（应用化学专业论文）荧光类表面活性剂的设计与合成.pdf

人连理l 人学硕十研究生学位论文 摘要 荧光化合物因其信号灵敏，检测方便等原因使其在生物、医药以及探针等应用领域 成为科学研究的热点。近几十年来，荧光探针在表面活性剂领域也得到了广泛的应用和发 展。但是由于目前所用的荧光探针大多水溶性较差，所以在使用时受到了不同程度的限 制。设想在不改变荧光基本性质的前提下，通过合适的连接方式，将荧光发色基团引入 到表面活性剂分子当中，必将形成一类新的化合物荧光类表面活性剂。此类化合物 不仅会具有荧光物质的基本性质，而且还会具有表面活性剂的基本特征，对于荧光类非离 子表面活性剂，甚至可以通过调节温度来控制荧光探针的水溶性地可以制成具有荧光性 质的脂质体，这将可能带来广阔的应用前景。 本文筛选出斯托克斯位移较大，荧光发射波长适中，荧光信号强烈的萘酰亚胺作为 荧光母体，选用酰胺基团作为连接基，将其引入到典型的表面活性剂当中，从而设计并合成 了两个荧光类非离子表面活性剂i i i 。和i i i b 以及系列荧光类阴离子表面活性剂。并通过质 谱、红外、核磁等手段验证了目标化合物的结构。这两类表面活性剂的结构尚未见文献 报导。 随着溶剂极性的增加，i i i 。，i i i b 荧光最大发射光谱均发生红移，荧光强度均有所降 低，特别是i i i b ，荧光强度变化十分显著，可以作为微极性环境的荧光探针。i i i 。i i i b 的c m c 分别是1 1 ，4 8 1 0 m o l l 和4 0 7 1 0 。6m 0 1 l ，最低表面张力( y 。) 分别是3 1 2 9 m n m 和3 l ，7 3 m n m ，浊点( c l o u dp o i n t ) 分别是4 0 1o c 和4 4 2 0 c 由于i i i b 分子中特殊的双疏水尾 链结构，使其在水中容易形成封闭的囊泡结构( 2 0 5 0 n m ) 。 化合物1 ，2 ，3 的钠盐在水溶液中的c m c 从1 2 1 1 1 0 。5 m o l l 依次降低至3 2 9 1 0 。m o i l 和1 6 8 1 0 4m o l 几，而最低表面张力依次为4 0 2 3m n ，m ，4 0 o l m n m 和4 0 0 6 m n m 。总体来说，随着溶剂极性的增加，化合物1 ，2 ，3 和4 的最大吸收波长和荧光最 大发射波长都发生红移，荧光强度减弱。 关键词；荧光；裹面活性剂；膳质体 乇建新：荧光类表面活性剂的设计与合成 d e s i g na n ds y n m e s i so ff 1 u o r e s c e n ts u r f a c t a m s a b s t r a c t f l u o r e s c e n tc o m p o u n d s ，w h i c hh a v en o to n l yu s e dw i d e l yi n b i o l o g i c a la i l dm e d i c a l f i e i d sb u ta l s o 印p l i e da sf l u o r e s c e n c ep m b ei ns u r f a c t a i l tf i e l d ，h a v eb e c o m ea i li m p o r t a i l t a r e ao fr e s e a r c hb e c a u s eo ft b e i rs e n s i t i v en u o r e s c e ms i g n a l sa i l dc o n v e n i e md e t e c t i o n r e c e m l y b u tt h e i rp o o rw a t e r - s o l u b m t yu s u a l l yc i r c u m s c r i b e dt h e i ra p p l i c a t i o n i tw a s h y p o t l l e s i z e dt 1 1 a tb yi n t m d u c i n gan u o r e s c e mg r o u pi n t oas u r f a c t a i l tm o i e c u l eb ya n 印p r o p r i a t cm e t h o dt og e tas e r i e so fs u r f 如t a n t s ，w t l i c hw o u l dp r o v i d en o to n l yt h es u r f k e p r o p e n i e s ( c m c ，代m c ) ，b u ta l s ot 1 1 ef l u o r e s c e n c ep f o p e n i e sa sw 枷e s p c c i a 儿yd l ew a t e r s o l u b i l 畸o fn u o r e s c e mn o i l i o n i cs u r f h c t a l l t sc a l lb ec o n t r 0 1 1 e db ya d j u s t i n gt c m p e m t u r ea n d l i p o s o m e 谢廿ln u o r e s c c n tp r o p e r t i e sc a nb ep r e p a i r e d 谢ln l e m t h u s ，s o m ep o t e n t i a l a p p l i c a t i o n sm i 曲tb eb m u g h t 谊s 口e c i a lf i e l d s t w on u o r e s c e n tn o n - i o n i cs u r f 如ea c t i v e a g e n t si i i a a n di i i b 、w r ed e s i g n e da 1 1 d s y m h e s i z e df 而mn 印h t h a l i i n i d ca i l d ( p o l y o x y e t l l y l e n ed o d e c y le t h e r ) a e 0 9b y 锄i d o1 i 1 1 l ( a i l d as e r i e so fn u o r e s c e ma i l i o n i cs u r f k t a n t sw e r ea l s oo b t a i n e df b mm en a p h t h a l i m i d e t h e v w c r ec h a r a c t e r i z e d b ym s ，i ra 1 1 d1 hn m ra 1 1 d 血e i rs u 嘞c ea 1 1 dn u o r e s c e n tp r o p e n i e sw e r e m e a s u r e d t h e i rs t r u c t u r e sh a v er i o tb e e ns e e ni nt h ed a 口e r sb y 陆 t h en u o r e s c e n c ee m i s s i o nm a x i m a ( 州) e x l l i b i t e dab “h o c h r o m i cs h i ra n dd e c r e a s e d n u o r e s c e n c ee m i s s i o na sb o t l lt h ec o m p o 咖d so fi i i aa 1 1 di i i bw e r ei n t r o d u c e di m om o r ed 0 1 a r s 0 1 v e m s b a t hi i i aa i l di i i bw e r ee n v i r o n m e n t - s e n s i t i v ea i l dc o m db eu s e da sn u o r c s c e n t p r o b e sb e c a u s et h e i rn u o r e s c e n c es p e c t r a 、v e r eh i g l l l yd 印e n d e n to n 廿l es 0 1 v e n t t h ev a l u e so f c m cf o ri i i aa n di i i bw e r e1 1 4 8 1 0 巾m 0 1 la 1 1 d4 0 7 1 0 巾m o l la n ds u r f h et e f l s i o n sa t c m cw e r e3 1 2 9i r l n ma i l d3 1 7 3n 1 n mr e s p e c t i v e l ya 1 1 dt l l e i rc l o u dp o i m sw e r e4 0 1 。ca i l d 4 4 2 。cr e s p e c t i v e l y m o r e o v e r ，c o m p o u i l di i i bf o m e dc l o s e dv e s i c l ei n a q u e o u ss o l u t i o n s p o n t a n e o u s j yb e c a u s eo f “ss p e c i a ib i h y d r o p h o b i c c h a i ns 佻t u r ea n di i i bl i p o s o m ew o u l d g i v es m a l lp a n i c l e sw i t hs p h e r i c a ls t n l c n l r e sa b o u t2 0 5 0m i nd i 锄e t e r t h ev a l u e so f c m c sf o rc o i r l p o l l n dl ，2a 工l d3w e r e1 2 1 1 1 0 m o l l ，3 2 9 1 0 巧m o l l a 1 1 d1 6 8 1 0 叼m o l la n dt h e i rs u r f 她et e n s i o n sa tc m cw e r e4 0 2 3m n m ，4 0 o lm n ma i l d 4 0 0 6m n mr e s p e c t i v e l y t h en u o r c s c e n c e 锄i s s i o nm a x i m a ( k m ) e x h i b i t e dab a m o c h r o m i c s h 讯a n dd e c i e a s e d 丑u o r e s c e n c ee m j s s i o na sb o t ht h ec o m p o u n d so fc o m p o u n d1 ，2 ，3a 1 1 d4 w e r ei n 廿o d u c e di n t om o r ed o l a rs o l v e n t s k e yw o r d s ：f l u o n s c e n c e ；s u r f a c t a n t ；l i p o s o m e 独创性说明 作者郑重声明：本硕士学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工 作及取得研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外， 论文中不包含其他人已经发表或撰写的研究成果，也不包含为获得大连理 工大学或者其他单位的学位或证书所使用过的利料。与我一同工作的同志 对本研究所做的贡献均已在论文中做了明确的说明并表示了谢意。 作者签名：王星耋日期：丝鱼! 丝! 竺? 人连理1 人学硕十研究生学位论文 大连理工大学学位论文版权使用授权书 本学位论文作者及指导教师完全了解“大连理工大学硕士、博士学位论文版权使用 规定”，同意大连理工大学保留并向国家有关部门或机构送交学位论文的复印件和电子 版，允许论文被查阅和借阅。本人授权大连理工大学可以将本学位论文的全部或部分内 容编入有关数据库进行检索，也可采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编学位论 文。 作者签名：王理豇 导师签名 矗：坌五 圣丝 年 月上l 日 人连理l 大学硕 ：研究生学位论文 引言 荧光光谱法因其精确度高，检测方便，信号强烈等优点，在表面活性剂领域，尤其 是胶束聚集数的测定和胶团内微极性的测定方面有了广泛的应用。但是由于使用的荧光 探针多为油溶性物质，而测量的环境太多在水溶液中，这不可避免会对体系产生一定的 不良影响。为了改善荧光探针的水溶性，本论文在以萘酰亚胺为荧光母体，设计并合成 了两个荧光类非离子表面活性剂和系列荧光类阴离子表面活性剂。此类化合物不仅具有 荧光物质的基本性质，而且还具有表面活性剂的基本特征，这些性质必将赋予它们良好 的应用前景。 千建新：荧光类表面活性剂的设计与合成 1 文献综述 1 1 荧光的基本原理 1 1 1 荧光的产生 有色化合物分子在吸收紫外或可见光的能量后，电子会从基态跃迁至能量较高的激 发态。处于激发态的分子称为电子激发态分予，十分不稳定，根据f r a l l c k c o n d o n 原理， 它到达了电子激发态s 2 以上的某一个振动能级，紧接着分子以热的方式耗散其部分能 量，从振动激发念驰豫到s l 的最低振动能级上，这一过程就是激发态的振动驰豫，然后 发生s 。的最低振动能级到基态各能级的辐射跃迁而产生荧光【1 4 】。 糖a 婶_ r i o nm 嘲嘴a 曼簏匿聊的噶脚帕翱醴四翱c 基， 图1 1 荧光、紫外和磷光光谱的相对传置 f i g 1 1r e i a t i v ep o s i t i o n0 f 门u o r e s c e n c e ，u v a b s o r p t i o na n dp h o s p h o r e s c e n c es p e c t 九l m 人连理1 人学硕十研究生学位论文 图1 2 芳香烃类化合物的紫外和荧光的振动能带 f i g ，1 ，2 v i b r a t o r y e n e r g yb a n do f u v - a b s o r p t i o na n d 日u o r e s c e n c e f o ra r o m a t i ch y d r o c a r b o nc o m p o u n d s 11 2 荧光的类型及其发射过程 荧光可分为瞬时荧光和延迟荧光。瞬时荧光即一般所说的荧光，它通常在吸收激发 光后大约1 0 。8 秒期间内发射，是由激发过程中最初生成的s 1 电子态所产生的辐射。瞬时 荧光可能由处于s l 电子态的分子或s l 激发态分子与基态分子所形成的聚合物产生的，这 两种过程用式予表示为： 0 8 1 一s 嘻+ h v s 1 +s 。- ( s 1 。8 0 ) +2 s o + h v 延迟荧光也被称为缓发荧光，单重念的寿命一般最长可达1 0 培秒，但有时却可以观察到 荧光辐射寿命长达1 0 。秒，这种长寿命的荧光有着不同于寻常瞬时荧光的光谱特征，这 种荧光被称为延迟荧光。 s 一h s ，一+ 二f 建新：荧光类表面活性剂的设计与合成 从比较荧光和激发光的波长，或者从比较两者的光子能量的角度出发，荧光又可以分为 斯托克斯( s t o k e s ) 荧光、反斯托克斯( a n t i s t o k e s ) 荧光和共振荧光等。自溶液中观察 到的荧光通常为斯托克斯荧光，即荧光发射的光子能量低于激发光的光子能量，换句话 说，荧光比激发光具有更长的波长。假如在吸收光子的过程中又附加热能给激发态分子， 那么所发射的荧光波长有可能比激发光的波长来的短，这种荧光称为反斯托克斯荧光， 在高温的稀薄气体中可能观察到这种现象。与激发光具有相同波长的荧光，称为共振荧 光。由于溶剂的相互作用，因而在溶液中不大可能观察到这种类型的荧光，但在气体和 结晶中却有可能发生这种现象。 1 1 3 荧光的激发光谱和发射光谱 任何荧光化合物都具有两种特征光谱，激发和发射光谱：激发光谱就是通过测量荧光 体的发光通量随波长变化而获得的光谱，它反映了不同波长激发光引起荧光的相对效 率。理论上某种化合物的荧光激发光谱形状应当与它的吸收光谱的形状相同，然而事实 并非如此，由于仪器的光源能量分布、单色器的透射和监测器的响应等特性都随着波长 的改变而改变，所以一般情况下所测得的激发光谱都是“表观”的激发光谱，只有对上 述仪器因素进行校正之后得到的“校正的激发光谱”才与吸收光谱非常近似；荧光发射光 谱表示在所发射的荧光中各种波长组分的相对强度，与激发光谱类似，一般仪器所测的 都是“表观”的荧光光谱。 荧光发射光谱的形状与激发波长无关，即使分子的电子吸收可能含有几个吸收带， 但由于内转化和振动松弛的速度非常快，电子很快地丧失多余的能量而衰变到s 。电子 态，所以荧光发射光谱只含一个发射带，并与电子被激发到哪一个电子态无关。 荧光发射是光吸收的逆过程。荧光发射光谱与吸收光谱有类似镜象的关系，但荧光 发射光谱总是较相应的吸收光谱红移见图1 2 ，这被称为斯托克斯位移( s t o k e ss h i f i ) 。产 生斯托克斯位移的主要原因有二个：一是跃迁到激发态高振动能级的激发态分子，首先以 更快的速度发生振动驰豫( 其速率在1 0 。3 数量级) ，散失部分能量，到达零振动能级；二是 激发态分子的构型将很快进一步调整，以达到较低能级的稳定态，这又损失了部分能量， 二者都导致荧光量子的能量低于被吸收光子的能量。也就是和吸收光谱相比，荧光光谱 将发生向长波长方向的位移。不过有时在高温下也可观察到反斯托克斯位移现象，即荧 光光谱移向短波方向。这是由于高温使更多的激发态分子处于高振动能级，荧光主要从 激发态的高振动能级发出。如果激发态的分子构型与基态的分子有很大的不同，则观察 不到荧光光谱与吸收光谱的镜像关系。 人选理i ：人学硕十研究生学位论文 1 1 4 荧光的影响因素 有机分子的荧光特性首先取决于它自身的能量状态即取决它自身的分子结构【l 4 l ， 强荧光物质往往具有以下特征：具有较大的共轭n 键结构：具有刚性的平面结构；具有 最低的单线电子激发念s 一为n ，n1 ；取代基为给电子基团。 ( 1 ) 化合物能够产生荧光的最基本条件 化合物能够产生荧光的最基本条件是它发生多重性不变的跃迁时所吸收的能量小 于断裂最弱的化学键所需要的能量。 ( 2 ) 结构的影响 分子共扼体系大小对荧光的影响 有机荧光试剂分子都含有发射荧光的基团称为荧光团。荧光团必须含有共轭大n 键，共轭的n 键达到一定程度才会发射出荧光，如( c h = c h 一) 。( n 2 ) 、苯、萘、对苯二醌、 苯并杂环等基团。当这些基团是分子的共扼体系的一部分时，则该化合物可能产生荧光。 芳香类碳氢化合物与直链的烯烃化合物相比，激发能向振动能的转换更难，因而荧光强 度更大。而对于具有强荧光的有机化合物和荧光试剂，仅有大的共轭体系还是不够的， 分子的共轭体系必须具备共平面性并且还要有一定程度的刚性。例如芴与联苯，芴相当 于由一个c h 2 把联苯的两个苯环固定在一个平面上，不扭瞳或转动，其共平面性比联 苯大，而且刚性强，荧光量子产率接近l 。 溉蕊 芴联苯 取代基的影响 a 、取代基种类的影响推电子取代基增强荧光， 属于这类取代基的有：n h 2 ，- n h r ，一n r 2 ，一o h ，一o r ( r = c h 3 ，c 2 h 5 等) ，含这类取 代基的荧光有机分子，其激发态的产生常常是取代基或杂原子上的n 电子被激发到n 键 上造成，取代基的孤对电子参与有机荧光分子的共轭大n 键，等于扩大共扼体系，使最 大吸收波长和荧光发射波长比未含取代基的母体化合物的波长红移，荧光强度明显增加： 吸电子取代基有：c = 0 ，n 0 2 ，c 0 0 h ，c o r ，卤素除氟外，它们对荧光强度的影响与推电 子基相反，即减弱荧光，因为这类取代基中的n 电子跃迁到兀键上属于禁阻跃迁，激发 毛建新：荧光类表面活性剂的设计与合成 态分子数较小，另外s 。到t ，的体系间跨越占优势，放出光予的激发态分子数大为减少 致使荧光减弱。 表1 1 取代基对某些芳烃荧光性质的影响凹1 t a b 1 1e 低c to f s u b 蚰m i o 嘣g r o u p sf o ra r o m a t i ch y d r o c 砒l o n so nn u o r e s c e n c e 化会物 r e 嗍 毒f化台物 e m 向m由f g 细h 卜娜c h 。 d 删， g 细心 口田 d n 岛 2 9 6o 0 8 2 8 6 0 t 8 2 9 6 0 t 9 3 2 l0 0 8 o 0 l o 。0 0 4 7 5 0 6 l o 2 9 0 。9 3 o 0 1 0 。0 0 b 、取代基在分子上的位置及取代基的数量对荧光量子效率的影响。 只有一个推电子取代基，处于空间位阻最小或无位阻的位置时，可使荧光增强，对 于不同的发光母体，同类取代基所处位置不同所表达的荧光强弱变化规律也不相同，文 献【6 】介绍了一系列对称1 ，4 二( 2 一苯基一1 ，3 ，4 噫二唑5 ) 苯衍生物的荧光性能及其与取 代基的关系，可以看出取代基位置对化合物的荧光量子产率影响是m p o 。另外对荧光 的影响还要看取代基的种类，小体积取代基所贡献的共扼效应小，只是体现出电荷的影 响，若一个大的取代基如苯或乙炔基苯，其共轭效应大，取代后扩大了试剂的共轭体系， 使荧光增强效应大于其吸电子使荧光减弱的效应，结果是取代后的荧光强度不是减弱而 是大大增强。 耐渤哮窑 人连理i ：人学硕ij 研究生学位论文 c 、取代基加重效应对荧光的影响。 从表1 2 不难发现，随着卤素原子量的增加，卤素取代物的荧光量子产率越来越低，相反， 磷光的强度一般是增加。除卤素原子外，能产生加重效应的原子和基团还有：s ，c = n 。 - n = n - ，c = o ，c = s ，一n o ，- n 0 2 等，这些原子和基团的引入会使荧光减弱和磷光增强。 表1 2 卤索取代的加重效应对荧光和磷光性质的影响 t a b 1 2e f b c to f h a l o g e ns u b s t i t u t j o nf o rn u o r e s c e n c ea f l dp h o s p h o r e s c e n c e 环中杂原子对荧光的影响 芳香环中杂原子的影响比较复杂，有时增强荧光，有时减弱荧光，主要看杂原子化 合物的结构。简单的杂环化合物如吡咯、噻吩及呋喃荧光量子产率很小，几乎为零，它 们与苯相并后形成吲哚、硫茚及苯并呋喃的荧光大大增强，呋喃的2 ，5 一位置被苯基取代 构成2 ，5 一二苯基呋喃，其荧光量子产率接近1 ；所以一些含杂原子的荧光团，如香豆素衍 生物、喹啉、吲哚等作为衍生试剂，用于荧光检测某些化学及生物活性物质。有关杂原 子有机化合物的结构及荧光量子产率见文献1 7j 。 分子离子化对荧光的影响。 苯胺和苯酚的质子化和离解对它们的荧光性能的影响情况：在p h = 7 1 2 时，苯胺发出 蓝色的荧光，而在p h 1 3 时无荧光。1 萘酚和4 羟基联苯都没有荧光，而它们的一o h 离解出h 后的阴离子 形式有荧光。随着介质酸度的变化，荧光素的荧光强度也变化，在碱性条件下荧光强度 达到最大，此时荧光素以阴离子形式存在，如表1 _ 3 。除上述影响荧光的因素外，分子的 立体结构也有影响，像反式的1 ，2 一二苯乙烯具有较强的荧光，顺式则无荧光，所以在 研究合成或选用新的荧光试剂时还要考虑立体结构的影响。 于建新：荧光类表面活性剂的设计与合成 ( 3 ) 环境因素对荧光光谱和荧光强度的影响 溶剂极性对荧光性质的影响 同一种荧光体在不同的溶剂中，其荧光光谱的位置和强度都可能会有显著的差别。 许多荧光体，尤其是那些在芳环上含有极性取代基的荧光体，它们的荧光光谱易受溶剂 的影响。溶剂的影响可以分为一般的溶剂效应和特殊的溶剂效应，前者指溶剂的折射率 和介电常数的影响，后者指的是荧光体和溶剂分子间的特殊化学作用，如氢键的生成和 配合作用。一般的溶剂效应是普遍存在的，而特殊的溶剂效应则决定于溶剂和荧光体的 化学结构。特殊的溶剂效应所引起荧光光谱的移动值，往往大于一般的溶剂效应所引起 的。 许多共轭芳族化合物，激发时发生了n 一”跃迁，其荧光光谱受溶剂的影响较大。 由于这些分子受激发时，其电子激发态比基态具有更大的极性，随着溶剂极性的增大， 对激发态比对基态产生更大的稳定作用，结果，荧光光谱随着溶剂的极性增大而向长波 方向移动。从l i p p e n 方程式来考察，随着溶剂的极性增大，定向极化率的数值增大，从 而使荧光光谱向长波方向移动。 一般来说，出于n 一4 跃迁和某些分子内电荷转移跃迁中包含了非键的孤对电子， 氢键溶剂对这种类型的光谱位置影响较为严重，而在一“跃迁和某些分子内电荷转 移跃迁中，因为伴随着电子的重排而产生较大的偶极矩变化，所以这类型的光谱极易 受到溶剂极性的影响。 温度对荧光性质的影响 温度对于溶液的荧光强度有着显著的影响。通常，随着温度的降低，荧光物质溶液 的荧光量子产率和荧光强度增大。当溶液中没有猝灭剂存在时，荧光量子产率的数值与 辐射过程和非辐射过程的相对速率有关。辐射过程的速率被认为不随温度变化而变化， 因此荧光量子产率的变化反映了非辐射过程速率的改变。随着溶液温度的降低，介质的 粘度增大，从而使荧光分子与溶剂分子的碰撞猝灭机会减小。溶液温度下降而使荧光强 度上升的一个主要原因是分子的内部能量转化作用。 人连理1 人学硕十研究生学位论文 1 1 5 各荧光参数的测量 衡量荧光材料和荧光探针的性能主要有几个方面：发射波长、荧光强度、荧光寿命以 及量子产率。“。 ( 1 ) 荧光寿命 荧光寿命直接体现了能级上的布局数变化，反映了从激发态向基态跃迁的途径和过 程。荧光分子的平均寿命定义：当不存在进一步的激发时，处于激发念的分子数目衰减到 初始值的l e 所经历的时间，用式1 1 表示： t = 1 ( k 一k )( ) 式中，k 沩荧光发射的速率常数：k 为各种非辐射去活化过程的速率常数总和。荧光强 度的衰变一般遵从如下速率方程： l n f o - l n f 尸t ( 1 2 ) 式1 2 中，f o 和f 。分别表示产0 和研时的荧光强度，作i n f 。一t 的关系衄线，从该直线的斜率 求出荧光寿命t 。 ( 2 ) 荧光量子产率陋圳 荧光量子产率( 荧光效率或收率，中f ) 被定义为荧光发射量子数与被物质吸收的光子 数之比，也可表示为荧光发射强度与被吸收的光强之比，或表示为荧光发射速率常数与 光吸收速率常数之比。它是表征一个分子荧光强弱的重要参数，为我们寻找性能优良的 荧光材料提供了比较标准，所以它的测量也就有着重要的实际意义。 o f 与分子结构及环境有关而与激发光源的波长无关。量子产率的测定工作最早是由 前苏联的巴维洛夫于1 9 2 4 年开始的。到今天，测定的方法各种各样，但按原理可分为两 种，即直接测量得到的绝对量子效率和比较测量得到的相对量子效率。直接测量法测量 工作繁琐，而且误差来源多，因而工作中应用的较多的是比较测量方法。该方法的好处 是可以除去标准物与待测物共同的误差来源，从而使测量的准确度提高。测量时，需要 选择一个激发和发射均与样品比较接近的标准物