（药理学专业论文）西格列他钠的Ⅰ期临床试验研究.pdf

目录 中文摘要1 英文摘要2 前言4 刖晶q 第一部分西格列他钠的i 期安全耐受性研究 ( 一) 引言9 材料与方法9 结果1 1 讨论1 3 结论0 0000 0 1 4 i 羽表g 0 00ooo o ooooa 1 5 第二部分血浆中西格列他钠浓度测定方法的建立和评价 引言4 0 ( 二) 材料与方法4 0 结果一4 4 讨论4 5 结论4 7 i 虱表4 8 第三部分西格列他钠片的单剂量药物代谢动力学及食物影响的研究 ( 一) 引。言5 6 材料与方法5 6 结果6 0 讨论6 2 结论”6 4 i 羽表6 5 第四部分西格列他钠片的多剂量药物代谢动力学研究 ( 一) 引。言7 7 ( 二) 材料与方法7 7 结果7 9 讨论8 l 结论8 1 图表8 2 参考文献8 9 附录9 3 1 综述9 3 2 发表文章1 0 8 致谢1 0 9 复口大学硕f j 学位论文 中文摘要 西格列他钠是由中国自主研发的新一代非噻哗烷二酮类胰岛素增敏剂，具有 p p a r o ) , 双重激活作用，属于国家一类新药，获“十五 国家重大科技专项项目 资助。临床前研究表明，西格列他钠具有疗效确切、毒副作用较小等特性，预期 对2 型糖尿病及其并发的脂类代谢紊乱、心血管等并发症有较好的预防和治疗作 用。 根据我国s f d a 的要求，需要对西格列他钠进行i 期临床试验研究，本文主 要进行了以下方面的工作：1 研究了西格列他钠片在中国健康受试者中的安全耐 受性。2 建立了高效液相色谱一串联质谱( l c m s m s ) 法测定人血浆中西格列 他钠的浓度。3 进行了西格列他钠片的单剂量药物代谢动力学及食物对药物代谢 动力学影响的研究。4 进行了西格列他钠片的1 6 m g 多剂量药物代谢动力学研究。 结果表明：1 单剂量口服西格列他钠片在剂量4 4 8 m g 范围内安全耐受性良 好。2 建立的l c m s m s 法快速、简便、灵敏度高，定量下限可达2 n g m l ， 批内、批间的r s d 均 5 0 9 k g ；单次静脉注射后雌性和雄性小鼠的l d 5 0 均 2 0 0 m g k g ；而不同剂量组 的比格犬单次口服西格列他钠后未能测定出近似致死剂量，最大耐受剂量 ( m t d ) 4 0 9 k g ，毒性很低。西格列他钠在大鼠和比格犬的长期毒性( 连续6 个月) 试验中，在低剂量组中各项观测指标未见异常；在中、高剂量组中可能会 引起体重增加，性激素的改变，红细胞数和血红蛋白含量的降低，凝血酶原时间 延长，心脏重量增加等异常现象，但是这些毒性是可逆的，停药后1 个月，所有 的变化指标均可恢复正常。在高剂量长期给药后，西格列他钠产生的这些毒副反 应，可能与其激活p p a r ) , 受体有关，而且西格列他钠引起毒性所需的剂量远远 高于罗格列酮所用剂量。另外综合试验、分析结果表明，西格列他钠不具有遗传 毒性和致癌性。 由此可见，西格列他钠的临床i j 药效明确，不仅具有降低血糖、改善机体胰 岛素抵抗作用，而且能够明显地改善脂类代谢紊乱；药物代谢动力学参数比较理 想，多次连续给药无体内蓄积现象；毒副作用相对较小，虽然高剂量长期给药后 会出现一些毒性，但停药后毒性可逆转，而且引起毒性的剂量明显高于具有类似 作用机制的药物( 如罗格列酮) 所用剂量。因此，我们可以预期西格列他钠可以 应用于2 型糖尿病及其并发的脂类代谢紊乱的治疗，并且对2 型糖尿病并发的冠 心病、动脉粥样硬化、心肌梗塞等有较好的防治作用，降低其发病率和死亡率， 可能会成为新一代的非噻唑烷二酮类胰岛素增敏剂，有着良好的发展前景。 西格列他钠经过充分的临床前药理研究，证明其是安全和有效的，但这一阶 段的研究主要是在动物身上或体外进行的。由于动物与人存在明显的种属差异， 单凭动物试验结果则不能对药物用于人体后是否安全有效作出确切的评价，动物 药物代谢动力学的规律和特点也不可能全面、确切地反映该药物在人体的药物代 复口入学硕一 j 学位论文 谢动力学规律和特点，因此西格列他钠作为第1 1 类新药则必须进行新药临床试 验研究。 新药的临床试验研究，一般分为四个时期进行逐步深入的研究。即在临床前 试验的基础上，进行i 期的临床试验1 2 3 1 。i 期临床试验是在人体进行新药试 验的起始期，是首次在正常人体进行人体安全性评价和药物代谢动力学研究 ( p h a r m a c o k i n e t i c s ) 的试验，主要是研究新药在人体的吸收、分布、代谢和排泄 的规律和特点以及人体对新药的耐受性，为i i 期临床试验的剂量确定、给药途径、 给药疗程、制定给药方案提供理论依据。i i 期和1 1 i 期临床试验则开始在少量病人 中对新药反应的早期评价和大量病人试用来评价新药的药效学和药动学的特性 及其开发价值。而期临床试验则是对已在临床广泛应用的新药进行社会性监测 和调查，着重于新药的不良反应监察。 因为西格列他钠片属于中国自主研发的i 类新药，国内尚未见到同类产品的 报道，而国外同类产品仍处于i i 期或i i i 期临床试验阶段1 1 5 。1 6 ，所以需要在中国健 康受试者中进行西格列他钠片的i 期临床试验研究，包括该药物的安全性和耐受 程度的考察、单剂量和多剂量的药物代谢动力学研究。观察西格列他钠片在中国 健康受试者中的安全耐受性；探讨该药物在人体内的药物代谢动力学规律和特 点；考察多次给药时血浆药物浓度达稳态的速度和程度，是否在人体内存在药物 蓄积现象；考察食物对该口服制剂的药物代谢动力学是否存在影响，从而为该新 药在国内的临床合理应用和临床药物治疗方案的制定提供理论依据。 复口大学硕十学位论文 第一部分西格列他钠的i 期安全耐受性研究 ( 一)引言 西格列他钠是新一代的非噻唑烷二酮类胰岛素增敏剂，其制剂为西格列他钠 片，具有p p a r 丫和p p a r o t 受体的双重激活功能。临床前研究表明由于西格列他 钠能够双重激活p p a r t 和p p a r o t 受体，不仅能够提高机体对胰岛素的敏感性， 降低异常升高的血糖水平；同时还对脂类代谢相关基因( 如s r a 3 ，c t p 等) 及 异常的脂类代谢紊乱具有明显的调节作用。但与此同时，临床前毒理学评价研究 结果显示，试验动物在西格列他钠高剂量、长期给药( 连续6 个月) 后，会出现 一些可逆性的毒副作用，例如体重增加、性激素水平降低、凝血酶原时间延长、 贫血、心脏重量增加而且组织病理学检查发现有病理性改变等毒副反应。再者， 动物与人存在明显的种属差异，动物试验结果虽有重要的参考价值，但药物在人 体的反应往往与动物有很大的不同。因此，必须首先在人体内进行临床药理研究， 对该新药的安全性和耐受程度进行考察，是i 期临床试验的第一步。 ( 二)材料和方法 l 受试对象 受试对象为健康男性志愿者，共有3 0 名受试者入选并完成试验。 1 1 入选标准 必须同时符合以下条件方可入选： ( 1 ) 研究前签署知情同意书； ( 2 ) 健康男性受试者； ( 3 ) 年龄在1 8 一- - 4 0 岁间，同一批试验年龄不宜相差1 0 岁； ( 4 ) 体重指数在1 9 , - - - - 2 7k g m 2 之间( 体重指数= 体重( 蚝) 身高( m 2 ) ) ； ( 5 ) 在参加研究前体格检查和实验室检查均正常： ( 6 ) 在参加研究前2 周内未服用任何药物( 包括中药) 。 1 2 排除标准 符合以下任何一条者，必须排除出本研究： ( 1 ) 静息心率低于5 0 次分，或高于1 0 0 次分； ( 2 ) 坐位收缩压低于9 0 m m h g ； ( 3 ) 严重过敏性疾病史； ( 4 ) 有心血管、肾脏、肝脏和严重消化道病史者； 复口大学硕1 ：学位论文 ( 5 ) 患有哮喘或严重的慢性阻塞性肺疾病； ( 6 ) 有神经系统病史、精神异常、内分泌疾病或代谢性疾病史； ( 7 ) 己知h i v 阳性或a i d s 病患者： ( 8 ) 参加研究前二周内患有其他疾患，按研究者判断不适宜参加研究或会影响 研究进行者； ( 9 ) 试验开始前1 个月内或目前正参与其他临床试验者； 0 0 ) 酗酒或滥用药物者，吸烟者或使用鼻烟者，试验前3 个月内曾献血者； a d 在研究期问有合并使用其他药物的需要，会影响对研究药物的分析。 1 3 限制 受试者必须： ( 1 ) 试验开始前一天至整个试验结束禁止吸烟、禁止饮用含酒精、咖啡因的饮 料或食用任何含醇食品； ( 2 ) 服药前一晚1 0 小时开始禁食，不禁水； ( 3 ) 服药前后1 小时禁水，并在4 小时后给予统一标准午餐。 2 受试药物 西格列他钠片，规格：8 m g 片，批号：0 5 0 5 1 8 ，由深圳微芯生物科技有限责 任公司提供。 3 试验设计 本研究采用的是开放、随机、单一中心、五周期剂量递增的试验设计。3 0 名受试者按照随机分配的原则分为5 组，每组6 人，每组受试者将接受一个较前 一组逐渐升高的剂量。 考虑到西格列他钠拟用临床剂量为1 6 - , - 2 4 m g ，单次给药，在临床前动物毒性 试验表明西格列他钠的安全性很好，敏感动物小鼠的l d 5 0 5 0 9 k g ，而大动物 复且人学硕士学位论文 比格犬的m t d 也 4 0 0 9 k g ；并且西格列他钠的规格为8 m g 片，故本研究的试 验剂量设定为：4 m g ，8 m g ，1 6 m g ，2 4 m g ，4 8 m g 。 受试者在给药前一天入住i 期临床病房直到给药后2 4 小时方可离开。在此 期间以一定的时问间隔密切观察受试者的生命体征，进行实验室检查( 包括血液 学检查、血生化检查和尿液分析) 、心电图检查和不良事件的监测，以评价西格 列他钠片的安全性和耐受程度。只有在前一剂量组结束，全部的观察指标显示均 正常( 或异常但无临床意义) ，无任何不良反应发生时，才能进入下一个剂量组 试验。 4 试验观察指标： 4 。l 生命体征 包括给药前和给药后o 5 h ，1 h ，2 h ，4 h ，2 4 h 的坐位血压、心率，2 4 h 的1 2 导联 心电图。 4 2 实验室检查 血液学：给药后2 4 h 测定白细胞计数和分类、血红蛋白、血细胞压积、血小 板计数和红细胞计数。 血液生化：给药后2 4 h 测定总胆红素、总蛋白、白蛋白、a l t 、a s t 、碱性 磷酸酶( a l p ) 、1 - - g t 、乳酸脱氢酶( l d h ) 、尿素氮、肌酐、尿酸、葡萄糖、 胆固醇、甘油三酯、l d l 、h d l 、皮质醇、睾酮。 尿液：给药后2 4 h 测定p h 值、蛋白、葡萄糖、酮体、比重、红细胞、白细 胞。 ( 三)试验结果 3 1 受试者的人口学特征 3 0 名受试者的基本情况为：年龄( 2 0 - - - - 2 5 ) 岁，平均( 2 1 9 0 + 1 1 6 ) 岁； 身高( 1 6 4 - - - 1 8 9 ) c m ，平均( 1 7 2 9 3 6 2 0 ) c m ；体重( 5 5 - 8 5 ) k g ，平均( 6 4 8 2 7 0 7 ) k g ：体重指数( b m i ) ( 1 9 0 3 - - - 2 7 0 0 ) g g m 2 ，平均( 2 1 6 6 + 1 9 2 ) k g m 2 。 具体的人口学资料见表1 1 。 同时对5 组受试者之间的均衡性进行了考察，采用的是对5 组受试者的年龄、 身高、体重进行单因素方差分析的方法。结果显示年龄、升高、体重的组间差别 均无显著性意义( p 值分别为0 0 9 4 ，0 6 9 5 ，0 0 7 9 ，均 0 0 5 ) ，说明5 个剂量组 各组受试者之间是均衡可比的。 复日人学硕。j ：学位论文 3 2 生命体征结果 五组受试者给药前和给药后各时间段( o 5 h ，l h ，2 h ，4 h ，2 4 h ) 的血压和心率 ( 见表1 2 表1 4 ) 。经统计学分析( 配对t 检验) ，除 8 m g 剂量组的收缩压在 给药后1 h 和2 h ，舒张压在给药后1 h ，心率在给药后o 5 h ；( 室) 4 8 m g 剂量组的收 缩压在给药后1 h ，心率在给药后l h 、2 h 和4 h ；这些检测结果与给药前相比有差 异以外( p o 0 5 ) 。 3 31 2 导联心电图结果 五组受试者给药前和给药后2 4 h 1 2 导联一t l , 电图的结果以及p r 间期、q r s 波宽和q t 间期结果均正常( 见表1 5 ) 。经统计学分析( 配对t 检验) ，所有检 测指标均无显著差异( p 0 0 5 ) 。 3 4 实验室检查结果 五组受试者给药前和给药后2 4 h 的血液学、血液生化和尿液分析数据( 见表 1 6 表1 - 2 0 ) 。经统计学分析( 配对t 检验) ，除 4 m g 剂量组平均血小板体积、 a l p 和l d h ；8 m g 剂量组总胆红素、尿素、a l p 和l d l ；1 6 m g 剂量组 a l p 、肌酐、h d l 和l d l ，红细胞平均体积、平均血红蛋白浓度和中性粒细胞 数；2 4m g 剂量组的白蛋白、a l p 、肌酐，白细胞计数、嗜碱性粒细胞百分比、 中性粒细胞数、淋巴细胞数、大单核细胞数和平均血小板体积； 4 8 m g 剂量组 白蛋白、a l p ，白细胞计数、大单核细胞百分比和大单核细胞数；这些检测指标 与给药前有差异( p 0 0 5 ) 。 五组受试者给药f j i 和给药后各时间段( 0 5 h ，l h ，2 h ，4 h ，2 4 h ) 的血压和心率 的统计学分析结果见表1 2 1 ，给药前和给药后2 4 h 1 2 导联心电图的统计学分析结 果见表1 2 2 以及给药前和给药后2 4 h 实验室检查结果( 包括血液生化、血液学 和尿液分析) 的统计学分析结果分别见表1 2 3 和表1 2 4 。与给药前比较，在统 计学上有差异( p 5 0 9 k g ，而大动 物比格犬的m t d 也 4 0 0 9 k g 。如果按敏感动物l d 5 0 的1 6 0 0 计算，则该试验 的最小初始剂量将 4 1 6 m g ；若按大动物( 狗) 最大耐受量( m t d ) 的1 5 - 1 3 计算，所得的结果也很大；所以根据上述的方法无法推测出人用的最小初始剂量。 但是一般认为，人用初始剂量约为预期用于人的治疗剂量的1 1 0 - - 1 5 ，因此根据 西格列他钠片的拟用临床剂量为1 6 2 4 m g ，再加上西格列他钠片的规格为8 m g 片，所以本研究中西格列他钠的初始剂量确定为4 m g 。理论上试验的最大剂量应 采用同类药的临床单次治疗量。然而目前临床上尚无西格列他钠的同类药，同时 考虑到西格列他钠的安全性范围较高、毒副作用小，所以选择4 8 m g 作为最大剂 量，可以为临床用药范围的增大提供一定的理论基础。从初始剂量4 m g 到最大 剂量4 8 m g 之间，可按照每次增加的剂量约为上一次剂量1 5 2 倍的原则，按顺 序剂量递增为8 m g ，1 6 m g 和2 4 m g 。在达到4 8 m g 的最大剂量时，仍未发生任何 不良反应时则按照有关规定终止试验。 4 2 观察指标的选择 受试者的一般情况，血压，心率，心电图以及肝肾功能，血尿常规为基本的 观察指标。由于在临床前长期毒性试验中，大鼠连续灌胃给药6 个月会引起性激 素水平的降低，所以尚需包括睾酮( 如女性则为雌二醇) 、皮质醇的特殊生化检 查。 4 3 安全耐受性讨论 经统计学配对t 检验分析，五组受试者给药前和给药后某些时间段的血压、 心率、实验室检查指标有差异( p o 0 5 ) ，但是其数值均在正常值范围内，这可 能是由于该试验每组受试者人数较少( 6 人) ，个体差异较大所造成，没有太大 的临床统计学意义。 单纯的p p a r y 激动剂t z d 类药物存在着一些与其激活p p a r y 有关的不良反 复q 人学硕l ：学位论文 应，主要表现在以下几个方面：( 1 ) 肝脏毒性：多数为可逆性肝功能改变，少数可 致严重的药物特异性肝损害1 2 ”。与曲格列酮相关的肝脏毒性最明显，经过1 4 0 万例次研究发现曲格列酮有明显的肝损害作用，致死者的比例约为0 0 0 1 ，目 前已被限制使用1 2 6 j ；而罗格列酮、毗格列酮的肝毒性则相对较小。( 2 ) 与血浆增加 有关的副反应【2 7 】：各种t z d 类药物大剂量皆可引起血浆容量增高，心脏负荷增 加、心脏肥大，可致贫血、血红蛋白及红细胞压积降低、水肿、液体滞留。( 3 ) 体 重变化：应用t z d 类药物治疗后，会造成体重增加。其原因与p p a r y 激活后， 刺激脂肪细胞增殖，由内脏脂肪向皮下脂肪组织重分布以及液体滞留，食欲增加 1 2 8 】等有关。( 4 ) 其他反应：有上呼吸道感染及头痛2 9 】；有消化道症状如腹泻【3 0 】； 与其他降血糖药物合用时，可出现低血糖现剩圳。 而p p a r ) , c t 双重激动剂是在激动p p a r y 的同时还能激动p p a r a 的化合物， 能够明显减轻高脂饮食所引起的肝脏甘油三酯的聚集，抑制内脏脂肪的形成，并 可以增加肝脏、肌肉及脂肪等组织对胰岛素的敏感性，降低血脂，改善胰岛素抵 抗【3 2 - 3 3 】；而且通过同时激活p p a r ? 和p p a r o c 能够避免t z d 类药物所具有的不良 反应，可以减少心血管并发症的发生率，不诱导肥胖等。目前处于不同临床试验 阶段的p p a r y c z 双重激动剂如k r p 一2 9 7 、m u r a g l i t a z a r 、t e s a g l i t a z a r 、n e t o g l i t a z o n e 和r a g a g l i t a z a r 等均表现出良好的安全和耐受性，不良反应都比较小。因此西格 列他钠作为与上述五种药物同类的新型p p a r t t x 又 y , 重激动剂，在理论上也同样具 有良好的安全耐受性。而且临床前动物试验表明了西格列他钠的毒性很低，安全 范围很高；同时本研究i 期临床试验中也进一步证实了西格列他钠在人体内的安 全性良好。所以，西格列他钠的安全耐受性还是比较理想的。 但是与此同时，西格列他钠作为新一代的非噻唑烷二酮类胰岛素增敏剂，是 否会出现与其自身有关的毒副作用，用于2 型糖尿病患者的长期治疗是否安全有 效，则还有待于西格列他钠的临床前动物试验和临床i i 期、i i i 期和期试验的进 一步研究和评价。 ( 五)结论 本研究结果表明，口服西格列他钠片在剂量4 m g - - - 4 8 m g 范围内无任何不良 反应发生，生命体征和实验室检查均没有临床统计学意义的变化，说明其在中国 健康受试者中的安全性和耐受性良好，为1 1 期i i i 期临床试验剂量的安全范围 ( 4 m g - - 4 8 m g ) 提供参考依据。 复口人学硕1 ：学位论文 表1 1 受试对象人口学资料 剂量组 编号年龄( 岁) 身高( c m )体重( k g ) b m i ( k g m 2 ) 4 m g 2 2 2 3 2 2 2 2 2 5 2 l 2 2 5 0 1 3 8 1 7 3 1 7 8 1 8 l 1 7 5 1 7 3 1 6 9 1 7 4 8 3 4 2 2 6 0 6 2 6 4 6 6 6 5 6 3 6 3 3 3 2 1 6 2 0 0 5 1 9 5 7 1 9 5 4 2 1 5 5 2 1 7 2 2 2 0 6 2 0 7 5 1 1 5 1 32 41 8 48 5 2 5 1 1 1 42 31 8 2 7 22 1 7 4 1 52 11 7 36 l 2 0 3 8 1 62 31 7 0 6 42 2 1 5 1 6 m g 1 72 3 1 6 56 02 2 0 4 1 82 21 7 56 5 2 1 2 2 m e a n 2 2 6 7l7 4 8 36 7 8 32 2 il s d1 0 37 1 99 4 1 1 6 1 _-_-_-一-l_o-_-_。oo。o。o。一 1 5 。 2 3 4 5 6 妨 复旦人学硕f ：学位论文 2 52 21 6 6 6 32 2 8 6 2 62 1 1 7 05 51 9 0 3 2 72 31 6 57 0 2 5 7 1 2 82 1 1 7 25 8i 9 6 l 4 8 m g 2 9 2 l1 6 57 3 52 7 3 02 l1 6 5 5 52 0 2 m e a n2 1 5 0 1 6 7 1 76 2 4 22 2 4 0 s d 0 8 43 0 67 8 83 3 6 m e a r l2 1 9 01 7 2 9 3 6 4 8 22 1 6 6 总体 s d1 1 6 6 27 0 71 9 2 1 6 复且人学硕士学位论义 表1 2 不同剂量组西格列他钠片给药前后一收缩压( m m h g ) 剂最组编号给药前 o 5 h l h2 h4 h2 4 h 19 81 0 01 0 0 1 0 811 01 0 0 29 89 89 61 1 01 0 4 9 8 31 0 09 6 1 0 01 0 89 81 0 0 4l1 01 1 41 0 8 1 1 41 1 21 0 8 4 m g 1 0 2 1 0 01 0 01 0 81 0 01005 v 611 41 0 41 0 8 1 0 41 1 411 0 m e a r l 1 0 3 6 710 2 0 010 2 0 0l0 8 6 7 10 6 3 3l0 2 6 7 s d6 7 46 4 5 4 9 03 2 76 6 25 0 1 2 5 2 6 2 7 2 8 4 8 m g 2 9 3 0 m e a n 9 4 1 0 8 1 0 4 l l o 1 0 0 1 0 8 1 0 4 o o 9 2 l1 0 1 0 2 1 0 6 9 0 1 0 8 l o l - 3 3 9 4 1 0 0 1 0 2 1 0 4 9 0 9 8 9 8 0 0 8 8 1 0 4 1 0 6 9 4 9 2 1 0 4 9 8 0 0 9 0 1 0 2 1 0 4 ll o 9 4 1 1 0 1 0 1 6 7 9 0 9 0 1 0 2 1 1 0 9 2 9 4 9 6 3 3 s d 6 0 78 4 55 2 27 5 98 2 4 8 0 4 _-_ll_-_-_-一l-_-_一。一 1 7 复r 口人学硕j j 学位论文 表1 3 不同剂量组西格列他钠片给药前后一舒张压( m m h g ) 1 8 复口人学硕上学位论文 表1 4 不同剂量组西格列他钠片给药前后一心率( 次m i n ) - i 9 复口人学颂l j 学位论文 表1 5 不同剂量组西格列他钠片给药前后心电图的结果 2 0 - i 一 一卜oo oo o寸o on t on 卜o2 o 西o 一 n o9譬“ 寸n 一 n n n 一口n o 吐一 卜6 n 1 n 卜n 卜 n n o n 口o 一 o oo 一on on o “卜nn o n 昏i o 口 n 田6 nn 一n c i “卜四n 8 i 卜口n 寸n n 西nn 小n 一寸 卜心n ： 卜寸 心卜oo on o o口o o崎9 on t o一o苌o 口口o 寸“o n “ 甘c 一 n 寸n n 一n t r n _ 寸节n c i 一 卜n c”n o 卜o n o on i oo n on n n n n on o “n 口“ n n 1 甘卜- o ” o 卜“ 2 1 6 一 n n 寸n o o n西9 o _ l 寸 卜一寸寸一 o 寸 一一 一o 0 一on o t 一 乜nn 0 一 一9 t 小nn “ 口“ o 西一 o ”n 冀n n崎n 西 c n 寸 ! 卜乜寸 一一一 一o 0岔o o n on一寸一o n 一 气寸 岔卜n寸9 n c 卜 。昏一 寸”n n n ni 西n i 寸 卜= n 匕寸 o 一 一o on q o n o 6 一 昏n n o一寸 田 n 9 n冀n n n “ 一 寸寸n 一西n寸 西n 寸n 一 口寸 i - = n o on o o 小i 一c，oc西“ 乱n 寸n 口“ n n n口寸n 心- 6 n冀n 一寸 n =寸 t _ _ n o 0卜o 0 c o n i n n o i 卜 - 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