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文档简介
,适合专业(群):食品加工技术专业群,食品微生物技术实训项目教程,1,行动领域,任务一菌落总数测定,任务二大肠菌群检验,任务三霉菌、酵母菌检验,任务四乳酸菌检验,2,一、实验目的,1、了解酸乳中乳酸菌分离原理2、学习并掌握酸乳中乳酸菌菌数的检测方法,任务四乳酸菌检验,3,二、实验原理,活性酸奶需要控制各种乳酸菌的比例,有些国家将乳酸菌的活菌数含量作为区分产品品种和质量的依据。由于乳酸菌对营养有复杂的要求,生长需要碳水化合物、氨基酸、肽类、脂肪酸、酯类、核酸衍生物、维生素和矿物质等,一般的肉汤培养基难以满足其要求。测定乳酸菌时必须尽量将试样中所有活的乳酸菌检测出来。要提高检出率,关键是选用特定良好的培养基。采用稀释平板菌落计数法,检测酸奶中的各种乳酸菌可获得满意的结果。,4,三、实验材料,1、培养基改良MC培养基(MRS培养基,改良CHALMERS培养基,M17培养基)。2、仪器和器具无菌移液管(25ml,1ml),无菌水(225ml带玻璃珠三角瓶,9ml试管),无菌培养皿,旋涡均匀器,恒温培养箱。,5,培养基,改良MC培养基,配方:大豆蛋白胨5g,牛肉浸膏5g,酵母浸膏5g,葡萄糖20g,乳糖20g,碳酸钙10g,琼脂15g,蒸馏水1000mL,硫酸多黏菌素B,6,四、操作步骤,将灭过菌的蒸馏水分两次,用移液管移取10mL装入灭过菌的试管中。,7,Page8,1、实验流程,样品,稀释,实验流程,制平板,培养,检查计数,8,1、样品稀释,先将酸奶样品搅拌均匀,用无菌移液管吸取样品25mL加入盛有225mL无菌水的三角瓶中,在旋涡均匀器上充分振摇,务必使样品均匀分散,即为10-1的样品稀释液,然后根据对样品含菌量的估计,将样品稀释至适当的稀释度。,2、实验步骤,9,2、制平板,用1mL移液管移取酸奶稀释液1mL,放入培养皿中(必须距离酒精度10cm以内)。,10,选用23个适合的稀释度,培养皿贴上相应的标签,分别吸取不同稀释度的稀释液1mL置于平皿内,每个稀释度作2个重复。,11,然后用溶化冷却至45左右的MC培养基倒平皿,迅速转动平皿使之混合均匀,冷却成平板。,12,3、倒培养基,13,4、培养,将平皿倒置于37恒温箱内培养72h,14,将各稀释平板上的菌落数填入下表,根据试验结果,报
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