临床常见传染病及检测方法ppt课件.ppt

,临床常见传染病及检测,1,为保障广大人民群众的身体健康，提高人口素质，有效控制病毒性肝炎（HBV、HCV）艾滋病和梅毒等传染性疾病的传播，加强肝炎、艾滋和梅毒等传染病的预防与控制工作，国家制定了中华人民共和国传染病防治法、艾滋病防治条例及最新的中国预防与控制梅毒规划（2010-2020年）。,2,按照卫生部临床输血技术规范相关规定,要求对输血前和手术前(包括产前)患者进行血液传播性疾病的血清指标检测，即乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒抗体(抗HCV)、人类免疫缺陷病毒(型,型)抗体(抗HIVl/2)、梅毒抗体（TP）四项传染性指标。我国2012年发布的中国丙型病毒性肝炎医院感染防控指南中要求：进行外科手术及侵入性诊疗操作(所有涉及外科操作的内科、内镜以及妇科、产科、牙科等的常规医疗操作)患者在进行操作前筛查丙肝病毒抗体；血液透析患者首次血液透析前应进行丙肝病毒抗体检测，丙肝病毒抗体阴性者在血透中建议定期(半年)进行丙型病毒性肝炎的筛查这对于避免医源性感染、预防医务人员的职业感染，防止出现医疗纠纷有积极意义。,3,乙型肝炎,4,属嗜肝DNA病毒科完整的HBV颗粒(Dane颗粒)呈球形,有双层衣壳(抗原)和含病毒DNA的核心,HBsAgHBcAg,乙肝病毒颗粒,HBsAg用于构建病毒子，并以小球形或小管状的形式而分泌入血液中血液中，HBV颗粒：HBsAg约为1:1,000-10,000,5,HBsAg,逆转录,肝脏细胞,血液中,前基因组的RNA,HBcAg,p22crAgHBeAg,完整的HBV,ssRNA,不完整dsDNA,空心粒子,HBeAg,核,HBV复制机制,HBsAg,6,临床潜伏期45-180天,平均60-90天类型:急性,重症肝炎,慢性及病毒携带者30-50%5岁或者5岁以上感染者产生黄疸,5岁以下的黄疸发生率少于10%临床表现为厌食,疲劳,恶心,呕吐,腹痛,关节肌痛,低热,皮疹和黄疸大多数成人感染后半年内会恢复且产生免疫力.感染HBV后,30-90%的5岁以下儿童和2-10%5岁以上会演变成慢性感染15-25%慢性感染者因为慢性肝病过早死亡,乙肝病程发展步骤,7,HBV急性感染,在患者出现症状之前，HBs抗原即出现于血液中。急性感染6个月内缓解。急性感染恢复期HBsAg值很低，但还是有传染性，如灵敏度不够未能检测出来，献血、输血、手术、口腔治疗、怀孕分娩等存在风险,8,HBV慢性感染（携带者）,抗-HBcHBs抗原,HBe抗原,抗-HBe,抗-HBs,Years,在受到感染的1岁的婴儿或围产期的婴儿中，大约90%的发展为慢性感染。他们成为无症状的HBV携带者，在十多岁至二十多岁的年龄期间，会发生短暂的肝炎。他们可能发展为慢性肝炎或肝硬化或肝癌。有些病例可能发生HBsAg的清除。,HBeAgs血清转换,HBV携带者维持高水平的抗-HBc和HBsAg,HBsAg血清,转换,9,慢性乙肝：一种不断进展的疾病,急性感染,慢性携带者,缓解,3050年,慢性肝炎,稳定,疾病进展,肝硬化,代偿性肝硬化,肝癌,死亡,非代偿性肝硬化,10,12,慢性乙型肝炎治疗一般流程图,11,慢性乙型肝炎的治疗药物,12,乙肝的临床治疗途径：,筛查,诊断,治疗方法的选择,监测治疗的反应,治疗目标,HBsAg,ALTHBeAg抗-HBeHBVDNAHBV基因型CBC肝硬化,ALTHBeAg抗-HBeHBVDNAHBsAg,伴有肝炎症状的个体妊娠妇女手术之前供血,生化HBeAg抗-HBe抗-HBcHBVDNAHBsAg定量检测,HBsAg定量检测,ALTHBeAg抗-HBeHBVDNAHBsAg定量检测,HBsAg定量检测,13,HBsAg水平有自然扩增放大作用,HBsAg是急性感染第一个可检测的标记物，也是早期诊断的重要指标之一；乙肝病毒感染时产生的表面抗原是完整病毒颗粒的100010000倍，这种自然扩增放大效应使表面抗原检测灵敏度比核酸扩增技术（NAT）好；台湾：NAT检测HBV献血者时，HBVDNA滴度非常低的慢性或隐性病人，其HBVDNA有可能波动到NAT检测低限以下。NAT混合样品测试漏检了15.8%HBsAg阳性携带者；WolframGerlich，2010EASLAbbottSymposiumPresentation,14,丙型肝炎,15,丙型肝炎,丙型肝炎（丙肝）是由丙肝病毒（HCV）引起的，以肝脏损害为主的一组全身性传染病。其急性感染期症状不明显，易慢性化，比例可达50.0%-85.0%；10.0%-20.0%的HCV感染者在感染20年后发展为肝硬化，1.0%-3.0%的人在感染30年后发展为肝癌。在我国健康人群抗HCV阳性率约为3.2%以长江为界，北3.6%，南2.9%全世界慢性HCV患者中，有24%左右生活在中国(DatamonitorDec2005),中国的流行率是美国的十倍(DecisionResourcesDec6th2006)少数地区（宁夏、河南）流行率在,9.6%以上,2000年(/eid11(1):Jan2005)社会调查显示在80年代到90年代：27.7%是由于血液捐献引起;只有2.6%非血液传播.(CIPRA,2005),16,HCV的结构,332nt,54nt,1,500,1000,1500aminoacids,2000,2500,3010,CE1E2/NS1NS2,NS3,NS4,NS5,结构区域,非结构区域,60nm,Glycoprotein糖蛋白Envelope包膜ViralRNACore核衣壳,17,HCV基因型,6种主要基因型(Genotypes1to6):每个基因型又有若干不同亚型不同基因型对治疗效果的反应不一分析试剂必须具有对不同基因型的检测能力我国现状：1b，2a多见，1b为主；1a，2b，3b可见；6型主要见于港澳地区及南方边境省份,18,2004HCVaudiowebconference,Dr.ERSchiff,MiamiUniversity,Florida,Symptoms+/-,TimeafterExposure,Titer,anti-HCV,ALT,Normal,Years,Months,HCV-RNA,HCVCoreAg,Symptoms+/-,TimeafterExposure,Titer,anti-HCV,ALT,Normal,Years,Months,HCV-RNA,HCVCoreAg,PersistentCase:70%,CuredCase:30%,HCV感染的典型血清学模式,急性HCV感染被完全治愈,急性HCV感染转为慢性感染,急性HCV感染的两种临床结果（血清学模式）：,19,HCV感染后的主要标志物,100806040200,Anti-HCV,TimeHCVRNAWindow=approximately1113daysHCVAgWindow=1214daysAnti-HCVWindow=70days(3rdGen)=82days(2ndGen),HCV-RNAHCV-Ag,20,抗-HCV检测的窗口期3rdgenerationHCVantibodytests,82天,140-150天,（70天）,HCV,感染,3rdgen,21,抗HCV的诊断流程,22,HCV诊断结果说明,23,HCV实验室检测方法,Anti-HCVIgG检测快速检测技术-金标法酶联免疫吸附实验-大批量处理化学发光技术-封闭式全自动化补充确认实验-重组免疫印迹实验(RIBA)Anti-HCV检测HCVRNA的检测HCV分型,24,艾滋病,25,HIV(HumanImmunodeficiencyVirus人类免疫缺陷病毒)AIDS(AcquiredImmuneDeficiencySyndrome获得性免疫缺陷综合症)：由人类免疫缺陷病毒（HIV）感染免疫细胞并破坏引起后天性免疫缺乏的症状，俗称“艾滋病”,人类免疫缺陷病毒HIV,Retroviridae逆转录病毒科Lentivirus慢病毒属HIV-1/2种HumanImmunodeficiencyVirus,26,HIVp24抗原单体,在体内容易诱导产生抗体反应的部位,HIV-1:gp41（gp120）/（HIV-2：,gp36）,p24（gag）：核蛋白感染初期以及血中病毒增加的时候作为HIV抗原可被查出RNAp66/p51（RT）：逆转录酶gp31（整合酶）,HIV病毒的构造,0.1m,27,HIV病毒的复制,ProviralDNA,前病毒DNA,HIVRNA,逆转录,ViralDNA,进入宿主基因组,逆转录酶整合酶,病毒蛋白蛋白酶裂解,融合的方式进入细胞病毒颗粒衣壳装配，&出芽方式到胞外,转录和加工,病毒mRNA&基因组RNA翻译Viralprecursorprotein病毒前蛋白,28,HIV存在HIV-1和HIV-2两种类型HIV-1在全世界范围内流行，占全部感染者90%以上；HIV-2主要流行于西非各国，其他地区感染率很低HIV-1已知有几种亚型组，其中M组占世界分布范围内的大多数。M组分10种亚型，而且相互之间还存在重组体。亚型的分布地域性较为明显。,HIV病毒的种类,29,中国HIV的流行分布,截至2013年9月，联合国艾滋病规划署（UNAIDS）公布中国HIV感染人数850，000中国艾滋病每天死8000人，每天新患1.5万,30,HIV的实验室检测,HIV特异性抗体检测酶联免疫吸附实验-大批量处理化学发光技术-封闭式全自动化快速检测技术-试纸条确认实验-蛋白印迹试验(WesternBlot)HIV特异性抗原检测Ag+Ab联合检测（同时定性检测HIVp24抗原和HIV-1或HIV-2抗体）,31,0,50403020,7060,80,10090,IgGHIV1病毒裂解产物,敏感性特异性,无IgM无HIV2,1983-85,Sensitivity%,2002,P24+IgG+IgMHIV1&HIV2重组抗原合成多肽敏感性99.9%特异性99.9%,第4代,IgG+IgMHIV1&HIV2重组抗原合成多肽,1994,P24抗原,敏感性特异性,无IgM,1987-90,第3代,第2代IgGHIV1+HIV2重组抗原,第1代,敏感性特异性,HIV-1O组,血清学检测HIV技术的进展,32,010,708090100,365,2030,1代抗体检测3代抗体检测P24抗原检测4代Ag+Ab检测172231,窗口期:3-5天,灵敏的联检,3代HIV抗体EIA,HIVp24Ag405060,抗HIV抗体,p24AgEIA1代HIV抗体EIA,HIVAg+Ab联合检测缩短窗口期,Adaptedfrom:FiebigetalAIDS,17:1871-1879(2003),感染早期，在HIV抗体产生之前就可以检出HIVp24抗原。HIV抗原抗体(Ag+Ab)联检检出HIV感染的时间比HIV抗体检测早3-5天,33,梅毒,34,梅毒Syphillis,所谓梅毒，是指一种由螺旋体科的梅毒螺旋体（Treponemapallidum；T.P.）菌引起的感染症，主要是由性行为或者类似行为引发感染而导致的一种性感染症。T.P.从皮肤和粘膜的伤口侵入体内，在局部组织中增殖后进入血中，曼延至全身,显示出各种各样的症状，是一种“全身性慢性感染症”。1905年，德国的细菌学者夏乌登和赫夫曼发现了梅毒的病原体（苍白螺旋体）。TP菌不能在体外（invitro）培养，而只能在老鼠的睾丸内培养。,梅毒螺旋体(长6-20m直径0.1-0.2m),Spirochaetaceae螺旋体科Treponema螺旋体属T.Pallidum种,Nichols株,35,诊察临床症状初期硬结、硬性下疳、扁平湿疣等病原学检查原理：一期、二期梅毒时，取硬下疳、扁平湿疣、黏膜斑等皮损部位组织液或淋巴结穿刺术得到的组织液，在暗视野显微镜下，光线从聚光器的边缘斜射到涂片上的梅毒螺旋体而发出亮光，从而根据其特殊形态和运动方式进行检测。方法：（1）暗视显微镜检查（2）镀银染色法（3）核酸检测血清学检查脂质抗体检测法梅毒螺旋体抗体（TP）检测法,梅毒诊断方法,36,感染梅毒后，首先产生IgM型抗梅毒螺旋体抗体，感染2周后即可测出，早期梅毒抗梅治疗39个月后或晚期梅毒治疗2年后，大部分病人IgM可转阴性，再感染时又出现阳性，故IgM型抗体的存在是活动性梅毒的表现,梅毒血清学标记物,感染梅毒4周左右产生IgG型抗梅毒螺旋体抗体，即使经足量抗梅治疗，梅毒螺旋体抗原消失后很长时间，IgG抗体仍可通过记忆细胞的作用继续产生，甚至终生在血清中可测出。另一种具有抗体性质的物质叫反应素(reagin)，是梅毒螺旋体破坏人体组织过程中释放出的一种抗原性心磷脂刺激机体所产生的抗体。反应素一般在感染后57周（或下疳出现后23周）产生，经正规治疗后可逐渐消失。,37,梅毒血清学