（应用化学专业论文）EDTA芳香酸配合物合成表征性能及其与蛋白质作用的研究.pdf

ad i s s e r t a t i o ns u b m i t t e dt og u a n g d o n gu n i v e r s i t yo f t e c h n o l o g yf o r t h ed e g r e eo f m a s t e ro ft e c h n o l o g y ( m a s t e ro fe n g i n e e r i n gs c i e n c e ) e d t a a r o m a t i ca c i dc o m p l e x e ss y n t h e s i s ， c h a r a c t e r i z a t i o na n dr e s e a r c ho ni n t e r a c t i o nw i t hp r o t e i n m a s t e rd e g r e ec a n d i d a t e ：c h e nl i n m i a o s u p e r v i s o r ：p r o f h a oz h i - f e n g m a y 2 0 1 0 f a c u l t y o fc h e m i c a l e n g i n e e r i n g a n d l i g h ti n d u s t r yg u a n g d o n g u n i v e r s i t yo ft e c h n o l o g yg u a n g z h o u ，g u a n g d o n g ，e r c h i n a ，5 10 0 0 6 摘要 摘要 磁共振成像( m 对) 技术是一种无辐射、无损伤、可提供任意方向断层图像、软组 织对比度高的成像技术，是最先进的医学影像诊断技术之一。在临床应用中3 0 以上 的诊断需要使用磁共振成像造影剂，造影剂可以缩短质子的弛豫时间，改变局部组织 的信号，提高诊断的敏感性，增强信号对比度和对软组织图像的分辨率，提高影像的 清晰度。目前应用于临床的造影剂有弛豫效率较低、不具有组织或器官靶向性等缺点。 由于芳香酸基团具有很好的亲脂性，能有效地改善当前造影剂的不足，本文通过氨基 芳香酸衍生物与乙二胺四乙酸二酐( e d t a a ) 发生酰化反应，合成了四种含芳酰胺配 体，进而分别与m n 2 + 、f e 2 + 和g d 3 + 等顺磁性金属发生配位反应，制备出四个系列含芳 酰胺配合物，采用现代分析测试手段表征了配合物的组成与结构，并研究了它们的荧 光光谱、电化学和弛豫性能。并且通过荧光光谱法、紫外光谱法研究了配合物与蛋白 质相互作用机理。具体内容如下： ( 1 ) 设计合成了以乙二胺四乙酸二酐( e d t a a ) 与氨基芳香酸衍生物发生酰化反 应，得到四种含芳酰胺配体。考察反应温度、反应时间、p h 对收率的影响，研究结 果表明，当反应条件为：n ( 氨基芳香酸) ：n ( e d t a a ) = 2 1 ：1 0 ，在4 0 反应1 2 h ，后处 理时，在p h 在3 - - 4 范围时，产物收率为7 5 , - - - 8 9 。产物通过熔点、红外光谱、 1 h n m r 、元素分析表征。 ( 2 ) 将上述的配体分别与m n 2 + 、f e “、c 0 2 + 、n i 2 + 和c d 3 + 等离子在溶液进行配位 反应，得到多种顺磁性配合物。经过元素分析、红外光谱、化学滴定法和热重差热 表征后，确定它们的组成。 ( 3 ) 选用不同配体的m n 配合物，运用循环伏安法研究了配合物的氧化还原的稳定 性，表明表明：m n 3 a 易被还原，m n - 3 b 和m n - 3 d 易难被还原，配合物的还原性大小为： m n 3 a m n - 3 d m n 3 b 。 ( 4 ) 选用不同稀土金属的配合物，通过荧光光谱法研究了s m 、g d 、e u 等稀土配 合物的荧光强度，结果表明配体分子吸收能量e u 金属传递的能量，使配体的发射光 谱峰发生“蓝移 ，而其他稀土配合物的配体发射峰不发生“蓝移。 ( 5 ) 用反转恢复法测试了g d 一3 a 、g d 3 b 的纵向弛豫时间t l ，研究了配合物的体 广东工业大学工学硕士学位论文 外弛豫性能。结果表明，g d 3 a 和g d 3 b 的弛豫率分别为9 1 l m m o l q l s 一、 7 4 3 m m o l l l s 一，与临床上应用的造影剂g d d t p a ( 4 3 7 3 m m o l 1 l s 1 ) 相比，体外弛豫 性能有明显的提高。 ( 6 ) 通过荧光光谱法、紫外光谱法对配合物与牛血清蛋白相互作用机理研究。结果 表明每个配合物分子与蛋白质之间的结合位点数o 8 9 ，且它们之间结合常数为k 为 2 1 】0 4 。 关键词：磁共振成像；造影剂；荧光光谱；循环伏安法；弛豫性能 a b s t l a c t a b s t r a c t m a g n e t i cr e s o n a n c ei m a g i n g ( m 砌) i so n e o ft h em o s ta d v a n c e dt e c h n i q u e so fc l i n i c a l d i a g n o s i s ，衍t l le x c e l l e nn o n r a d i a n t ，n o n - t r a u m a , t h i st e c h n i q u ec a l lp r o v i d et h ei m a g e o f e v e r yd i r e c t i o nl a y e ra n dh i g h e rc o n t r a s ti m a g e c o n t r a s ta g e n tw a sa p p l i e di no v e r3 0 c l i n i c a ld i a g n o s e s b yr e d u c m yt h er e l a x a t i o nt i m e so ft 1 ，i tc a nc h a n g et h em a g n e t i c r e s o n a n c es i g n a lo ft i s s u e s ，t oi m p r o v ed e f i n i t i o no fi m a g e i np r e s e n tc o n t r a s ta g e n t su s e d i nc l i n i ch a v ep r o v c i d e dw e a kp o i n tb yl o wr e l a x a t i o n 、衍t 1 1n o nt i s s u es e l s c t i v e b e c a u s eo f a r o m a t i ca c i dg r o u p 丽虹1w e l ll i p o p h i l i cp r o p e r t i e s ，i tc a ne f f e c t i v e l yi m p r o v ei n a d e q u a c y o fc o n t r a s ta g e n t i np a p e r sf o u rl i g a n d s 、析t l la m i o - a r o m a t i ca c i dd e r i v a t i v e sa n de d t a a w e r ep r e p a r e d t h e i rc o m p l e x e sw e r ep r e p a r e db yt h er e a c t i o no ft h e s el i g a n d sw i t hg d 3 + ， m n 2 + ，s m 3 + ，e u 3 + a n df e 3 + c h e m i c a lc o m p o s i t i o n sa n ds t r u c t u r e so ft h e s en e wl i g a n d sa n d c o m p l e x e s w e r ec o n f i r m e db ym o d e ma n a l y t i c a l t e c h n i q u e s ；f o rt h e i rc o m p l e x e s f l u o r e s c e n c es p e c r u r n ，e l e c t r o c h e m i c a la n dt h er e l a x i v i t yw e r ea l s oi n v e s t i g a t e d ，t h e i n t e r a c t i o nm e c h a n i s m sb e t w e e nt h ec o m p l e xa n db s aw a sp r o v i d e db yc h a n g e so f f l u o r e s c e n c es p e c t r aa n du v - v i ss p e c t r a ( 1 ) t h r o u g ha c y lr e a c t i o nb ye d t a a a n da m i n of r a g r a n ts o u rd e r i v a t i v e ，g e tf o u rk i n d s a m i d el e g a n d s ，b ym e l t i n gp o i n t , i n f r a r e ds p e c t r u m ，1h n m r , e l e m e n t a la n a l y s i s i n v e s t i g a t et h er e a c t i o nt e m p e r a t u r e ，r e a c t i o nt i m e ，p hi m p a c t i o no ny i e l d ，t h er e s u l t s h o w st h a to n c et h er e a c t i o nt e r m si sa sf o l l o w s ：n ( a m i n of r a g r a n ta c i d ) ： n ( e d t a a ) - - 2 1 ：1 0 ，a f t e rr e f l e c t 12 h o u r so n4 0 ，i ft h ep hi sa r o u n d3 - 4 ，t h e r e c e i v e dy i e l di s7 5 - 8 9 ( 2 ) u s et h es y n t h e s i sl i g a n dt oc o o r d i n a t i v er e a c t i o ni nt h es o l u t i o nw i t hm n 2 + ，f e 2 + ，c 0 2 + ， n i 2 + a n dg d 3 + p l a s m as e p a r a t e l y , g e tm a n yp a r a m a g n e t i s mc o m p l e x e s b ye l e m e n t a l a n a l y s i s ，i n f r a r e ds p e c t r u m ，c h e m i s t r yt i t r i m e t r i cm e t h o d e c t r u ma n dt g - d t aa t t r i b u t e t h e i rb a s i c a lc o m p o s i t i o n ( 3 ) c h o o s ed i f f e r e n tl i g a n d sm n c o m p l e x e sa n d ，u s et h ec y c l i cv o l t a r n m e t r yt or e s e a r c ht h e s t a b i l i t yo ft h eo x i d a t i o na n dr e d u c i b i l i t y t h er e s u l t si n d i c a t et h a tg d - 3 bc o m p l e xi s i i i 广东工业大学工学硕士学位论文 i r r v e v r s i b l e ，m n 一3 ai se a s yt ob er e d u c e d ，m n 一3 ba n dm n - 3 da r ed i f f i c u l tt ob er e d u c e d ， t h er e d u c i n gd e g r e ei s ：m n 3 a m n - 3 d m n 一3 b ( 4 ) c h o o s ed i f f e r e n tr a r e e a r t hm e t a lc o m p l e x e s ，a n dr e s e a r c ht h es m 3 + ，g d 3 + ，e u 3 + r a r e e a r t h sf l u o r e s c e n c ei n t e n s i t yb yf l u o r e s c e n c es p e c t r u m ，i ts h o w st h a tt h el i g a n dr e c e i v e t h e e n e r g yf r o mt h e e um e t a li o n , t h ee m i s s i o ns p e c t r u mo fl i g a n ds h i f tt ol o w w a v e l e n g t h ，b u to t h e rc o m p l e x e se m i s s i o ns p e c t r u mn o t “s h i f tb l u e ” ( 5 ) b yo v e l t u l t l - r e s u m ew a yt e s t g d 一3 aa n dg d - 3 bl o n g i t u d i n a lr e l a x a t i o nt i m et 1 ， r e s e a r c ht h el i g a n d se x t e r n a lr e l a x a t i o np e r f o r m a n c e t h er e s u l ti n d i c a t e s ，t h e r e l a x a t i o nh e n a np r o v i n c er a t e so fg d - 3 aa n dg d - 3 ba r e9 1l m m o l - 1 l s - 1 ， 7 4 3 m m o l - 1 l s - 1 ，c o m p a r e sw i t ht h ec o n t r a s tm e d i u mg d - d t p a ( 4 3 7 3 m m o l - 1 l s - 1 ) o nc l i n i c ，t h ee x t e r n a lr e l a x a t i o nh a so b v i o u si m p r o v e m e n t ( 6 ) s t u d yo nt h eg d 3 a 诵t l lb s ai n t e r a c t i o nm e c h a n i s mb yf l u o r e s c e n c es p e c t r u m ， u l t r a v i o l e ts p e c t r u m t h er e s u l ti n d i c a t e st h a tt h ec o m b i n a t i o nc o u n tf o rt h el i g a n da n d p r o t e i n i s0 8 9 ，a n dt h e i rc o m b i n a t ec o n s t a n tki s2 1 10 4 k e y w o r d s ：m a g n e t i cr e s o n a n c ei m a g i n g ；c o n t r a s ta g e n t s ；f l u o r e s c e n c es p e c t r u m ；c y c l i c v o l t a m m e t r y ：r e l a x i v i t y w 目录 目录 摘要。i a b s t r a c t i i i 目录v c o a t e n t s v i i 第一章绪论1 1 1 磁共振成像的发展与原理：1 1 2 造影剂基本原理2 1 3m 对造影剂的基本条件3 1 4 造影剂的分类4 1 4 1 铁磁性造影剂4 1 4 2 超顺磁性造影剂5 1 4 3 顺磁性造影剂。5 1 5 小分子顺磁性造影剂的研究发展6 1 5 1g d d t p a 类造影剂7 1 5 2g d d o t a 类造影剂9 1 6 本论文研究背景和选题意义。1 0 第二章乙二胺四乙酸芳香氨基多羧酸衍生物的合成ll 2 1 引言1 1 2 2 实验部分1 1 2 2 1 实验仪器与药品1 1 2 2 2 合成路线13 2 3 结果与讨论1 3 2 3 1e d t a a 合成与讨论1 3 2 3 2 配体反应条件的优化1 3 2 3 3 配体的合成1 5 v 广东工业大学工学硕士学位论文 2 4 小结2 2 第三章乙二胺四乙酸芳香氨基多羧酸配合物的合成与性能表征2 3 3 1 引言2 3 3 2 实验部分2 3 3 2 1 实验仪器与试剂。2 3 3 2 2 合成路线2 5 3 3 结果与讨论2 5 3 3 1 配合物的合成2 5 3 3 2p h 值对配合物合成的影响2 5 3 3 3 ( 3 a ) 配合物的合成与表征2 6 3 2 4 ( 3 b ) 配合物的合成与表征2 9 3 2 5 ( 3 c ) 配合物的合成与表征3 2 3 2 6 ( 3 d ) 配合物的合成与表征3 4 3 4 本章小结。3 7 第四章含芳香氨基乙二胺四乙酸配合物的性能研究3 8 4 1 实验部分3 8 4 1 1 实验仪器与试剂3 8 4 1 2 配合物的荧光光谱研究3 8 4 1 3 配合物的电化学研究3 9 4 1 4 弛豫性能的研究3 9 4 2 结果与讨论4 0 4 2 1 配合物的荧光光谱研究4 0 4 2 2 配合物的的电化学研究4 2 4 2 3 配合物弛豫性能的研究4 4 4 3 本章小结。4 5 第五章配合物与牛血清蛋白作用机制研究一4 8 5 1 引言4 8 5 2 实验部分一4 8 v i 目 录 5 2 1 仪器与试剂4 8 5 2 2 溶液配制4 9 5 2 3 配合物与牛血清蛋白质的紫外光谱4 9 5 2 4 配合物与牛血清蛋白质的荧光光谱4 9 5 3 结果与讨论5 0 5 3 1 紫外光谱的研究。5 0 5 3 2 配合物与牛血清蛋白的荧光光谱研究5l 5 3 3 猝灭机理和结合常数的测定5 2 5 4 j 、结5 4 结论。5 5 参考文献5 7 攻读硕士研究生期间发表的论文6 4 独创性声明6 5 致谢6 6 v i i 广东工业大学工学硕士学位论文 co n t e n t s a b s t r a c t ( c h i n e s e ) 。i a b s t r a c t i i i 目录v c o n t e n t s v i i c h a p t e r1i n t r o d u c t i o n 1 1 1i n t r o d u c t i o nt h ed e v e l o p m e n ta n dt h e r o yo fm a g n e t i cr e s o n a n c ei m a g i n g 1 1 2b a s i ct h e r o yo fc o n t r a s ta g e n t s 2 1 3t h er e q u i r e m e n t so fc o n t r a s ta g e n t s 3 1 4s o r t so fm r ic o n t r a s ta g e n t s 4 1 4 1f e r r o m a g n e t i cc o n t r a s ta g e n t s 4 1 4 2s u p e r p e r e m a g n e t i cc o n t r a s ta g e n t s 5 1 4 3p e r e m a g n e t i cc o n t r a s ta g e n t s 5 1 5t h ed e v e l o p m e n to fs m a l lm o l e c u l ep a r a m a g n e t i cc o n t r a s ta g e n t sr e s e a r c h 6 1 5 1 g d d t p ac l a s sc o n t r a s ta g e n t s 7 1 5 2 g d - d o t ac l a s sc o n t r a s ta g e n t s 9 1 6r e s e a r c h f u lb a c k g r o u n da n dp e r p o r to ft h i sp a p e r 10 c h a p t e r2s y n t h e s i so fe t h y l e n ed i a m i n et e t r a a c e t i ca c i da m i d e d e r i v a t i v e s 11 2 1f o r w o r d s 11 2 2e x p e r i m e n t a lp a r t 11 2 2 1e x p e r i m e n t a li n s t r u m e n t sa n dr e a g e n t s 11 2 2 2s y n t h e t i cr o u t e 13 2 3 r e s u l t sa n dd i s c u s s i o n s 1 3 2 3 1s y n t h e s i sa n dd i s c u s s i o n o fe d t a a 13 2 3 2t h ec o n d i t i o n so fa c y l a t i o n 13 v m c o n t e r l t s 2 3 3s y n t h e s i so f l i g a n d s 1 5 2 4s u m m a r yo f t h i sc h a p t e r 2 2 c h a p t e r3s y n t h e s i sa n d c h a r a c t e r i z a t i o no fe t h y l e n ed i a m i n et e t r a a c e t i ca c i d c o m p l e x e s 2 3 3 1f o r w o r d s 2 3 3 2 e x p e r i m e n t a lp a r t 2 3 3 2 1e x p e r i m e n t a li n s t r u m e n t sa n dr e a g e n t s 2 3 3 2 2s y n t h e t i cr o u t e 2 5 3 3 r e s u l t sa n dd i s c u s s i o n s 2 5 3 3 1s y n t h e s i so fc o m p l e x e s 2 5 3 3 2t h ep he f f e c to f c o m p l e x e ss y n t h e s i s 2 5 3 3 3s y n t h e s i sa n dc h a r a c t e r i z a t i o n ( 3 a ) c o m p l e x e s 2 6 3 3 4s y n t h e s i sa n dc h a r a c t e r i z a t i o n ( 3 b ) c o m p l e x e s 2 9 3 3 5s y n t h e s i sa n dc h a r a c t e r i z a t i o n ( 3 c ) e o m p l e x e s 3 2 3 3 6s y n t h e s i sa n dc h a r a c t e r i z a t i o n ( 3 d ) c o m p l e x e s 3 4 3 4s u m m a r yo ft h i sc h a p t e r 3 7 c h a p t e r4p e r f o r m a n c er e s e a r c ho fe t h y l e n ed i a m i n et e t r a a c e t i ca c i dc o m p l e x e s 3 8 4 1e x p e r i m e n t a lp a r t 3 8 4 1 1e x p e r i m e n t a li n s t r u m e n t sa n dr e a g e n t s 3 8 4 1 2f l u o r e s c e n c er e s e a r c ho fc o m p l e x e s 3 8 4 1 3e l e c t r o c h e m i c a lr e s e a r c ho fc o m p l e x e s 3 9 4 1 4r e l a x i v i t yr e s e a r c ho f c o m p l e x e s 3 9 4 2 r e s u l t sa n dd i s c u s s i o n s 4 0 4 2 1f l u o r e s c e n c ea n a l y s e so fc o m p l e x s 4 0 4 2 2e l e c t r o c h e m i c a la n a l y s e so fc o m p l e x s 4 2 4 2 3r e l a x i v i t yr e s e a r c ho fc o m p l e x e s 4 4 4 3s u m m a r yo f t h i sc h a p t e r 4 5 c h a p5s t u d yi n t e r a c t i o nb e t w e e nc o m p l e xa n db s a 4 8 i x 5 1f o 嗍r d s ”4 8 5 2e x p e r i m e n _ t a lp a r t ”4 8 5 2 1e x p e r i m e n t a li n s t r u m e n t sa n dr e a g e n t s - 4 8 5 2 2s o l u t i o np r e p a r a t i o n ”4 9 5 2 3u vs p e c 咖b e 锄吲mc o m p l e xa n db s a ”4 9 5 2 4f i u o r e s c e n c es p e c t r u mb e t w e e nc o m p l e xa n db s a ”4 9 5 3r e s u h | sa n dd i s c u s s i o n s 5 0 5 3 1u v s p e c t r u mr e s e a r c hb e t w e e nc o m p l e xa n d b s a 5 0 5 3 2f l u o r e s t e n c es p e c t r u mr e s e a r c hb e t w e e nc o m p l e xa n d b s a “5 1 5 3 3q u e n c h i n gm e c h a n i s ma n db i n d i n gc o n s t a n td e t e r m i n a t i o n 5 2 5 4s u m m a r yo f t h i sc h a p t e r ”5 4 c o n e i u s i o n s 5 5 r e f e r e n c e s ”5 7 p u b 订c a t i o nd u r i n gt h es t u d yf o rm a s t e r sd e g r e e 6 4 s t a t e m e n to fo r i g i n a lc r e a t i o n 6 5 a c k n o w i e g m e n t s 6 6 x 第一章绪论 第一章绪论 1 1 磁共振成像的发展与原理 自从1 9 4 6 年，美国哈佛大学的p u i c e l l 和斯坦福大学的b l o c k 分别发现了核磁共 振现象，核磁共振技术应用范围不断拓展，在物理，化学，地质，石油化工，材料科 学等领域得到了广泛的应用。1 9 7 1 年工程物理学家r d a m a d i a n 最先将m r i 技术应用 于临床医学，核磁共振技术拓展到生物医药领域。1 9 7 3 年p c l a u t e r b u r 1 j 提出了核磁 共振成像方法，并且获得水的模型图像。1 9 7 8 年m a l l r d ，h u t c h i s o n 及l a u t e r b u r 等将 m n ( i i ) 盐应用于人体，根据所得到的不同的弛豫时间，分辨出人体的各部分组织，且 第一次获得了人体的头，胸和腹部的图像。1 9 8 0 年h a w k e s 2 1 等不仅证实了m r i 成像 的优越性，还首次用m 砒检查到颅内细胞的病变的结果。自此以后，在临床医学中， m 刚技术的不断创新应用，且成为医学影像技术一种重要手段。 核磁共振成像的原理是核磁共振现象，是由具有磁矩的原子核，在外磁场b o 的 作用下，产生围绕着外磁场运动，其与动角频率o 与外磁场b o 成正比( 丫为原子核 的旋磁比) 。 c o o ：y b o ( 1 - 1 ) 如果在垂直于外磁场的方向加上一个频率为v = t o o 2 兀的射频场，使原子核能够吸 收此射频场的能量后，原子核从低能级轨道跃迁到高能级轨道，这种现象既为磁共振 成像。正常情况下高能级的原子核可以不用辐射的方式回到低能级，这种现象叫弛豫。 弛豫有以下两种方式1 3 j ： ( 1 ) 自旋晶格弛豫，又称纵向弛豫。当原子核与环境进行能量交换时，处于高 能级的原子核由热运动的形式把能量传递出去，由高能级返回到低能级。这个弛豫的 过程所需要的时间，用半衰期t l 表示，t l 越小表示弛豫过程的效率越高。 ( 2 ) 自旋自旋弛豫，又称横向弛豫。处于高能级的原子核将能量传递给邻近的 一个低能级原子核。在此弛豫过程中，各种能级的原子核的总数不发生变化。用其半 衰期t 2 表示。 磁共振成像就是利用生物体内不同组织在外磁场的作用下产生不同的磁共振信 号来成像的。由于人体内不同组织的含水量有一定的差别，所以当组织发生病变时， 广东工业大学工学硕士学位论文 变性部位周围的免疫反应和细胞浸润将会导致局部的含水量的增加，造成正常组织和 病变组织的含水量存在差别。正是由于这种含水量的差别存在，在核磁共振中导致质 子密度，自旋晶格弛豫时间t l 和自旋自旋弛豫时间t 2 发生变化，从而产生不同的 磁共振信号。 通过对t 1 和t 2 值的研究表明，它们随着质子密度的增大而增大，而且在不同组 织的时间内，正常细胞与病变细胞组织的t l 和t 2 值的差别远远大于质子密度的差别。 通常情况下，t l 空间分布图能清楚地表示形态，对早期发现病变十分有利；而t 2 成 像能更好的阐明病变的机理。此外，m 刚所得图像的灵敏度取决于浓度，t l 和t 2 值 和几个因素的综合信息。其图像亮度与参数的关系 4 1 ： i = k n ( h ) f ( v ) e x p ( - t e 厂r 2 ) 1 e x p ( t r t 1 ) 】( 1 2 ) 其中，n ( h ) 扫描层内质子密度；坟v ) 为扫描层面内质子速度的函数；t e 为激励脉 冲到采样脉冲之间的回波延迟时间；t r 为脉冲周期重复时间。( t 1 越短，t 2 值越大， 则i 值越大，图像越清晰。) 1 2 造影剂基本原理： 在8 0 年代m r i 发展的早期，由于m 的应用范围比较狭窄，在检查诊断时无 需使用造影剂( c o n t r a s t a g e n t ) 。但随着m r 技术的发展，目前在临床应用中对很多 病变都有使用造影剂的必要。这是因为人体内很多相邻部位自发m r 信号很弱且差别 不够大，不能形成清晰的m r 图像，这就需要通过改变局部的m r 信号来增加影像对 比度。据统计【5 】，世界上检查约为增强检查，即需要使用磁共振成像造影剂即( m r c o n t r a s ta g e n t ) ，每年大约要进行8 0 0 - - 1 0 0 0 万次核磁共振诊断，而其中3 0 以上必 须使用造影剂。 造影