（农药学专业论文）新型喹唑啉类衍生物合成及生物活性研究.pdf

贵州大学2 0 0 6 届博士研究生学位论文 中文摘要 近几年来，喹唑啉类农药和医药表现出良好的生物活性。成为化学界和生物学界学者们 研究的热点之一。在医药方面，其对e g f 受体( e g f r ) 产生抑制作用，进而表现出抗癌活 性。此外，喹唑啉类化合物还具有抗疟、抗肿瘤和抗h 1 v 活性；还可用于治疗良性前列腺 增生和肥大；作为受体阻滞剂，在心血管疾病的防治中占据较为重要的作用：可预防动 脉粥样硬化和冠心病。农药方面，特别是喹唑啉肟醚类化合物具有抗烟草花叶病毒( t h d v ) 、 黄瓜花叶病毒( c m v ) 的活性及抗植物病菌活性。 为了创制高效的抗癌或抻菌活性的药物，寻找治疗癌症或植物病菌的新靶点，指导开发 治疗癌症或抗植物病菌的新靶标药物，本论文以p d1 5 3 0 3 5 为先导化合物，设计合成了四类 新型喹唑啉类化合物，进行医药和农药的联合开发。对四类目标化合物的合成方法进行了研 究：( i ) 第一类：以邻氨基苯甲酸为原料，经甲酰胺闭环，五氯化磷和三氯氧磷氯化，经 芳香胺的4 一位胺化反应，合成了- 取代- 4 胺基喹唑啉类化合物1 5 个( 编号：i ) ，经i r 、 m s 、1 hn m r 、”cn m r 和元素分析确证了化合物结构。( i i ) 第二类：从邻氨基苯甲酸出 发，经单氯化或双氯化，合成5 氯- 2 氨基苯甲酸或3 。5 二氯2 氨基苯甲酸，经甲酰胺闭环， 五氯化磷和三氯氧磷氯化，经芳香胺的4 一位胺化反应，合成了氯代- 取代4 - 胺基喹唑啉类 化合物6 个( 编号：i i ) ，经1 r 、m s 、1 h n m r 、”c n m r 和元素分析确证了化合物结构。 ( i i i ) 第三类：从没食子酸出发，经硫酸二甲酯醚化、甲醇酯化、硝酸硝化、碱性水解、二 氯化锡还原、甲酰胺闭环、三氯化磷氯化、芳香胺的4 位胺化等八步骤，合成了6 ，7 ，8 三甲 氧基4 胺基取代喹唑啉类化合物1 9 个( 编号：i l i ) 经i r 、1 hn m r 、1 n m r 和元素分 析确证了化合物结构。( i v ) 第四类：以4 氯代喹唑啉类化合物与芳香硫酚在碳酸钾存在下， 丙酮中回流反应，合成了娶取代- 4 硫醚类喹唑啉化合物7 个( 编号：) 经瓜、1 h n m r 、 ”cn m r 和元素分析确证了化合物结构。共合成了目标化合物4 7 个。 对中间体和目标化合物的合成方法进行了合成条件筛选，特别是对关键中间体2 氨基 3 , 4 ，5 三甲氧基苯甲酸的合成方法进行了研究，另外还对2 甲基6 ，7 ，8 三甲氧基喹唑啉- 4 酮 类化合物作了初步合成探讨。 采用微波辐射催化的绿色合成方法对部分化合物的胺化取代一步与传统的合成方法做 了对比，结果表明，微波催化下能很好的促进胺化取代反应的进行，缩短了反应时间，提高 了产率。从传统方法的反应时间1 2h 缩短到2 0m i n ，产率从2 4 4 5 1 3 提高到7 9 1 9 6 5 。 目标化合物及中间体采用生长速率法，以小麦赤霉病菌( f u s a r i u mg r a m i n e a r u m ) 、苹 果腐烂病菌( c y t o s p o r am a n d s h u r i c a ) 和辣椒枯萎病菌( f u s a r i u mo x y s p o r u m ) 为测试对象， 对目标化合物进行了初步抗植物病菌活性筛选。结果表明部分目标化合物具有一定的抑菌 活性，如化合物i n 在药剂浓度为5 0 0 吲m l 下，对小麦赤霉病菌、苹果腐烂病菌、辣椒枯 萎病菌的抑制率分别为8 9 0 8 、7 2 2 1 、7 6 6 8 ，与对照药剂恶霉灵在相同药剂浓度下的 抑制率相当；目标化合物i l 在药剂浓度为5 0 | i g m l 时，对小麦赤霉病菌的抑制率为4 7 9 4 ， 与对照药剂恶霉灵在相同药剂浓度下的抑制率相当，但在此药剂浓度下对苹果腐烂病菌和辣 椒枯萎病菌的抑制率分别为：6 0 0 6 和7 1 9 9 ，均优于对照药剂恶霉灵在相同药剂浓度下 的抑制率：目标化合物i 、，7 在药剂浓度为5 0p g m l 下，对三种植物病菌的抑制率均优于对 照药剂恶霉灵在相同药剂浓度下的抑制率。选定化合物i v 7 对辣椒枯萎病菌，测定了对病菌 的毒力( e c ，。) 建立了其线性回归方程，并对药剂处理后辣椒枯萎病菌体细胞中的可溶性 蛋白含量、还原糖含量、几丁糖含量、几丁质酶活性进行了测定。结果表明，目标化合物 i 对辣椒枯萎苗丝细胞的蛋白合成没有影响：在所设定的时间内，菌体内还原糖含量、几 丁糖含量、几丁质酶活性一直低于对照。可以初步推测，目标化合物i v ，处理后对辣椒枯萎 菌丝的作用方式为抑制菌丝体内几丁质酶的活性，进而影响菌体内还原糖含量、几丁糖含量， r 贵州大学2 0 0 6 届博士研究生学位论文 从而破坏菌丝细胞细胞壁的合成与分解平衡，影响菌丝的生长。 部分目标化合物进行抑制p c 3 、b c a p - 3 7 和b g c 8 2 3 三种癌细胞增殖实验。结果表明， 化合物如i 、k 和玛分别具有良好抑制活性。m t l 法测试表明，当药剂浓度为lp e , m l ( 3 4 l a n o l l ) ，化合物i 抑制率为8 8 6 ；当药剂浓度为5 吲l l l l ( 1 7 3g m o l l ) ，化合物i n 抑制 率为8 0 o 。化合物2 抑制率为8 8 6 ；化合物h 2 在药剂浓度为9 “g m l ( 2 5 1v , m o l l ) 时。 对p c 3 细胞增殖抑制率达7 0 以上。 部分目标化合物采用免疫印迹法进行抗磷酸化生物活性测定结果表明，在药剂浓度为 1 0f a n o l l ，目标化合物互对e g f 刺激的e r k i 2 磷酸化有良好抑制作用，但对p d g f 刺激 无抑制作用，其作用机制极有可能是通过抑制e g f r 磷酸化从而抑制其下游蛋白磷酸化， 由此阻断细胞信息传导进而抑制细胞增殖。浓度梯度试验表明，化合物1 6 在0 5l u n o l l 时 具有抑制e r k i 2 的磷酸化。 关键词：喹唑琳，邻氨基苯甲酸，没食子酸，合成抑菌活性，抗癌活性 生物活性 中图分类号：$ 4 8 2 贵州大学2 0 0 6 届博士研究生学位论文 a b s t r a c t i nr e c e n ty e a r s ，q u i n a z o l i n ec o m p o u n d st a k eo ng o o db i o l o g i c a la c t i v i t yi nm a d i c i n ea n d p e s t i c i d ea s p e c t w i t hs y n t h e s i sa n db i o a c t i v i t ys t u d yo fq u i n a z o l i n ec o m p o u n d sd e v e l o p i n g ，i t s b e c o m eo n eo faf o c u s e s s t u d i e df i e l dt oc h e m i c a l sa n db i o l o g i c a ls c h o l a r s i nm e d i c i n ea s p e c t , q u i n a z o l i n ec o m p o u n d sh a v ei n h i b i t i o no ne g fr e c e p t o r ( e g f r ) ，a n dt h e nd e m o n s t r a t et h e a n t i c a n c e ra c t i v a t i o n i na d d i t i o n , q u i n n z o l i n ec o m p o u n d ss t i l lr e s i s tm a l a r i aa n dh i v , t r e a tb e n i g n p r o s t a t eg l a n dh y p e r 0 1 a s i aa n dl o o s e i np e s t i c i d er e s p e c t , q u i n a z o l i n eo x i m ee t h e rc o m p o u n d s h a v eg o o db i o l o g i c a la c t i v i t yt oa n t i - n 订vc m va n df i m g a l i no r d e rt oc r e a t em o r eh i g h - e f f i c i e n ta n t i c a n c e rm e d i c i n eo rf u n g i c i d e ，l o o kf o rt h en o w t a r g e tw h i c ht r e a t sc a n c e ro rp l a n tf u n g i c i d e ，g u i d ea n dd e v e l o pt h en e wt a r g e tm e d i c i n eo r p e s t i c i d et ot r e a tc a n c e ro rp l a n tf u n g i c i d e ，r e g a r d i n gp d1 5 3 0 3 5a st h el e a d i n gc o m p o u n d , w e d e s i g na n ds y n t h e s i z ef o u rk i n d so f n e w - t y p eq n i n a z o l i n ec o m p o u n d s ：( i ) a n t h r a n i l i ca c i dt a k e n a sl a wm a t e r i a l s ，c y c l e db yf o r m a m i d e ，c h l o r i n e db yp h o s p h o m sp e n t a c h l o r i d ea n dp h o s p h o f o s o x y c h l o r i d e , a n dt h e nr e a c t e dw i t ha r y la m i n et og e tn - s u b s t i t u t e d - 4 - a m i n e q u i a n z o l i n e ，1 5 c o m p o t m d sa r es y n t h e s i z e d t h es t n a c t u r eo fa l l1 5c o m p o u n d si sc h a r a c t e r i z e db yi r , m s h n m r , ”cn m ra n de l e m e n t a la n a l y s i s ( ) t a k ea n t h l a n i l i ca c i da sl a wm a t e r i a l s , w eg e t 5 - c h l o r i n e 2 - a m i n o b e n z o i ca c i do r3 , 5 一d i c h l o r i n e - 2 - a m i n o b e n z o i ca c i da f t e rs i n g l ec h l o r i n a t i o no r d o u b l ec h l o r i n a t i o n t h e n ，t h e5 - c h l o r i n e - 2 一a m i n o b a n z o i ca c i do r3 , 5 - d i c h l o r i n e - 2 - a m i n o b e n z o i c a c i dt h r o u g hc y c l e db yf o r m a m i d e ，c h l o r i n e db yp h o s p h o r u sp e n t a c h l o r i d ea n dp h o s p h o r u s o x y c h l o r i d e n ，a n dt h e nr e a c t e dw i t ha r y la m i n et og e tc h l o r i n es u b s t i t u t e dn - s u b s t i t u t e d - d - a m i n e q u i a n z o l i n e f i n a l l y , 6c o m p o u n d sa r es y n t h e s i z e d t h es t r u c t u r eo fa l l6c o m p o u n d si s c h a r a c t e r i z e db yi l lm s ，1 hn m l l cn m ra n de l e m e n t a la n a l y s i s ( ) g a l l i ca c i dt a k e n8 al a w m a t e r i a l s ，e t h e r e db yd i m e t h y ls u l f a t e ，e s t e r e db ym e n t h o l ，n i t r a t e db yn i t r i ca c i d , h y d r o l i z e di n b a s e ，r e d u c e db yt i nd i c h l o r i n e ，c y c l e db yf o r m a m i d e ，c h l o r i n e db yp h o s p h o u so x y c h l o r i d e 。a n d r e a c t e dw i t ha r y la m i n et og e t6 , 7 ，8 - t r i m e t h o x y ln - s u b s t i t u t e d - 4 - - a m i n e q n i a n z o l i n e ，1 9c o m p o u n d s a r es y n t h e s i z e d t h es t r u c t u r eo f a l l1 8c o m p o u n d si sc h a r a c t e r i z e db yi r , 1 hn m r , 1 3 cn m ra n d e l e m e n t a la n a l y s i s ( i v ) 4 - c h l o r i n eq u i n a z o l i n ec o m p o u n dr e a c t e dw i t hs u l p h u ra w lp h e n o li n p o t a s s i u mc a r b o n a t ea n da c e t o n e s - s u b s t i t u t e d - 4 s u l p h u re t h e rq u i n a z o l i n ea s y n t h e s i z e d t h e s t r u c t u r eo fa l l7c o m p o u n d si sc h a r a c t e r i z e db y 取1 hn m cn m ra n de l e m e n t a la n a l y s i s 4 7t i t l ec o m p o u n d sa l es y n t h e s i z e di nt o h a l t h es y n t h e t i cm e t h o d so f t h ei n t e r m e d i a t ea n dt i t l ec o m p o u n d sa r ed e c r e p i t p a r t i c u l a r l y , t h e s y n t h e s i so fk e yi n t e r m e d i a t e2 - a m i n o - 3 ，4 ，5 - t r i m e t h o x y lb e n z o i ca c i di se x p l a i n e di nd e t a i l i n a d d i t i o n , w ee x p l o r e2 - m e t h y l 6 ，7 ，8 - t x i m e t h o x y l q u i n a z o l i n - 4 - o n ev i at h er e a c t i o no f2 - a m i n o - 3 , 4 ，5 t r i m e t h o x y lb e n z o i ca c i dw i t ha c e t i ca n h y d r i d e , t h r o u g h6 , 7 ，8 - t r i m e t h o x y - 2 - m e t h y l - b a n z o 【d 】【l ，3 o x a z i n - 4 - o n e t h ep r e s e n tn e wm e t h o do ft h ef o r m a t i o no fn - s u b s t i t u t e d - 4 a m i n o q n i n a z o l i n ed e r i v a t i v e s u n d e rm i c r o w a v ei r r a d i a t i o no f f e r ss e v e r a la d v a n t a g e s ：f a s t e rr e a c t i o nr a t e sa n dh i g h e ry i e l d s ， w h i c hi n v o l v e sar e d u c t i o no fr e a c t i o nt i m ef r o m1 2ht o2 0m i na n dar a i s ei ny i e l d sf r o m 2 4 4 5 1 3 t o7 9 1 - 9 6 5 c o m p a r e d 诵i l i t h e c l a s s i c a l m e t h o d s o m et i t l e c o m p o u n d s a n di n t e r m e d i a t e s u p p r e s s i n gf u n g i c i d es u c h a sf u s a r i u m g r a m i n e a r u m , c y t o s p o r am a n d s h u r i c aa n df u s a r i u mo x y s p o r u mi st e s t e d t h er e s u l ti n d i c a t e s t h a ts o m ec o m p o u n d sh a v eg o o da c t i v a t i o no fs u p p r e s s i n ga n t i f u n g a la c t i v i t i e sr e s p e c t i v e l ys u c h a si n w h e nt h em e d i c a m e n tc o n c e n t r a t i o ni s5 0 0 e j m l ，s u p p r e s s i o nr a t i oo f t h ec o m p o u n di ni s 贵卅大学2 0 0 6 届博士研究生学位论文 8 9 0 8 7 2 2 1 a n d7 6 6 8 t of u s a r i u mg r a m i n e a r u m , c y t o s p o r am a n d s h u r i c aa n df u s a r i u m o x y s p o r u m ，n e a r l ys u p p r e s s i o nr a t i o t oc o n t r a s td r u gh y m e x a z 0 1 w h e nt h em e d i c a m e n t c o n c e n t r a t i o ni s5 0l a g m l ，s u p p r e s s i o nr a t i oo ft h ec o m p o u n di ii s6 0 0 6 a n d7 1 9 9 t o c y t o s p o r am a n d s h u r i c aa n df u s a r i u mo x y s p o r u m ，b e t t e rs u p p r e s s i o nr a t i ot h a nc o n t r a s td r u g h y m e x a z 0 1 w h e nt h em e d i c a m e n tc o n c e n t r a t i o ni s5 0 e c r n l ，s u p p r e s s i o nr a t i oo f t h ec o m p o u n d n i sb e t t e rs u p p r e s s i o nr a t i ot h a nc o n t r a s td r u gh y m e x a z o lt ot h r e ep l a n tp a t h o g e nf u n g u s e s 1 1 l e e c h oa n dt h et o x i c i t yr e g r e s s i o ne q u a t i o no f c o m p o u n d a g a i n s tt h r e ep l a n tp a t h o g e ni st e s t e d t oi n v e s t i g a t et h ea n t i f a n g a lm e c h a n i s mo f c o m p o u n di v t h ec h a n g e so f s o l u b l ep r o t e i nc o n t e n t , g l u c o s ec o n t e n t , c h i t o s a n ( t h en d e a c e t y l a t e dd e r i v a t i v eo fc h i t i n ) c o n t e n ta n dc h i t i n a s ea c t i v i t y d u r i n g2 4hw e r ed e t e c t e da r e rt h em y c e l i u mo feo x y s p o r u mw a st r e a t e dw i t hi v ，t h er e s u l t s s h o w e dt h a tc o m p o u n dn e x e r t e di t sa n t i f u n g a la c t i v i t yb ya c t i n go nt h em e t a b o l i s mp r o c e s so f s a o c h a r i d ea n dc h i t i no f t h ep l a n tp a t h o g e n i cf u n g u s t h ed e c l i n eo f c h i t i n a s e sa c t i v i t ym a ym a k e t h ec o n t e n to f t h en - a c c t y l - d - g l u c o s a m i n ea n dr e d u c i n gg l u c o s ei neo x y s p o r u mh a sad e c l i n e s o m et i t l ec o m p o u n d ss u p p r e s s i n gp c 3 ，b c a p - 3 7a n db g c 8 2 3c e l l sh y p e r p l a s i ai st e s t e d t h er e s u l ti n d i c a t e st h a tt h ec o m p o u n d sh a v eg o o da c t i v a t i o no fs u p p r e s s i n gr e s p e c t i v e l ys u c ha s i ，i ua n d 玛w h e nt h em e d i c a m e n tc o n c e n t r a t i o ni sl # g m e ( 3 4i i m o p l ) ，s u p p r e s s i o nr a t i oo f t h ec o m p o u n dki s8 8 6 ；w h e ni ti s5 峭，m l ( 1 7 3l u n o l l ) ，s u p p r e s s i o nr a t i oo f t h ec o m p o u n d 1 1 2i s8 0 0 a n ds u p p r e s s i o nr a t i oo ft h ec o m p o u n d 2i s8 8 6 1 1 mt e s to fm 1 tm e t h o d i n d i c a t e st h a tc e l lh y p e r p l a s i as u p p r e s s i o nr a t i ot op c 3r e a c h e sm o r et h a n7 0 w h e nt h e m e d i c a m e n tc o n c e n t r a t i o ni s9 懈m l ( 2 5 1p m o l l ) i no r d e rt od e t e r m i n eb i o l o g i c a la c t i v i t i e so fs o m et i t l ec o m p o u n d s ，w ec a r r i e do u te r k i 2 p h o s p h o r y l a t i o ne x p e r i m e n t s w ew e r es e e k i n gt od e t e r m i n ee f f e c t so ft h et i t l ec o m p o u n d so n e g f - o rp d g f - i n d u c e de r k i 2p h o s p h o r y l a t i o n t h er e s u l ts h o w st h a tw h e nt h em e d i c a m e n t c o n c e n t r a t i o ni s 1 0 “m o l l ，t h e t i t l ec h e m i c a l c o m p o u n d1 6 t oe g f - i n d u c e de r k i 2 p h o s p h o r y l a t i o ns u p p r e s s i o nh a sg o o di n h i b i t i o n , b u th a sn oi n h i b i t i o nt op d g f - i n d u c e de r k i 2 p h o s p h o r y l a t i o ns u p p r e s s i o n t h u s ，i t s f u n c t i o nm e c h a n i s mm a y b ei s e x t r e m e l yt h r o u g h s u p p r e s s i n ge g f rp h o s p h o r i ca c i dt os u p p r e s si t sd o w n s t r e a ma l b u m e np h o s p h o r i ca c i dp r o b a b l y , w h i c ht h e r e f o r eb l o c k sc e l l si n f o r m a t i o nt r a n s d u c t i o nt h e ns u p p r e s sc e l l s h y p e r p l a s i m1 h e g r a d i e n tt e s to ft h ed e n s i t ye x h i b i t st h a tt h ec h e m i c a lc o m p o u n di c a ns u p p r e s st h ep h o s p h o r i c a c i do f e r k l 2e f f e c t i v e l yi nt h em e d i c a m e n tc o n c e n t r a t i o no f 0 5p r n o i l k e y w o r d s ：q u i n a z o l i n e ，a n t h r a n i l i ca c i d ，g a l l i ca c i d , s y n t h e s i s ，a n t i f u n g a la c t i v i t i e s ，a n t i c a n c e r a c t i v i t i e s ，b i o l o g i c a la c t i v i t y i 贵州大学2 0 0 6 届博士研究生学位论文 缩略词列表 l i i 贵州大学2 0 0 6 届博士研究生学位论文 前言 近几年来，喹唑啉类农药和医药表现出良好的生物活性，成为化学界和生物学界学者们 研究的热点之一。自1 9 0 0 年第一篇文献报道喹唑啉化合物以来( b o g c r tm t ，e ta 1 ，1 9 0 0 1 ， 有关喹唑啉类化合物共有7 0 0 0 多篇文献报道( 数据来源于s c i f i n d e rs c h o l a r2 0 0 6 年4 月统 计结果) ，其中中国专利1 7 0 多篇( 数据来源于中华人民共和国知识产权局2 0 0 6 年4 月统计 结果) ，国外专利近3 0 0 0 篇( 美国专利5 2 0 篇) ( 数据来源于欧洲知识产权局 ( h t t p ：e p e s p a c e n e t c o m ) 2 0 0 6 年4 月统计结果) ，特别是在医药方面其对e g f 受体( e g f r ) 产生抑制作用( l e ej y ，e i a l ，2 0 0 1 ；l e e ys ，e ta 1 ，2 0 0 3 ；侯廷军，等2 0 0 2 ) ，进而表现出 抗癌活性。此外，喹唑啉类化合物还具有抗疟、抗肿瘤和抗m v 活性( 蒙小英，等，1 9 9 1 ； 蒙小英，等，1 9 8 9 ；刘进前，等，1 9 9 l ：崔智勇，等，1 9 9 9 ：i b r a h i ms s ，e ta 1 ，1 9 9 7 ：h u f f m a n m a ，e ta 1 ，1 9 9 5 ；m e ih y ，1 9 9 8 ) ；还可用于治疗良性前列腺增生和肥大( a n o n y m o u s ， 1 9 9 4 ；a c h a r ir ，e ta 1 ，1 9 9 2 ) ：作为* 受体阻滞剂，在心血管疾病的防治中占据较为重要的 作用( 张建华，1 9 9 4 ) ：可预防动脉粥样硬化和冠心病( e s t r a d ae ，c ta 1 ，1 9 9 8 ) 。农药方面， 特别是喹唑啉肟醚类化合物具有抗烟草花叶病毒( n f v ) 、黄瓜花叶病毒( c m v ) 的活性及 抗植物病菌活性( 刘昕，等1 9 9 9 ；黄润秋等，1 9 9 6 ) 。 有关该类化合物的分子设计、合成及生物活性的研究是当前新药创制的热点之一，尤其 是该类化合物的广谱选择性活性和结构多样性而倍受人们的关注。p d1 5 3 0 3 5 属于4 苯胺喹 唑啉类化合物( 见图1 ) ，是e g f r 酪氨酸激酶( e g f r - t k ) 的选择性小分子抑制剂( b o sm ， e ta 1 ，1 9 9 7 ) 。它对e g f r t k 具有高度选择性是一种a t p 竞争性抑制剂，抑制e g f r - t k 的i c 5 0 为2 9l u n o f l 对n i h 3 t 3 细胞e g f 刺激的r t k 磷酸化抑制作用为1 5n m o i l ，对离 体e g f r - t k 抑制的i c 5 0 为0 0 2 9n m o l l 。对其它受体酪氨酸激酶的敏感性较低，药荆浓度 为5 0l u n o f l 时，对如p d g f 、f g f 、c - s r c 激酶无抑制活性。 为了创制更高效的抗癌或抑菌活性的药物，寻找治疗癌症或植物病菌的新靶点，指导开 发治疗癌症或抗植物病菌的新靶标药物，本论文以p d1 5 3 0 3 5 为先导化合物，设计合成了四 类新型喹唑啉类化合物，进行农药和医药的联合开发。对四类目标化合物的合成方法进行了 研究：( i ) 第一类：以邻氨基苯甲酸为原料，经闭环、氯化、胺化取代反应设计并合成了 _ 取代- 4 胺基喹唑啉类化合物；( i i ) 第二类：以邻氨基苯甲酸为原料，经苯环氯化、闭环、 氯化、胺化取代反应设计并合成了氯代取代4 胺基喹唑啉类化合物：( 1 1 1 ) 第三类：以没 食子酸为原料，经醚化、酯化、硝化、水解、还原、闭环、氯化、胺化八步，设计并合成了 6 , 7 ，8 三甲氧基取代4 胺基喹唑啉类化合物；( i v ) 第四类：以4 氯代喹唑啉化合物与芳 巯基酚反应，设计并合成量取代_ 4 硫醚类喹唑啉化合物。结构通式见图1 所示。所有中间 体及目标化合物经元素分析、m 、1 hn m r 、”cn m r 、m s 对其结构进行了表征，共合成 了目标化合物4 7 个。 对中间体和目标化合物的合成方法进行了合成条件筛选，特别是对关键中间体2 一氨基 - 3 , 4 ，5 三甲氧基苯甲酸的合成方法进行了研究，另外还对2 甲基- 6 ，7 ，8 - 三甲氧基喹唑啉4 - 酮 类化合物作了初步合成探讨。采用微波辐射催化的绿色合成方法对部分化合物的胺化取代一 步与传统的合成方法做了对比，结果表明，微波催化下能很好的促进胺化取代反应的进行。 缩短了反应时间，提高了产率。从传统方法的反应时间1 2h 缩短到2 0 m i n ，产率从2 4 4 一, 5 1 3 提高到7 9 1 9 6 5 。 目标化合物及中间体进行农药和医药的联合开发。采用生长速率法，以小麦赤霉病菌 ( f u s a r i u mg r a m i n e a r u m ) 、辣椒枯萎病菌( f u s a r i u mo x y s p o r u m ) 、苹果腐烂病菌( c y t o s p o r a m a n d s h u r i c a ) 为供试对象，对目标化合物进行抑菌活性筛选。结果表明：部分目标化合物 具有一定的抑菌活性，如化合物1 1 2 在药剂浓度为5 0 0p g m l 下，对小麦赤霉病菌、苹果腐 贵州大学2 0 0 6 届博士研究生学位论文 烂病菌、辣椒枯萎病菌的抑制率分别为8 9 0 8 、7 2 2 1 、7 6 6 8 ，与对照药剂恶霉灵的抑 制率相当，表现出一定的抑菌活性；目标化合物l i 在药剂浓度为5 0t t g m l 时，对小麦赤霉 病菌的抑制率为4 7 9 4 与对照药剂恶霉灵的抑制率相当，但在此药剂浓度下对苹果腐烂 病菌和辣椒枯萎病菌的抑制率分别为：6 0 0 6 和7 1 9 9 ，均优于对照药剂恶霉灵；目标化 合物i v , 在药剂浓度为5 0a g m l 下，对三种植物病菌的抑制率均优于对照药剂恶霉灵。选 定化合物7 对辣椒枯萎病菌，测定了对病菌的毒力( e c 5 0 ) ，建立了其线性回归方程，并 对药剂处理后辣椒枯萎病菌体细胞中可溶性蛋白含量、还原糖含量、几丁糖含量、几丁质酶 活性进行了测定。结果表明，目标化合物，对辣椒枯萎菌丝细胞的蛋白合成没有影响；在 所设定的时间内。茵体内还原糖含量、几丁糖含量、几丁质酶活性一直低于对照。可以初步 推测，目标化合物7 处理后对辣椒枯萎菌丝的作用方式为抑制菌丝体内几丁质酶的活性 进而影响菌体内还原糖含量、几丁糖含量，从而破坏菌丝细胞细胞壁的合成与分解平衡影 响菌丝的生长。采用m t r 法对目标化合物进行抑制p c 3 、b c a p 3 7 和b g c 8 2 3 三种癌细胞 增殖实验。结果表明，化合物如i 、i n 和z 分别具有良好抑制活性，当药剂浓度为lt l g m l ( 3 4t t m o v l ) ，化合物l 抑制率为8 8 6 ；当药剂浓度为5t t g m l ( 1 7 3 m o l l ) ，化合物i n 抑制率为8 0 0 ，化合物z 抑制率为8 8 6 。m t t 法测试表明化合物2 在药剂浓度为9 p g m l ( 2 5 1t t m o l l ) 时，对p c 3 细胞增殖抑制率达7 0 以上。部分目标化合物采用免疫印迹 法进行抗磷酸化生物活性测定，结果表明，在药剂浓度为1 0t u n o f l ，目标化合物i 对e g f 刺激的e r k l 2 磷酸化有良好抑制作用，但对p d g f 刺激无抑制作用，其作用机制极有可能 是通过抑制e g f r 磷酸化从而抑制其下游蛋白磷酸化，由此阻断细胞信息传导进而抑制细 胞增殖。浓度梯度试验表明，化合物i 在0 5g m o f l 时具有抑制e r k i 2 的磷酸化。 b r r = h ，c i ，m e t 3 ；n = 0 ，1 ，2 ，3 ；a r = a r y l ，a l k y l ：x = n h ，s p d1 5 3 0 3 5 目标化合物 图1 p d l 5 3 0 3 5 与设计的目标化合物结构对比 - 2 - 贵州大学2 0 0 6 届博士研究生学位论文 一、喹唑啉类化合物综述 近几年来，喹唑啉类农药和医药表现出良好的生物活性，成为化学界和生物学界学者们 研究的一个热点之一。特别是在医药方面，其对e g f 受体或e g f 受体酪氨酸激酶抑制作用 ( l e ej y ，e ta 1 ，2 0 0 1 ；l e e ys ，e t a l ，2 0 0 3 ；侯廷军，等，2 0 0 2 ) ，表现出具有抗前列腺癌、 肺癌、胃癌和胆癌等的作用。此外，喹唑啉类化合物还具有抗烟草花叶病毒( n d v ) 的活 性( 刘听，等，1 9 9 9 ；黄润秋。等。1 9 9 6 ) ：抗疟、抗肿瘤和抗菌活性( 蒙小英，等，1 9 9 1 ； 蒙小英，等，1 9 8 9 ：刘进前，等，1 9 9 1 ：崔智勇，等，1 9 9 9 ；i b r a h i m s s 。e t a l ，1 9 9 7 ) ；同 时，在中草药板兰根的提取物中也发现有喹唑啉酮类化合物( 刘云海，等，2 0 0 2 ) ：还可用 于治疗良性前列腺增生和肥大( a n o n y m o u s ，1 9 9 4 ：a c h a r ir ，e ta 1 ，1 9 9 2 ) 、抗微生物和抗 真菌活性( e l s h a r i e f a m s h ，e t a l ，2 0 0 1 ；a l y a a ，2 0 0 3 ) 、可用作镇静催眠药( e s t r a d a e ， c ta 1 ，1 9 9 8 ) ：还具有抗h i v 活性( h u f f r a a nm a ，e ta 1 ，1 9 9 5 ；m e ih y ，1 9 9 8 ) 。还是降血压 药的重要中间体( 张建华。1 9 9 4 ) 。喹唑啉类化合物有如此多的靶标点，而且还正在继续发 现其新的作用位点和靶标点这引起了化学工作者们极大的兴趣。 表皮生长因子受体酪氨酸激酶( e g f r - t k ) 是在文献中最早描述的一个酪氨酸激酶， 也成为了药物研究开发的靶点。同时许多其他的受体和非受体酪氨酸激酶也逐渐成为研究 课题中有吸引力的研究对象。近年来，科研工作者也开始将研究的领域逐渐从e g f r 扩展 到了其它受体和非受体的酪氨酸激酶，如血小板衍化生长因子受体f f d g f r ) 、血管内层生长 因子受体( v e g f r ) 、纤维原细胞生长因子受体( f g f r ) 、胰岛素受体o r