（水产养殖专业论文）刺参apostichopus+japonicus+selenka高效免疫增强剂的筛选与应用.pdf

ji1，1 i 独创声明 本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成 果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表 或撰写过的研究成果，也不包含未获得中国海注太学或其他教育机构的学位或证 书使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确 的说明并表示谢意。 靴论文作者签名批参签字吼如晖石月f 日 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并向国家 有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权学校可以 将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等 复制手段保存、汇编学位论文。同时授权中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到 中国学位论文全文数据库，并通过网络向社会公众提供信息服务。( 保密的学位论文 在解密后适用本授权书) 学位论文作者签名： 导师签字： 签字日期：2 0 f o 年月l 歹日 签字日期： 舻f 月f r 日 中国海洋大学博士毕业论文：刺参似d 啦向印淞冲铆 伽ss e l e f l l c a ) 高效免疫增强剂的筛选与应用 刺参( a p o s t i c h o p u s j a p o n i c u ss e l e n k a ) 高效免疫增强剂的筛选 与应用 于两晏 本文选择我国北方海参养殖的主要种类刺参( a p o s t i c h o p u sj a p o n i c u ss e l e n k a ) 为研究 对象，通过一系列在室内循环水养殖系统中开展的养殖实验，探讨了在刺参基础饲料中 分别添加具有免疫促进作用的营养素( 维生素c 和维生素e ) 、多糖( p 葡聚糖) 、低聚糖( 低 聚果糖、甘露寡糖) 以及微生态制剂( 枯草芽孢杆菌、硒酵母、酵母培养物) 对刺参生长、 免疫及抗病力的影响。主要研究内容如下： 1 以初始体重为( 5 0 84 - o 0 8 ) g 的健康刺参( a p o s t i c h o p u s j a p o n i c u ss e l e n k a ) 为实验对象， 采用3 x 3 双因子设计，在基础饲料中分别添加0 、5 0 0 和2 0 0 0m gk g 。包膜维生素c ， 每种维生素c 水平分别添加0 、6 2 5 和1 2 5 0m gk g 13 - 葡聚糖，共制成9 种实验饲料， 在室内水循环系统中进行了为期9 周的饲喂实验，探讨了饲料中不同含量的维生素 c 和b 葡聚糖对刺参生长性能、免疫力和抗病力的影响。研究结果表明：维生素c 和b 葡聚糖对刺参的特定生长率都有显著影响，且同时添加高剂量维生素c 和p 一 葡聚糖的实验组刺参的特定生长率显著高于对照组( p 0 0 5 ) ；维生素c 和d 一葡聚糖 对刺参体腔细胞的吞噬活性、呼吸爆发活性、酚氧化酶活性和酸性磷酸酶活性均有 显著影响( 尸 o 0 5 ) ，当饲料中不添加维生素c 时，p 葡聚糖的添加显著增强了刺参的 呼吸爆发活性、酚氧化酶活性和酸性磷酸酶活性伊 o 0 5 ) ，当饲料中只添加5 0 0m g k g 。维生素c 时，添加6 2 5m gk g 。的p 葡聚糖可以增强显著刺参的吞噬活性和酚氧 化酶活性( 尸 o 0 5 ) ，而添加1 2 5 0m gk 9 4 的p 一葡聚糖可以显著增强刺参的呼吸爆发活 性和酸性磷酸酶活性( 尸 0 0 5 ) 。当饲料中添加2 0 0 0m gk 9 1 维生素c 时，添加6 2 5m g k 9 1 的b 葡聚糖可以显著增强刺参的酚氧化酶活性和酸性磷酸酶活性衅o 0 5 ) ，而添 加1 2 5 0m gk g 以的p 一葡聚糖可以显著增强刺参的吞噬活性、呼吸爆发活性、酚氧化 酶活性和酸性磷酸酶活性( 尸 o 0 5 ) 。饲料中不同浓度的p 一葡聚糖对刺参感染灿烂弧 菌后的累积死亡率有显著影响俨 o 0 5 ) ，当饲料中添加5 0 0m gk 9 1 和2 0 0 0m gk g 。1 的维生素c 时，随着饲料中p 葡聚糖含量的升高，刺参的累积死亡率呈下降的趋势， 尤其饲料中添加5 0 0m gk g 。维生素c 和高水平的p 葡聚糖( 1 2 5 0m gk g j ) 的实验组显 著降低了刺参感染灿烂弧菌1 4 d 内的累积死亡率( 尸 0 0 5 ) 。在本实验条件下，维生素 参特定生长率均有显著影响沪 o 0 5 ) ，且当饲料中不添加维生素c 或添加2 0 0 0m g k g 。维生素c 时，添加2 5 0m gk g 。1 的维生素e 实验组刺参的特定生长率显著高于对 照组畔0 0 5 ) ；维生素c 和维生素e 对刺参体腔细胞的吞噬活性、酚氧化酶活性和 酸性磷酸酶活性都有显著的影响( p 0 0 5 ) ，当饲料中单独添加维生素c 时，刺参的 吞噬活性随着维生素c 添加量的增加有上升的趋势，且2 0 0 0m gk g 。1 维生素c 添加 组刺参的吞噬活性显著高于对照组( 尸 0 0 5 ) 。当饲料中不添加维生素c 时，添加2 5 0 m gk g 。1 的维生素e 实验组刺参的吞噬活性显著高于对照组( 尸 0 0 5 ) 。当饲料中添加 添加5 0 0m gk g - 1 维生素c 时，刺参的吞噬活性、呼吸爆发活性和酚氧化酶活性随 着饲料中维生素e 的添加有上升的趋势，且添加2 5 0m gk g 。1 的维生素e 实验组刺参 的酚氧化酶活性显著高于对照组限o 0 5 ) 。当饲料中添加2 0 0 0m gk 9 1 维生素c 时， 刺参的呼吸爆发活性、酚氧化酶活性和酸性磷酸酶活性随着饲料中维生素e 的添加 有上升的趋势，且添加2 5 0m gk g - 1 的维生素e 实验组刺参的吞噬活性、呼吸爆发活 性、酚氧化酶活性和酸性磷酸酶活性都显著高于对照组b o 0 5 ) 。饲料中不同浓度的 维生素e 对刺参感染灿烂弧菌后的累积死亡率有显著影响妒 o 0 5 ) ，在任何维生素c 添加水平下，随着饲料中维生素e 含量的升高，刺参的累积死亡率呈下降趋势，尤 其饲料中同时添加高剂量的维生素c ( 2 0 0 0m gk g 。1 ) 和维生素e ( 2 5 0m gk 9 1 ) 的实验组 显著降低了刺参感染灿烂弧菌1 4 d 内的累积死亡率( 尸 0 0 5 ) 。在本实验条件下，维生 素c 和维生素e 对刺参体腔细胞的吞噬活性表现出显著的交互作用帜0 0 5 ) 。 3 以初始体重为( 5 0 6 士o 1 0 ) g 的刺参( a p o s t i c h o p u s j a p o n i c u ss e l e n k a ) 为实验对象，在 室内水循环系统中进行了为期8 周的饲喂实验，探讨了饲料中不同含量的低聚果糖 和枯草芽孢杆菌对刺参生长性能、免疫力、肠道菌群以及抗病力的影响。本实验采 用3 x 3 双因子实验设计，在基础饲料中分别添加0 、o 2 和0 5 的枯草芽孢杆菌， 中国海洋大学博士毕业论文：刺参( a p o s t i c h o p u s j a p o n i c u ss e l e n k a ) 高效免疫增强剂的筛选与应用 每种枯草芽孢杆菌水平分别添加o 、0 2 5 和o 5 的低聚果糖( 有效含量为9 5 ) ， 共制成9 种实验饲料，每个处理三个重复。研究结果表明，当不添加低聚果糖时， 0 2 枯草芽孢杆菌显著提高了刺参的特定生长率( s g r ) 和刺参体腔细胞吞噬活性 ( 尸 o 0 5 ) ，显著降低了刺参感染灿烂弧菌后的累积死亡率( 尸o 0 5 ) 。当不添加枯草芽 孢杆菌时，刺参s g r 、p o 和吞噬活性随着低聚果糖的添加而升高，且饲料中添加 o 5 低聚果糖时，刺参体腔细胞破碎液中吞噬活性、酚氧化酶活性和酸性磷酸酶活 性都显著高于对照组沪 o 0 5 ) ，当饲料中枯草芽孢杆菌含量为o 2 时，o 5 低聚果 糖可以显著提高刺参的特定生长率、吞噬活性、p o 活性( p 0 0 5 ) ，显著降低刺参肠 道弧菌数及刺参感染灿烂弧菌后的累积死亡率( p o 0 5 ) ；当饲料中枯草芽孢杆菌含量 为o 5 时，0 2 5 低聚果糖添加组显著提高了刺参的酚氧化酶活性和酸性磷酸酶活 性( 尸 0 0 5 ) ，降低了刺参感染细菌后1 4 d 内的累积死亡率妒 o 0 5 ) 。枯草芽孢杆菌和 低聚果糖对刺参的吞噬活性、酚氧化酶活性、弧菌数目以及抗病力产生了明显的交 互作用伊 o 0 5 ) ；刺参肠道总菌数不受低聚果糖添加量的影 响，但是两低聚果糖组刺参肠道中的弧菌数显著低于对照组( 尸 0 0 5 ) ；饲料中添加甘露寡糖可以提高刺参肠道中 的总菌数，降低肠道中的弧菌数，0 2 5 和0 5 甘露寡糖组刺参肠道中的总菌数均 显著高于对照组( p 0 0 5 ) ，但只有0 5 甘露寡糖添加组刺参肠道中的弧菌数显著低 于对照组伙0 0 5 ) 。0 2 5 甘露寡糖组刺参体腔细胞吞噬活性和呼吸爆发活性显著高 于其他两组( 尸 0 0 5 ) 。0 2 5 甘露寡糖组刺参感染灿烂弧菌1 4 d 的累积死亡率显著降低 护 o 0 5 ) ；( 3 ) 综上所述，饲料中分别添加0 5 的低聚果糖或者0 2 5 的甘露寡糖对 刺参生长、免疫力和抗病力的效果较好。二者均可以作为安全高效的口服免疫增强 剂应用于刺参的养殖生产。 5 以初始体重为( 3 5 24 - 0 0 8 ) g 的刺参( a p o s t i c h o p u sj a p o n i c u ss e l e n k a ) 为实验对象，在 室内水循环系统中进行了为期8 周的饲喂实验，探讨了饲料中不同含量的硒酵母和 维生素e ( v e ) 对刺参生长性能、免疫力以及抗病力的影响。本实验采用2 x 4 双因子 实验设计，在基础饲料中分别添加0 和2 5 0m gk g 。的v e ，每种v e 水平分别添加o 、 1 0 0 、3 0 0 和6 0 0m gk 鸢1 的硒酵母，共制成8 种实验饲料，每个处理3 个重复。研究 结果表明，硒酵母和维生素e 对刺参的特定生长率均有显著影响，饲料中添加硒酵 母和维生素e 的不同配伍均可显著提高刺参特定生长率( p o 0 5 ) ，高剂量硒酵母( 6 0 0 m gk g 。1 ) 和维生素e ( 2 5 0m gk g 1 ) 添加组刺参的特定生长率最高；当饲料中不添加维 生素e 时，随着硒酵母添加量的增加，刺参的吞噬活性、呼吸爆发活性、酚氧化酶 活性和酸性磷酸酶活性呈剂量依赖性升高，且6 0 0m gk g - 1 硒酵母添加组刺参的吞噬 活性、呼吸爆发活性、酚氧化酶活性和酸性磷酸酶活性均显著高于对照组( p o 0 5 ) 。 当饲料中添加2 5 0m gk g 。1 的维生素e 时，添加6 0 0m gk g - 1 硒酵母实验组刺参的吞 噬活性、呼吸爆发活性和酚氧化酶活性高于其他各处理组，并显著高于对照组 ( 尸 0 0 5 ) ；维生素e 对过氧化氢酶活性( c a t ) 、谷胱甘肽过氧化物酶( g s h p x ) 活性、 超氧化物歧化酶( s o d ) 活性都有显著的影响沪 0 0 5 ) ，而硒酵母仅对s o d 和g s h p x 活性影响显著( p 0 0 5 ) ；当饲料中不添加维生素e 时，饲料中单独添加硒酵母可以降低刺 参感染灿烂弧菌后的1 4 d 内的累积死亡率，且随着添加量的增加刺参的累积死亡率 有下降的趋势( 胗0 0 5 ) 。当饲料中添加添加2 5 0m gk g 。的维生素e 时，各水平硒酵 母添加组的刺参感染灿烂弧菌后1 4 d 的累积死亡率显著低于对照组( p 0 0 5 ) 。其中同 时添加6 0 0m gk g 。1 硒酵母和2 5 0m gk 百1 的维生素e 的实验组显著提高了刺参的特 定生长率、非特异性免疫力和抗氧化酶活力，显著降低了刺参感染灿烂弧菌后的累 积死亡率，表现出较好的复合益生效果，是本研究最优的功能组合。 6 以初始体重为( 3 4 9 - a ：0 0 6 ) g 的刺参( a p o s t i c h o p u s j a p o n i c u ss e l e n k a ) 为实验对象，在室 内水循环系统中进行了为期8 周的饲喂实验，探讨了饲料中不同含量的酵母培养物 中国海洋大学博士毕业论文：刺参o 印f 触叩淞却o n 耙甜ss e l e n k a ) 高效免疫增强剂的筛选与应用 ( 达农威益康x p ) 和枯草芽孢杆菌对刺参生长性能、免疫力、肠道菌群以及抗病力的 影响。本实验采用2 4 双因子实验设计，在基础饲料中分别添加0 和0 2 的枯草芽 孢杆菌，每种枯草芽孢杆水平分别添加0 、0 1 、o 2 和0 4 的酵母培养物，共制 成8 种实验饲料，每个处理三个重复。研究结果表明，当不添加枯草芽孢杆菌时， 酵母培养物显著提高了刺参的吞噬活性、呼吸爆发活性、a c p 和s o d 活性妒 o 0 5 ) ， 显著降低了刺参感染灿烂弧菌1 4 d 内的累积死亡率( 氏o 0 5 ) ；当添加o 2 的枯草芽 孢杆菌时，酵母培养物添加组的刺参特定生长率、肠道总菌数、呼吸爆发活性、a c p 等的活性都显著高于对照组( 尸 0 0 5 ) ，且当饲料中酵母培养物的含量达到o 4 时， 刺参体腔细胞的吞噬活性和呼吸爆发活性达到了最高水平。相应地，刺参感染细菌 后1 4 d 内的累积死亡率也显著低于对照组( p o 0 5 ) 。双因素统计分析结果表明，酵母 培养物( 达农威益康，) 和枯草芽孢杆菌对刺参肠道总茵数和非特异性免疫力都产生 了明显的交互作用( 尸 o 0 5 ) 。 关键词：刺参，饲料，生长，肠道菌群，免疫力，抗病力 中国海洋大学博士毕业论文：刺参( 4 p r f c ，l 印甜j 却d 打切岱s e l e n l 【a ) 高效免疫增强剂的筛选与应用 中国海洋大学博士毕业论文：刺参( a p o s t i c h o p u s j a p o n i c u ss e l e n k a ) 高效免疫增强剂的筛选与应用 t h es e l e c t i o na n da p p l i c a t i o no fh i g h - e f f e c t i v ei mm u n o s t i m u l a n t s 。r ；u m b e r ( a p o s t i c h o p u si a p o n i c u sselenka)ior s e ac u c u m b e r ( a p o s t i c h o p u sl a p o m cs e l e n k a a b s t r a c t s i xf e e d i n gt r i a l sw e r ec o n d u c t e di ni n d o o rc i r c u l a t i n gs y s t e mt oi n v e s t i g a t et h ee f f e c t so f d i e t a r yv i t a m i nc ，v i t a m i ne ，1 3 - g l u c a n ，b a c i l l u ss u b t i l i s ，f r u c t o o l i g o s a c c h a r i d e s ( f o s ) ， m a n n o o l i g o s a c c h a r i d e s ( m o s ) ，s e l e n i u my e a s t ( s e - y e a s t ) a n dy e a s tc u l t u r e ( d i a m o n dvx p y e a s t c u l t u r e ，x p ) o ng r o w t h ，i m m u n i t ya n dd i s e a s e r e s i s t a n c ei ns e ac u c u m b e r ( a p o s t i c h o p u s j a p o n i c u ss e l e n k a ) t h e r e s u l t sa r es u m m a r i z e da sf o l l o w s ： 1 a9 - w e e kf e e d i n ge x p e r i m e n tw a sc o n d u c t e dt oi n v e s t i g a t et h ee f f e c to fv i t a m i nca n d i b - g l u c a no nt h eg r o w t hp e r f o r m a n c e ，i m m u n i t ya n dd i s e a s er e s i s t a n c eo fs e ac u c u m b e r 研 j a p o n i c u ss e l e n k a ) f i v eh u n d r e da n df o r t yi n d i v i d u a l s ( i n i t i a lb o d yw e i g h t ：5 0 84 - 0 0 8 ) g ，m e a n4 - s e ) w e r ef e d 谢mn i n ep r a c t i c a ld i e t sa c c o r d i n gt oa3x3f a c t o r i a ld e s i g n ：t h e b a s a ld i e ta st h ec o n t r o ld i e ts u p p l e m e n t e dw i t ht h r e el e v e l so fv i t a m i nc ( 0 ，5 0 0 ，2 0 0 0 m gk g d i e t ) ，a n de a c hc r o s s e d 谢t 1 10 ，6 2 5o r12 5 0m gk g p - g l u c a n a f t e r9w e e k s ，f i v e s e ac u c u m b e r sp e rt a n kw e r es a m p l e df o ri m m u n ei n d i c e sd e t e r m i n a t i o n t h e na l lt h es e a c u c u m b e r sl e f tw e r ec h a l l e n g e db yv i b r i os p l e n d i d u s t h er e s u l t ss h o w e dt h a td i e t a r y v i t a m i nca n d1 3 - g l u c a nh a ds i g n i f i c a n te f f e c t so ns p e c i f i cg r o w t hr a t e ( s g r ) o fa j a p o n i c u s 畔0 0 5 ) s g ro ft h es e a c u c u m b e rw i t ht h ec o m b i n a t i o no f2 0 0 0m gk g 吐 v i t a m i nca n d12 5 0m gk g 1p - g l u c a nw a ss i g n i f i c a n t l yh i g h e rt h a nt h ec o n t r o lg r o u p 妒 o 0 5 ) a c t i v i t i e so fp h a g o c y t o s i s ，r e s p i r a t o r yb u r s t ( r b ) ，p h e n o l o x i d a s e ( p o ) a n da c i d p h o s p h a t a s e ( a c p ) w e r es i g n i f i c a n t l yi n f l u e n c e db yd i e t a r yv i t a m i nca n d1 3 - g l u c a n 衅0 0 5 ) i nt h ea b s e n c eo fd i e t a r yv i t a m i nc ，a c t i v i t i e so fr b ，p oa n da c ps i g n i f i c a n t l y i n c r e a s e dw i t hi n c r e a s i n gf ；- g l u c a n ( p 0 0 5 ) i nt h eg r o u p sw i t h5 0 0m gk g v i t a m i nc ， s e ac u c u m b e r sf e dw i t h6 2 5m g k g 1 3 - g l u c a nh a ds i g n i f i c a n th i g h e rp h a g o c y t o s i sa n dp o a c t i v i t yt h a nt h ec o n t r o lg r o u p ( 尸 0 0 5 ) ，a n dt h o s ef e d 谢t l l12 5 0m gk g 以1 3 - g l u c a nh a d s i g n i f i c a n th i g h e rr ba c t i v i t ya n da c pa c t i v i t y ( p 0 0 5 ) i nt h eg r o u p s 谢t h2 0 0 0m g v i t a m i nck g d i e t ，6 2 5m gk g 11 3 - g l u c a ns u p p l e m e n t a t i o nr e m a r k a b l yi n c r e a s e dp o a c t i v i t ya n da c pa c t i v i t yp 0 0 5 ) ，w h i l e 12 5 0m gk g q 1 3 - 酉u c a ns u p p l e m e n t a t i o n s i g n i f i c a n t l ye n h a n c e dp h a g o c y t o s i s ，r ba c t i v i 饥p oa c t i v i t ya n da c pa c t i v i t y ( 氏0 0 5 ) m o r e o v e r , d i e t a r yb - g l u c a nh a ds i g n i f i c a n te f f e c t o nc u m u l a t i v e m o r t a l i t y o fs e a p h a g o c y t o s i s ，p h e n o l o x i d a s e ( p o ) a c t i v i t ya n da c i dp h o s p h a t a s e ( a c p ) a c t i v i t y ( 尸 o 0 5 ) i nt h eg r o u p s 谢t hv i t a m i nca l o n e ，p h a g o c y t o s i si n c r e a s e d 诵t ht h ei n c r e a s i n gd o s e so f v i t a m i nca n dw a ss i g n i f i c a n t l ye n h a n c e db y2 0 0 0m gk 9 1v i t a m i nc 衅0 0 5 ) i nt h e g r o u p sw i t h o u tv i t a m i ncs u p p l e m e n t a t i o n ，p h a g o c y t o s i so fs e ac u c u m b e r sf e d 晰t l l2 5 0 m gk g 以v i t a m i ne w a ss i g n i f i c a n t l yh i g h e rt h a nt h ec o n t r o lg r o u p ( p 0 0 5 ) i nt h eg r o u p s w i t h5 0 0m gk g v i t a m i nc ，p h a g o c y t o s i s ，r e s p i r a t o r yb u r s t ( r b ) a c t i v i t ya n dp oa c t i v i t y s h o w e di n c r e a s i n gt e n d e n c y 、析t 1 1t h ei n c r e a s i n ga d m i n i s t r a t i o nd o s e so fv i t a m i ne 职0 0 5 ) ，a n dp oa c t i v i t yo ft h eg r o u pf e dw i t h2 5 0m gk g 。1v i t a m i nes i g n i f i c a n t l y i n c r e a s e d c o m p a r e dw i t h t h e c o n t r o l 俨 0 0 5 ) i nt h eg r o u p s 谢l 2 0 0 0m g k g s u p p l e m e n t a t i o no fv i t a m i nc ，r ba c t i v i t ya n dp oa c t i v i t ya n d a c p a c t i v i t yi n c r e a s e d 谢lt h ed o s e so fv i t a m i ne ，a n da l lt h ei m m u n ei n d i c e si nt h eg r o u pf e d 谢t l l2 5 0m gk g “v i t a m i new a ss i g n i f i c a n th i g h e rt h a nt h ec o n t r o lg r o u p 妒 0 0 5 ) m o r e o v e r , d i e t a r y v i t a m i neh a ds i g n i f i c a n te f f e c to nc u m u l a t i v em o r t a l i t yo fs e ac u c u m b e r sa f t e r14d a y s f o l l o w i n g 形s p l e n d i d u se x p o s u r e 畔0 0 5 ) c u m u l a t i v em o r t a l i t yd e c r e a s e dw i t ht h e i n c r e a s i n g d o s e so fv i t a m i nea te a c hv i t a m i ncl e v e l n l eg r o u pf e dw i t hd i e t s p h a g o c y t o s i so fs e ac u c u m b e r ( p 0 0 5 ) t h es g r , p oa c t i v i t y , t b c a n dv b cw e r e s i g n i f i c a n t l ya f f e c t e db yd i e t a r yf o s i nt h eg r o u p s 谢t i l 丑s u b t i l i sa l o n e ，s g ra n d p h a g o c y t o s i so fo 2 丑s u b t i l i sa d m i n i s t r a t i o ns i g n i f i c a n t l yi n c r e a s e dc o m p a r e dt ot h e c o n t r o lg r o u p ( 尸 0 0 5 ) ，w h i l ec u m u l a t i v em o r t a l i t yo fs e ac u c u m b e r ss i g n i f i c a n t l y d e c r e a s e d ( p 0 0 5 ) i nt h eg r o u p sw i t h o u t 丑s u b t i l i s ，s g r ，p h a g o c y t o s i sa n dp oa c t i v i t y i n c r e a s e d 晰t l lt h ed o s e so ff o s ，a n dp h a g o c y t o s i s ，p oa c t i v i t ya n da c pa c t i v i t yo ft h e g r o u pf e dw i t h0 5 f o ss i g n i f i c a n t l ye n h a n c e dc o m p a r e dt h ec o n t r o l ( p 0 0 5 ) i nt h e g r o u p s 谢t 1 1o 2 最s u b t i l i s ，o 5 f o ss u p p l e m e n t a t i o ns i g n i f i c a n t l yi n c r e a s e dt h es g r ， p h a g o c y t o s i sa n dp oa c t i v i t yo fs e ac u c u m b e r s ，w h i l en o t a b l y d e c r e a s e dv b ca n d c u m u l a t i v em o r t a l i t y 俨 0 0 5 ) i nt h eg r o u p sf e dw i t h0 5 丑s u b a l 西，0 2 5 f o s s u p p l e m e n t a t i o ns i g n i f i c a n t l yi n c r e a s e dt h ep oa c t i v i t ya n da c pa c t i v i t y o fs e a c u c u m b e r s ，w h i l es i g n i f i c a n t l yd e c r e a s e dc u m u l a t i v em o r t a l i t y u n d e rt h ee x p e r i m e n t a l c o n d i t i o n s ，d i e t a r y 丑s u b t i l i sa n df o sh a das y n e r g i s t i ce f f e c to ne n h a n c i n gp h a g o c y t o s i s ， p oa c t i v i t ya n dd i s e a s er e s i s t a n c eo fs e ac u c u m b e r 妒 0 0 5 ) 4 a n8 - w e e k f e e d i n ge x p e r i m e n t w a sc o n d u c t e dt oe v a l u a t et h ee f f e c t so f f o sa n dm o so n g r o w t h ，n o n s p e c i f i ci m m u n i t y o fs e ac u c u m b e r 似 j a p o n i c u ss e l e n k a ) a sw e l la si t sr e s i s t a n c e a g a i n s t 矿s p l e n d i d u s f o sa n d 中国海洋大学博士毕业论文：刺参g 和f 曲叩淞却o n 似ss e l e n j c a ) 高效免疫增强剂的筛选与应用 m o sw e r ea d m i n i s t e r e dt os e ac u c u m b e r st h r o u g ht h ed i e t sa tt h r e el e v e l s ( 0 ，0 2 5 a n d o 5 ，r e s p e c t i v e l y ) t h eb a s a ld i e tw i t h o u tf o so rm o sw a su s e da st h ec o n t r 0 1 e a c h d i e tw a sr a n d o m l ya l l o c a t e dt ot r i p l i c a t eg r o u p so fs e ac u c u m b e r si ni n d o o r5 0lt a n k s 、析t l lc i r c u l a t i n gs e a w a t e ra n dc o n s t a n ta e r a t i o n a n de a c ht a n kw a ss t o c k e dw i t l l2 2s e a c u c u m b e r s ( i n i t i a la v e r a g ew e i g h t3 0 44 - o 0 6 曲t h er e s u l t ss h o w e dt h a t ：i f o s s u p p l e m e n t e da to 5 s i g n i f i c a n t l ye n h a n c e dt h es p e c i f i cg r o w t hr a t e ( s g r ) o fs e a c u c u m b e r s ( 尸 0 0 5 ) h b r i ob a c t e r i ac o u n t s ( v b c ) i n s t e a do ft o t a lb a c t e r i ac o u n t s ( t b c ) w e r es i g n i f i c a n t l ya f f e c t e db yf o s a d m i n i s t r a t i o n 妒 o 0 5 ) p h a g o c y t o s i s ，r ba c t i v i t y , p oa c t i v i t y a n da c pa c t i v i t y s i g n i f i c a n t l yi n c r e a s e dw i t ht h ei n c r e a s i n gd o s e so ff o s ，a n da l lo ft h e s ef o u ri m m u n e i n d i c e sw e r er e m a r k a b l ye n h a n c e db yo 5 f o ss u p p l e m e n t a t i o n ( p 0 0 5 ) i i s e a c u c u m b e r sf e d 晰t l l0 2 5 a n d0 5 m o ss u p p l e m e n t a t i o nh a dn os i g n i f i c a n td i f f e r e n c e i ns g rp 0 0 5 ) t h eg r o u p sw i t ht w ol e v e l so fm o sh a dh i g h e rt b ct h a nt h ec o n t r o l g r o u p 妒 o 0 5 ) ，a n do 5 m o sh a dl o w e rv b cc o m p a r e d 晰t l lt h ec o n t r o l 妒 0 0 5 ) p h a g o c y t o s i sa n dr ba c t i v i t yi ns e ac u c u m b e r sf e d 谢t l l0 2 5 m o sw a ss i g n i f i c a n th i 曲 w h e nc o m p a r e dw i t ht h ec o n t r o la n d0 5 m o ss u p p l e m e n t a t i o ng r o u p 妒 0 0 5 ) t h ec h a l l e n g ee x p e r i m e n t s h o w e dt h a ts e ac u c u m b e r sf e dt h ed i e tw i t h0 2 5 m o sh a ds i g n i f i c a n t l yl o w e r c u m u l a t i v em o r b i d i t yc o m p a r e d 诵t l lt h ec o n t r o lg r o u p ( p 0 0 5 ) i i i t h e s er e s u l t s s u g g e s t e dt h a tf e e d i n gf o sa tad o s eo f0 5 o rm o s a tad o s eo f0 2 5 c o u l de n h a n c e g r o w t h ，n o n s p e c i f i ci m m u n i t ya sw e l l a sr e s i s t a n c ea g a i n s t 矿s p l e n d i d u so fs e a c u c u m b e r 5 a n8 - w e e kf e e d i n ge x p e r i m e n tw a sc o n d u c t e dt oi n v e s t i g a t et h ee f f e c to fs e l e n i u my e a s t ( s e y e a s t ) a n dv i t a m i ne o nt h eg r o w t hp e r f o r m a n c e ，i m m u n i t ya n dd i s e a s er e s i s t a n c eo f s e ac u c u m b e r 口j a p o n i c u ss e l e n k a ) s i xh u n d r e di n d i v i d u a l s ( i n i t i a lb o d yw e i g h t ：3 5 24 - o 0 8g ，m e a n4 - s e ) w e r ef e de i g h tp r a c t i c a ld i e t sa c c o r d i n gt oa2x4f a c t o r i a ld e s i g n ： t h eb a s a ld i e ta st h ec o n t r o ld i e ts u p p l e m e n t e dw i t ht w ol e v e l so fv i t a m i ne ( 0 ，2 5 0m gk g d i e t ) ，c r o s s e dw i t h0 ，10 0 ，3 0 0o r6 0 0m gk g 。1s e l e n i u my e a s t ( s e - y e a s o t h er e s u l t s s h o w e dt h a td i e t a r ys e - y e a s ta n dv i t a m i neh a ds i g n i f i c a n ti n f l u e n c eo ns p e c i f i cg r o w t h r a t e ( s g r ) ( 尸 o 0 5 ) a n ds g r o ft h es e ac u c u m b e r sf e d 谢t l lt h ec o m b i n a t i o no f6 0 0m g 埏一s e - y e a s ta n d2 5 0m gk g 以v i t a m i new a ss i g n i f i c a n t l yi n c r e a s e dw h e nc o m p a r e d w i t ht h ec o n t r o lg r o u p ( 尸 o 0 5 ) s i g n i f i c a n th i g h e rp h a g o c y t o s i s ，r e s p i r a t o r yb u r s t ( r b ) 中国海洋大学博士毕业