（分析化学专业论文）色谱质谱联用检测茶叶中多种残留农药的研究.pdf

p r ，； 订， ， 0 ， 譬 y u ， ， 一 k 学位论文数据集 中图分类号 0 6 5 7 7 + l 学科分类号 1 5 02 5 论文编号 1 0 0 1 0 2 0 0 7 0 6 7 8 密级 学位授予单位代码 1 0 0 1 0 学位授予单位名称北京化工大学 作者姓名 董金斌 学号2 0 0 4 0 0 0 6 7 8 获学位专业名称 分析化学获学位专业代码0 7 0 3 0 2 课题来源 自选项目 研究方向 食品分析 论文题目色谱质谱联用检测茶叶中多种残留农药的研究 关键词超高效液相色谱串联质谱，气相色谱质谱，茶叶，多种农药残留 论文答辩日期 2 0 0 7 5 31牛论文类型 应用研究 学位论文评阅及答辩委员会情况 姓名职称工作单位学科专长 指导教师杨俊佼副教授北京化工大学 有机化学 评阅人1袁洪福教授北京化工大学 分析化学 评阅人2王军 高工化工研究院有机化学 评阅人3 评阅人4 评阅人5 答辩委员会主席袁洪福教授北京化工大学分析化学 答辩委员1 王军 高工化工研究院 有机化学 答辩委员2 陈卫强副研究员 中科院理化所 有机化学 答辩委员3施用唏高工北京化工大学 分析化学 答辩委员4 杜振霞 副教授北京化工大学 分析化学 答辩委员5 注：一论文类型：1 基础研究2 应用研究3 开发研究4 琪它 二中图分类号在( ( 中国图书资料分类法查询。 三学科分类号在中华人民共和国国家标准( g b t1 3 7 4 5 9 ) 学科分类与代码中查 询。 四论文编号由单位代码和年份及学号的后四位组成 m删l舢4 40mm眦-m 8 iiiiy 一 、 摘要 色谱质谱联用检测茶叶中多种残留农药的研究 摘要 茶叶中农药残留检测的方法报道较多，但样品前处理过程复杂，分析 流程较长，而且现有的检测方法主要是单一种类农药的分析，缺乏多组分 分析方法。针对这一问题，本论文分别利用气相色谱质谱( c c m s ) 和超 高效液相色谱串联质谱( u p l c m s m s ) 研究并建立了茶叶中农药多残留 快速检测方法，以满足农药残留检测要求。本论文主要包括两个部分： 1 建立了测定茶叶中7 4 种农药残留的g c m s 分析方法。粉碎好的 茶叶使用乙腈超声提取，再经石墨化碳固相萃取柱净化，采用g c e 1 m s 的选择离子监测( s i m ) 方式和外标法定量方法，分析测定了茶叶中的7 4 种农药残留量。该方法回收率在6 0 9 - - , 1 2 1 9 之间，相对标准偏差小于 1 8 3 ，7 4 种农药的检出限最小为0 3 9 9 k g ，最高为2 0 9 9 k g 。该方法快 速、灵敏、准确，各项技术指标满足国内外农药残留检测的要求，能够应 用于茶叶试样中痕量农药残留的分析。 2 建立了测定茶叶中1 6 种氨基甲酸酯农药残留的u p l c m s m s 分 析方法。以乙腈和1 0m m 乙酸铵水溶液( 含有0 1 甲酸) 为流动相，样品 中的待测组分，经超高效液相色谱分离，多级反应监测( m r m ) 模式同时 分析检测氨基甲酸酯农药残留。9 m i n 内，完成克百威、甲萘威、灭虫威 等16 种氨基甲酸酯农药化合物的定量分析，所有分析物在浓度为 5 n g m l 一4 8 0 n g m l 内线性良好( r 2 0 9 9 8 ) ，且平均回收率在4 9 6 9 6 o 之间，相对标准偏差小于2 7 ，16 种农药的检出限最小为0 0 1 4 1 a g k g ， 最高为o 5 “g k g ，满足茶叶中农药残留分析的要求。 关键词：超高效液相色谱一串联质谱，气相色谱一质谱，茶叶，多种农药残 留 、 _ j 一 s t u d yo ng c m sa n du p l c m s m s a n a l y t i c a l t e c h n i q u e so f p e s t i c i d e sm u l 月i r e s i d u e si nt e a a b s t r a c t a n a l y t i c a lt e c h n i q u e ss u c ha sg a sc h r o m a t o g r a p h y ( g c ) ，g c m a s s s p e c t r o m e t r y ( g c m s ) ，h i g hp e r f o r m a n c el i q u i dc h r o m a t o g r a p h y ( h p l c ) a n dh p l c m a s s s p e c t r o m e t r ya l l o wf o rt h ed e t e r m i n a t i o no fp e s t i c i d e s r e s i d u e si nt e a s a m p l e s h o w e v e r , m a n yo ft h ep u b l i s h e dm e t h o d sf o r p e s t i c i d ed e t e r m i n a t i o ni nt e ar e q u i r et i m e - c o n s u m e dp r o c e d u r ef o rs a m p l e p r e p a r a t i o nb e f o r ea n a l y z i n gs oa st oe l i m i n a t et h ee f f e c t sf r o mm a t r i c e s i n t h i st h e s i s ，w ec o n c e n t r a t e do u r s e l v e so nd e v e l o p m e n to f s i m p l e ，r a p i du l t r a p e r f o r m a n c e l i q u i dc h r o m a t o g r a p h y - t a n d e mm a s s s p e c t r o m e t r y ( u f l c - m s m s ) a n dg c m sm e t h o df o ra n a l y s i so fp e s t i c i d e sr e s i d u e si nt e a r 啊 o 1i l l sd i s s e r t a t i o nc o n s i s t so ft w o p a r t s 1 t h i ss e c o n da n dt h i r dc h a p t e rd e s c r i b e dam e t h o df o rt h ed e t e r m i n a t i o n o f7 4p e s t i c i d e sr e s i d u e si nt e ab yg a sc h r o m a t o g r a p h y m a s ss p e c t r o m e t r y p e s t i c i d e sw e r ee x t r a c t e df r o mt e aw i t ha c e t o n i t r i l ei na nu l t r a s o n i cb a t ha n d c l e a n e du po nag r a p h i t i s e dc a r b o nb l a c kc o l u m n ，t h e nw e r ed e t e r m i n e db v g a s c h r o m a t o g r a p h yw i t he l e c t r o ni o n i z a t i o nm a s ss p e c t r o m e t r i cd e t e c t i o ni nt h e s e l e c t e di o nm o n i t o r i n gm o d e w h e nt h es p i k el e v e lw e r e0 01 0 8m g k g ，t h e r e c o v e r i e sr a n g e df r o m6 0 9 t o12 1 9 w i t ht h er e l a t i v es t a n d a r dd e v i a t i o n l e s st h a n18 3 f o rt h ed i f f e r e n tp e s t i c i d e s t h ed e t e c t i o nl i m i to f t h em e t h o d w a sf r o m0 3t o2 0 p g k g t h ed e v e l o p e dm e t h o dw a sl i n e a ro v e rt h er a n g e a s s a y e d ，0 0 0 4 - v 2 0m g 爪g ，w i t hd e t e r m i n a t i o nc o e f f i c i e n t sr e o 9 9 2 2 t h i sf o u r t hc h a p t e rd e s c r i b e dam e t h o df o rt h ed e t e r m i n a t i o no f16 北京化工大学硕士学位论文 c a r b a m a t e p e s t i c i d e sr e s i d u e si n t e ab yu p l c m s m s t h e p e s t i c i d e s r e s i d u e sw e r ee x t r a c t e df r o mt e as a m p l e sb ya c e t o n i t r i l eu n d e ru l t r a s o n i ca n d c l e a n e du po nac a r b o n - n h 2c o l u m n t h ee x t r a c t i v ew a sd e t e r m i n e db y l i q u i dc h r o m a t o g r a p h y u s i n ga c e t o n i t r i l e w a t e r ( 10 m m o l a m m o n i a a c e t a t e + 0 1 f o m i ca c i d ) a sm o b i l ep h a s e t h ec a r b a m a t ep e s t i c i d e sw e r e d e t e c t e du s i n ge l e c t r o s p a yi o n i z a t i o n ( e s i ) o nat a n d e mm a s ss p e c t r o m e t e ri n m u l t i p l er e a c t i o nm o n i t o r i n g ( m r m ) m o d e 16c a r b a m a t ep e s t i c i d e sr e s i d u e s c o u l db ed e t e c t e dq u a n t i t a t i v e l yw i t h i n9m i n t h el i n e a rc a l i b r a t i o nc u r v e s w e r eo b t a i n e di nt h ew h o l er a n g e ( 5 n g m l 一4 8 0 n g m l ) p r o v e dt ob el i n e a r i t y f o ra l lt h ea b o v ep e s t i c i d e s t h er e s u l t e dl i n e a rc o r r e l a t i o nc o e f f i c i e n t sw a s h i g h e rt h a no 。9 9 8 t h ea v e r a g er e c o v e r i e si nt e ao b t a i n e df o re a c hp e s t i c i d e w e r er a n g e df r o m4 9 6 t o9 6 o w i t ht h er e l a t i v es t a n d a r dd e v i a t i o nl e s s t h a n2 7 f o rt h ed i f f e r e n tp e s t i c i d e s t h ed e t e c t i o nl i m i to ft h em e t h o dw a s f r o mo 0 1 4t oo 5 i - t g k g k e yw o r d s ：u p l c m s m s ，g c m s ，t e a ，m u l t i r e s i d u e p e s t i c i d e s l l 目录 目录 第一章绪论i 1 1 农药与农药残留概论。1 1 2 农药残留分析前处理技术4 1 3 农药残留测定方法8 1 。4 农药残留分析方法的发展趋势1 3 1 5 选题的意义和研究内容1 4 第二章茶叶中4 2 种农药残留的气相色谱质谱检测1 7 2 1 引言17 2 2 茶叶中农药残留的检测1 9 2 3 结果与讨论2 2 2 4 结论2 9 第三章茶叶中3 2 种农药残留的气相色谱质谱检测3 l 3 1 茶叶中农药残留的检测一3 l 3 2 结果与讨论3 4 3 3 结论3 7 第四章茶叶中1 6 种氨基甲酸酯类农药残留的超高效液相色谱串联质谱 检测3 9 4 1 引言3 9 4 2 茶叶中农药残留的检测4 1 4 3 结果与讨论4 6 4 4 结论：5 3 第五章结论5 5 参考文献5 7 致 射6 l 研究成果及发表的学术论文6 3 作者与导师简介6 4 目录 c o n t e n t s c h a p t e r1i n t r o d u c t i o n 1 1 1p e s t i c i d e sa n dp e s t i c i d e sr e s i d u e s 1 1 2t e c h n o l o g yo fs a m p l ep r e p a r a t i o na b o u tp e s t i c i d e sr e s i d u e s 4 1 3m e t h o d so f d e t e r m i n a t i o na b o u tp e s t i c i d e sr e s i d u e s 8 1 4t r e n do fd e v e l o p m e n ta b o u ta n a l y t i c a lm e t h o d si np e s t i c i d e sr e s i d u e s 。l3 1 5s i g n i f i c a n c eo f t h i sp a p e r 1 4 c h a p t e r2m u l t i r e s i d u ed e t e r m i n a t i o no f4 2p e s t i c i d e s i nt e a b yg a s c h r o m a t o g r a p h y m a s ss p e c t r o m e t r y 1 7 2 1i n t r o d u c t i o n 17 7 2 2d e t e r m i n a t i o no f p e s t i c i d e sr e s i d u e si nt e a 1 9 2 3r e s u l ta n dd i s c u s s i o n 2 2 2 4c o n l u s i o n ：1 9 c h a p t e r3m u l t i r e s i d u ed e t e r m i n a t i o no f3 2p e s t i c i d e s i nt e ab yg a s c h r o m a t o g r a p h y m a s sp e c t r o m e t r y 3 l 3 1d e t e r m i n a t i o no f p e s t i c i d e sr e s i d u e si nt e a 3 l 3 2r e s u l ta n dd i s c u s s i o n 3 j 4 3 3c o n l u s i o n 3 7 c h a p t e r4d e t e r m i n a t i o no f16c a r b a m a t ep e s t i c i d e si n t e ab yu l t r a p e r f o r m a n c el i q u i dc h r o m a t o g r a p h y m s m s 3 9 4 1i n t r o d u c t i o n 3 9 4 2d e t e r m i n a t i o no f p e s t i c i d e sr e s i d u e si nt e a 4 l 4 3r e s u l ta n dd i s c u s s i o n 4 6 4 4c o n l u s i o n ! ；3 c h a p t e r5c o n c l u s i o n 。! ；5 r e f e r e n c e s ! ；7 a c k n o w l e d g e m e n t 6 1 p r o d u c t i o na n dp a p e r s 6 3 i n t r o d u c t i o no fa u t h o ra n di n s t r u c t o r 6 5 第一章绪论 i i 农药与农药残留概论 第一章绪论 农药就是指用于预防、消灭或控制危害农业、林业的病虫害和其它有害生物，以 及有目的地调控植物和昆虫生长的化学合成物，或者来源于生物及其它天然物质的一 种或几种物质的混合物及其制剂。农药的分类多种多样，大多数的分类方法如表1 1 。 表i - i 农药分类 t a b l e l - ik i n d so fp e s t i c i d e s 农药的应用是人类文明发展的一大标志，它为解决人类温饱、提高经济效益、促 进人类健康做出了巨大的贡献。农药的使用成为保证粮食增产的决定性因素，是解决 世界上6 0 亿人口温饱问题的有力保障。据统计，每投入l 美元的农药，大约可以获得 4 美元的收益。如果完全不使用农药，农作物产量有可能减少一半，食物成本可能要提 高4 5 倍。由于世界人口激增，粮食生产仍低于需求，在一些贫困国家，仍有很多人 在挨饥受饿，平均每3 6 秒就有一个人饿死，所以农药作为农作物保护的重要手段， 今后还是必要的。此外，杀虫剂在疾病载体控制以及健康和生命保护的卫生项目中也 起着决定性的作用，如疟疾问题中的疟蚊的防治。特别是在热带和亚热带地区，农药 挽救了数以百万计人的生命，而且今后还将如此。 然而大量事实表明，农药的广泛使用虽然给人们提供了必要的食品，帮助人类控 制了疾病，但同时又是造成环境污染、影响食品安全等社会问题的主要因素之一【1 】。 农药残留物是指由于喷施农药后存留在环境和农产品、食品等中的农药及其降解 代谢产物、杂质，还包括环境背景中存有的污染物或持久性的农药的残留物在商品中 形成的残留【2 】。这些残留农药在食物上达到一定的浓度( 即残留量) 后，人或其它动 物长期进食这些食物，就会使农药在体内积累起来，引起慢性中毒，导致疾病的发生， 甚至影响后代，这就是农药的残留毒性，简称残毒。特别是一些农药可以引起致癌、 致畸、致突变，即所谓“三致”。因此，食品中农药残留问题已经越来越多受世人关注。 北京化工大学硕士学位论文 为了农药的安全使用，必须建立农药管理体系。通过对动物的毒理学研究，得到每一 种农药对人的日允许摄入量( a d i 值) ，即该种农药对动物的最大无作用剂量除以安 全系数，以相当于人体每千克体重每日允许摄入的农药毫克数表示( m g k g d ) 。在此 基础上，制定了每种农药在各种农作物或食品中的最大残留量( m a x i m u mr s i d u el i m i t m r l ) 。农药残留限量是在大量农药残留实验的基础上，对大量的残留实验数据进行 数学统计、计算，得到理论残留限量后，经过毒性风险评估后制定的。在我国农药工 业刚刚起步的2 0 世纪5 0 年代，黄瑞纶先生就提出了农药残留这一问题。2 0 世纪8 0 年代，我国建立了全国农药残留分析协作组，开始制定农药安全使用标准。 各国政府出于保护本国人民生命健康和制造贸易壁垒等目的，制订了数量越来越 多，要求日益严格的农残限量标准。表1 2 列出与本课题研究相关9 0 种农药各国茶叶 中最大残留限量标准。( 其中日本m r l 数据来源于2 0 0 6 年5 月颁布的肯定列表制度， 欧盟m r l 为0 4 年1 1 月的数据) 表1 2 日本、欧盟和中国的茶叶中农药最大残留限量标准 t a b l e l - 2m r l o f e u 、j a p a na n dc h i n ai nt e a 2 3 3乙硫磷 e t h i o n 0 3 2 3 4丙线磷 e t h o p r o p h o s 0 0 0 5 3 5皮蝇磷 f e n c h l o r p h o s 0 1 0 1 3 6杀螟硫磷 f e n i t r o t h i o n0 2 0 5 0 5 3 7仲丁威f e n o b u c a r b 0 5 3 8甲氰菊酯 f e n p r o p a t h r i n 2 5 3 9 倍硫磷 f c n t h i o n 4 0氰戊菊酯 f e n v a l e r a t e l o 0 5 4 l 氟氰戊菊酯 f l u c y t h r i n a t e 2 0 o 1 2 0 4 2 呋线威f u r a t h i o c a r bo 1 0 1 4 3 g a m m a 六六六g a n m m - h c h 0 0 5 0 0 2 4 4 七氯h e p t a c h l o r 0 0 2 o 0 2 4 5异稻瘟净 i p r o b e n p h o s 4 6异艾氏荆 i s o d r i n 4 7 异柳磷 i s o f c n p h o s 4 8 异丙威 i s o p r o c a r b 一 4 9 三氟氯氰菊酯l a m b d a - c y h a l o t h r i n 1 5 0 溴苯磷l e p t o p h o s 5l马拉硫磷 m a l a t h i o n 0 0 5 0 5 5 2虫螨畏m e t h a c r i f o s0 10 1 5 3甲胺磷 m e t h a m i d o p h o s 50 1 5 4 杀扑磷m e t h i d a t h i o nl 0 1 5 5灭虫威 m e t h i o c a r b 5 6灭多威 m e t h o m y l 2 0 o 1 5 7速灭威 m e t o l a c h l o r 5 8 速灭磷 m e v i n p h o s 5 9 o ，p 。一滴滴滴o ，p d d d0 20 20 2 6 0 o ，p i - 滴滴伊o ，p i d d e0 20 20 2 6 l o ，p - 滴滴涕o ，p d d t0 20 2 0 2 6 2氧化乐果o m e t h o a t e 0 1 6 3p ，p 滴滴滴p ，”d d d 0 20 2 0 2 6 4p ，p 滴滴伊p , p - d d e 0 20 2 0 2 6 5 p ，p 一滴滴涕p , p - d d t0 2 0 20 2 6 6多效唑p a c l o b u t r a z o l 6 7 对硫磷p a r a t h i o n e t h y l 0 3 6 8 甲基对硫磷p a r a t h i o n m e t h y l 0 2 6 9氯菊酯p e r m e t h r i n 2 0o 12 0 7 0苯醚菊酯p h e n o t h r i n 0 0 2 7 1稻丰散p h e n t h o a t e 0 1 7 2甲拌磷p h o r a t e 0 10 1 7 3伏杀硫磷p h o s a l o n e 2 7 4抗蚜威p i r i m i c a r b 7 5 嘧啶磷p i r i m i p h o s e t h y l 7 6 甲基嘧啶磷p i r i m i p h o s m e t h y l 1 0o 0 5 3 北京化工大学硕士学位论文 而且欧盟近几年颁布的茶叶中农药最大残留限量( m r l ) 标准项目逐渐增多，限量 也逐渐降低。 近十几年来，农药残留问题越来越被人们重视，农药各国对农药的生产、使用、 管理、监控、检测等环节加大了立法和科学指导，农药残留分析方法逐渐由单一或数 个农药检测到十几个同类农药或几十个性质相似的农药多残留检测，如今已发展到不 同种类数百种农药多残留检测技术。 1 2 农药残留分析前处理技术 农药残留分析方法通常包括样品前处理和检测两部分。样品的前处理即农药残留 物的提取、分离和净化，是农药残留分析中工作量最大、对残留分析结果有重大影响 的步骤。传统的前处理技术索氏提取、液液萃取与柱层析费时、费溶剂、费人力，在 农药残留分析中已较少采用。现代分析样品制备技术的发展趋势是样品处理的过程要 简单、速度快、使用装置要小、引进的误差小，对于测定组分的选择性和回收率要高 等等【3 】。近几年迅速发展的固相萃取( s p e ) 、凝胶渗透色谱( g p c ) 、加速溶剂萃取( a s e ) 、 超临界流体萃取( s f e ) 、固相微萃取( s p m e ) 等样品前处理技术正符合这些发展趋势， 并逐步在农药残留检测方面得到应用【4 】。 1 2 1 固相萃取 固相萃取( s o l i dp h a s ee x t r a c t i o ns p e ) 就是利用固体吸附剂将液体样品中的目标 化合物吸附，与样品的基体和干扰化合物分离，然后再用洗脱液洗脱，达到分离和富 集目标化合物的目的。相比液液萃取，固相萃取有很多优点：不需要大量溶剂，处理 过程中不会产生乳化现象，节省时间和费用，回收率较高而且稳定。 固相萃取实质上是一种液相色谱分离，其主要模式也与液相色谱相同，可分为正 4 第一章绪论 相，反相，离子交换和吸附四种模式。我们根据样品的种类和待测农药的性质，选择 合适的固相萃取柱和淋洗溶剂，s p e 操作步骤( 包括柱预处理、加样、洗去干扰组分 和回收待测组分4 个部分) 。其中加到萃取柱上的样品量取决于萃取柱的尺寸、类型、 待测组分的保留性质以及待测组分与基质组分的浓度等因素，常用的固相萃取柱的类 型见表1 3 。s p e 的另一种分离情况是杂质被保留在柱上，待测组分通过柱。样品被 净化但不能富集待测组分，也不能分离保留性质比待测组分更弱的杂质，即净化不完 企【5 】 工。 表1 3 常用的固相萃取柱 殆6 l e l 3s p ec o l u m n s 张莹等采用微量化学法，用活性炭柱分离净化茶叶中1 4 种有机磷农药【6 1 ，用活性 炭柱和中性氧化铝柱分离净化茶叶中6 种拟除虫菊酯类农药【7 1 ，方法快速、准确，符合 实际应用需要。赵晓萌等用f l o r i s i l 固相萃取柱分离净化蔬菜和水果中3 5 k r p 农药，其中 3 3 种农药回收率在7 0 1 2 0 之间，检出限为0 0 0 0 7 0 2m g k g t 引。b e a t r i za l b e r o 用c 1 8 固相萃取柱萃取了蜂蜜中5 1 种农药，回收率都大于8 6 ，重复性好【9 】。f r a n kj s c h e n c k 等用不同固相萃取柱分离了鸡蛋中6 种有机氯和2 8 种有机磷农药，鸡蛋用乙腈提取后 经石墨化碳黑柱和氨基柱净化后，有机磷农药用气相色谱火焰光度检测器( g c f p d ) 检测，经过f l o r i s i l 柱进一步净化后，有机氯农药用气相色谱电子捕获检测器( g c e c d ) 检测，两类农药回收率均令人满意l l 0 1 。 1 2 2 凝胶渗透色谱 北京化工大学硕士学位论文 凝胶渗透色谱( g e lp e r m e a t i o nc h r o m a t o g r a p h yg p c ) 又称体积排阻色谱法，它的原 理是在分析样品时，样品在洗脱过程中，大分子不能进入凝胶内部，被排阻于颗粒之 外，小分子可进入凝胶内部。因此，大分子较快地被洗脱出，经过一段时间，大分子 和小分子可完全分离。凝胶渗透色谱法是食品样品分析中最常用的净化手段，在应用 于农药残留检测中，对除去样品中的脂肪、色素等大分子物质具有明显优势。 黄盈煜等采用自己填充的g p c 柱净化分离茶叶6 种残留农药，茶叶中色素等干 扰物质分子量较大，最先流出被除去，达到了净化效果【i l 】。曾鸣等建立了凝胶渗透色 谱净化气相色谱法测定鸡肉中2 4 种有机氯农药的方法。所使用的方法能使农药的提 取和分配一次完成，凝胶渗透色谱柱使鸡肉中的农药与脂肪等得到较好分离，在此条 件下干扰物得到了很好的去除，并提高了分析速度，方法快速、简便，适用于鸡肉中 有机氯农药的快速检测【l2 1 。刘咏梅等用凝胶渗透色谱净化气相色谱分离同时测定糙 米中5 0 种有机磷农药残留，通过对不同时间段的洗脱液进行g c f i d 检测，判断出糙 米中杂质( 油脂、色素等) 和有机磷农药流出时间段，结果净化效果较好，回收率较高 【l3 1 。a g a r r i d of r e n i c h 等在对鸡肉、猪肉和羊肉中有机氯和有机磷农药进行检测时， 采用g p c 作为净化手段，除去了肉类中的脂肪和其它基质化合物【l4 1 。目前，橄榄油 中农药残留日常检验中，g p c 已经是被广泛应用的净化技术。j u a nf 等在文中介绍了 自动化的g p c 系统( 带有软件和馏分收集装置) 在橄榄原料中农药残留分析中，大多数 的农药都获得了很好的回收率【l 引。 1 2 3 超临界流体萃取 超临界流体萃取( s u p e r c r i t i c a lf l u i de x t r a c t i o ns f e ) 作为一种新技术，相比传统 农药残留分析中前处理技术有以下优势。首先，s f e 的样品用量少，样品萃取在低温 下进行，避免了农药的损失和降解，提高了分析方法的可靠性，并使得分析时间缩短、 排除了有机溶剂的污染。其次，s f e 使用一种超临界流体作为萃取溶剂，一般使用 c 0 2 ，我们可以通过改变萃取的流体温度和压力或加入改性剂从而改进s f e 的选择性 【l6 1 。如对于含水量高的样品，s f e 的使用受限制。为了提高s f e 的使用效率，采用冷 冻干燥样品和混合样品以吸收水分。用3 乙腈将c 0 2 改性，在2 7 5 8 m p a 和6 0 条 件下萃取，在c l 键合相制备柱上于9 5 从脂肪中分离出非极性到中等极性有机氯和 有机磷。在实验的6 2 种农药中，4 3 种回收率较好【17 1 。 1 2 4 固相微萃取 固相微萃取( s o l i dp h a s em i c r o e x t r a c t i o ns p m e ) 是在固相萃取基础上发展起来的 一种新的萃取分离技术。相比于液液萃取和固相萃取，s p m e 具有操作时间短，样品 其原理是 ，当萃取 进入气相 成为国内 外分析科学家的研究热点，目前对农药检测s p m e 主要与g c 、g c m s 和h p l c 联用。 帅琴等建立了固相微萃取与气相色谱质谱( s p m e g c m s ) 联用测定水样中有 机磷杀虫剂残留量的方法。探讨了影响s p m e 萃取效果的萃取头类型、萃取时间、解 吸时间、离子强度等诸因素，优化y g c m s 仪器条件。方法用于实际水样分析，结果 令人满意，样品的加标回收率为9 4 7 11 0 0 。该方法具有分析速度快、灵敏度高、 重现性好、预处理简单易行等优点f l8 1 。董春周( 音译) 等用自制的s p m e 萃取头，用 项空固相微萃取气相色谱法对萝卜中1 2 种有机氯残留农药进行了检测，所有农药的检 测限都低于0 1 7 4 p p b 1 9 】。k f y t i a n o s 等用顶空固相微萃取气相色谱法对不同水果中的 痕量有机磷农药进行了测定。采用顶空进样可以提高方法的选择性和灵敏度，并对2 1 种水果1 5 0 多种样品中的二嗪磷，对硫磷，甲基对硫磷，马拉硫磷和杀螟硫磷农药残 留进行了研究。检测限为0 0 3 3 p p b ，都低于欧盟所设定的残留限量标准。所有样品中j ， 只有不到2 的样品被检测出含有阳性物质且高于欧盟所设定的残留限量标准【2 0 1 。 1 2 5 基质固相扩散 基质固相扩散( m a t r i xs o l i d p h a s ed i s p e r s i o nm s p d ) 是使分析者能同时制备、萃 取和净化样品的一种较新的技术。m s p d 技术包括在玻璃研钵中将键合相载体和组织 基质混合，用玻璃杵将其捣碎成近乎均质分散的组织细胞膜和基质成分。组织与涂以 c 1 8 的硅胶迅速混合产生半固体物质。也可用c 3 、c 8 以及聚合物相，将半固体物质填充 于柱中，根据不同分析物在聚合物组织基质中的溶解度来洗脱。此方法根据分析物在 在聚合物组织基质中的分散和所用溶剂的极性将分析物迅速分离。这样获得的萃取物 在仪器分析前不需要再处理。 申中兰等建立了用弗罗里硅土作基质固相分散剂的加速溶剂萃取、并以灭蚁灵 ( m i r e x ) 为内标的快速、同时测定土壤中1 6 种有机氯农药的气相色谱法f 2 。奉夏平等采 用基质固相分散从蔬菜水果中提取、净化2 0 种常用的有机氯残留农药，用g c e c d 分 析检测，g c m s d ( s i m ) 进行确证。由于基质固相分散集提取、过滤和净化于一步完成， 使得样品的预处理变得非常简单，避免了样品转溶、乳化、浓缩造成的待测农药组分 的损失，提高了方法的准确度和精密度。2 0 种有机氯农药的回收率在8 1 2 - - 1 1 7 2 之 间，相对标准偏差小于1 0 ，完全能满足蔬菜水果中农药残留的分析要求f 2 2 】。v i v a l s a m a k i 等用弗罗里硅土作基质固相分散剂净化分离了鸡蛋中2 0 种有机氯农药，用 二氯甲烷正己烷( 1 ：1 ) 洗脱后，再经硫酸磺化，用g c e c d 进行检测，用g c m s ( s i m ) 7 北京化工大学硕士学位论文 进行确证。方法检出限均低于o 7 p p b ，回收率范围从8 2 1 1 0 【2 3 1 。 1 2 6 加速溶剂萃取 加速溶剂萃取( a c c e l e r a t e ds o l v e n te x t r a c t i o na s e ) 技术于1 9 9 5 年首次发表，许 多实验室已用于常规样品制备。a s e 优点是溶剂用量少，萃取时间短，且可自动化。 美国环保局提出“方法3 5 4 5 ”可对固体和半固体废物样品萃取，分析成分包括有机氯农 药和氯化除草剂【2 4 1 。朱晓兰等采用加速溶剂萃取法测定土壤中有机磷和有机氯农药残 留物，方法快速简单，且回收率比超声提取更耐2 1 1 1 2 5 1 。 1 2 7 微波辅助萃取 微波辅助萃取( m i c r o w a v e - a s s i s t e de x t r a c t i o nm a e ) 始于2 0 世纪8 0 年代，利用微 波能量，快速有选择地萃取并克服了传统方法费时、费力和费溶剂等不足。常用的萃 取剂有：甲醇、乙醇、丙酮、乙酸、甲苯、二氯乙烷、乙腈等有机溶剂。用苯，正己 烷等非极性溶剂萃取时必须加入一定比例的极性有机溶剂。o s f a t o k i 等对水中和沉 积物中有机氯农药残留进行检测，比较了索氏提取和微波辅助萃取的沉积物中有机氯 农药残留回收率，虽然微波辅助萃取的回收率略低，但检测限较低而且省时省力，更 适用于样品前处理【2 6 1 。杨云等用微波辅助萃取气相色谱质谱联用分析蔬菜中的有机 磷农药，与传统的机械振荡萃取法相比，不仅萃取效率相当，而且省时省溶剂【2 力。 1 2 8 免疫亲和色谱 免疫亲和色谱( i m m u n o a f t i n i t yc h r o m a t o g r a p h yi a c ) 根据分析物和其所引起的抗 体之间有选择的和可逆的相互作用而从复杂样品基质中分离出分析物。e i k iw a t a n a b e 等用免疫亲和柱净化柑橘类水果中杀菌剂抑霉唑，相比其它的净化手段，i a c 除去水 果基质中其它共存物更为彻底，而回收率和相对标准偏差非常令人满意，而且从萃取 到液相色谱分析整个过程仅花了1 个小时【28 1 。 1 3 农药残留测定方法 目前常用的农药残留分析方法主要有g c 、h p l c 、g c m s 、l c m s 等仪