对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局麻药物的分析.ppt

对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局麻药物的分析,主要内容：,结构与性质鉴别试验杂质检查含量测定体内药物分析,第一节对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类药物的结构与性质,对氨基苯甲酸酯类：具有游离的芳伯氨(或仲胺)基，而对位有取代,酰苯胺类：芳伯氨基被酰化，对位有取代,一、对氨基苯甲酸酯类,（一）基本结构与典型药物,苯佐卡因,盐酸丁卡因,盐酸普鲁卡因胺,盐酸普鲁卡因,（二）性质,1.具有芳伯氨基，发生重氮化-偶合反应。,（盐酸丁卡因除外）,2.具有酯结构易水解,3.具有脂烃胺侧链弱碱性(叔胺氮原子),与酸成盐，与生物碱试剂反应,4.溶解性游离碱难溶于水，易溶于有机溶剂；盐酸盐易溶于水，难溶于有机溶剂。,5.具有苯环结构紫外吸收,二、酰胺类,（一）基本结构与典型药物,盐酸利多卡因,盐酸布比卡因,盐酸罗哌卡因（USP）,对乙酰氨基酚（扑热息痛）,（二）性质,1.水解后可发生重氮化-偶合反应具有酰胺结构的共性水解成芳伯氨基，发生重氮化偶合反应,利多卡因、布比卡因、罗哌卡因等因邻位有2个甲基，受空间位阻的影响，较难水解。,2.弱碱性具叔胺氮原子,能与酸成盐,能与生物碱沉淀试剂,（利多卡因、布比卡因、罗哌卡因）,3.重金属离子反应酰胺的氮与铜/钴离子生成配位化合物,（利多卡因、布比卡因、罗哌卡因）,4.紫外吸收苯环结构,5.溶解性,芳胺类氨基直接与苯环相连的药物,芳烃胺类氨基在烃基侧链上的药物,第二节鉴别试验,（一）重氮化偶合反应(芳香第一胺类的鉴别反应),具有芳伯氨基或潜在芳伯氨基的药物,直接反应：苯佐卡因、盐酸普鲁卡因、盐酸普鲁卡因胺、对氨基水杨酸钠,苯佐卡因和盐酸普鲁卡因Ch.P（2010）本品显芳香第一胺类的鉴别反应（附录）取供试品约50mg，加稀盐酸1ml，必要时缓缓煮沸使溶解，放冷，加0.1mol/L亚硝酸钠溶液数滴，滴加碱性-萘酚试液数滴，视供试品不同，生成由橙黄到猩红色沉淀。,间接：对乙酰氨基酚、醋氨苯砜、贝诺酯,水解后生成芳伯氨基,对乙酰氨基酚Ch.P（2010）取本品约0.1g，加稀盐酸5ml，置水浴中加热40分钟，放冷；取0.5ml，滴加亚硝酸钠试液5滴，摇匀，用水3ml稀释后，加碱性-萘酚试液2ml，振摇，即显红色。,盐酸丁卡因（芳香第二胺结构）,与NaNO2作用生成乳白色N-亚硝基化合物沉淀,乳白色,（二）与金属离子反应1.与铜和钴离子反应（盐酸利多卡因/布比卡因/罗哌卡因）,试液,2羟肟酸铁盐反应,（盐酸普鲁卡因胺）,（三）水解产物反应,酯键水解生成的水解产物,（盐酸普鲁卡因、苯佐卡因）,1.盐酸普鲁卡因Ch.P（2010）,取本品约0.1g，加水2ml溶解后，加10氢氧化钠溶液1ml，即生成白色沉淀；加热，变为油状物；继续加热，发生的蒸气，能使湿润的红色石蕊试纸变为蓝色；热至油状物消失后，放冷，加盐酸酸化，即析出白色沉淀。,2.苯佐卡因Ch.P（2010）,取本品约0.1g，加氢氧化钠试液5ml，煮沸，即有乙醇生成；加碘试液，加热，即生成黄色沉淀，并发生碘仿的臭气。,（四）制备衍生物测定熔点,1三硝基苯酚衍生物,盐酸利多卡因Ch.P（2010）取本品2g，加水20ml溶解后，取溶液10ml，加三硝基苯酚试液10ml，即生成沉淀；滤过，沉淀用水洗涤后，105干燥，熔点为228232，熔融时同时分解。盐酸布比卡因Ch.P（2010）,2.硫氰酸盐衍生物,盐酸丁卡因Ch.P（2010）取本品约0.1g，加5%醋酸钠溶液10ml溶解后，加25%硫氰酸铵溶液1ml，即析出白色结晶；滤过，结晶用水洗涤，在80干燥，熔点约为131。,（五）光谱法,含有苯环,盐酸布比卡因Ch.P（2010）取本品，精密称定，按干燥品计算，加0.01mol/L盐酸溶液制成每1ml中含0.40mg的溶液，照紫外-可见分光光度法测定，在263nm与271nm的波长处有最大吸收；其吸光度分别为0.530.58与0.430.48。,1.UV,2.IR,特征性强，专属性好,盐酸普鲁卡因：本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱（光谱集397图）一致。,第三节特殊杂质检查,一、盐酸普鲁卡因中对氨基苯甲酸的检查,来源：水解产物,方法：HPLC杂质对照品法,对氨基苯甲酸取本品，精密称定，加水溶解并定量稀释制成每lml中含0.2mg的溶液，作为供试品溶液；另取对氨基苯甲酸对照品，精密称定，加水溶解并定量制成每lml中含1g的溶液，作为对照品溶液；取供试品溶液lml与对照品溶液9ml混合均匀，作为系统适用性试验溶液。照高效液相色谱法（附录VD)试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以含0.1%庚烷磺酸钠的0.05mol/L磷酸二氢钾溶液（用磷酸调节pH值至3.0)-甲醇（68:32)为流动相；检测波长为279nm。取系统适用性试验溶液101，注入液相色谱仪，理论板数按对氨基苯甲酸峰计算不低于2000，盐酸普鲁卡因峰和对氨基苯甲酸峰的分离度应大于2.0。取对照品溶液l01,注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分峰髙约为满量程的20%。精密量取供试品溶液与对照品溶液各101，分别注入液相色谱仪，记录色谱图。供试品溶液色谱图中如有与对氨基苯甲酸峰保留时间一致的色谱峰，按外标法以峰面积计算，不得过0.5%。,二盐酸氯普鲁卡因注射液中有关物质和光解产物的检查（自学）,HPLC-MS,精密量取本品适量，用流动相定量稀释制成每lml中约含盐酸利多卡因2mg的溶液，作为供试品溶液；精密量取lml，置100ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，为对照溶液；另取2,6-二甲基苯胺对照品，精密称定，加流动相溶解并稀释制成每lml中约含0.8g的溶液，作为对照品溶液。照含量测定项下的色谱条件，取对照溶液20l，注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰的峰高约为满量程的20%;再精密量取上述三种溶液各20l，分别注入液相色谱仪，记录色谱图至主成分峰保留时间的3.5倍，供试品溶液的色谱图中如有与2,6-二甲基苯胺保留时间一致的色谱峰，其峰面积不得大于对照品溶液主峰面积（0.04%),其他单个杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积的0.5倍（0.5%),其他各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积（1.0%)。,盐酸利多卡因注射液中2,6-二甲基苯胺及其他杂质的检查,四盐酸罗哌卡因的对映体纯度检查（自学）,毛细管电泳,第四节含量测定,一、亚硝酸钠滴定法,1.原理,芳伯氨基，在酸性条件下与NaNO2定量发生反应，生成重氮盐，根据消耗NaNO2量，计算含量。,含潜在芳伯氨基药物，如芳酰氨基、硝基等，可先水解或还原，得芳伯氨基后，再进行测定。,2.测定的主要条件,反应速度受多种因素影响,滴定液NaNO2及生成物重氮盐均不稳定,重氮化反应属于分子反应,（1）酸的种类：加入适量KBr加速反应,在盐酸存在下，重氮化反应的历程为：,NaNO2+HClHNO2+NaClHNO2+HClNOCl+H2O,重氮化反应速度是HBrHClH2SO4、HNO3,加入KBr,（1）K1,（2）K2,K1300K2加入KBr，可增大被测溶液中NO+的浓度，所以能加快重氮化反应速度。,（2）药物结构与反应速度的关系,游离芳伯胺的浓度越高反应速度越快,碱性强游离的少碱性弱游离的多,a.当在苯环上特别是氨基的邻位或对位上有吸电子取代基时，如-SO3、-COOH、-NO2等可使氨基的碱性降低，重氮化反应速度加快。,b.当在苯环上有供电子取代基时，反应速度降低。,（3）酸的用量：加过量盐酸加速反应,加入盐酸作用：重氮化反应速度加快；重氮盐在酸性溶液中稳定；防止生成偶氮氨基化合物而影响测定结果。,芳胺:盐酸1:2.56,酸度不足未反应的芳胺与生成的重氮盐产生偶氮氨基化合物,酸度过大,游离芳伯氨的量减小(成盐),影响重重氮化反应速度,使反应速度减慢,（4）反应温度,温度升高,升高10，反应速度加快2.5倍。,升高10，重氮盐分解速度加快2倍。,滴定液亚硝酸钠逸失速度加快,重氮化反应宜在低温下进行，经试验，室温：1030,（5）滴定速度：先快后慢,在30C以下，滴定管尖端插入液面下2/3处，,在不断搅拌下快速加入大部分标准溶液。(约80%90%)；,目的：防止亚硝酸的挥发和分解,提出液面后缓缓滴定至终点,目的：降低近终点滴定速度，避免终点提前。,第八章%20对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局麻药物的分析(12年).ppt#59.幻灯片59,3.指示终点的方法,永停法（DEADSTOP）（中国药典）,电位法,外指示剂法,内指示剂法,（1）永停法（DEADSTOP）,永停滴定装置,在两个铂电极间外加10200mV电压，并且在回路中串联一个灵敏的电流计。,终点前：线路中无电流，电流计指针指零,终点时：溶液中存在微过量的HNO2，电极发生氧化还原反应，电流计指针偏转，不回零,阳极：,阴极：,（2）电位法USP,电极：甘汞-铂电极,终点：稍过量的NaNO2使电位产生突跃,（3）外指示剂法KI-淀粉试纸2NaNO2+2KI+4HCl2NO+I2+2KCl+2NaCl+2H2O,（4）内指示剂法,取本品约0.6g，精密称定，照永停滴定法，在1520，用亚硝酸钠滴定液(0.1mol/L)滴定。每1ml亚硝酸钠滴定液(0.1mol/L)相当于27.28mg的C13H20N2O2.HCl。,盐酸普鲁卡因的含量测定,二、非水溶液滴定法,1.原理,药物分子结构中含有弱碱性氮原子,2.溶剂冰醋酸-醋酐,3.滴定液,高氯酸（0.1mol/L）,4.指示剂,结晶紫（常用）,盐类的滴定（置换滴定）,5.讨论：,BHA-十HClO4BH+ClO4-十HA,强酸滴定液置换与游离碱结合的弱酸,2BHX十Hg（Ac）22BHAc十HgX22BHAc十HClO4BH+ClO4-十HAc,本类药物均为盐酸盐，加入醋酸汞，消除氢卤酸的影响。,革除汞盐的方法：加入醋酐溶液，增强药物碱性；醇溶液中，用氢氧化钠滴定；改用其他方法。,BP2