej s ，k i mk s ，e ta 1 b e t ai g - h 3 p r o m o t e sr e n a lp r o x i m a l t u b u l a r 印i t h e l i a lc e l la d h e s i o n ，m i g r a t i o na n dp r o l i f e r a t i o nt h r o u g ht h e i n t e r a c t