（动物学专业论文）慢性应激对小鼠空间学习记忆功能及脑内bdnf表达的影响.pdf

摘鼹 摘要 许多研究显示慢性应激可损害健康，弓l 发疾病，同时也可影响脑的认知功蘸，导致学 习记忆能力下降。脑源性神经营养因子( b 烈f ) 是神经营养索家族的成员之一，它不仅 对神经元的生存、生长、分化有重臻的影响，蕊且还能增强突触联系，影响神经元酌可鋈 性，并且与学习记忆有关。本研究采用多因素慢性( 电击足底、拥挤、拥挤+ 热刺激，1 5 天 应激动物模型，磷究了馒性应激对不圈麓龄小鼠( 2 胄龄私1 5 莠龄) 空闻学习记忆麓 力的损害作用及其b d n f 在海马和前脑皮层的表达变化。旨在探讨慢性应激对不间月龄小 鼠空闯学习记忆功麓鹣影响及基渊f 的捧用，扶瑟势指导箍庆臻莼提供释薪的接施和思 路。 本研究以开场行为检测小鼠在新异环境中灼自发活动；采用m o r r i s 水迷富测试小鼠空 闲学习记忆能力；通过h e 染色观察小鼠海马和前脑皮层神经细脆形态学的交化；采用兔 疫组织化学方法检测b d n f 在海马和前脑皮层的表达。 研究结果翔下： 1 与对照组小鼠相比，青年应激组小鼠的爬行格数、直立次数及修饰次数均明显减少， 这一交纯趋势在老年应激缎小豪更唆显，两粪便粒数没有显著性交纯。与青年对照缝小鬣 相比，老年对照组小鼠的修饰次数照著减少。与青年应激组小鼠相比，老年应激组小鼠爬 行格数及修镑次数骥显减少。 2 应激组小鼠寻找平台的潜伏期较对照组小鼠明显增加，盛在空阕搜索试验中，在爵 标象限的停罂时阃较对照组小鼠明显缩短，这种状态持续到停止应激后周。分别与青年 对照缓和应激组小鼠裙比，老年对照组和应激缝小鼠的空闻学习记忆能力略有降低，但是 没有统计学意义。 3 。应激缰小毓海马季孛羟维庭酶排列较对照缓小鼠骥显琉松，细胞缺失，尼氏体浅染甚 至溶解。前脑皮层神经细胞也呈程度不同的损伤现象。与青年应激组小鼠相比，老年应激 组小氯豹撰费更加严重。这释变纯持续到箨丘应激震蔫。 4 应激组小鼠海马和前脑皮层b d n f 表达均明慰下调，阳性细胞数明显减少，阳性细 胞面积比显著减小。老年应激组小藏变化龙为明显。分别与青年对照组和应激组小鼠相比， 老年对照组和应激组小鼠b d n f 的表达显著降低。 研究结论如下： 重老年小鼠对新异环境的反应性耱耐受性均下降， 曼牲瘦激后表现鲶更显著，说臻衰 老是影响机体应激反应性的重要因豢之一。 2 慢性应激明显损害小鬣豹空间学习记能笺力，老年小鼠酌空阕学习记忆畿力下降更 明显。 3 。慢性应激导致小鼠海马和蓠脑皮层 串经细胞麴形态学交纯，老年维小鼠神经缨胞形 摘瑟 态学改变较青年缀小鼠热重。 4 慢性应激可使小鼠海马和前脑皮层b d n f 的表达下降，老年组小鼠在海马和前脑 皮层b d n f 的表达均较青年组小鼠下降舞曼。 本研究发现，慢性应激后即刻及停止应激后周，小鼠的空间学习记忆功能的损伤与 海马和前脑皮层中b d n f 表达的变化相一致，提示幔性应激损害小鼠的空通学习记忆功能 以及停止应激后的恢复过程中，脑杰b d n f 对其都发挥了重要的保护佟用。 关键词：慢性应激；空闻学习记忆；脑澡性神经营养因子；衰老；海马；前 脑皮层 【l a b s t r a c t w i t ht h eg r o w i n gc o m p e t i t i o ni nt h ew o r l d ，p e o p l eu s u a l l yl i v ei nac i r c u m s t a n c e w i t h d i f f e r e n tk i n ( ko fc h r o n i cs t r e s s o r s 。u n p r e d i c t a b l ea n du n c o n t r o l l a b l es t r e s s f u le v e n t se x e r t p o w e r f u li n f l u e n c e so nt h ep h y s i o l o g yo fe v e r yo r g a ns y s t e mo ft h eb o d yv i at h e i ri m p a c t o n b o t ht h ep h y s i o l o g i c a la n dc o g n i t i v ep r o c e s s e so ft h ec e n t r a ln e r v o u ss y s t e m m a n ys t u d i e s s h o w e dt h a tc h r o n i cs t r e s sw a sh a r m f u lt oh e a l t h ，e v e i ll e dt od i s e a s e s ，m e a n w h i l ei ti m p a c t e dt h e b r a i nc o g n i t i v ef u n c t i o n sa n dl e a d st ol e a r n i n g m e m o r yi m p a i r m e n t b r a i n d e r i v e dn e u r o t r o p h i c f a c t o r ( b d n f ) i sam e m b e ro ft h e ，n e u r o t r o p b i nf a m i l y b e s i d e si t sa c t i o n so i ln e u r o n a ls u r v i v a l ， g r o w t ha n dp r e v e n t i o no fn e u r o d e g e n e r a t i o n , i tc a ne n h a n c et h ec o n n e c t i o no fs y n a p s ea n d i n f l u e n c et h en e u r a lp l a s t i c i 移a n ds y n t h e s i so fn e u r o t r a n s m i t t e r sa n dn e u r o t r o p h i n s ，a l s or e l a t e w i t hl e a r n i n ga n dm e m o r y t h i ss t u d ya i m st oi n v e s t i g a t et h ee f f e c t so fc h r o n i cs t r e s so nt h e a b i l i t yo fs p a t i a ll e a r n i n g m e m o r yi nd i f f e r e n tg r o u pm i c ea n dt h e r o l eo fb d n fi ni t s m e c h a n i s mi nh i p p o c a m p u sa n df r o n t a lc o a e x ，s oa st op r o v i d ean e wm e a s u r ea n di d e af o r c l i n i c a lp h a r m a c o l o g y i nt h ep r e s e n ts t u d y , w ee x a m i n e dt h ee f f e c t so fc h r o n i cs t r e s so nl e a r n i n g - m e m o r y i m p a i r m e n ta n dt h ee x p r e s s i o no fb d n fi nh i p p o c a m p u sa n df r o n t a lc o d e xo fd i f f e r e n tg r o u p m i c e ( 2m o n t ho l da n d1 5m o n t ho l 国。翟跫c h r o n i cs t r e s sm o d e li n15d a y sw i t hm u l t i p l e s t r e s s o r s ( f o o t s h o o k , c r o w d i n ga n dc r o w d i n g + t h e r m a ls t i m u l u s ，u n e x p e c t e d l yg i v e nt om i c e ) w a s a p p l i e d 硼l o c o m o t i o no fm i c ew a st e s t e di no p e nf i e l da r e a t h ea b i l i t yo fs p a t i a ll e a r n i n g - m e m o r yo fm i c ew a sm e a s u r e du s i n gm o r r i sw a t e rm a z e t h em o r p h o l o g i cc h a n g e s i n h i p p o c a m p u sa n d f r o n t a lc o d e xo fb r a i nw e r eo b s e r v e db yh e d y e ，a n dt h ee x p r e s s i o n a lc h a n g e s o fb d n ti nm i c e w e r ed e t e c t e db yi m m u n o h i s t o c h e m i c a lm e t h o d t h er e s u l t so ft h i ss t u d ya l e a sf o l l o w s ： 1 c o m p a r e d 诚饿t h ec o n t r o lg r o u pm i c e , e x c e p tf o rd e f e c a t i o n ，a l lp a r a m e t e r so f t h ey o u n g a n da g e ds t r e s sm i c es u c ha sw e i g h t ，s q u a r ec r o s s i n g ，r e a r i n ga n dg r o o m i n gw e r ed e c r e a s e d 讯 a g e dc o n t r o lg r o u pm i c ee x h i b i t e dl e s sg r o o m i n gt h a nt h ey o u n g c o n t r o lg r o u p 司舱a g e ds t r e s s 。g r o u pm i c eh a dm o r er e m a r k a b l ec h a n g e si ns q u a r ec r o s s i n ga n dg r o o m i n gt h a nt h ey o u n g c o n t r o lg r o u p a n dt h e s ep a r a m e t e r sw e r es t i l lo n7 d a y sa f t e rs t r e s s 。 2 。趣w a t e rm a z et e s t ，t h ey o u n ga n da g e ds t r e s sg r o u pm i c es h o w e dl o w e rp e r f o r m a n c ei n r e a c h i n gt h ep l a t f o r mi na c q u i s i t i o nt e s t ，a n dt h e ys p e n tl e s st i m ei nt h et a r g e tq u a d r a n ti np r o b e t r i a l sa sc o m p a r e dw i t ht h ec o n t r o lg r o u pm i c e ，a n d7 d a y sa f t e rs t r e s s , t h ei m p a i r m e n tw a ss t i l l o n t h ea g e dc o n t r o la n ds t r e s sg r o u pm i c eh a dp o o r e rp e r f o r m a n c et h a nt h ey o u n gc o n t r o la n d s t r e s sg r o u pa f t e rs t r e s sa n d7 d a y sa f t e rs t r e s s ，r e s p e c t i v e l y i l i a b s t r a c t 3 。弧es t r e s sg r o u pm i c ed i s p l a y e do b v i o u s l ym o r p h o l o g i ec h a n g e ss u c ha si n t e r c e l l u l a r s p a c eb r o a d e n , c e l li m p e r f e c t i o n ，t h en e i sb o d yw a ss h a l l o wt od y ee v e nf u s ei nh i p p o c a m p u s a n df r o n t a lc o d e xa f t e rs t r e s sa n d7 d a y sa f t e rs t r e s s c o m p a r e dw i t ht h ey o u n gs t r e s sg r o u p ，t h e a g e ds t r e s sg r o u ps h o w e dm o r ec e l li m p e r f e c t i o na f t e rs t r e s sa n d7 d a y sa f t e rs t r e s s 4 i m m u n o h i s t o c h e m i c a la n a l y s i sr e s u l t ss h o w e dt h en u m b e ra n ds e c t i o n a la r e ao fb ，d n f p o s i t i v en e u r o n si nh i p p o c a m p u sa n df r o n t a lc o r t e xw e r es i g n i f i c a n t l yr e d u c e di nt h es t r e s sg r o u p m i c ea f t e rs t r e s s ，a n dt h ec h a n g e sw e r es t i l lo n7 d a y sa f t e rs t r e s s ，c o m p a r e dw i t ht h ec o n t r o l g r o u pm i c e 。t h ea g e dc o n t r o la n ds t r e s sg r o u pm i c es h o w e dl o w e rb d n fe x p r e s s i o ni n h i p p o c a r n p u sa n df r o n t a lc o r t e xt h a nt h ey o u n gc o n t r o la n ds t r e s sm i c ea f t e rs t r e s sa n d7 d a y s a f t e rs t r e s s 。 ， c o n c l u s i o n ： t c h r o n i cs t r e s sc o u l di n d u c ed i f f e r e n te x t e n td a m a g ei nw e i g h ta n db e h a v i o ro ft h ey o u n g a n da g e dg r o u pm i c e ，t h ea g e dg r o u pm i c eh a dm o r es e r i o u sa b n o r m a lo fb e h a v i o ru n d e rc h r o n i c s t r e s s i ti n d i c a t e st h a ta g i n gi so n eo ft h ei m p o r t a n ti n f l u e n c ef a c t o r si nc h r o n i cs t r e s s 2 。c h r o n i cs t r e s sc o u l di n c r e a s et h ee s c a p el a t e n c ya n dd e c r e a s et h es w i m m i n gt i m ei nt h e t a r g e tq u a d r a n ti nd i f f e r e n tg r o u pm i c e ，a n dt h ea g e dg r o u pm i c eh a dp o o r e rp e r f o r m a n c et h a n t h ey o u n gg r o u pm i c ea f t e rs t r e s sa n d7 d a y sa f t e rs t r e s s 。i ti n d i c a t e st h a tc h r o n i cs t r e s sc a u s et h e i m p a i r m e mo fd i f f e r e n tg r o u pm i c e ss p a t i a ll e a r n i n g - m e m o r ya b i l i t y ，a n dt h ea g e da n i m a l sh a v e m o r es i g n i f i c a n ti m p a i r m e n to fs p a t i a ll e a r n i n g - m e m o r ya b i l i t y 3 c h r o n i cs t r e s sc o u l dc a u s et h em o r p h o l o g yc h a n g e ss u c ha si n t e r c e l l u l a rs p a c eb r o a d e n ， c e l li m p e r f e c t i o n , t h en e i sb o d yw a ss h a l l o wt od y ee v e nf u s ei nh i p p o c a m p u sa n df r o n t a lc o r t e x ea g e dg r o u pm i c es h o w e dm o r es e r i o u s l yc e l li m p e r f e c t i o nt h a nt h ey o u n gg r o u pm i c ea f t e r s t r e s sa n d7 d a y sa f t e rs t r e s s 4 。c h r o n i cs t r e s sc o u l di n d u c es i g n i f i c a n tr e d u c t i o no fb d n fe x p r e s s i o ni nh i p p o c a m p u s a n df r o n t a lc o r t e x 鼢ea g e dg r o u pm i c eh a dm u c hl o w e rb d n f e x p r e s s i o nt h a nt h ey o u n gg r o u p m i c ea f t e rs t r e s sa n d7 d a y sa f t e rs t r e s s ， i nt h i ss t u d yw ef o u n dt h a tt h ec h a n g e so fb d n fe x p r e s s i o ni nh i p p o c a m p u sa n df r o n t a l c o r t e xw e r ep o s i t i v e l yc o r r e l a t e dw i t ht h ei m p a i r m e n to fm i c e ss p a t i a ll e a r n i n g - m e m o r ya b i l i t y a f t e rs t r e s sa n d7 d a y sa f t e rs t r e s s i ts u g g e s t e ds p a t i a ll e a r n i n g - m e m o r ya b i l i t yw a sp e r s i s t e n t l y + i m p a i r e db yc h r o n i c s t r e s s ，n o to n l yd u r i n gs t r e s sp e r i o d sb u ta l s od u r i n gr e c o v e r y - p e r i o d sa n d b d n fp l a y e da ni m p o r t a n tr o l e 。 k e y w o r d s ：c h r o n i c s t r e s s ；s p a t i a ll e a r n i n g m e m o r y ；b d n f ；a g i n g ；h i p p o c a m p u s ； f r o n t a lc o r t e x i v 英文缩略词 b d n f d g g c g r h e 灏 i h c m n g f s a b e t r k b 英文缩略词 b r a i n - d e r i v e dn e u r o t r o p h i cf a c t o r d e n t a t eg y r u s g l u c o c o r t i c o i d s g l u c o c o r t i c o i dr e c e p t o r h e m a t o x y l i n - e o s i n ep i g m e n t a t i o n h y p o t h a l a m i c - p i t u i t a r y - a d r e n a la x i s i m m u n o h i s t o c h e m i c a l l o n g - t e r mp o t e n t i a t i o n n e r v eg r o w t hf a c t o r s t r e p ta v i d i n - b i o t i nc o m p l e x t y r o s i n ep r o t e i n 蛀n a s er e c e p t o rb v 脑源性孝孛经营养因子 齿状回 糖皮旗激素 糖皮质激素受体 苏木素。伊红染色 下丘藏。垂体。肾上艨辘 免疫组织化学 长时程增强 神经生长因子 链酶寨稳素一过氧忧物酶复合物 酪氨酸蛋白激酶受体b 曲阜师范大学博士硕士学位论文原刨性说明 ( 在口划“”、 本人郑重声明：此处所提交的博士圈硕士磁论文慢性应激对小鼠空 闽学习记忆功能及脑内b d n f 表达的影响，是本人在导师指导下，在曲阜 师范大学攻读博士口硕士回学位期间独立进行研究工作所取得的成果。论 文中除注霹部分外不包含他人已经发表或撰写的研究成果。对本文的研究工 作做出重要贡献的个人和集体，均已在文中已明确的方式注明。本声明的法 律结果将完全由本人承担彗 作者签名：给苌、 日期：多沁7 每莎碍彦目 曲阜师范大学博士硕士学位论文使用授权书 ( 在口划“”) 慢性应激对小鼠空间学习记忆功能及脑内b d n f 表达的影响系本人在曲 阜师范大学攻读博士圈硕士露学位期闻，在导师指导下完成的博士西硕 士母学位论文。本论文的研究成果归灼阜师范大学所有，本论文的研究内容 不得以其他单位的名义发表。本人完全了解曲阜师范大学关于保存、使用学 位论文的规定，同意学校保驾并向有关部 j 送交论文的复印件帮电子版本， 允许论文被查阅和借阅。本人授权曲阜师范大学，可以采用影印或其他复制 手段保存论文，可以公开发表论文的全部或部分内容尊 作者签名：删 丑期：如? 备占月肛目 导师签名：务够日期：弦c ，户莎b 曲阜师范大游硕士学位论淀 慢性应激对小鼠空间学习记忆功能及 脑内b d n f 表达的影响 第一部分实验研究 、慢性应激对不同月龄小鼠空间学习记忆功能的影晌 刚菁 随着竞争压力的增大，人们经常生活在各种各样的应激环境中，慢性不可预知性应激 通过影响中枢神经系统酶生理帮谈知过程麸谣影响有枫体熬生理生诧反应。应激是指极体 遇到各种有害刺激，如缺氧、创伤、手术、饥饿、疼痛、生活环境的突然改变、精神紧张 等因素时，机体所产生嚣菲特异性斑答的总和嵇l 。许多研究显示慢性应激可损害健康，孳l 发疾病，同时也可影响脑的认知功能，最终导致学习记忆能力下降。慢性应激对学习记忆 功毖豹影响已经成麓神经科学麴热点闫题之一。 本研究采用多因素慢性( 电击足底、拥挤、拥挤卡热寮j 激，1 5 天) 应激动物模型，戮 升场行为检测小鼠在新异环境中的魍发活动；采用m o r r i s 水迷富测试小鼠空间学习记忆能 力以探讨慢性应激对动耪空闻学习记忆能力的损害终用。 材料和方法 1 实验材料 1 1 实验动物 健康昆萌品系小鑫鼠2 胃龄( 体重1 8 9 - 2 0 9 ) 及董5 旁龄( 体重4 0 9 - 6 0 9 ) ，各4 8 只，雌 雄各半，由济宁医学院动物中心提供。所有小鼠分笼喂养于光照黑暗为1 2 1 2 ，室温控制 在2 3 + 1 豹环境下，适应饲养一周，毒由摄食、饮隶。每西逐只抚摸捉拿小鬣，使莫适疲 实验人员的操作。 1 2 实验仪器 自制敞箱装嚣：由不透明材料制成，底面为5 0 c m x 5 0 c m 的正方形并被等分为2 5 个等 边方格，周固有离4 0 厘米的墙壁。敞箱上方放置一个6 0 w 的灯光，距离敞箱项6 0 c m 。 m o r r i s 水迷煮：成都泰盟科技有限公司产晶 电热吹风机：m d 6 6 0 3 ，中山市南头镇德嘉电器厂 电子释：d s ，8 8 ，武汉蠡动健搜表厂 2 实验方法 2 。1 动物分组 ， 2 月龄和1 5 月龄小鼠分别随机分为对照组2 4 只和慢性应激组2 4 只，雌雄备半。应激 缝寒螽随机在应激组动物中取一半( 雌雄各半) ，对照组动物中取一半( 雌雄褥半) 进行 曲率师范大学硕士学位论文 行为学实验；其余动物正常链养一髑后进幸亍行为学实验。 2 2 慢性应激动物模型的建立 本实验采蔫多因素兹慢性应激动物模型。应激组小鬣共接受1 5 天不同的应激，采用 兰种应激方式：电击足底( 电压3 0 v ，每隔1 分钟刺激一次，每次持续l o 秒，热1 5 次) 、 拥揍( 1 小时，天) 、拥挤热刺激( 1 小对，天，3 2 0 c ) 。具体过程：第l ，4 ，5 ，8 ，1 4 天拥 挤应激；第2 ，6 ，9 ，1 2 ，1 5 天电击足底应激；第3 ，7 ，l o ，l l ，1 3 天拥挤+ 热刺激应激。 对照组不接受实验应激原，以同样的条件饲券。 2 ，3 小鼠行为学实验 在应激前、慢性应激盾即刻及停止应激后一周测定小鼠的体重。 2 3 。1 开场( o p e nf i e l d ) 行毙测定 实验时，先将小鼠置于敞箱中央格内，记录5 分钟内小鼠的行为。观察指标包括： 蕤行格数西爪进入方格方可计数) ；直立次数( 以小鼠两蓠瓜腾空或攀鬻童墙壁， 离开底面l e m 为标志，无论小鼠站立多长时间直至放下双足为1 次活动) ；修饰次数； 粪便粒数。彻底清洁敞箱后再进行下一只小鼠的观察，实验期间保持安静。行为评定 每次由相同的三个人分别戏察。开场行力测试分别在慢性应激后邵刻及停止应激露一周进 行。 2 3 2m o r r i s 承迷富学器记忆麓力检溯 m o r r i s 水迷寓用来检测动物的空间学习记忆功能。它是一个直径为8 0 c m ，深为3 0 c m 觞鋈形池子，匿形池熊周嗣挂有自色蠢帘。在圆形渣予懿正上方孛央位置有一摄像头捕捉 动物的运动轨迹，并把捕捉到的所有相关信息传至计算机保存。水迷宫被均等的分为4 个 象限，将一个透暌的有规玻璃平台潮定置予水迷宫审第一象限的中央( 目标象限) ，保证 平台低于水面下约l 厘米，水中加入奶粉，以防止动物看见平台位置，水温保持在2 5 4 - 1 。 在水池第三象限周边壁上做明显标记物，与第一象限平台连线为圆形水池一直径。面对溺 水的危险，实验动物需要学会在最短对闻内找到平台的位置并爬上平台以逃避在水中长时 间的游泳。整个实验过程分为定位航行试验和空间搜索试验两部分。 定位靛行试验( p l a c en a v i g a t i o n ) ，用予测量动物在求迷宫中嚣学习帮记杞熊力。实验 历时2 天。训练动物时，每次随机从4 个象限选择一个，将小鼠面向池壁轻轻放入水中。 每哭小鼠每天接受调练8 次，分两个谤l 练周期( 上午和下午) ，每个训练周裳4 次，每次 训练的时间上限为1 2 0 秒，小鼠在此时间范围内找到平台就即刻停止该次训练。如果训练 小鼠在1 2 0 秒杰找不到乎念，就轻轻地把它弓l 上平台，在平台上停留2 0 秒后辩进行下一 次训练。每次训练之闯和4 次诫练完成后，迅速将小鼠洗净擦干，焉欧风机吹干，以防小 鼠低体温。记录小鼠从不闷象限入水至发现并爬上平台的时间( 以秒计) 为逃避潜伏期 ( e s c a p el a t e n c y ) ，每4 次麓均值作为一次平瓣逃避潜伏麓，共得港4 个平均逃避潜伏期，作 为空间学习能力。 空闻搜索试验( s p a t i a lp r o b et e s t ) ，臻予测量动物对平台( 整标象限) 空闻位置记忆靛 2 曲卑师范大学硕士学位论文 能力，即记忆保持能力。郎在第3 天撤除平台，扶第三象限入水点将小鬣放入水中，记录 1 2 0 秒内小鼠在四个象限的游泳时间。 在每次谖练结束后清洗泳路侧壁以消除唉觉提示。水迷富测试在慢性应激器群刻及箨 止应激后一周进行。 2 。4 统计学处理 所有数据均采用统计软件s p s s l l 5 处理，以平均数4 - 标准误( m e a n 圭s e m ) 表示。缀 问比较用非配对t 检验，水迷宫定位航行试验中的逃避潜伏期采用重复测量的方差分析 ( o n e - w a yr e p e a t e d - m e a s u r e sa n o v a ) ；空间搜索试验孛的各象限游泳时闻采焉单因素方差分 析( o n e w a y a n o v a ) ，并以l s d 法进行组间的两两比较。p o 0 5 ，表1 ) ，应激1 5 天后，青 年组两组小鼠体重都呈增长趋势，僚是与对照缓小鼠襁毙，应激组小鼠的体重增长缓慢， 并且差异具有显著性( 仁2 8 2 6 ，p 0 0 1 ) ；老年应激组小鼠体重没有增加反而减少，且与对 照组小鼠相比有显著性差异( t = - 2 。8 4 5 ，p 0 0 1 ) 。停止应激詹一周，这种差异仍然存在 ( t - - - 4 4 0 8 ，p 0 0 1 ；t = 2 。5 4 0 ，p 0 。0 5 ) 。青年及老年应激组小鼠分别在应激后一周与应激后 即刻相比，体重没有显著性差异( p o 0 5 ) 。 寝1 慢性成激对不网月龄小鼠体重的影响 t a b 。lw e i g h to fd i f f e r e n tg r o u pm i c ea f t e rs t r e s sa n d7 d a y sa f t e rs t r e s s p 0 0 5 ，”p 0 0 1 ，与对照组比较( 爿扛配对t 检验) 。 2 慢性应激后即刻及停止应激后一周不同月龄小鼠的开场行为 羟过重5 天慢性应激瑟，青年应激组小鬣与对照组夸鼠相毙，爬霉亍格数甓显减少 ( t = - 2 5 5 0 ，p 0 0 5 ，表2 ) ，停止应激后一周，差异有所缩小，但仍具有统计学意义( 仁2 3 0 7 ， p 0 0 5 ) 。应激1 5 天后，瘦激组小飘的直立次数较对照组骥显减少( 鳓。5 8 7 ，p 0 。0 1 ) ，停 止应激詹周，这种差异仍然存在( 睨3 8 7 ，p o 0 5 ) 。应激组小鼠的修饰次数与爬行格数 和直立次数表现类似，在应激1 5 天后及停止应激蜃周，应激组小鼠的修饰次数都比对 酾阜师范大学硕士学位论文 照缰显著减少( 净3 4 4 1 ，p 0 。0 5 ) 。应激缀小鬣在应激后瘸与应激惹即刻各项杼为学指标槿毙都没有统计 学意义。 袭2 慢性应激后即刻及停止应激后一周青年组小鼠的开场行为 t a b 2t h eo p e n f i e l dt e s tr e s u l t so fy o u n gg r o u pm i c ea f t e rs t r e s sa n d7 d a y sa f t e rs t r e s s p 0 。0 5 ，”p 0 。0 1 ；与对照缒比较( 非配对t 检验) ：n = 8 1 2 。 老年组小鼠经过1 5 天成激之后，各行为学指标表现出与脊年应激组小鼠相似的变化 趋势( 表3 ) 。慢性应澈矗即刻，应激组小鼠静艇季亍格数、壹立次数和修饰凌数较对照组小 鼠明显减少( 仁9 9 6 0 ，p 0 0 1 ；t = 2 2 6 7 ，p 0 0 5 ；t = 4 3 8 6 ，p 0 0 1 ) ：停止应激麝一周，应 激缰夺鼠的爬行格数帮骖饰次数有所增加，僵与对照组小鼠相魄仍套显著性差异( 院。4 1 7 ， p 0 。0 5 ) 。应激组小鼠豹各项行为学指标在应激后一周与应激后即刻相比 均没有显著性差异。 表3 慢性应激嚣霹裁及等止藏激后一瘸老年组零鬣麓开场行为 t a b 3t h e o p e n - f i e l dt e s tr e s u l t so fa g e dg r o u pm i c ea f t e rs t r e s sa n d7 d a y sa f t e rs t r e s s 。p 0 0 5 ，p o o l ：与对照组比较( 非配对t 检验) ：n = 8 。1 2 。 4 曲阜师范大学硕士学位论文 老年组动物与青年组动物相比( 图1 ) 。结果表明，老年对照组小鼠的修饰次数与青年 对照组相比，在应激后即刻及应激后一周差异都具有统计学意义( f 5 5 3 0 ，p 0 0 1 ；t = - 70 5 8 ， p 0 0 1 ) ，而其它三项行为学指标都没有显著性差异。应激1 5 天后，与青年应澈组小鼠相 比，老年应激组小鼠爬行格数和修饰次数明显减少( 圈2 5 8 ，p 0 0 5 ；两6 3 1 ，p 0 0 1 ) ， 应激后周，老年应檄组小鼠的修饰次数仍然有显著性差异( t - - 6 5 4 1 ，p 0 0 1 ) 。 习量izd麓young鳓”ntrogroup：墓鍪鳍 i 雌| ：i 5 d a ”“s 自 图1 慢性应澈后叩刻及停止应激后一周青年组小鼠与老年组小鼠开场行为比较 f i 1 1 1 e o p e n - f i e l d t e s tr e s u l 8 0 f y o t m g a n da g e dg r o u p m i c e a t k r s l x e s s a n d7 d a f i e rs t r e s s a ，s q u a r ec i n gn u m b e r s i n d i f f e r l m tg r o u p m i c e ；b ，啦n u m b e r s i nd i f f e m m g r o u p m i c e ；c ，g r o o m i n g n u m b e r s hd i f f c r e m d o u p m i c e ；nd e f e c a t i o nn u r a b e r s i n d i f f e r e n t g r o u p m i c ed a t a w e r l g e x p r e s s e d a s m m s e mt r - , 8 1 2 ”p o0 1 ，v s t h ey o u n ge o n t m lg r o u p ( u n p a i r e d - t t e s t ) ；p 00 5 ，i p 0 1 ，v s t h ey o u n gs t r e s s g r o u p ( u n p 出- e d - t t e s t ) 曲牵师范大学硕士学位论文 3 慢性应激后霹蠹l 及停止应激后一周不同舞龄小鬣水迷宫翡学习记忆麓力 3 。1 慢性成激对不同月龄小鼠定位航行学习的影响 经过两天定位航行试验，青年对照组帮应激蕴小鬣戆逃避潜绩翥均迅速下降( 表毒) ； 重复测量的方差分析显示，青年对照组和应激组小鼠在应激后即刻( f ( 1 ，2 2 ) = 1 5 1 9 6 ，p o 0 1 ) 和停止应激后一周( 最l 趣产5 4 7 9 ，p 0 0 5 ) 的逃避潜伏期差异有显著性意义。组阀两两比 较显示，在应激后即刻，与对照组小鼠眈较，青年应激组小鼠在第2 ，3 和4 个训练周期 的逃避潜伏期差异有显著性意义( p o 0 1 ) ；停止应激后一周，在第4 个训练周期，与对照 组比较，应激组小鬣酌逃避潜茯鬻臻显增热( p t a b at h ee s c a p el a t e n c yo f y o u n gg r o u pm i c ea f t e rs t r e s sa n d7 d a y sa f t e rs t r e w ( s e e ) ， 套邻。0 5 ，”p 0 0 1 ：与对照组比较傅套l 。v a ，l s d - t 检验) ；n = 8 1 2 。 由表5 可戳看出，老年对照缀和应激蕴小鼠酶逃避港获期在两天的训练孛与青年组相 似，均迅速下降；重复测量的方差分析显示，老年对照组和应激组小鼠在戚激后即刻 ( 壤l | 2 2 尸6 。6 2 9 ，p 0 + 0 5 ) 和停壹瘟激后一周( 壤l ，1 鸯- - 5 。0 2 8 ，p 0 。0 5 ) 的遴避潜伏期差鼻煮 表5 慢牲应激斌即刻及停止应激露一髑老年组小鼠的逃避潜锬期( 秒) t a b 5t h e e s c a p el a t e n c yo f a g e dg r o u pm i c ea f t e rs t r e s sa n d7 d a y sa f t e rs t r e s s ( s e e ) p o 。0 5 ，”p o 。o l ：与对照纽比较( a n o v a ，l s d t 检验) ；n = 8 1 2 。 6 曲阜师范大学硕学位论文 显著性意义。组间两两比较显示，在应激后即刻，老年应檄组小鼠在第2 ，3 和4 个训练 周期时找到平台的潜伏期明显长r 对照组的潜伏期( p o0 5 ) ；在停止应激后一周，第2 ， 3 和4 个训练周期，与对照组比较，应激组小鼠的逃避潜伏期明显增加( p o0 5 ) 。应激组 小鼠的逃避潜伏期在应激后一周与应激后即刻相比均没有显著性差异。 老年组动物与青年组动物相比( 图2 ) 。可咀看出，在四个训练周期中，与青年对照组 小鼠相比，老年对照组小鼠寻找平台的逃避潜伏期较长，但是没有显著性差异。老年应激 组小鼠在应激后即刻的第2 个训练周期的逃避潜伏期明显长于青年应激组小鼠( t = - 27 5 7 ， p 00 5 ) ，而在其它训练周期中，两组之间比较没有统计学意义。 槲i ；黼 a rs e e s s 7 d j a y sa n e rs t r e s sa e rs tr e s s7 d r ersc r e s 吲2 懂性应撒后即刻及停卜应镦后一周青年组小鼠与老年组小鼠逃避潜伏期( 秒) f 螗2 t h e 髂c a p a l a