乳腺癌组织中Hedgehog相关蛋白的表达及其临床意义

肿瘤防治研究 2014年第 41卷第 7期 Cancer Res Prev Treat,2014,Vol.41,No.7 756doi:10.3971/j.issn.1000-8578.2014.07.015乳腺癌组织中 Hedgehog相关蛋白的表达及其临床意义刘志勇1，易 坚1，邹小明2Expression of Hedgehog Related Proteins in Breast Carcinoma and Its Significance LIU Zhiyong1,YI Jian1,ZOU Xiaoming21. Department of Breast,The First Affiliated Hospital of Gannan Medical University, Ganzhou 341000,China；2.The Second Affiliated Hospital of Harbin Medical UniversityCorresponding Author:YI Jian,E-mail:Abstract:Objective To investigate the expression and clinical significance of Hedgehog related proteins in human primary breast carcinoma. Methods Tissue microarray blocks were prepared from 334 cases of breast carcinoma tissues. Immunohistochemical method was applied to analyze the expression of six Hedgehog signaling proteins, including sonic hedgehog (Shh), patched (Ptch), smoothened (Smo), and the glioma-associated oncogene Gli-1, Gli-2, and Gli-3. Results Expression of Hedgehog signaling proteins were significantly correlated with some prognostic factors, including the correlation of lymph node metastasis with the expression of Shh (P=0.001)， Gli-3 (P0.001) and Ptch(P=0.025), the correlation of staging with Shh and Ptch expression (P=0.007 and P=0.037, respectively), the correlation of nuclear grades with Smo and Gli-3 expression(P=0.004, P=0.026), and the correlation of histologic grades with Smo expression (P=0.007). The expression of Shh, Ptch, Smo, Gli-1, Gli-2 and Gli-3 were significantly different based on phenotypes (P=0.0001, P=0.0001, P=0.004, P=0.039, P=0.031 and P=0.003 respectively). Gli-2 expression was correlated with a worse overall survival (P=0.012). Conclusion The activation of Hedgehog pathway expression is correlated with the invasiveness of breast carcinoma. Hedgehog pathway may be a useful therapeutic target for breast carcinoma. Gli-2 could be a prognostic marker.Keywords: Hedgehog proteins； Gli-2 protein； Gli-1 protein； Breast carcinoma摘 要 ： 目的 探讨 Hedgehog相关蛋白在乳腺癌中的表达及其临床意义。 方法 从 334例乳腺癌组织中制备组织块。免疫组织化学法检测六种 Hedgehog信号蛋白（ Shh、 ptch、 Smo、 Gli-1、Gli-2和 Gli-3）的表达。 结果 Hedgehog信号蛋白表达与一些预后因素显著相关，包括淋巴结转移与 Shh（ P=0.001）、 Gli-3 (P0.001)、 Ptch(P=0.025)的相关性、分期与 Shh和 Ptch表达（ P分别为 0.007和 0.037）的相关性，核分级与 Smo(P=0.004)和 Gli-3（ P=0.026）的相关性，组织学分级与Smo(P=0.007)的相关性。 Shh、 Ptch、 Smo、 Gli-1、 Gli-2和 Gli-3表达在表型之间差异有统计学意义（ P分别为 0.0001、 0.0001、 0.004、 0.039、 0.031和 0.003）。 Gli-2表达与较差的整体生存结果相关（ P=0.012）。 结论 Hedgehog通路表达激活与乳腺癌的侵袭性相关，可能是乳腺癌的一个有效的治疗靶点。 Gli-2可作为乳腺癌的一个预后指标。关键词 ： Hedgehog蛋白； Gli-2蛋白； Gli-1蛋白；乳腺癌中图分类号 ： R737.9 文献标识码 ： A收稿日期 ： 2013-07-09； 修回日期 ： 2013-12-05作者单位 ： 1.341000江西赣州，赣南医学院第一附属医院乳腺科； 2.哈尔滨医科大学附属第二医院通信作者 ：易坚， E-mail:作者简介 ：刘志勇（ 1982-），男，硕士，主治医师，主要从事乳腺癌诊断、治疗及基因的研究临床研究0 引言H e d g e h o g信号通路最初在果蝇中发现，其功能是胚胎发展的初始调节器，哺乳动物的Hedgehog信号转导包含三个 Hedgehog同源体：Sanic(Shh)、 Indian和 Desert1。 Hedgehog信号级联最初是 Hedgehog结合在十二跨膜蛋白结合 1内。内在的 Ptch和解除抑制的 Smo激活胶质瘤相关癌基因（ Gli）转录因子2。 Gli转录因子存在三种形式，Gli-1、 Gli-2和 Gli-33。尽管这个通路的详细机制尚未被了解，一个完整长度 Gli-1被输送到细胞核以激活 Hedgehog靶基因。 Gli-1是 Hedgehog的靶基因，其功能仅是作为一种反式作用因子，被认为是 Hedgehog通路激活的标志物4。最近的研究显示各种器官的癌症，如皮肤5、肿瘤防治研究 2014年第 41卷第 7期 Cancer Res Prev Treat,2014,Vol.41,No.7 757小脑6、肺7、骨8、胰腺9、前列腺10、子宫颈11和乳腺12，都伴有配体依赖的 Hedgehog信号通路的激活。 Shh、 Ptch和 Gli-1已被报道在乳腺癌中过度表达。此外，已有报道雌激素受体和 Gli-1核易位之间呈正相关，并且进一步研究显示激素诱导的 Shh表达激活了 Hedgehog通路、促进了细胞增殖13。乳腺癌是异型性很高的肿瘤之一，伴有各种组织学、表型和临床行为。总体来说，其系统治疗取决于激素受体状态、人类表皮生长因子受体 2（ HER2）和 Ki 67标记指数。还有一些其他肿瘤标志物与乳腺癌的预后相关。 这项研究的目的是评估乳腺癌中 Hedgehog信号蛋白的表达与已知临床病理参数的关系，并且比较患者生存率的差异，进而研究 Hedgehog信号蛋白在乳腺癌预后中的意义。1 资料和方法1.1 临床样本收集 1999年 1月 2007年 8月在赣南医学院第一附属医院行切除术的 334例原发性乳腺癌患者。患者均为女性，年龄 3082岁（平均年龄 51.3岁），研究人群的临床病理资料，见表 1。福尔马林固定石蜡包埋组织并且对临床数据进行回顾性收集。核分级和组织学分级均根据诺丁汉分级系统进行评估。肿瘤分期按照美国癌症联合委员会第 7版（ AJCC）标准进行评估。 334例患者中，322例患者有完整的生存资料及随访数据。中位随访时间为术后 75.1月（范围 0179月）。 21例（ 6.3%）患者出现局部复发， 62例（ 18.6%）患者发生远处转移和 36例（ 10.8%）患者随访期间死亡。本研究由赣南医学院医学伦理委员会批准。1.2 免疫组织化学方法组织块切片厚度为 5 m，置于多聚 -L-赖氨酸的载玻片上， 60烤箱中烘烤 40 min，脱蜡，梯度乙醇水化，柠檬酸盐缓冲液微波抗原修复。 PBS冲洗，含 3% H2O2的甲醇中室温下孵育表 1 Hedgehog相关蛋白与乳腺癌患者临床病理特征之间的关系Table1RelationshipbetweenHedgehogrelatedproteinsexpressionandclinicopathologicfactorsofbreastcarcinomaCharacteristic n(%)Positive cases(%)Shh P Ptch P Smo P Gli-1 P Gli-2 P Gli-3 PAge（ years） 50 179(53.6) 87(48.6) 100(55.9) 47(26.3) 141(78.8) 77(43.0) 99(55.3) 50 155(46.4) 77(49.7) 0.845 83(53.5) 0.671 28(18.1) 0.074 64(41.3) 0.750 111(71.6) 0.130 92(59.4) 0.456Tumor sizes(cm) 5 33(9.9) 20(60.6) 20(60.6) 7(21.2) 13(39.4) 28(84.8) 13(39.4)Node metastasis 0 179(53.6) 84(46.9) 96(53.6) 40(22.3) 80(44.7) 136(76.0) 111(62.0) 1-3 98(29.3) 40(40.8) 0.001* 47(48.0) 0.025* 18(18.4) 0.257 36(36.7) 0.423 74(75.5) 0.940 36(36.7) 0.000* 4 57(17.1) 40(70.2) 40(70.2)17(29.8) 25(43.9) 42(73.7) 44(77.2)Tumor stage 78(23.4) 32(41.0) 45(57.7) 18(23.1) 36(46.2) 57(73.1) 54(69.2) 169(50.6) 78(46.2) 83(49.1) 36(21.3) 67(39.6) 126(74.6) 89(52.7) 81(24.3) 48(59.3) 49(60.5) 19(23.5) 33(40.7) 63(77.8) 45(55.6) 6(1.8) 6(100.0) 0.007* 6(100.0) 0.037* 2(33.3) 0.896 5(83.3) 0.159 6(100.0) 0.475 3(50.0) 0.100Nuclear grades 1 39(11.7) 20(51.3) 23(59.0) 4(10.3) 15(38.5) 34(87.2) 18(46.2) 2 168(50.3) 79(47.0) 0.747 90(53.6) 0.826 31(18.5) 0.004* 68(40.5) 0.590 128(76.2) 0.112 89(53.0) 0.026* 3 127(38.0) 65(51.2) 70(55.1) 40(31.5) 58(45.7) 90(70.9) 84(66.1)Histologic grades 1 75(22.5) 34(45.3) 40(53.3) 9(12.0) 35(46.7) 61(81.3) 42(56.0) 2 136(40.7) 64(47.1) 0.433 73(53.7) 0.837 28(20.6) 0.007* 61(44.9) 0.273 105(77.2) 0.160 81(59.6) 0.764 3 123(36.8) 66(53.7) 70(56.9) 38(30.9) 45(36.6) 86(69.9) 68(55.3)ER 154(46.1) 79(51.3) 67(43.5) 48(31.2) 53(34.4) 102(66.2) 75(48.7) + 180(53.9) 85(47.2) 0.458 116(64.4) 0.000* 27(15.0) 0.000* 88(48.9) 0.008* 150(83.3) 0.000* 116(64.4) 0.004*PR 184(55.1) 95(51.6) 97(52.7) 54(29.3) 68(37.0) 139(75.5) 92(50.0) + 150(44.9) 69(46.0) 0.306 86(57.3) 0.399 21(14.0) 0.001* 73(48.7) 0.031* 113(75.3) 0.965 99(66.0) 0.003*HER2 251(75.1) 108(43.0) 144(57.4) 52(20.7) 107(42.6) 193(76.9) 144(57.4) + 83(24.9) 56(67.5) 0.000* 39(47.0) 0.099 23(27.7) 0.186 34(41.0) 0.790 59(71.1) 0.287 47(56.6) 0.905Notes： *： P 0.05肿瘤防治研究 2014年第 41卷第 7期 Cancer Res Prev Treat,2014,Vol.41,No.7 75810 min，阻断内源性过氧化物酶的活性， PBS冲洗。主要抗体在 4下孵育 12 h。主要抗体为：Shh(1:200,EP1190Y,Epitomics公司 )， Ptch (1:200, ab53715,Abcam公司 )， Smo(1:100,ab72130,Abcam)，Gli-1(1:50,ab92611,Abcam公司 )， Gli-2(1:400, ab7181,Abcam公司 )， Gli-3(1:400,PAB10052,Abnova公司 )， E R (1:30 0 , 6 F11, N o v o c a s t r a 公司 )，PR(1:600,Novocastra公司 )， HER2 (1:1 800,polyclonal公司 )和 Ki-67(1:200,MM1公司 )。免疫组织化学染色使用过氧化物酶 /DAB显色试剂盒（ Dako公司）。用苏木精对比染色，蒸馏水冲洗， 60温水泡 0.5 min，酒精脱水 12 min、透明、包埋。免疫组织化学染色玻片由两位病理医生独立审查。 Shh、 Ptch、 Smo阳性染色定位于细胞质，Gli-1、 Gli-2、 Gli-3定位于细胞核。染色强度分级如下： 0：阴性； 1：弱； 2：中度； 3：强。百分比分数按阳性细胞百分数分为： 0： 5%； 1：5%25%； 2： 25%50%； 3： 50%75%和 4： 75%。强度得分与百分比得分相乘产生免疫反应得分（ IS）。阴性表达被定义为 IS低于 4。1.3 肿瘤表型分类乳腺癌表型按照 2011圣加伦共有序列分类。ER和 PR免疫组织化学染色用奥尔雷德方法进行评估。 HER2免疫组织化学结果按如下得分判定： 0：无染色； +：在肿瘤细胞中完整膜染色10%； +：完整膜染色的强度 10%肿瘤细胞；+：完整膜染色 30%浸润性肿瘤细胞。 0和 +为阴性， +、 +为阳性。表型分类如下：管腔A(LumA)型： ER和（或） PR阳性， HER2阴性，Ki67指数 14%。管腔 B型： HER2阴性（ LumB 、HER2阴性）型： ER和（或） PR阳性， HER2阴性和 Ki67指数 15%； HER2阳性（ LumB、 HER2阳性）型： ER、 PR阳性， HER2阳性和任意 Ki67值；三阴性型： ER、 PR和 HER2阴性。1.4 统计学方法数据分析使用 SPSS 13.0版本完成。 Hedgehog相关蛋白与临床特征及乳腺癌表型之间的关系通过卡方检验来分析。患者的生存使用 Kaplan-Meier生存分析，同时使用时序检验进行单因素分析。P0.05为差异有统计学意义。2 结果2.1 Shh、 Ptch、 Smo、 Gli-1、 Gli-2和 Gli-3的免疫组织化学结果Shh、 Ptch和 Smo位于细胞质， Gli-1、 Gli-2和Gli-3位于细胞核，见图 1。 334例乳腺癌中， Shh、Ptch、 Smo、 Gli-1、 Gli-2和 Gli-3的阳性表达率分别为 49.1%（ 164/334）、 54.8%（ 183/334）、22.5%（ 75/334）、 42.2%（ 141/334）、 75.4%（ 252/334）和 57.2%（ 191/334）。2.2 Shh、 Ptch、 Smo、 Gli-1、 Gli-2和 Gli-3和乳腺癌临床病理特征之间的关系淋巴结转移与 Shh、 Ptch、 Gli-3的表达相关（ P分别为 0.001、 0.025和 0.000）。 Shh和 Ptch表达与分期显著相关（ P分别为 0.007和 0.037）。核分级与 Smo（ P=0.004）和 Gli-3（ P=0.026）有关。组织学分级与 Smo（ P=0.007）有关。 ER表达与Ptch(P=0.000)、 Smo(P=0.000)、 Gli（ P=0.008）、A： Shh； B： Ptch； C： Smo； D： Gli-1； E： Gli-2； F： Gli-3图 1 Shh、 Ptch、 Smo、 Gli-1、 Gli-2和 Gli-3在乳腺癌组织中的阳性表达 （ SP 40）Figure1 Positiveexpressionofsonichedgehog(Shh),patched(Ptch),smoothened(Smo),andglioma-associatedoncogenes(Gli-1,Gli-2,andGli-3)inbreastcarcinoma(SP 40)肿瘤防治研究 2014年第 41卷第 7期 Cancer Res Prev Treat,2014,Vol.41,No.7 759Gli-2（ P=0.000）和 Gli-3（ P=0.004）有关。 PR表达与 Smo（ P=0.001）、 Gli-1（ P=0.031）和 Gli-3（ P=0.003）有关。 HER2表达与 Shh(P=0.000)显著相关，见表 1。2.3 Hedgehog相关蛋白表达与乳腺癌表型之间的关联 Shh、 Ptch、 Smo、 Gli-1、 Gli-2、 Gli-3的表达在乳腺癌不同表型之间显著不同（ P分别为 0.000、 0.000、 0.004、 0.039、 0.031、 0.003）。 143例（ 49.3%）乳腺癌组织中检测到 Shh阳性表达， Shh的表达与乳腺癌组织中 HER2型（ 74.1%）的关系有统计学意义。 158例（ 54.4%）乳腺癌组织中检测到 Ptch表达， Ptch的表达与乳腺癌组织中 LumB HER2阴性型（ 76.7%）的关系有统计学意义。在65例（ 22.4%）乳腺癌组织中检测到 Smo表达，Smo的表达与乳腺癌组织中 HER2型、三阴型（分别为 31.0%、 30.9%）的关系有统计学意义。在 119例（ 41.0%）乳腺癌组织中检测到 Gli-1表达， Gli-1表达与乳腺癌组织中 LumB HER2阳性型 (64.0%)的关系有统计学意义。在 215例（ 74.1%）乳腺癌组织中检测到 Gli-2表达， Gli-2的表达与 LumA (85.1%)、 LumB HER2阴性（ 81.4%）和 LumB HER2阳性型（ 80.0%）的关系有统计学意义。在168例（ 57.9%）乳腺癌组织中检测到 Gli-3表达，但 Gli-3的表达与任何一种乳腺癌亚型的关系都无统计学意义，见表 2。2.4 生存分析乳腺癌的肿瘤分期（ P =0.0001）与患者的总体生存显著相关。在分析的所有 Hedgehog相关蛋白中， Gli-2阳性组较 Gli-2阴性组生存率差（ P=0.012），见图 2。 Shh、 Ptch、 Smo、 Gli-1和 Gli-3与患者的预后关系无显著的统计学意义，见表 3。3 讨论Hedgehog信号途径在胚胎发育期间控制细胞命运和器官形成中发挥重要作用； Hedgehog信号途径中断导致先天性无脑、面部和其他器官形成缺陷14。 Hedgehog信号途径激活突变与基底细胞癌15和髓母细胞瘤16有关。Kubo等17对 52例乳腺癌组织进行免疫组织化学染色，评估 Shh、 Ptch和 Gli-1的表达，结果肿瘤细胞分别在 52个总标本中的第 52、 50和 5个标本中过度表达 Shh、 Ptch和 Gli-1。另外， 4个人类乳腺癌细胞株显示 Shh、 Ptch和 Gli-1表达增加。然而，根据他们的结果，在 T分期，淋巴结受累和肿瘤表 2Hedgehog相关蛋白表达与乳腺癌表型之间的关系Table2RelationshipbetweenHedgehogrelatedproteinsexpressionandbreastcarcinomaphenotypes LumA LumB LumB HER2 TNBC (n=67) (HER2-) (HER2+) (n=58) (n=97) P na (n=43) (n=25) Shh 147(50.7) 33(49.3) 27(62.8) 12(48.0) 15(25.9) 60(61.9) + 143(49.3) 34(50.7) 16(37.2) 13(52.0) 43(74.1)* 37(38.1) 0.0001*Ptch 132(45.5) 21(31.3) 10(23.3) 13(52.0) 31(53.4) 57(58.8) + 158(54.5) 46(68.7) 3(76.7)* 12(48.0) 27(46.6) 40(41.2) 0.0001*Smo 225(77.6) 58(86.6) 40(93.0) 20(80.0) 40(69.0) 67(69.1) + 65(22.4) 9(13.4) 3(7.0) 5(20.0) 18(31.0)* 30(30.9)* 0.004*Gli-1 171(59.0) 35(52.2) 25(58.1) 9(36.0) 40(69.0) 62(63.9) + 119(41.0) 32(47.8) 18(41.9) 16(64.0)* 18(31.0) 35(36.1) 0.039*Gli-2 75(25.9) 10(14.9) 8(18.6) 5(20.0) 20(34.5) 32(33.0) + 215(74.1) 57(85.1)* 35(81.4)* 20(80.0)* 38(65.5) 645(67.0) 0.031*Gli-3 122(42.1) 17(25.4) 20(46.5) 6(24.0) 30(51.7) 49(50.5) + 168(57.9) 50(74.6) 23(53.5) 19(76.0) 28(48.3) 48(49.5) 0.003*Notes:a: randomly selected 290 cases； *:P 0.05；TNBC:triple negative breast carcinoma表 3 所有生存患者临床病理特征与预后的关系Table3 RelationshipofclinicopathologicfactorsandprognosisofallsurvivalpatientsCharacteristics Breast carcinoma patients (n=322)Total No. of decreased PAge (years) 50 501701521719 0.233Stage 73163 80 6 21416 4 0.000*Phenotypes LumA LumB HER2 LumB HER2+ HER2 Triple negative 67 43 25 58 97 3 8 1 5 9 0.130Shh 1671551719 0.447Ptch 1471751521 0.638Smo 252 7027 9 0.695Gli-1 1861362511 0.354Gli-2 79243 234 0.012*Gli-3 1391832115 0.469Notes: selected cases were available for follow-up, some cases couldnt be followed up due to contact information change；*: P0.05肿瘤防治研究 2014年第 41卷第 7期 Cancer Res Prev Treat,2014,Vol.41,No.7 760总淋巴结转移（ TMN）分期之间差异无统计学意义。 ten Haaf等18确定在人类乳腺癌中 Gli-1蛋白水平升高与癌症的侵袭性行为相关，如高肿瘤分期和淋巴结状态。此研究显示 Hedgehog相关蛋白的过度表达与较大的肿瘤大小（ Gli-3）、更多的淋巴结转移（ Shh、 Ptch和 Gli-3）、更高的分期（ Shh和 ptch）、更高的核分级（ Smo和 Gli-3）和更高的组织学分级（ Smo）有关联，均表明肿瘤的侵袭性行为与 Hedgehog相关蛋白有关。Hedgehog相关蛋白和乳腺癌患者总体生存期间的关系有很多研究。根据 ten Haaf等18的报道，Gli-1高表达组总体生存率低。 OToole等19评估了在 279例浸润性导管癌中 Hedgehog过度表达，并且报道 Hedgehog配体表达与转移风险增加和乳腺癌死亡显著相关。很少研究 Hedgehog相关蛋白表达和其他器官恶性肿瘤的关系。 Zhang等20报道 Gli-2表达与肝细胞癌患者预后较差显著相关。 Ding等21报道结肠癌手术后无转移组其 Smo表达更低。另一方面， Lee等22报道 Ptch和 Gli-2阳性组的胃腺癌有更好的总体生存率。然而，本研究显示 Gli-2表达的乳腺癌患者总体生存率更差， Hedgehog相关蛋白与导致进一步侵袭性行为的临床病理特征相关。Gli-2，哺乳动物 Gli-转录因子家族的三员之一，是已知主要作为介导 Hedgehog信号细胞反应的转录激活因子。 Lewis23研究显示 Gli-2在乳腺发展中中断导致导管发育不良，从而导致人类乳腺增生。然而，关于 Gli-2和人类乳腺癌的研究较少。根据 Xuan等24的报道： Gli-2表达与 PR、Ki67、淋巴结转移和临床分期相关。我们的研究最先报道 Gli-2表达在乳腺癌患者中有较差的总体生存率，结果表明 Gli-2可作为一个预后指标。在 2011年，第 12届圣加仑国际乳腺癌会议专家面组采用一个新的方法基于治疗目的的患者分类25。这个方法使用 ER和 PR免疫组织化学结果、 HER2状态和 Ki67增殖指数识别肿瘤亚型。（ 1）管腔 A(LumA)型： ER和（或） PR阳性，HER2阴性， Ki6714%；（ 2）管腔 B型： HER阴性（ LumB HER2阴性）： ER和（或） PR阳性，HER2阴性和 Ki67 15%；（ 3） HER2阳性（ LumB HER2阳性）型： ER、 PR阳性， HER2阳性和任意Ki67值；（ 4）三阴型： ER、 PR和 HER2阴性。本研究显示， Shh表达在 HER2型更高， Ptch表达在 LumB HER2阴性型更高， Gli-1表达在 LumB HER2阳性型更高。除了内分泌治疗或曲妥珠单抗靶向治疗外，这些表型均需要化疗。 Hedgehog途径可能是这些病例中化疗的治疗目标。 Smo在HER2和三阴型中表达更低，这也要求使用药物进行化疗。推断非甾体类化疗药通过直接结合 Smo来抑制 Hedgehog途径激活。 Gli-2表达在 LumA、LumB HER2阴性和 LumB HER2阳性型中更高。这三型都是 ER和（或） PR阳型。 Xuan等24报道 Gli-2表达与 PR表达相关。然而， Gli-2和激素受体之间的完整关系尚未发现。在细胞中存在多条与乳腺癌发生发展相关的信号转导通路：有归属于受体酪氨酸激酶 (RTK)介导的信号通路，有归属于雌激素调控的 ER信号通路，还有 Notch信号转导通路、 Wnt信号转导、Hedgehog信号通路等都与乳腺癌的发生、浸润、转移等有密切关系。随着对与乳腺癌相关信号转导通路的深入研究发现，乳腺癌的发病机制十分复杂，可能是上述信号途径中的两条或多条的共同参与引起的26-27，虽然具体的机制还不清楚，但一定与癌基因和抑癌基因相关，这就说明一些因子的生物学活性成为信号转导途径的关键环节。因此，对细胞信号转导通路的研究有助于阐明乳腺癌的发病机制。同时，对肿瘤细胞信号转导通路的分子靶向药物研究为人类防治肿瘤开辟了新的道路，尤其对肿瘤细胞增殖与生存、肿瘤血管生成等方面的具有高选择性的分子靶向药物的研究有助于我们联合化疗、放疗，显著提高疗效。总之， Shh、 Ptch、 Smo、 Gli-1、 Gli-2和Gli-3表达与各种临床病理指标显著相关，表明Hedgehog途径的激活与更多的侵袭性临床行为相关。最重要的是， Gli-2表达的患者预后较差，表明 Gli-2是一个有前途的预后指标。评估 Hedgehog相关蛋白可预测患者的预后，为患者选择进一步图 2 乳腺癌患者 Gli-2阳性组和 Gli-2阴性组的 Kaplan-Meier生存分析Figure2 Kaplan-Meier survival analysis of breastcarcinomapatientsinGli-2positiveandGli-2negativegroups肿瘤防治研究 2014年第 41卷第 7期 Cancer Res Prev Treat,2014,Vol.41,No.7 761治疗方案时提供参考， Hedgehog途径可能是乳腺癌患者化疗中一个有用 的治疗靶点。参考文献:1 Toftgrd R. 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