（外科学专业论文）染色体1p19q杂合性缺失与脑胶质瘤术后化疗的关系.pdf

拿0 j 二二 目录 中文摘要l 英文摘要2 研究论文染色体l p 1 9 q 杂合性缺失与胶质瘤术后化疗的关系 前言6r i j 看 材料与方法6 结果l o 附图1 l 附表1 5 讨论1 7 参考文献2 4 综j 苤2 7 致 射3 5 个人简历3 6 中文摘要 染色体1 p 1 9 q 杂合性缺失与脑胶质瘤术后化疗的关系 摘要 目的：脑胶质细胞瘤是颅内常见的恶性肿瘤，通常选择手术切除为主 辅以放化治疗。但是由于其特点为：呈侵袭性生长导致手术无法完全切除， 血脑屏障和病理学差异对放化疗敏感性不同，并且术后容易复发。因此需 要建立一个综合的治疗、评价模式。 近1 0 年来，少突胶质细胞瘤分子生物学研究已初步建立了其诊断、治 疗和预后的分子评价模式。许多研究也都证实了在少突胶质细胞瘤和间变 性少突胶质细胞瘤中可以看到较高的染色体1 p 1 9 q 杂合性缺失( 1 0 s so f h e t e r o z y g o s i t y ，l o h ) 率。有学者尝试将染色体1p 19 q l o h 检测用于少突胶 质细胞瘤的诊断、指导临床治疗和判断预后，并且得到了良好的效果。 所以，考虑是否能将少突胶质细胞瘤的治疗模式延伸到胶质细胞瘤染 色体l p 1 9 q l o h 情况对临床术后化疗敏感性以及对患者的生存期的影响 中。通过该扩展研究对胶质细胞瘤患者术后放化疗的选择有着一定的指导 意义。 方法：收集河北医科大学第二医院神经外科2 0 0 8 年5 月- - 2 0 0 9 年5 月手术治疗的5 1 例胶质细胞瘤患者( 其中男性3 2 例，女性1 9 例) 的手术 标本，年龄l o 一7 4 岁，平均年龄4 6 6 6 , a ：1 6 8 5 岁。采用荧光原位杂交技术 ( f l u o r e s c e n c ei ns i t uh y b r i d i z a t i o n ，f i s h ) 检测其染色体l p 1 9 q l o h 情况。根 据术后患者的病理结果确定放化疗方案。总和实验数据进行统计学分析得 出结论。 结果判定： 。 1 染色体1 p 1 9 q l o h 的检测：应用f i s h 技术，使用神经胶质瘤的探针 试剂盒。在荧光显微镜下检测染色体l p 1 9 q l o h 的情况。缺失的评判标准 均为：缺失细胞比率 3 0 为阳性。 2 疗效判定：根据公式计算有效率。 统计学方法： 根据数据采集的不同方法及统计学处理的不同要求，选用矿检验，t 检 验和s p e a r m a n 等级相关分析统计学方法。使用s p s s l 3 0 统计软件处理。 中文摘要 p o 0 5 有统计学意义。 结果：实验结果显示在5 l 例胶质瘤细胞中少突胶质细胞瘤共8 例其中 l p 1 9 q l o h7 f f l j 阳性率为8 7 5 ，其他胶质细胞瘤共4 3 例其中l p 1 9 q l o h 1 2 例阳性率为2 7 9 。在胶质瘤中，少突胶质细胞瘤染色体染色体 1 p 1 9 q l o h 情况的表达显著高于其他型胶质瘤组。且差异有统计学意义 ( p o 0 1 ) 。除外少突胶质细胞瘤8 例，在其他胶质细胞瘤4 3 例中，低级别组 ( w h oi i i ) 1 8 例其中存在l p 1 9 q l o h1 例阳性率为5 5 6 ，高级别组高级 另, j ( w h o i i i i v ) 2 5 例其中存在1 p 1 9 q l o h1 1 例阳性率为4 4 。在除外少突 胶质细胞瘤的其他类型胶质瘤组中，高级别组染色体1 p 1 9 q l o h 表达高于 低级别组，且差异有统计学意义( p o 0 5 ) 。在5 1 例胶质瘤患者术后常规给 与放化疗，通过对患者术后随访资料进行评价。发现同时存在l p 1 9 q l o h 患者1 9 人中，有效1 2 人，其余7 人；无1 p 1 9 q l o h 患者3 2 人中，有效共6 人， 其余共2 6 人。在胶质瘤中，存在染色体染色体1 p 1 9 q l o h 组，术后对化疗 药物的敏感性高于无缺失组，且差异有统计学意义( p o 0 5 ) 。综合实验结 果证明染色体染色体1 p 1 9 q l o h 情况对胶质瘤术后放化疗及临床评估有 着重要的指导意义。 结论： l 胶质瘤中，少突胶质细胞瘤染色体染色体l p 1 9 q l o h 情况的表达 显著高于其他型胶质瘤组。 2 除外少突胶质细胞瘤的其他类型胶质瘤中高级别组染色体染色体 1 p 19 q l o h 情况的表达显著高于低级别组。 3 胶质瘤中，存在染色体染色体l p 1 9 q l o h 组术后对化疗的敏感性 高于无缺失组。 4 染色体染色体l p 1 9 q l o h 情况对胶质瘤术后放化疗及临床评估有 着重要的意义。 预后 关键词：染色体染色体1 p 1 9 q l o h ；荧光原位杂交；胶质瘤；放化疗； 英文摘要 t h ec o n n c t i o no flp 19 qc h r o m o s o m el o s so fh e t e r o z y g o s i t ya n d m a l i g n a n tg l i o m a s t h er e l a t i o n s h i po fc h e m o t h e r a p y a b s t r a c t o b j e c t i v e ：g l i o m a si sac o m m o ni n t r a c r a n i a lt u m o r , s u r g i c a le x c i s i o ni s u s u a l l ya c c o m p a n i e db yr e l e a s eo ft h et r e a t m e n t h o w e v e r , b e c a u s eo fi t s c h a r a c t e r i s t i c sa sf o l l o w s ：i n v a s i v eg r o w t hl e dt os u r g e r yw a sn o tc o m p l e t e l y r e m o v e d ，b l o o d - b r a i nb a r r i e ra n dp a t h o l o g i c a ld i f f e r e n c e si nt h es e n s i t i v i t yo f d i f f e r e n tp a i r so fr a d i o t h e r a p ya n dc h e m o t h e r a p y , a n dp o s t o p e r a t i v er e l a p s e e a s i l y t h e r e f o r e ，t h en e e df o rac o m p r e h e n s i v et r e a t m e n t ，e v a l u a t i o nm o d e l o v e rt h ep a s t10y e a r s ，o l i g o d e n d r o c y t ec e l lt u m o r s ( o l i g o d e n d r o g l i o m a s ， o g s ) o fm o l e c u l a rb i o l o g yr e s e a r c hh a si n i t i a l l ye s t a b l i s h e di t sd i a g n o s i s ， t r e a t m e n ta n dp r o g n o s i so fm o l e c u l a re v a l u a t i o nm o d e l m a n ys t u d i e sh a v e a l s oc o n f i r m e dt h eo l i g o d e n d r o c y t ec e l lt u m o r , a n da n a p l a s t i co l i g o d e n d r o c y t e c e l lt u m o rc a nb es e e ni nah i g h e rr a t eo fl o s so fh e t e r o z y g o s i t ylp 19 q ，o t h e r t y p e so fg l i o m ar a r ep h e n o m e n o n s o m es c h o l a r sh a v et r i e dt oc h r o m o s o m e 1p 19 qd e t e c t i o no fl o s so fh e t e r o z y g o s i t yf o rt h el i t t l es t i c k so fg l i a lc e l l t u m o rd i a g n o s i s ，t og u i d ec l i n i c a lt r e a t m e n ta n dp r o g n o s i s b ea b l et oc o n s i d e rw h e t h e ro l i g o d e n d r o c y t ec e l lt u m o re x t e n d e dt ot h e t r e a t m e n tm o d a l i t i e so fm a l i g n a n tg l i o m a lp 19 qc h r o m o s o m el o s so f h e t e r o z y g o s i t yo f t h ec l i n i c a lp o s t o p e r a t i v er a d i o t h e r a p ya n dc h e m o t h e r a p yo n s u r v i v a lo fp a t i e n t sw i t ht h ei m p a c t s t h r o u g ht h ee x p a n s i o no fr e s e a r c ho n m a l i g n a n tg l i o m a c e l l si n p a t i e n t s w i t hp o s t o p e r a t i v er a d i o t h e r a p ya n d c h e m o t h e r a p yo p t i o n sh a v e ac e r t a i ns i g n i f i c a n c e m a t e r i a l sa n dm e t h o d s ：51 g l i o m at i s s u es a m p l e so p e r a t e d i nt h e s e c o n dh o s p i t a lo fh e b e im e d i c a lu n i v e r s i t yf r o m2 0 0 8 5t o2 0 0 9 5 ( 3 2o f t h e ma r em a l e ，19o ft h e ma r ef e m a l e ) ，a g e sa r eb e t w e e n10a n d7 4 ，a v e r a g e a g ei s4 6 6 6 + 16 8 5 u s e df l u o r e s c e n c ei ns i t uh y b r i d i z a t i o n ( f l u o r e s c e n c ei n s i t uh y b r i d i z a t i o n ，f i s h ) d e t e c t e dl o s so fh e t e r o z y g o s i t yo nc h r o m o s o m e lp 19 qs i t u a t i o n t h es u mo ft h ee x p e r i m e n t a ld a t aa n a l y z e ds t a t i s t i c a l l yt oa 3 英文摘要 c o n c l u s i o n j u d g m e n to f r e s u l t ： 1u s e dg l i o m ap r o b ek i ta n dd e l e t i o nc r i t e r i af o rj u d g i n ga r e - l a c ko fc e l l r a t i o 3 0 p o s i t i v e 2u s e dt h ef o r m u a lt oc a l c u l a t ee f f i c a c y s t a t i s t i c a lm e t h o d ：a c c o r d i n gt od i f f e r e n tm e t h o d so fd a t ac o l l e c t i o n a n ds t a t i s t i c a la n a l y s i so ft h ed i f f e r e n tr e q u i r e m e n t s ，s e l e c t i o no fs i n g l e f a c t o r a n a l y s i so fv a r i a n c e ，x 2t e s t ，tt e s t ，t t e s ta n ds p e a r m a nr a n kc o r r e l a t i o n a n a l y s i s s t a t i s t i c a lm e t h o d ，n l eu s eo fs t a t i s t i c a ls o f t w a r es p ssi3 0 p r o c e s s i n g p o 0 5s t a t i s t i c a l l ys i g n i f i c a n t r e s u l t s ：e x p e r i m e n t a lr e s u l t ss h o w e dt h a t5 1c a s e so fg l i o m ac e l l s ， o l i g o d e n d r o c y t e sw e r e8c a s e so ft u m o r si nw h i c hlp 19 q l o h7c a s e sw e r e p o s i t i v er a t ew a s8 7 5 ，o t h e rg l i a lc e l lt u m o ro f at o t a lo f 4 3c a s e si nw h i c h lp 19 q l o h12c a s e sw e r e p o s i t i v e r a t ew a s2 7 9 i n g l i o m a ， o l i g o d e n d r o c y t ec e l lc a r c i n o m al o s so fh e t e r o z y g o s i t yo fc h r o m o s o m elp 19 q o fe x p r e s s i o nw a ss i g n i f i c a n t l yh i g h e rt h a no t h e rt y p e so fg l i o m ag r o u p a n d t h ed i f f e r e n c ew a ss t a t i s t i c a l l ys i g n i f i c a n t ( p 0 o1 ) e x c e p tf o ro l i g o d e n d r o c y t e t u m o r s ，8c a s e so fm a l i g n a n tg l i o m ac e l l s i no t h e r4 3c a s e s ，t h el o w l e v e l m a l i g n a n t ( w h oi i i ) 1 8c a s e si nw h i c hl p 19 q l o hlc a s e sw e r e p o s i t i v er a t ew a s5 5 6 ，t h eh i g h - l e v e lg r o u po fh i g hm a l i g n a n tl e v e l ( w h o i i v ) 2 5c a s e si nw h i c ht h e r ei sl p 19 q l o h11c a s e sw e r ep o s i t i v er a t e w a s4 4 i nt h eo l i g o d e n d r o c y t ec e l l t u m o r s ，e x c e p tf o ro t h e rt y p e so f m a l i g n a n tg l i o m ai no t h e rc h r o m o s o m e slp 19 q l o hs e n i o re x p r e s s i o nw a s s i g n i f i c a n t l yh i g h e rt h a nt h el o w - l e v e lm a l i g n a n tg r o u p ，t h ed i f f e r e n c ew a s s t a t i s t i c a l l ys i g n i f i c a n t ( p 0 0 5 ) i n 51c a s e so fm a l i g n a n tg l i o m ap a t i e n t s g i v e n c o n v e n t i o n a l p o s t o p e r a t i v er a d i o t h e r a p y a n d c h e m o t h e r a p y , b y p o s t o p e r a t i v ef o l l o w - u pd a t ae v a l u a t i o n 1p 19 q l o h f o u n dt oe x i s ti np a t i e n t s w i t h19p e o p l e ，c l h p r12p e o p l e ，o t h e r7p e o p l e ；n olp 19 q l o h p a t i e n t s w i t h3 2p e o p l e ，c r + p r6p e o p l e ，o t h e r2 6p e o p l e i ng l i o m a s ，t h el o s so f h e t e r o z y g o s i t y o nc h r o m o s o m elp 19 q g r o u p o n r a d i o t h e r a p y a n d c h e m o t h e r a p ys e n s i t i v i t yh i g h e rt h a nt h o s ew i t h o u t m i s s i n gg r o u p t h e 4 d i f f e r e n c e w a s s i g n i f i c a n t ( p 0 0 5 ) s o t h el o s so fh e t e z y g o s i t y o f c h r o m o s o m e lp 19 qs i t u a t i o n o nt h eg l i o m a c l i n i c a l e v a l u a t l o n 0 t p o s t o p e r a t i v er a d i o m e r a p y a 1 1 dc h e m o t h e r a p ya n d h a si m p o m 呲s i g n i f i c a n c e 。 c o n c l u s i o n ： 1i ng l i o m a s ，t h eo l i g o d e n d r o c y t ec e l lc a r c i n o m a l o s so fh e t e z y g o s i t y o fc h r o m o s o m elp 19 qt h ee x p r e s s i o no f t h es i t u a t i o nw a ss i g n i f i c a n t l yh l g h 盯 t h a no t h e rt y p e so fg l i o m ag r o u p 2t h ev i c i o u s铲o u p o fo t h e rs e n i o rm a l i g n a n tg l i o m a c h f o m o s o m e 1p 19 ql o s so f h e t e r o z y g o s i 哆o f t h ee x p r e s s i o nw a ss i g n i f i c a n t l yh l g h e r t h a n l o w g r a d em a l i g n a n tg r o u p 3i ng l i 锄嬲，t h el o s so fh e t e r o z y g o s i t yo n c h r o m o s o m elp 19 q 舯u p o n r a d i o 也e r a p ya n dc h e m o t h e r a p ys e n s i t i v i t yh i g h e rt h a n t h o s ew i t h o u tm l s s m g i z r o u d 9 - 4t 1 1 el o s so fh e t e r o z y g o s i t yo fc h r o m o s o m e lp 19 qs i t u a t i o no n 也e g l i o m ac l i n i c a l e v a l u a t i o no fp o s t o p e r a t i v er a d i o t h e r a p ya n dc h e m o t h e r a p y a n dh a si m p o r t a n ts i g n i f i c a n c e k e y w 。r d s ：lp 19 qc h r o m o s o m e 1 0 s s 。f h e t e r o z y g 。s i 妙；n u 。r e s c e n c e m s i 劬y b r i d i 刎0 n ；g l i o m ；r a d i o m e r a p y 舭d c h 唧o t l l e r a p y ；p r o g n o s l s 5 ，。&w鼍霍重暨 111 11lllliiiiiiilill 研究论文 染色体l p 1 9 q 杂合性缺失与脑胶质瘤术后化疗的关系 屿e - 丽青 脑胶质瘤是颅内最常见的原发恶性肿瘤，由于其呈侵润性生长和恶性 发展过程，手术彻底切除可能性甚微，术后易复发，且对放化疗的敏感程 度存在差异。因此，建立一个综合系统的脑胶质瘤诊断、治疗和预后的分 子评价模式尤为迫切。从c a i m c r o s s ( 1 9 8 8 年) 和m a c d o n a l d ( 1 9 9 0 年) 先后证实 对复发和首发的少突胶质细胞瘤患者采用甲基苄肼+ 长春新碱+ 洛莫司汀 ( p r o c a r b a z i n e + v i n c r i s t i n e + c c n u ，p v c ) 联合化疗的疗效是肯定的。 c a i m c r o s s 等在4 4 名患者的研究中发现存在染色体l p 1 9 q l o h 的少突胶质 细胞瘤患者5 年存活率为9 5 ，而无l p 缺失者死亡的危险性增加了1 7 倍。 此项研究奠定了染色体1 p 1 9 q l o h 的少突胶质细胞瘤患者联合应用p c v 方案作为少突胶质细胞瘤经典化疗方案的临床基础，这也使少突胶质细胞 瘤成为第一个被发现对化疗药物敏感、患者生存期能明显延长的恶性胶质 瘤。结合近几年来关于少突胶质细胞瘤染色体1 p 1 9 q l o h 情况对放化疗的 敏感程度的研究，是否能延伸到存在染色体1 p 1 9 q l o h 的脑胶质瘤对放化 疗的敏感性同样有一定的关系。近年来研究，染色体l p 1 9 q l o h 情况与肺 癌，肝癌等其他恶性肿瘤对放化疗的敏感程度相关。染色体1 p 1 9 q l o h 可 以提高肿瘤对化疗的敏感性，延长患者的生存期。 本实验利用f i s h 技术检测恶性脑胶质瘤染色体中l p 1 9 q l o h 情况与 患者术后对化疗的敏感性相结合，计算有效率，采用统计学方法，综合分 析染色体i p 1 9 q l o h 情况与脑胶质细胞肿瘤对化疗的敏感性之间的关系。 材料与方法 l材料 1 1 标本来源 本研究选用河北医科大学第二医院神经外科2 0 0 8 年5 月- - 2 0 0 9 年5 月手术治疗的5 l 例胶质瘤病人( 其中男性3 2 例，女性1 9 例) 的手术标 本，年龄l o 一”岁，平均年龄4 6 6 6 - j ：1 6 8 5 岁。所有患者术前均未经过任 6 研究论文 何放射或药物治疗。按w h o ( w o r l dh e a l t ho r g a n i z a t i o n ) 2 0 0 0 年神经系统 肿瘤分类标准明确病理诊断( 分类和分级) ，为了方便统计，将i i i 级 归为低级别组共2 3 例，1 1 1 i v 级归为高级别组共2 8 例。 1 2 主要试剂 l p 19 q 荧光探针试剂盒( 美 v y s i s 公司) o 3 n p 4 0 溶液 二甲苯 甲醛 酒精等 1 3 主要仪器 杂交仪( 1 1 1 e r m o b r i t e t m ) 荧光显微镜：( 日本o l y m p u sb x 51 ) 切片机：德国徕卡r m 2 1 3 5 离心机：北京离心机厂l d z 5 2 型 电子天平：瑞士m e t t e ra e l 0 0 型 移液器：德国e p p e n d o r f 干燥箱：日本三洋m i r 1 5 3 型 电热干燥箱d g b 2 0 ：( 上海光华仪器厂) 医用微波炉：浙江临安爱迪仪器厂y w y 7 8 1 b 型 2 方法 2 1 标本制备 标本于4 多聚甲醛固定后，常规梯度浓度酒精脱水上行，二甲苯透 明，常规石蜡包埋。连续切片5 - 6 张，将厚度5 1 a m 的组织切片附于经多 聚赖氨酸附膜的载玻片上，6 0 过夜备用。 2 2h e 染色 2 2 1 切片常规脱蜡至水 二甲苯i ，二甲苯i i ，1 0 0 酒精i ，1 0 0 酒精i i ，各5 分钟。9 5 酒精，9 0 酒精，8 0 酒精，7 0 酒精各5 分钟，蒸馏水洗。 2 2 2 苏木精染色5 分钟，自来水冲洗。 2 2 31 盐酸酒精分化，自来水冲洗。 2 2 4 伊红染色2 分钟，自来水冲洗。 研究论文 2 2 5 常规梯度酒精脱水7 0 酒精，8 0 酒精，9 0 酒精，9 5 酒精，各2 分钟，1 0 0 酒精i ，1 0 0 酒精i i ，各lo 分钟，二甲苯透明，中性树胶封 片。 2 3l p 1 9 q 的检测方法： 采用f i s h 技术检测：选用美国v y s i s 公司的l p 1 9 q 荧光探针试剂盒。 实验步骤参照探针说明书进行。简述如下：二甲苯脱蜡处理后自然晾干； 8 0 预处理液处理1 0 m i r a3 7 胃蛋白酶消化1 0 m i n ；室温下甲醛固定 l o m i n ；梯度酒精脱水并自然晾干；在杂交区域处加入探针并盖上盖玻片； 放入杂交仪( t h e r m o b r i t e t m ) ，设定程序：7 2 c 变性1 0 r a i n ，3 7 。c 杂交 1 6 h ；次日，7 2 2 x s s c 0 3 n p - 4 0 溶液洗涤2 m i r a 自然晾干，加入d a p i 避光静置1 5 m i n ；在荧光显微镜( 日本o l y m p u sb x 5 1 ) 观察、采集图 像后，杂交玻片于- 2 0 保存。 2 4 根据术后患者的病理结果确定放化疗方案： 少突胶质细胞瘤的病例给予放化疗方案化疗药物为：甲基苄肼+ 长春 新碱+ 洛莫司汀( p v c ) ；星型细胞瘤与胶质母细胞瘤病例均给予放疗加卡 氮芥( b c n u ) 药物治疗；髓母细胞瘤及恶性室管膜瘤病例给予放疗与卡铂 ( c a r b o ) 化疗。 2 5 判断标准： 2 5 1 荧光原位杂交的结果判定： 神经胶质瘤的探针试剂盒中包含l p 3 6 1 q 2 5 和1 9 q 1 3 1 9 p 1 3 两管探针， l p 3 6 l q 2 5 包含红色的检测位点探针l p 3 6 和绿色的内对照探针l q 2 5 ，用 于检测l p 3 6 的缺失情况，；1 9 q 1 3 1 9 p 1 3 包含包含红色的检测位点探针 1 9 q 1 3 和绿色的内对照探针1 9 p 1 3 用于检测1 9 q 1 3 的缺失情况，。细胞核 则由d a p i 染成蓝色。在观察癌细胞并进行信号计数时，选择细胞核大小 一致、核的边界完整、d a p i 染色均一、细胞核孤立无重叠、绿色信号清 晰的细胞。随机计数1 0 0 个癌细胞核中的双色信号( 红色、绿色) ，红色 信号= 绿色信号的细胞评判为正常细胞，红色信号 3 0 为阳性。 2 5 2 疗效判定： 2 5 2 1 选择可以作为判定疗效的病例 2 5 2 1 1 病理诊断明确者( 包括c t 等辅助检查) 。 研究论文 2 5 2 1 2 有客观阳性体征者。 2 5 2 1 3 治疗后存活4 周以上者。 2 5 2 1 4 无严重并发症，肝、肾、骨髓功能无严重障碍者。 2 5 2 1 5 如为复发肿瘤，前次治疗对本次治疗也不再有影像。 2 5 2 2 以c t 影像作为判定指标 2 5 2 2 1 计算方法e 肿瘤的长径乘以与长径垂直的最大宽径，计算出肿瘤组织多层面的 体积。对于多病灶者，要计算其体积总和。治疗后肿瘤体积缩小率计算公 式为： 1 一a + b + c 缩小率= 1 一1 0 0 a + b + c 其中，a 、b 、c 等为治疗前肿瘤的体积，a 、b 、c 为治疗后肿瘤的体 积。 2 5 2 2 2 疗效表示方法： 2 5 2 2 2 1 显效( c o m p l e t er e s p o n s e ，c r ) ：肿瘤病灶消失。 2 5 2 2 2 2 有效( p a r t i a lr e s p o n s e ，p r ) ：肿瘤缩小在5 0 以上。 2 5 2 2 2 3 微效( m i n o r r e s p o n s e ，m r ) ：肿瘤缩小在2 5 5 0 之间。 2 5 2 2 2 4 无变化( n or e s p o n s e , n c ) ：肿瘤缩小在2 5 以下，继续增大在 2 5 以内者。 2 5 2 2 2 5 恶化( p r o g r e s s i v ed i s e a s e ，p d ) ：肿瘤继续增大，超过2 5 ，或出 现新的病灶者。 2 5 2 2 2 6 有效率的计算： c r 例数+ p r 侈j j 数 有效率= l o o 全体例数 3 统计学分析： 统计学方法：根据数据采集的不同方法及统计学处理的不同要求，选 用单因素方差分析，f 检验，t 检验，t 检验和s p e a r m a n 等级相关分析统 计学方法。使用s p s s l 3 0 统计软件处理。p 0 0 5 有统计学意义。 研究论文 结果 1 在5 1 例胶质瘤细胞中少突胶质细胞瘤共8 例其中l p 1 9 q l o h7 例 阳性率为8 7 5 ，其他胶质细胞瘤共4 3 例其中l p 1 9 q l o h1 2 例阳性率为 2 7 9 。通过统计学分析可以得出以下结论：在胶质瘤中，少突胶质细胞 瘤染色体l p 1 9 q l o h 情况的表达显著高于其他型胶质瘤组。且差异有统 计学意义( p o 0 1 ) ( 见t a b l e 2 ) 。 2 在5 l 例胶质瘤细胞中除外少突胶质细胞瘤8 例，在其他胶质细胞 瘤4 3 例中，低级别组( w h oi i i ) l8 例其中存在l p 1 9 q l o hl 例阳性率 为5 5 6 ，高级别组高级i i * j ( w n o i i i - f v ) 2 5 例其中存在l p 1 9 q l o h1 1 例 阳性率为4 4 。通过统计学分析得出结论：除外少突胶质细胞瘤的其他类 型胶质瘤中高级别组染色体1 p 1 9 q l o h 表达显著高于低级别组，且差异 有统计学意义( p o 0 5 ) ( 见t a b l e 3 ) 。 3 在5 l 例胶质瘤患者术后常规给与放化疗，通过对患者术后1 年内 随访资料进行评价。发现同时存在1 p 1 9 q l o h 患者1 9 人中，c r + p r 共 1 2 人，其余7 人；无l p 1 9 q l o h 患者3 4 人中，c r + p r 共6 人，其余共 2 6 人。经分析可得出；胶质瘤中，存在染色体l p 1 9 q l o h 组术后对化疗 的敏感性高于无缺失组，且差异有统计学意义( p 6 5 ) r g r f 过表达倍增 l o h l 7 p p d g f - a ，p d g f 吨p 5 3 突变 过表达( - 6 0 )m d m 2 倍增( l o ) r 过表达( 5 0 ) 星形细胞瘤( w h oi i 级) l o h l 3 q l o h l 9 q ( 一- 6 5 ) p 1 6 丢失( 3 0 - - 4 0 ) l o h l 0 p t e n r b 变异 l o h a p 1 r ( c d k n 2 a b 退行性变星形细胞瘤 p d g f _ - r a l o h 9 p l o h l o p t e np d g f v e g f ( c d k n 2 a e) d c c 失表达( - - - 5 0 )l o h l o q | p t e n ( 8 0 j p d g f r - - a 倍增( 1 0 ) ， r r b 变异 1r 继发胶质母细胞瘤 ( w h oi v ) 原发胶质母细胞瘤 ( w h o l v ) 其他来源的胶质母细胞瘤， ( w h o i v ) 巨细胞胶质母细胞瘤 新生儿胶质母细胞瘤 其他原发的年轻患者胶质母细胞瘤 f i g 9t h eo r i g i no fg l i a lc e l l s 1 4 研究论文 附表 t a b l e1 t h ee x p r e s s i o no ft h i ss t u d i e s o - ( o l i g o d d r o g l i 锄a ) 少突胶质细胞瘤；a o ：( a n a p l a s t i co l i g o d c n d r o g l i o m a ) f 司变性少突胶质细胞 瘤；a ：( 舡仃0 q 他t i 珊。鹉) 星型细胞瘤；g ：( g l i o b l 髓t 啪a ) 胶质母细胞瘤：m ：( m o d u l l o b l a s t o m a ) 髓母细胞瘤：m e ：( m a l i g n a n t 叩蛐d y m 锄a ) 恶性室管膜瘤：r t ：放疗；p v c ：( p r o c a r b a z i i l e + v i n c r i s t i n e + c c n u ) 甲基苄肼+ 长春新碱+ 洛莫司汀；b c n u ：卡氮芥：c a r b o ：卡铂 t a b l e2t h ee x p r e s s i o no flp 19 q l o hb e t w e e nt h eo l i g o d e n d r o g l i o m a s a n dt h eo t h e rg l i o m a st i s s u e s 胶质瘤组例数 l p 19 q l o h + 一 矿p 值 1 5 研究论文 t a b l e3t h ee x p r e s s i o no fg l i o m at i s s u e se x c e p tt h eo l i g o d e n d r o g l i o m a s 除少突外的胶质瘤组例数 l p 1 9 q l o h + 矿 p 值 t a b l e4t h ee x p r e s s i o no ft h ea l lc a s e s 缺失情况 对药物的敏感性 c r + p r o t h e r f p 值 1 6 研究论文 讨论 神经胶质细胞瘤是神经系统最为常见的原发肿瘤，其发病率几近颅内 原发肿瘤的半数，恶性程度高。手术治疗胶质瘤疗效颇不理想，必须采取 综合治疗方案。包括：手术、放射治疗和化学药物治疗。手术与放射治疗 临床上都为局部治疗，而化疗是一种全身治疗，在预防术后胶质瘤复发、 侵袭性生长起着一定作用【l 】。 胶质瘤从始祖细胞发生、发展为胶质母细胞瘤的主要环节【2 巧1 ( 见 f i g 9 ) 简要说明了始祖胶质瘤细胞发生、发展为胶质母细胞的主要过程和 关键基因的变化。据( f i g 9 ) 所示主要基因的变化过程，各国科学家开展了 针对胶质母细胞瘤关键基因靶向治疗的药物研究，相信在不远的将来，胶 质瘤的靶向药物治疗将给患者带来福音【6 7 】。随着人类基因组计划的完 成，蛋白质组计划的启动，微阵列技术的发展，对人体实体性肿瘤瘤细胞 信号传导通路有了更加深入地研究，对其表面受体变化、生长因子、抑癌 基因、癌基因变化作出的诊断，可以反映出某一具体的肿瘤细胞恶性生物 学行为，如：分化异常、无限生长、转移侵袭、抗化疗药物与放疗敏感性 等瘤细胞的相关生物信息1 1 。例如，星形细胞瘤弥漫浸润性生长，手术 很难做到全部切除，术后容易复发，肿瘤的恶性程度可能升级。分子病理 学的研究结果表明，这类患者的预后并不完全相同。分化较好的星形细胞 瘤演变成胶质母细胞瘤，关键基因变化是p 5 3 发生突变，是继发胶质母细 胞瘤发生的始动基因。年轻的胶质瘤患者，p 5 3 发生突变，对放疗与化疗 相对敏感，相对存活期长；而表皮生长因子( e p i d e r m a lg r o w t hf a c t o r ，e g f r ) 过度表达的胶质母细胞瘤的老年患者，对放疗与化疗反应差，存活期短 【l2 1 。但是，由于基因治疗还有许多技术问题需要解决，尚待定论。并且 随着社会和医学的发展，传统的病理学信息已经满足不了患者和医生的需 要，患者及其家属希望了解肿瘤的预后、生存期长短及生存质量等，医生 希望获得可依据的信息，以便对个体设计切实可行的治疗方案。如上所 述，形态学上诊断相同的同一种肿瘤，其命运是不同的，包括预后、是否 适合手术治疗、对放疗和化疗是否敏感等都存在很大的差异，这些与肿瘤 的基因和( 或) 蛋白水平上的改变，即肿瘤的生物学行为有关，由此对肿瘤 分子病理学的需要突显出来【1 , 9 , 1 2 , 1 3 , 1 4 一。通过个体化肿瘤细胞的免疫组化标 研究论文 志物、染色体标志物、基因标志物，在基因和( 或) 蛋白水平对肿瘤细胞的 受体、生长因子、抑癌基因、癌基因等变化进行检测，依据这些指标，精 确地判断某一具体肿瘤细胞的生物学行为，有针对性地设计不同的治疗方 案。因此，这种治疗方案是在分子病理指导下的个体化综合治疗方案。举 例说明：如：k i 6 7 是一种细胞增殖核抗原，也是目前较为肯定的核增殖 标志基因，属非组蛋白，近核仁区。分子病理检测，某一肿瘤标本l 【i 6 7 表达阳性，说明胶质瘤