（农药学专业论文）有机磷农药在竹笋中的多残留测定方法研究.pdf

中文摘要 竹笋是我国传统的出口农产品，而有机磷农药是一类应用广泛的杀虫剂，因此建 立有机磷农药在竹笋中的残留测定方法对正确评价竹笋中有机磷农药残留量有重要 的意义。本文参考q u e c h e r s 法，研究建立了1 4 种有机磷农药在竹笋中的多残留分 析方法，并应用建立好的方法调查了当前安徽产竹笋的有机磷农药污染现状，主要结 果如下： 1 确立了1 4 种有机磷农药的气相色谱检测条件。a g i l e n t 6 8 9 0 气相色谱仪； 检测器：f p d ；色谱柱：h p 5 毛细管柱，3 0 r e x 0 2 5 m m x 0 2 5 m ；柱程序升温：开 始以6 0 保持l m i n ，以3 0 r a i n 升到1 8 0 保持5 m i n ，再以2 0 r a i n 升到2 0 0 保持9 m i n ，最后以4 0 c r a i n 升到2 4 0 c 保持9 m i n ；进样口温度：2 0 0 ；检测器温 度：2 5 0 ；氮气流速：1 5 m l m i n ；尾吹气：1 5 m 1 m i n ，氢气1 0 0 m l _ m i n ，空气1 3 0 m l m i n ；进样量：2 此。 2 样品制备技术的优化和改进。 提取方法：比较了涡旋振荡和超声波振荡提取法，两种提取方法对竹笋中 1 4 种有机磷农药的平均回收率分别为6 3 9 - 一8 7 2 和7 9 7 1 1 0 4 ，优化后的提 取方法为超声波振荡法。 提取时间：超声波振荡提取3 r a i n 、5 m i n 和1 0 m i n ，对竹笋中有机磷农药的 平均回收率分别为6 3 9 - - 8 7 2 、6 3 9 0 0 - 8 7 2 和6 3 9 0 0 , - 8 7 2 ，优化后的提取 时间为3 r a i n 。 提取溶剂用量：含1 h a e 的乙腈用量为1 0 m l 、1 5 m l 、和2 0 m l ，对竹笋 中有机磷农药的平均回收率分别为8 0 7 0 o - - 1 1 2 4 、7 8 6 , - - 1 1 5 3 和 7 4 3 1 1 3 7 ，优化后的提取溶剂用量为1 0 m l 。 固相吸附剂p s a 的用量：固相吸附剂p s a 的用量分别为5 0 m g 、8 0 m g 、 1 0 0 m g 和1 5 0 m g 时，竹笋中有机磷农药的平均回收率分别为5 2 3 - 9 8 3 、 8 1 3 哆扣1 0 6 8 、7 9 6 一1 0 9 4 和8 3 4 0 , - 1 2 1 7 ，优化后的p s a 用量为8 0 - 1 0 0 r a g 。 当使用无水硫酸钠代替无水硫酸镁时，竹笋中有机磷农药的平均回收率为 6 0 2 - 9 3 1 ，而且基质层与有机相分层不明显。当去除提取溶剂里的缓冲体系后， 回收率有所下降，平均回收率在4 5 4 8 3 7 。 3 优化改进后的方法为：称取1 0 9 竹笋样于5 0 m l 离心管中，加入含1 h a e 的1 0 m l 乙睛和i g n a i - i a c ，再加入4 9 无水硫酸镁，超声波振荡3 m i n ，以4 2 0 0 转m i n ， 离心1 0 r a i n ，用移液枪从上层有机相中吸取2 m l 到5 m l 离心管中，加8 0 m g 固相吸 附剂p s a 和3 0 0 m g 无水硫酸镁，振摇l m i n 左右，以4 2 0 0 转r a i n ，离心1 0 r a i n ，用 移液枪准确吸取上清液lm l 到lm l 容量瓶中，用氮吹仪吹干，石油醚定容，待测。 添加回收实验表明：根据各农药的响应情况，在竹笋中分别添加 o 0 5 m g - k g 一0 1 m g k g 、0 1 m g k g 一o 2 m g k g 。和o 5 m g k g 一l m g k g 。的有机磷 农药标准溶液，得到的平均添加回收率分别为6 0 1 7 9 2 、7 1 6 8 9 5 和 8 4 3 , , - 9 6 3 ，变异系数分别为4 2 - 8 7 、3 2 - 7 9 和2 1 o 6 ；竹笋中1 4 种 有机磷农药的最低检出浓度在0 0 0 4 2 m g k g - - o 0 2 0 8 m g k g 之间，均满足农药残留分 析要求。 将参考q u e c h e r s 法优化组合后的方法与其他三种具有代表性的样品制各方法 进行比较。结果表明，选定的三种方法在以竹笋为基质进行的添加回收试验结果都达 不到农残分析的要求，而且溶剂消耗量大。而本文研究优化的方法具有定性定量准确， 操作简便，经济实用，弥补了以往方法的缺陷。 4 利用优化出来的方法对安徽省和重庆市产的竹笋进行了实际样品检测，调查 以春笋为主，主要检测了毛竹笋和雷竹笋中的有机磷农药残留。结果发现，在所有的 调查竹笋中，只有宁国地区和黄山地区的雷竹笋样品检出农药，均为敌敌畏，残留浓 度分别为o 0 5 1m g k g 和0 0 4 1m g k g 。 关键词：有机磷农药，竹笋，g o ，残留分析 a b s t r a c t b a m b o o - s h o n ti st r a d i t i o n a l e x p o r tp r o d u c t o fo u r c o u n t r y h o w e v e r , o r g a n o p h o s p h o r u sp e s t i c i d e sa r eu s e dw i d e l y i ti sv e r yi m p o r t a n tt oe s t a b l i s ht h ea n a l y t i c m e t h o df o ro r g a n o p h o s p h o r u sm u l t i r e s i d u ed e t e r m i n a t i o ni nb a m b o o s h o o t i nt h i sp a p e r , w ee s t a b l i s h e dt h ea n a l y t i cm e t h o df o r1 4o r g a n o p h o s p h o r u sm u l t i r e s i d u ed e t e r m i n a t i o ni n b a m b o o - s h o o t , r e f e r st om e t h o do f q u e e h e r s ，a n dw ei n v e s t i g a t e db a m b o o s h o o ti nw h i c h a n h u ip r o d u c e df o rc o n t a m i n a t e db yo r g a n o p h o s p h o r u sp e s t i c i d e s t h em a i nr e s u l t sw e r e s u m m a r i z e da sf o l l o w s ： n ed e t e r m i n a t i o nc o n d i t i o no f1 4o r g a n o p h o s p h o r u sp e s t i c i d eb yg cw i t hi - i p 5 c a p i l l a r yc o l u m n ：0 2 5m m ( i d ) 3 0 m m d e t e c t e r ：f p d c a l e f a c t i v ep r o g r a mo f c o l u n m ： t h ec o l u m nt e m p e r a t u r ew a ss e ta t6 0 ( h o l d1r a i n ) , t h e ni n c r e a s e da t3 0 m i nt o 1 8 0 ( h o l d5m i n ) ，t h e ni n c r e a s e da t2 0 r a i nt o2 0 0 ( h o l d9 m i n ) ，a tl a s tr a i s e d4 0 r a i n u n t i l2 4 0 c ( h o l d9m i l l ) i n e t ：2 0 0 ，d e t e c t e rt e m p e r a t u r e ：2 5 0 f l o wo f n 2 ：1 5 m l j m i n ；a n di n j e c t o rv o l u m e ：2 山。 1 t h ep r o c e s so f s a m p l ep r e p a r a t i o nw a so p t i m i z e da n dd e v e l o p e d e x t r a e t i n gm e t h o d ：t l l i se x p e r i m e n tc o m p a r e dt h em e t h o do fe x t r a c t e db yu l t r a s o n i c a n d s w i r l i n g , a n dt h e a v e r a g e r e c o v e r i e sw e r e r e s p e c t i v e l y6 3 9 8 7 2 a n d 7 9 7 11 0 4 n 他o p t i m a lm e t h o dw a su l t r a s o n i cm e t h o d e x t r a c t i n gt i m e ：n ea v e r a g er e c o v e r i e s f o r t i f e db a m b o o s h o o te x t r a c t e dw i t h u l t r a s o n i cm e t h o d b y 3 r n i n ， 5 r a i na n d 1 0 m i n w e r e r e s p e c t i v e l y 6 3 9 8 7 2 ，6 3 9 弼7 2 a n d6 3 9 8 7 2 ，t h eo p t i m a le x t r a c t i n gt i m ew a s3 m i n v o l u m eo fe x t r a c t i n gs o l v e n t ：n ev o l u m eo fe x t r a c t i n gs o l v e n tw e r er e s p e c t i v e l y 1 0 m l ，1 5 m l a n d2 0 m l ，a n d t h e a v e r a g e r e c o v e r i e sw e r e r e s p e c t i v e l y 8 0 7 * o - 1 1 2 4 7 8 6 - 1 1 5 3 a n d7 4 3 一1 1 3 7 , t h eo p t i m a lv o l u m eo fe x t r a c t i n g s o l v e n tw a sl0 m l a m o u n to fp s a ：珊l e nt h ea m o u n to fp s aw e r ea d d e dr e s p e c t i v e l y5 0 r a g , 8 0 r a g , l o o m g a n d 1 5 0 r a g , t h ea v e r a g e r e c o v e r i e sw e r e r e s p e c t i v e l y 5 2 3 曲8 3 ，8 1 3 一1 0 6 8 ，7 9 6 一1 0 9 4 a n d8 3 4 一1 2 1 7 ，a n dt h eo p t i m a l a m o u n to f p s a w a s8 0 1 0 0 m g 1 1 l e a v e r a g e r e c o v e r i e s o f o r g a n o p h o s p h o r u s i n b a m b o o - s h o o tw a s 6 0 2 毋3 1 ，w h e nu s oa n h y d r o u sn a 2 s 0 4i n s t e a do fa n h y d r o u sm g s 0 4 t h ea v e r a g e r e c o v e r i e so fo r g a n o p h o s p h o r t l si nb a m b o o - s h o o tw a s4 5 4 一8 3 7 w h e nw i p eo f ft h e s y s t e mo f b u f f e r 3 t h em e t h o de n t a i l se x t r a c t i n gt h ep e s t i c i d er e s i d u e sf r o m1 0 9o f s a m p l eb yw o r t e x m i x i n gw i t h 1 0 m lo fa c e t o n i t r i l ew h i c h c o n t a i n i n g 1 a c e t i ca c i da n da d d i n g4 9 a r t h y d r o l l sm a g n e s i u ms u l f a t ep l u sl gs o d i u ma c e t a t e ，c a r r i e do u tb yu l t r a s o n i cs h a k i n ga c e n t r i f u g i n gt u b e t h et u b ei st h e nc e n t r i f u g e df o r1 0 m i n ，a n dap o r t i o no ft h ee x t r a c ti s t r a n s f e r r e dt oat u b ec o n t a i n i n g8 0 m gp r i m a r ys e c o n d a r ya m i n ea n d3 0 0 m g a n h y d r o u s m a g n e s i u m t h e n , t h ee x t r a c ti sc e n t r i f u g e da n dt r a n s f e r r e dl m lt ol m lv o l u m e t r i c f l a s k , b l o wt od r y , w a i t i n gf o rd e t e c t i n g t h er e c o v e r ye x p e r i m e n ti n d i c a t i o n ：b yu s i n gt h e e s t a b l i s h e dm e t h o d ，w h e nt h ef o r t i f i e dc o n c e n t r a t i o nw e r eo 0 5 r a g 。k g 一- 0 1 m g 。k g 、 o 1 m g k g - l 0 2 m g k g 。1 a n d 0 5 m g k g l m g k g t h ea v e r a g er e c o v e r i e s o f1 4 o r g a n o p h o s p h o r u sp e s t i c i d e sr a n g e db e t w e e n6 0 1 a n d7 9 2 ，7 1 6 a n d8 9 5 ，8 4 3 a n d9 6 3 r e s p e c t i v e l y , t h ec vw e r er e s p e c t i v e l y4 2 - - 8 7 、3 2 7 9 a n d 2 1 7 6 t h er e s u l t sa r ea l la c c o r d i n gw i t ht h er e q u i r e m e n to fr e s i d u a la n a l y s i s t h e m i n i m u md e t e c t e dc o n c e n t r a t i o na r e0 0 0 4 2 m g k g q ) 0 2 0 8 m g k g t h i se x p e r i m e n ta l s oc o m p a r e dt h eo p t i m i z e dm e t h o da c c o r d i n gt oq u e c h e r sw i t h o t h e rt h r e et y p i c a ls a m p l ep r e p a r a t i o n s t h er e s u l ti n d i c a t e dt h a tt h r e et y p i c a ls a m p l e p r e p a r a t i o n sw h i c hs e l e c t e dw a sn o ta c c o r d i n gw i t l lt h er e q u i r e m e n to fr e s i d u a la n a l y s i s m o r e o v e r , t h ec o n s u m eo fs o l v e n tw a sg r e a t n e s s b u tt h eo p t i m i z e dm e t h o di so fa c c u r a t e i d e n t i f i c a t i o na n dq u a n t i t y ，s i m p l eo p e r a t i o na n de c o n o m y 4 w e i n v e s t i g a t e d b a m b o o - s h o o tw h i c ha n h u i p r o d u c ec o n t a m i n a t e db y o r g a n o p h o s p h o r u sp e s t i c i d e s o nt h eb a s i so ft h eo p t i m i z e dm e t h o d t h er e s u l to f i n v e s t i g a t i o ni n d i c a t e dt h a tb a m b o o s h o o tw h i c hl i n g g u oa n dh u a n g s h a no f a n h u ip r o v e n c e w e r ed e t e c t e d ，t h eb o t hp e s t i c i d e sw a sd d v , c o n c e n t r a t i o nw e r eo 0 5 1m e g k g ，0 0 4 1m e ；x g r e s p e c t i v e l y k e y w o r d s ：o r g a n o p h o s p h o r u sp e s t i c i d e s ，b a m b o o s h o o t ，g c ，r e s i d u ea n a l y s i s 术语与略语 n a 2 s 0 4 g n g m g k g m l m l m g l “l 姗 m l n d g c l c m s g c m s r p m m r l r s d l o d l o q c v m g s 0 4 s f e g p c s p e s p s f c m s p d 术语及略语表 英文全称 s o d i u ms u l f a t e g r a m n a n o g r a m m i l l i g r a m k i l o g r a m m i l l i l i t e r g r a m m i l l i l i t e r m i l l i g r a m l i t r e m i c r o l i t r e n a n o m e t e r m i n u t e d a y g a sc h r o m a t o g r a p h y l i q u i dc h r o m a t o g r a p h y m a s ss p e c t r o m e t r y g a sc h r o m a t o g r a p h y m a s ss p e c t r o m e t r y r e v o l u t i o np e rm i n u t e m a x i m u mr e s i d u el i m i t r e l a t e ds t a n d a r dd e v i a t i o n l i m i to fd e t e c t i o n l i m i to fq u a n t i t y c o e 伍c i e n to f v a r i a t i o n m a g n e s i u ms u l f a t e s u p e r c r i f i c a lf l u i de x t r a c t i o n g dp e r m e a t i o nc h r o m a t o g r a p h y s o l i dp h a s ee x t r a c t i o n s o l i dp h a s em i c r o e x t r a e t i o n s u p e r c r i t i c a lf l u i dc h r o m a t o g r a p h y m a t r i xs o l i d - p h a s ed i s p e r s i o n 中文全称 硫酸钠 克 纳克 毫克每千克 毫升 克每毫升 毫克每升 毫米 纳米 分钟 天 气相色谱 液谱质谱联用 气谱质谱联用 每分钟转数 最大残留限量 相对标准偏差 检测限 最低检出量 变异系数 硫酸镁 超临界流体萃取 凝胶渗透色谱 固相萃取 固相微萃取 超临界流体色谱 法 基质固相分散 独创性声明 本人声明所呈的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取 得的研究成果。据我所知，除了文中特另t l d h 以标注和致谢的地方外，论 文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得安徽 农业大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作 的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢 = 也 恩。 学位论文作者签名：歪羞醚蜩 签字日期：历刁年月2z 日 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解安徽农业大学有关保留、使用学位论文的 规定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子文件， 允许论文被查阅和借阅。本人授权安徽农业大学可以将学位论文的全部 或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复 制手段保存、汇编学位论文( 保密的学位论文在解密后适用本授权书) 。 学位论文作者签名：幽 签字日期：泐7 年月犯日 学位论文作者毕业后去向： 工作单位： 通信地址： 指导教师签名f 岳当芭壅 签字日期：文哆年多月2 汨 电话： 邮编： 1 前言 1 1 选题背景 1 1 1 竹笋的生产利用现状 竹子是森林资源之一。全世界竹类植物约有7 0 多属1 2 0 0 多种，主要分布在热带及 亚热带地区。我国竹类资源十分丰富，据统计，全国竹类植物共有4 8 个属，5 0 0 多种。 这些竹种分布在北纬4 0 。以南的广大国士上。自古以来，人们对竹资源的利用就从来 没停止过，竹笋作为蔬菜来食用就是其中之一【l 】。竹笋作为蔬菜口感风味独特，含有 丰富的食用纤维，蛋白质含量高达3 0 0 7 5 0 n 珂1 0 0 9 鲜重，素有山中珍品的美称【2 】。 竹笋的品种繁多，按季节分类有春笋、秋笋、冬笋；按形状分类有笔杆笋、鞭子 笋、打卦笋、龙须笋、牛角笋；按质地分类有鲜笋、干笋；按产地分类有茅山笋、天 目笋等3 1 。 竹笋及其制品是竹林资源开发中第二大类产品，其加工与贸易历史悠久。随着人 们生活消费水平的提高，市场需求不断增加，竹笋的生产、加工与贸易已成为振兴山 区经济、带领农民脱贫致富奔小康的重要经济支柱。据不完全统计，目前我国竹业年 产值已达约4 5 0 亿元，其中出口创汇近5 亿美元。我国鲜笋产量逐年递增，猛增到目前 的2 5 0 万t 以上【4 - 5 】。竹笋的种植带动了竹笋加工行业的发展，竹笋栽培及竹产业更成 为浙江、福建、江西、安徽南部等产竹大省和地区的新经济增长点。 中国加入世界贸易组织，为劳动密集型的竹笋产业带来了新的机遇，农产品税率 下调，有利于企业扩大产品出口，但同样也面临着严峻的挑战。竹产业的蓬勃发展和 人们对自身健康的日益关注，农产品质量安全问题越来越受到关注。2 0 0 6 年日本的“肯 定列表制度”的实施，提高了日本食品安全风险保护水平同时也大幅提高了我国输日 农产品的技术门槛。 1 1 2 有机磷杀虫剂的毒性及污染问题 农药的毒性是其能否危害环境及人、畜安全的重要指标【6 】。有机磷杀虫剂对人畜 的毒性高，如果使用不当，极可能造成中毒事故。人畜中毒的机理是和有机磷杀虫剂 杀虫机理相同，同样是抑制了胆碱酷酶，造成人、畜体中神经传导介质一乙酰胆碱的 大量积累，使神经过度兴奋并很快转入抑制和衰竭。有机磷的毒性，常常与以下几点 因素相关4 j ： ( i ) 当有机磷化合物中的乙基换成甲基时，l d s 0 值增大，毒性降低，如：甲基对硫 磷比对硫磷的毒性低； ( 2 ) 磷酰基中的取代基不同毒性也差别很大，例如：二甲基磷酰化血细胞胆碱酯酶 半恢复期为8 0 分钟，而二乙基磷酰化血细胞胆碱酯酶半恢复期为5 0 0 分钟，二异丙基 磷酰化血细胞胆碱酯酶几乎不能恢复活性； ( 3 ) 有机磷化合物在生物体内代谢氧化能增强毒性，如：氧乐果的毒性比乐果的大； ( 4 ) 光解作用：例如：剧毒农药对硫磷在光照条件下易发生光氧化反应生成毒性更大 的对氧磷，低毒农药辛硫磷经光解也生成对哺乳动物毒性较大的一硫代特普； ( 5 ) 有些有机磷化合物水解使毒性增强，如：敌百虫经水解后变为毒性较大的敌敌 畏； ( 6 ) 某些有机磷杀虫剂的降解产物具有潜在的三致毒性。如：敌敌畏水解生成的二 氯乙醛可能诱发突变； ( 7 ) 据目前研究，己有6 7 类化合物显示出不同程度内分泌干涉性质，确定为环境激 素物质，有机磷杀虫剂马拉硫磷、乙基对硫磷被列入其中； 九十年代初，经常发生蔬菜有机磷中毒事故，对社会造成了很大的负面影响，如 出1 2 1 到香港的蔬菜，被查出有机磷农药超标，造成1 0 0 多人中毒 9 1 。随着现在监管力 度的加大，目前这种现象已越来越少。但是，在有机氯杀虫剂已经停用的情况下，有 机磷农药成为蔬菜生产的主要污染源。农药使用造成农药残留物污染的原因是多方面 的：高毒农药的使用；害虫产生抗药性而增加农药使用量；临近收获前使用农药等。 这些都会造成农药对蔬菜这样的短茬作物污染或在蔬菜中形成高农药残留量。随着检 测仪器发展和检测仪器灵敏度的提高，以及农药生化、农药残留物的研究更加深入， 暴露出来的问题越来越多，农药残留物污染和危害就愈来愈受到人们的重视和关注， 国际和各国政府都制定了食品中农药最高残留限量，表明了对食品中农药残留量的控 制极为关注和重视。 1 2 农药多残留分析技术研究进展 1 2 1 农药多残留分析的前处理技术 传统的农药残留分析普遍采用索氏抽提、振荡提取、变速捣碎法提取和超声波法 提取等技术，存在许多不足，如需要的样品量大、萃取时间长、消耗大量的有机溶剂 和有毒溶剂，从而导致大量废液的产生。提取和净化步骤繁琐是制约农药残留分析速 度和分析效率提高的瓶颈，传统样品前处理技术无法满足食品安全性分析快速、准确 的要求 1 0 - 1 3 。近几年样品前处理工作正朝着省时、省力、廉价、有机溶剂消耗少、对 环境的污染小、向微型化和自动化方向发展，提取和净化的界限越来越模糊 1 4 - 1 5 】。目 前国内外广泛应用的新技术主要有：固相萃取( s p e ) 、微波辅助萃取( m 八e ) 、基质固 相分散萃取( m s p d e ) 、超临界流体萃取( s f e ) 、固相微萃取( s p m e ) 、加速溶剂萃 取( a s e ) 、吹扫蒸馏技术、顶空固相探针( 微) 萃取法( h e a d s p a c e s p m e ) 、自动液一 液分配、自动索氏提取( a s e ) 等分离净化技术，这些前处理方法可在短时间内，快 速有效地完成多种或多类多种农药在样品中的提取、分离和净化过程，自动化程度高， 2 大大缩短了样品前处理时间，提高了样品中农药的提取率，保证了检测数据的准确性 1 6 - 2 1 1 2 2 农药多残留分析的检测技术 随着对现代生活节奏的加快，贸易往来的快捷，以及人们对环境质量和食品安全 的要求日益提高，待测样品量迅速增加，这就要求农残分析方法必须更加快速、灵敏、 准确、简便【捌。5 0 年代农药残留分析方法局限于化学法、比色法和生物测定法，检 测方法缺乏专一性，灵敏度也不高。6 0 年代色谱技术的发展，使薄层色谱法( w l c ) 在农药残留分析中广泛应用。而气相色谱法( g c ) 的出现推动了农药残留分析的高 速发展。8 0 年代以来，对热不稳定极性农药及其代谢物的残留应用更多的是液相色 谱分析方法( h p l c ) 2 3 - 2 5 。随着高新分析技术引入农药残留检测之中，发达国家经 常采用先进的农药残留检测技术加强农药残留检测工作，所用检测技术如超临界流体 色谱法( s f c ) 、免疫分析技术( 队) 、气相色谱与质谱联用技术( g c m s ) 、液相色 谱与质谱联用技术( l c m s ) 、毛细管电泳与质谱联用技术( c e m s ) 、以及气相、液相 色谱与多级质谱联用技术等。这些技术的应用大大提高了农药残留检测的定性能力和 检测的灵敏度、检测限和检测覆盖范卧雏3 0 】。 1 3 国内外有机磷杀虫剂多残留分析现状 目前用于检测有机磷杀虫剂的g c 检测器主要有两类：氮磷检测器( n p d ) 和火焰 光度检测器( f p d ) 。近几年我国在有机磷多残留检测方面的文献见表1 ： 襄1 近年来不同基质中有机磷农药多残留研究 t a b l ei s t r a yo nt h e d e t e r m i n a t i o no fo 盟啪。也唑业型! m ! 堕塑i 曼堡鱼曼i 塑! 堡! 巫 农药基质提取净化 检测器 参考文献 注：表示不用净化 农药多残留分析技术是发展趋势，我国现有的蔬菜中有机磷杀虫剂多残留分析方 法，尚有许多的问题有待开展研究，表现在分析的农药较少，前处理过程繁琐，基质 适用范围不广a o a c 早在2 0 世纪8 0 年代就对大部分有机磷农药建立了气相色谱分析 3 方法，并且针对不同的基质给出了一般性原则删。n o b o mm o t o h a s h l 4 1 1 等人总结了国 际上官方多残留分析方法的要点，见表2 ： 袭2 蔬菜、水果和土壤中农药多残留分析官方方法 t a b l e2o f f i c i a lm u l t i r e s i d u em e t h o d so f p e s t i c i d ea n a l y s i si nv e g e t a b l e s , f r u i t sa n ds o i l 由上表可以看出，国内外在做多残留提取时，考虑更多的是乙腈，虽然它有毒， 但它也具有其它溶剂所不具备的优点，如乙腈具有很强的溶解能力，能与水混溶；提 取出的农药可以很容易的通过盐析使乙腈与水分层睁”。 近四十年来，大量的分析方法不断涌现及更新，但在这些方法中很难有同时对绝 大多数农药达到较高质量的分析方法。2 0 0 3 年，s j l e h o t a y 丰d m a n a s t a s s i a d a s 开发出 基于分散固相萃取技术的q u e c h e r s 农药残留分析方法，i i l q u i c k ，e a s y ，c h e a p ，e f f e c t i v e ， r u g g e da n ds a f e 英文单词的首缩写 5 2 , 5 3 j ，是一种快速、简便、价格低廉、质量高的农 药多残留分析方法。真正使方法达到了快速、简便、易操作、低成本、溶剂使用少、 4 低污染、对环境友好、需要的器具及空间少等特点，而且此方法适合对高达2 5 0 种农 药的残留分析蚓，基质适用性广，l e h o t a 媾 5 孓5 q 人随后继续研究q i i e d l e r s 法在果蔬 和含脂肪基质里农药的提取净化效果，并将缓冲体系引进了本方法使一些不稳定的农 药提高了回收率。对一些基质很复杂的样品，还可以通过进一步的净化来降低基质的 影响【5 7 1 。 m a s a h i r oo k i h a s h i 等人对9 种蔬菜和水果基质中1 8 0 种农药进行添加回收，添加浓 度在0 0 5 - 0 1 m g k g ? g 平之间，回收率在7 0 1 1 0 之间，检测限达到了o 0 1 4 ) o s p g g ， 变异系数在2 5 以下，文献中作者还对提取方法进行了改进【5 8 】。c p a n 和h z h a n g 等 用经优化后q u e c h e r s 法研究了蜂蜜中氯霉素单残留问题，为了避免无水硫酸镁吸水 使蜂蜜变成胶体阻碍样品的混匀，最终去除了无水硫酸镁【”。c d f e z 等选择以大麦 为基质，添加非极性、中性和极性各种不同除草剂农药，比较了q u e c i l e r s 法和其他 传统多残留前处理方法，发现只有q u e c h e r s 法对各种极性农药的回收率达到t 6 0 一7 0 ，尤其对极性农药的回收率最好i 删。f l o r i a np 1 6 s s l 运用这个方法分析了血液里的 医药残留【6 1 1 。j u a nf g a r c l a 等总结了近年来在橄榄油和橄榄果实中使用的农药残留前 处理方法，比较了液液分配、g p c 、s p e 、m s p d 、q u e c h e r s 法各自的优缺点，认为 经过优化的q u e 砌巳r s 法更值得考虑【6 2 】。曹磊等运用q u e c h e r s 法对菠菜和胡萝卜中 1 6 种有机磷和有机氯农药进行添加回收，取得了满意的回收率【6 ”。刘敏等同样利用 q u e c h e r s 法与l c m s 法对果胡萝卜、苹果、西红柿和卷心菜中1 4 种有机磷和氨基甲 酸酯农药进行了添加回收实验，回收率在7 9 以上【6 4 1 。胡西洲等利用同样的方法，对 1 1 种有机磷农药进行残留分析，得出检出限在5 6 1 8 2 p 班g 之间，其中平均回收率在 6 7 7 0 0 1 0 5 3 之间，r r s d 不大于1 0 6 1 6 5 1 。于彦彬等用p s a 固相分散萃取技术对蔬 菜和水果里得灭定威进行了测定【6 6 1 。 由于q u f h e r s 法的种种优点，目前这个方法正得到越来越多的应用，并且出现 了商品化的q u e c h e r s 法萃取小柱。当然，它也有缺点，就是加在基质里的固相吸附 剂的吸附容量是有限的。相信根据不同的农药和基质对q u e c h e r s 法进行优化和改造， 使其能够达到我们预期的目标。 1 4 蔬菜中有机磷农药的最大残留限量 农药最大残留限量又称最高残留限量或允许残留量，简称m r l ( m a x i m u m u m r e s i d u el i m i t ) 。农药最高残留限量系指在生产或贮运商品过程中，直接或间接使用农 药后，在食品和饲料中允许形成农药残留的最大浓度【1 6 1 。常规的农业生产条件下，食 品中残留有微量农药几乎是不可避免的，问题是要使其中的农药残留减少到对人体无 害的程度，因此就必须制订这种食品中农药的最大残留限量标准。最大残留限量是基 于良好农业规范数据基础上制定的，遵照各自最大残留限量规定的食品在毒理学评价 上应该是安全的。最大残留限量是由国家法定机构或国际食品法典委员会制定，确定 5 的数值能够应用于国际贸易中。 制订农药最大残留限量的意义在于控制食品中过量农药残留以保障消费者的安 全。人们日常在食用各种食品时不可避免地会摄入一定量的残留农药。为了保障人民 的身体健康，就需要制订各种食品包括茶叶中的农药m r l 值。由于在制订农药m r l 标准时已考虑了人们食谱中各种食品的食用量，以及人体的解毒和排毒能力，因此只 要农药残留低于这个限量标准的食品，即使长期食用，也不会对人体产生危害。消费 者的安全也由此得以保障。其次为合理用药提供依据。有了农药的最大残留限量标准， 就可以此为依据，提出该农药的有效剂量、安全间隔期等一系列合理用药的技术措施。 这样可以确保在实施安全合理用药措施后所采下的鲜叶，经加工成成茶后的农药残留 将低于最大残留限量标准。最后，作为进口农产品检验的依据。在国际商品贸易中， 利用技术性法规来控制进口商品的质量标准，以增强国际贸易的竞争力和保护本国利 益。我国己加入世界贸易组织w t o ，根据w t o 的协议规定，加入后关税壁垒的作 用将减少到最低点，而主要依赖于非关税壁垒的作用。农药最大残留限量的制订将是 农产品质量监控的重要内容。由于各国病虫发生情况和人民的膳食结构不同，农产品 出口国和进口国对农药残留量的要求也不完全一致，以及政治因素和贸易因素，所以 各国制订的农药最大残留限量标准也不一致。 有机磷农药在蔬菜上的应用一直比较广泛，正因为如此才造成了有机磷农药的残 留，而且有机磷农药也是蔬菜农药残留检测中必检的项目。欧盟2 0 0 0 2 4 e c 和 2 0 0 0 4 2 e c 规定了更为严格的残留限量规定，新规定中对有机磷农药最高残留限量大 部分都定在0 1m g k g 。2 0 0 6 年6 1 2 月间，我国有1 4 种输日农产品先后被日方实施 命令检查，其中有4 种农产品被检出有机磷超标，违反了“一律标准”。目前，国内 外还没有对竹笋中的有机磷农药最高残留限量作出规定，参考我国目前对蔬菜中有机 磷杀虫剂最高残留限量规定( 见表3 ) ，拟建立一套适合于竹笋中有机磷农药多残留 分析方法。 6 表3 我国蔬菜中有机磷杀虫剂最高残留限量国家标准 t a b l e 3t h em r lo f o r g a n o p h o s p h o r u si n s t i c i d e so f v e g e 诅b l ei nc h i n a 注：卅杖据来源于同络见多写文取6 7 1 5 研究意义及目的 我国竹笋及其制品的主要出口市场是日本，2 0 0 3 年5 月3 0 日日本政府发布食 品卫生法修正案并于2 0 0 6 年5 月2 9 日起正式施行：其在食品中残留农业化学品 肯定列表制度中明确设定了进口食品、农产品中可能出现的7 3 4 种农药、兽药和饲 料添加剂的近5 万个暂定标准，对其未设标准而欧美国家也无标准可参照的农药推行 “一律标准”【6 8 ，6 9 】，即o o l p p m 水平。而我国目前仅制订了1 3 7 种农药的4 7 7 项残 留限量标准，9 8 种兽药6 5 8 项残留限量标准，还有3 9 1 种农药、1 5 5 种兽药没有残留 检测方法标准【7 0 】，与日本“肯定列表制度”的差距极。由于国内外对竹笋上的农药残 留还没有最高残留限量的规定，所以像出口到日本的竹笋一律按照“一律标准”执行， 十分严格。 2 0 0 6 年，中国农产品对日出口8 2 1 亿美元，同比增长3 6 ；自同年日本实施 “肯定列表制度”以来，我农产品出口受到一定影响，部分产品出口受阻，市场份额 被挤占。 根据海关统计，6 1 2 月我对日本出口农产品4 9 亿美元，同比增长3 1 ；其中 对日出口食品4 4 3 亿美元，增长3 6 ，而2 0 0 5 年同期增幅为4 2 。6 - 1 2 月，我对 7 日本市场农产品、食品的出口份额也分别下降到2 5 3 和2 6 5 。其中水煮笋对日本 出口数量同比下降5 6 【”】。 近几年我国有机、绿色、无公害竹笋的标准体系建设得到了一定的推进，竹笋绿 色、无公害地方标准在近几年相继发布，但尚无国家标准而主要执行行业和地方标准。 这些标准主要：前 q y f r l 0 4 8 - - - 2 0 0 6 绿色食品笋及笋制品。以及s n t1 3 5 2 2 0 0 4 ( 出 e l 鲜竹笋检验规程和浙江、福建等地方标准【7 2 】。其中对农药残留