（法医学专业论文）氟乙酰胺代谢产物检测新方法及家兔体内分布研究.pdf

山西医科大学硕士学位论文 氟乙酰胺代谢产物检测新方法及家兔体内分布研究 中文摘要 目的 1 通过氟乙酰胺体内代谢产物氟离子电化学芯片检测方法的研究，建立一种新的快 速的检测手段。 2 开发便携、简便的氟乙酰胺代谢产物氟离子的芯片检测技术并完成便携式氟离子 快速检测仪。 3 建立氟乙酸和氟柠檬酸的l c m s m s 定性、定量方法。 4 建立家兔口服氟乙酰胺中毒动物模型。 5 研究氟乙酰胺的代谢规律及日常案件中常用检材的前处理方法及分布，为氟乙酰 胺中毒案件的检材采取、检测、结果分析、死因判断及法医学鉴定提供科学依据。 6 研究氟乙酸和氟柠檬酸在中毒家兔体内分布情况 方法 1 动物模型 将1 2 只家兔随机分为2 组，每组6 只。第一组为空白对照组，常规饲料喂养，第二 组为染毒组；经口灌服致死剂量( 1 0 0 m g l ( g 体重) 的氟乙酰胺 2 检材采取及处理 中毒组在经口服药物后自然死亡，立即解剖取血、尿、心、肝、肾、脑等常用检材， 空白组耳缘静脉空气栓塞致死，取同样检材，作为对照。 3 f 前处理方法的研究：分析了不同沉淀蛋白、不同p h 值条件对氟离子提取回收率 的影响，优化了氟离子提取方法。 4 氟乙酸和氟柠檬酸l c m s m s 检测方法条件优化的研究：采用保留时间( r t ) 和 多反应监测( i 、保m ) 方式来对常用检材中氟乙酸和氟柠檬酸进行定性定量分析。 5 氟乙酸和氟柠檬酸的提取方法 样品制备：生物组织检材样本( 如肝、肾等) 用匀浆机打碎混匀。取1 0 r n l 血液或1 o g 组织检材样品，加入3 0 i l l l 水丙酮( 1 ：4 ，v ，v ) ，超声8 分钟，在4 0 0 0 r 曲的离心机上 离心5 分钟除去蛋白质，收集提取液，重复上述提取过程3 次，合并3 次提取液后，用n a o h 调节p h 8 o 左右，4 0 条件下用氮气吹至2 0 “左右水溶液，用3 0 珊己烷提取杂质，离 心分离后，弃去己烷，用l i n o l m l 的盐酸调节p h 小于2 0 。用4 0 m l 乙酸乙酯剧烈震荡5 分钟，离心分离，重复提取4 次，合并上清液，加入2 0 0 此1 0 的二乙醇胺丙酮液碱化， 在5 0 条件下氮气吹干，甲醇定容，过膜待检。 山西医科大学硕士学位论文 6 l c m s m s 方法检测：采用保留时间和选择2 3 对离子定性，以1 对响应值相对较 高的特征离子的峰面积与其溶液浓度做标准曲线，用外标法进行定量。 7 统计学方法：实验数据结果以均数士标准差( x s ) 表示，用s p s s l l 5 统计软件 对各检材中氟乙酸和氟柠檬酸的含量进行方差分析。 结果 1 氟离子选择性芯片在1 0 0 1 0 击i n o l l 范围内呈线性响应，线性相关系数为o 9 9 9 4 。 其甲均斜率为5 8 1 4 ，接近理论斜率5 9 3 5 ；氟离子选择性芯片的检测下限为5 l o0 n l o l l ； 平均回收率为7 6 6 2 ( r s d = 1 2 1 ) 。 2 在1 0 。3 1 0 。6 i n o l ln a f 标准溶液中，氟离子选择性芯片响应时间 2 l 血在1 0 石 5 1 0 7 i n o l ln a f 标准溶液中，氟离子选择性芯片响应时间 5i 血。 3 用同一芯片在室温下重复连续测定1 0 。3 和1 0 。5 m o l l 标准溶液5 次，r s d 分别小 于0 4 3 和o 9 0 ；用同一芯片在室温下保存5 天，每天测定1 0 。3 和1 0 。5m o l l 标准溶液1 次，r s d 分别小于o 5 4 和1 2 3 。 4 芯片p h 适用范围p h 在5 0 6 o 是氟离子敏感膜使用的最佳p h 范围。 5 酶一o h 一大约为1 0 ，也就是说芯片对f 一的响应比对o h 一的响应灵敏1 0 倍；k f 一，c l 一 大约为1 0 0 0 ，k f 一。b r 和酶一i 一大约为1 3 0 0 。 6 给药组家兔在给药后l 1 5 小时出现强直性痉挛，阵发性抽搐症状，2 小时内死 亡。染毒组家兔血中氟离子含量较对照组高5 6 倍；肝、肾、脑组织中氟离子含量较空 白组增高2 4 倍，各指标增高显著( p 肾 心 胃内容( 浓度：0 ) ：氟乙 酸的浓度大小依次是：胃内容 肾 肝 血 心。 结论 1 本课题研究建立的氟乙酰胺代谢产物氟离子检测芯片结合氟离子选择电极对氟离 子的高选择性、灵敏性和电位分析技术的简单，便捷等特点，本技术将大大缩短对氟乙酰 胺检测的时间，降低检测成本，使检测设备便于携带，实现对氟乙酰胺的现场测定，为取 i i 山西医科大掌硕士学位论文 缔剧毒鼠药的销售使用，预防鼠药群体染毒事件的发生提供依据。将采样至实验室的检测 路线改为实验室移至现场的服务路线，将为尽快检测出染毒物质、挽救人民生命，为抢救 病人赢得时间、节省大量人力物力提供简便、实用的方法。该方法特别适合在基层推广， 使大量刑事染毒案件的取证检验工作可以在基层完成检测。 2 氟离子检测芯片与其他常见的f _ 测定方法如离子色谱法、分光光度法等比较，此检 测芯片价格低，操作简便，抗干扰能力强，能够快速检测样品中f - 含量，可以广泛应用于 环境样品、体液、食品中f 。含量的检测，是初筛实际样品中f 。含量的首选方法。氟离子芯 片直接给出样品氟离子浓度，响应速度快，较易实现连续测定与自动监控，有利于发展成 为日常检测氟含量的一种方法。 3 本文建立了生物检材中氟乙酸和氟柠檬酸h p l c m s m s 检测方法，回收率高，灵 敏度高，重现性好，方法准确、可靠，操作简便，样品不需要衍生化处理，色谱柱寿命长， 适用于生物检材中氟乙酰胺代谢产物的快速枪测。 4 氟乙酰胺中毒的代谢产物氟乙酸和氟柠檬酸广泛存在家兔体内，血液中氟柠檬酸 含量最高，氟乙酸胃内容中含量最高。 关键词氟乙酰胺，氟乙酸，氟柠檬酸，芯片，l c m s m s ，分布 i 山西医科大学硕士学位论文 t h es t u d yo ft h en e wd e t e c t i n gm e t h o do ft h e m e t o b l i z i t o na n do ff l u o r o a c e t a m i d ea n dt h e d i s t l u b u t i o ni nt i s s u e a b s t r a c t o b j e c t i v e s 1 t oe s t a b l i s han e wa p p l yt 00 n - s i t et e s t i n gm e t h o df o rd e t e 咖i n i l l g0 ff 。t l 】r o u 曲t h e 出p d e t e c t i o nm e t h o do f t h ee l e c t r o c h e m i c a ls t u d i e s 2 d e v e l o p m e n to fp o r t a b l e ，e a s yc h i p st e c h n o l o g yf 研d e t e c t i n gf a i l dc o m p l e t ep o r t a b l ef f 奴 d e t e c t o r 3 t oe s t a b l i s ham e t h o do fl l i g h - p e r f o el i q u i d c h r o m a t o g r 印h y - t a l l d e mn 粥s s p e c t r o i n e t r ) r ( l c m s i s ) f o rd e t e m 洫a t i o no f n u o r o a c e t a t ea c i da n dn u o r i l i ec i t r a t e 4 t be s t a b l i s ham o d e lo fp o i s 伽e dr a b b i tb yo r a ls o d i 啪f l u o r o a c e t a t e 5 r e s e a r c ht h el a wo fm e t o 加1 i s m0 fn u o r o a c e t a m i d ea n d0 t h e rr e 百c i d e si n c l 础n gf l u o r i ma n dt h e 肿a t m e n to fs a m p l e s 锄dd i s t r i b m i o ni nr o u t i n ec 舔e s ，t op r o v i d es c i e n t i f i cb a s i sf 0 rf i ci d e i l t i f i c a t i o n f o rs a m p l e st a k e i l ，t e s t i n 吕r e s u l ta j l a l y s i s ，d e t e r m i n et h ec a u o fd e a t h 锄dp r o v i d es c i e n t i f i cb 嬲i s 衙 f o r e n s i ci d e m i f i c a t i o l l 6 r e s e a r c ht h ep o i s 伽e dr a b b i t si nv i v od i s t r i b m i o n0 fn u o 眦e t a t ea u c i da n df l u o r i d ec i t r a t e m e t h o d s 1 a n i m a lm 0 d e l o fl2r a b b i t sw e r er a i l d o i i l l yd i v i d e dn ot 、o g r o u p so fs i ) ( t h ef i r s tg r o u p ( s i ) 【r a b b i t ) i s b l a n kc o n t r o lg r o u p ，n o 唧a ld i e t 诧d ；t h es e c o n dg r o u p ( s i xr a l b b i t ) t o o k1 e t l l a ld o s eo fo r a l g a v a g e ( 1o 0 n l g l 【gb o d yw e i g h t ) o f n 啪c e t a i i l i d e 2 s a m p l e st a k e na 1 1 dt r e a t n l e n t t h ep o i s o n e d 黟o u p 咖l l yd i e db yo r a l 腓d i c a t i o f i s ，t l 豫ni m m e d i a t e l ya m o p s yb 1 0 0 d ，试n e ，h e a 鸭 l i v e r ，k i d n e y ，b r a i n 卸d0 t h e rc o m m o n l ys e i z e dm a t e r i a l ，t l l ec o n 打o l 伊o u pd i e d 仔o ma i re m b o l i s me a rv e i 玛 t a j ( et h es a m er e v i e wi n a t e r i a l s u s e da sc o r l 仃o l 3 1 1 1 er e s e a r c ho f p r e 仃e a t m e mm e t h o d so f t h ef l u o r i d ei o n ：锄a 舱l y s i so f c i i 仃e r e mp r o t e i n 阳i p i 诅t i o 凡 p hv a l si nd i 恐r e mc o n d i t i o i l s 硼dd i 腩r e n tt e m p e r a n j r ec o n d i t i o i l s0 nt h ee f f 跚so ff l u 谢d ei o ne x t r a c t i o n r e c o v e i mo p t i m i z a t i o no fm en u o r i d ei o ne x 仃a 烈i o n 4 t oo p t i m 妇t h em e t h o d so fl c m s m s 南rd e t e m i i l 啦n u o r o a c 咖ea c i d 锄dn u o m e c i t r a t e ：u s eo fr e t e m i o nt i i n e ( r t ) a n dr 印h i p l er e a c t i o nm o n i t o r i n g ( m r m ) 、 ，a su s e d 南r q u a l i t a t i v ea n dq u a r i t i t a t i v ea l l a l y s i so fn u 咖e t a 伦a c i d 锄df l u o r i d ec i t r a t e 山西医科大学硕士学位论文 5 t h ee ) 缸a c t i o ni n e t h o do ft h e 瑚【e t a b o l i t e so fn u o r c e 庀a m i d ea r l do t h e rr e 西c i d e si n c l u d i n g n u o r i n e b i o l o g i c a lt i s s u es a m p l e s ( s u c ha st h el i v e r ，k i d n e y ，e t c ) 砒ht h eh o m o g e n 泌rr n i x 啦 r n a c h i n eb r o k e n 1 抵l 血b l o o do r lgo 玛a i l 咖i o nm a t e r i a ls 锄p l e ss e 妇db ya d d 啦3 “o f w a t e r a c e t o n e ( 1 ：4 ，v m ，p l t r a s o u n d8m i i l u t e s ，c e n t r i 舢g e5m e s a t4 0 0 0 r r n mt or e r n o v e p r o t e i i la n de ) ( t r a c tt h ec o l l e c t i o 珥r e p e a tt h ee 】( t r a c t i o np m c e s s3 t i i n e s a f 【e rt h ec o m b i i l e d e x t r a c tt 1 1 r e et h e s ，a d d2 0 0 o p l lo o fd i e t h a n o l 撇i i l ea l l ( a l i 2 斌i o nt h e nu n d e rt h ec o n d i t i o l l so f a i rd r y i r 培a t7 0 ，m e t h a n o lf e dv o l u l e ，o v e rm e m b r a n ef o ri i l s p e c t i 0 i l 6 l c m s m sd e t e c t i o n ：l l s et h er e t e n t i o nt i i n ea n dc h o i c eo f2 - 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s e l e c t i v ec 郇 r e s p o l l s et i n l e 5m i i l 3 u s i n gt h es 锄ec h i pa tr o o mt e m p e r a t u r et oc o n t i n u o u sd e t e m l i i l eo f1 0 3 a n dt h e1o - 5 n l o l ls t a n d a r ds o l u t i o n6 v et i i l l e s ，r s d 、e 佗l e s st h a n0 4 3 锄do 9 0 ；u s i i l gt h es 锄ec h i pa t r o o mt e m p e r a t u r ed a y st od e t e n l l i i l eo fl o - 3 觚d1 0 5m o l ls t 锄d a r ds 0 1 u t i o no n c e 南r5d a y s ， r s d l e s st 1 1 a nt h e0 5 4a n d1 2 3 ，r e s p e c t i v e l y 4 c l 卸p hs c o p e ：t h en u o r i d ei o n - s e n s i t i v em e m h m e i st h eo p t i i n u mp hr a l l g ea tp h5 0 6 o 5 珞- ，o h a b o u ti s1 0 ，w l 血hm e a l l s t h cr e s p o n s eo f c h i pf o rf i s1 0t i i n e st h a nt h eo h ， k f ，c 1 i sa b o u t1 0 0 0 ，k f 。b n dk f ，i 灿u t1 3 0 0 v 山西医科大学硕士学位论文 6 对b b i ti i lt h e 骶a t i n e n tg r o u p 印p e a r s1 1 1 ：m d a t o 巧s p a s 弛p a r o x y s n l a lc o n w l s i o n s 舯p t o 蛐a f 【e ra d l i n i s t r a t i o n1 1 5h o u r s 锄dd i e dw i t h i i l2h o u r s r a b b i tb l o o dp o i s o 曲玛 f l u o r i d ei o nc o i l c e m r a t i o n1 1 i g h e r5t 06t i i l l e st h a l lt h ec o n t r o l 毋- o u p ；l i v e r ，k i d n e y 觚db r a i l l t i s s u en u o 耐ei o nc o n t e mt h a i lt h ec o n t r o lg r o u pi i l c r e a s e d2t 04t i i i l e s ，e a c hi n d e xi l l c r e a s e d s 远i l i f i c a n t l y ( p h e a r t s t o i i l a c hc o n t e n t s ( c o n c e n t r a t i o n = 0 ) ；t h es e q u e n c eo f n u o r o a c e t i ca c i dc o m e n ti nr a b b “i sa sf i o l l o w ：s t o m a c hc o m e n t k i d n e 、l i v e f b l o o i i h e a r t c o n c i u s i o n s 1 t h es t u d ys u b j e c t so ft h ec h i p 向rt e s t i n gf l u o r o a c e t a r n i d ea 1 1 do t h e rr e g i c i d e s 妣l u d i i 培 f l u o 血ew i t hn u o r i d ei o ns e l e c t i v ee l e c t r o d e 内rn u o r i d ei o n 血l l i g hs e l e c t i v i t y ，s e n s i t i v i t y 锄d p o t e n t i a la m l y s i so fs i i i l p l e ，c o i e 1 1 i e n ta i l do t h e rc h a r a c t e r i s t i c s ，t h i st e c h n o l o g yw i l l 黟e a t l y s h o r r t e nt h et e s t m gt i i 】1 e ，r e d u c et e s t i i l gc o s t s ，觚dp o r t a b l et e s t i i 坞e q u i p m e n ta i l dr e a l 诬 n u o r o a c e t a n l i d et o x i i l ss u c ha so n s i t ed e t e 砌i 1 1 a l i o no ff l u o r i d e i l lo r d e rt ob a nt h es a l eo f t h e u s eo fl l i g m yt o x i cr a tp o i s o 玛r a tp o i s o np r e v e n t i o ng r o u p s ，p r o v i d et h eb a s i s 衙t h eo c c u r r e n c e o f p o i s o r l i n g t h es 锄p l et ot h eh b o r a t o 巧t e s t i i l gl a _ b o r a t o r i e st om o v e t h er o a di n t oaf i e l d s e i c el i r l e ，w i l ld e t e c tt o x i cs u b s t a n c e sa ss o o na sp o s s i b l et os a v ep e o p l e sl i v e s ，i i lo r d e rt 0 s a v et h ep a t i e n tt 0g a i l lt i n l e ，s a v ea1 0 to f 瑚n p o 、耽ra n dm a t e r i a lr e s o u r c e st 0p r o v i d es i i l l p l e ， p r a c t i c a lm e t h o d t h i sm e t h o di sp a r t i c p l a r l ys u i t a b l ef o rt h ep r o m o t i o na tt h e 掣a s s r o o t sl e v e l ， s ot h a tal a r g e 肌m b e ro f c a s e so f c r 沛i i l a lp o i s o i l i n go f e v i d e n c ei i l s p e c t i o n 、o r kc a i lb e c o m p l e t e da tt h eg r a s s r o o t sl e v e ld e t e c t i o n 2 f l u o r i d ei o nd e t e c t i o nc l l i pc o m p a r e dw i t ho t h e rc o m m o nm e a s u r e m e mm e t h o d s ，s u c h 嬲 i o nc l l r o m a t o 伊印h xs p e c t r o p h o t o m e t r y ，t h et e s tc 1 1 i pi sl o w p r i c e ，e a s yt oo p e r a 士e ， a n t i 协t e r 龟r e n c ea b i l i t ya n dc a nb eq u i c k l yd e t e c tf - c o m e n ti nt h es 锄p l e s ，s oi tc 锄b ew i d e l y u s e di i le n v i r o n m e n t a ls a n l p l e s ，b o d yf l u i d s ，如o dc o n t e n to ff - ，i ti st h ep r e 佬r r e dm e t h o df o r s c r e e i l i n go ff c o n t e n ti i lr e a ls a m p l e s t e s ti sas c r e e n i i l go ff - c o n t e mi 1 1t b ea c t u a ls 锄p l e st h e p r e f e r r e dm e t h o d f l u o r i d ei o nc m ps a l p l e sa r eg i v e nd i r e c t l yt ot h ec o i l c e n t r a t i o no fn u o r i d e v i 山西医科大学硕士学位论文 i o i l ，f a s tr e s p o i l s e ，e a s i e rt 0a c h i e v ec o m 洒u o u sm e a s u r e m e n t 觚da m o m a t i cc o n t r o l i sc o n d u c i v e t 0t h ed e v e l o p m e mo far o u t i i l ed e t e c t i o no fn u o r i d ec o m e n ti l law a y t h ec l l i pc a nd i r e c t l yg i v e t h ec o n c e m r a t i o no fn u o m ei o 玛缸tr e s p o i l s e ，e a s i e rt oa c h i e v ec o m i l l u o u sm e a s w e r n e n ta n d a u t o m a t i cc o n t r o ls oi t _ i sc o n d u c i v et ot h ed e v e l o p m e mo far o u t i i l ed e t e c t i o no fn u o r i d e c o m e i i ti i l aw a y 3 。i l l i ss t u d yd e v e l o p e dt h eh p l c m s m si n e t h o do fd e t e c t i i l gt h em a i l lt o x i cm e t a b o l i t e o f f l u o r i i l e c o m a m i i l gf l u o r o a c e t i ca c i da n dn u o r i d ec i t r a 土ei 1 1b i o l o g i c a ls 锄p l e s ni sl l i g h r e c o v e 巧r a t e ，h 远hs e n s i t i v i t y ，g o o dr e p r o d u c i b i l i t ya n d t h em e t h o di sa c c u r a t e ，r e l i a b l e ，e a s yt o o p e r a t e ，t h es a r l l p l ed o e sn o tr e q u i r ed e r i v 习l t i v et r e a t m e m ，c o l u i n nl o i 塔l i f e ，s u “a b l e 向r b i o l o g i c a ls a n l p l e ss u c h 邪f l u o r i i l e - c o m a i n i i l gf l u o r o a c e t a i l l i d er 印i dd e t e c t i o no ft o x i c m e t a b 0 1 i t e s 4 f l u o r o a c e t i ca c i da i l df l u o r i d ec i t r a t ei sg e n e r a l l yd i s t r i b u t e di 1 1b l o o da n dt i s s u e so f r a 曲b i t t h ec o n t e n to fn u o m ec i t r a t ea r e1 1 i g h e s ti i lb l o o d ；t h ec o n c e n t r a t i o i l so ff l u o r o a c e t i ca c i d a r el l i g h e s ti l ls t o m a c hc o n t e m k e y w o r d s f l u o r o a c 渤m i d e ，f l u o r o a c e 住他a c i d ，f l u o r i d ec i t r a t e ， c h i p ，l c - m s m s ，d i s t r i b u t i o n v h 学位论文独创性声明 本人常红发声明，所呈交的学位论文系在导师张大明指导下本人独立完成的研究成果。 文中任何引用他人的成果，均已做出明确标注或得到许可。论文内容未包含法律意义上已 属于他人的任何形式的研究成果，也不包含本人已用于其他学位申请的论文或成果。与我 一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。 本文如违反上述声明，愿意承担以下责任和后果： 1 、交回学校授予的学位证书； 2 、学校可在相关媒体上对作者本人的行为进行通报； 3 、本文按照学校规定的方式，对因不当取得学位给学校造成的名誉损害，进行公开道 歉。 4 、本人负责因论文成果不实产生的法律纠纷。 论文作者签名： 学位论文版权使用授权书 本人完全了解山西医科大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留或向国家 有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅；本人授权山西医科 大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印 或其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。 本人离校后发表或使用学位论文或与该论文直接相关的学术论文或成果时，署名单位 仍然为山西医科大学。 ( 保密论文在解密后应遵守此规定) 论文作者签名：醢 指导教师签名：彳出窿4 等一 0 7 日期：塑年二j 二膛日 广、 日期：盖立z 巫年月三2 日 山西医科大学硪士学位论文 刖吾 氟乙酰胺和氟乙酸钠作为杀鼠剂具有毒性强、作用快、合成工艺简单、使用方便、价 格低廉且无色无味等特点【2 7 9 l ，因此自研制出以后，得到了普遍使用。8 0 年代末，氟乙酰 胺和氟乙酸钠几乎取代了以往的杀鼠药( 磷化锌) 成为最广泛使用的高效杀鼠药。但是氟乙 酰胺和氟乙酸钠毒性大，进入体内代谢成氟乙酸，干扰体内正常代谢，造成神经系统受损 而引发死亡特别是其具有二次染毒的特点，毒性大，作用快而被用于自杀、投毒。由于 当前鼠药市场管理混乱，违禁鼠药充斥市场，造成投毒、自杀和误食染毒的事故屡有发生， 对人民的生命和财产造成威胁。因此剧毒鼠药染毒案明显上升，2 0 世纪9 0 年代末已经遍 及全国各省，自1 9 9 8 年到2 0 0 0 年，浙江省鼠药染毒案件占全部毒物案件的比例已占到 5 0 以上( 2 0 0 0 年) 。此外由于毒性强，他们有外号叫“毒三代 ，因此吃染毒牲畜肉引起 的染毒也时有发生。 因此，急需开发出一种高效、灵敏、准确、简单的剧毒杀鼠药的分析确证方法，做为 迅速侦破此类案件的有力武器。目前，有报道的氟乙酰胺和氟乙酸钠的分析确证方法主要 是g c m s 方法【1 5 2 0 ，3 6 1 ，但氟乙酰胺和氟乙酸由于分子量很小( 1 0 0 ) ，且极性较大，采用 g c m s 分析方法时必须衍生化处理，样品处理费时、复杂，且样本本底干扰很大( 因为在 衍生化时，许多本底杂质也会被衍生化而造成对样品的干扰) ，而公安样品分析通常要求 时效性( 即分析速度快) ，准确性( 干扰小) ，高灵敏性。本文旨在结合氟离子选择电极对氟 离子的高选择性、灵敏性和电位分析技术的简单，便捷等特点，开发氟乙酰胺的快速初筛 方法和采用了a g i l e m 公司h p l c l l o o 和a p l 2 0 0 0 ( 美国a b 公司) m s m s 液质联用仪 大气压化学电离技术分析剧毒杀鼠药氟乙酰胺和氟乙酸钠，样品不需要衍生化处理，分析 速度快，灵敏度高，取得了良好的结果。 本研究主要目的： 1 通过氟乙酰胺的代谢产物氟离子电化学芯片检测方法的研究，建立一种新的适用 于现场的检测手段； 一 2 开发便携、简便的氟乙酰胺的代谢产物氟离子芯片检测技术并完成便携式氟乙酰 胺的快速检测仪； 3 建立氟乙酸和氟柠檬酸l c m s m s 定性方法； 4 建立兔氟乙酰胺口服染毒动物模型； 5 研究氟乙酰胺的代谢规律及日常案件中常用检材的前处理方法及分布，为氟乙酰 染毒案件的检材采取、检测、结果分析、死因判断及法医学鉴定提供科学依据。 本研究分两部分： 第一部分氟乙酰胺中毒代谢产物氟离子检测芯片的研究 第二部分氟乙酸和氟柠檬酸h p l c m s m s 检测方法的研究 第三部分氟乙酸和氟柠檬酸在家兔体内分布研究 山西医科大学硕士学位论文 第一部分氟乙酰胺中毒代谢产物氟离子检测芯片的研究 氟乙酰胺等含氟毒物是剧毒、速效杀虫剂，早在1 9 8 2 年公安部、农业部和卫生部就 联合声明禁止生产、销售和使用。但因其具有合成简单，无刺激性气味及杀鼠快速等特点， 近年来仍有大量非泫生产、销售和使用的案例【6 ，7 ，引。目前对氟乙酰胺及含氟毒物的测定主 要依赖化学法和色谱法等【2 3 2 6 1 ，该方法时间长、程序繁琐、且成本高，不利于氟乙酰胺的 实时测定，对氟乙酰胺及含氟毒物的快速测定仍没有合适的方法。特别是当发生大规模群 体染毒事件时，根本没有现场快速检验的方法，以至于贻误抢救时问，增加死亡人数。本 文旨在结合氟离子选择电极对氟离子的高选择性、灵敏性和电位分析技术的简单，便捷等 特点，开发氟乙酰胺等含氟毒物的快速检测方法，并应用于实际案例的初筛，缩短对氟乙 酰胺等含氟毒物检测的时间，实现对氟乙酰胺等含氟毒物的现场测定，该方法特别适合在 基层推广，使大量刑事染毒案件的取证检验工作可以在基层完成。 1 材料与方法 1 1 实验动物及染毒模型建立 1 1 1 实验动物 北京大学医学部动物实验中心提供健康日本家兔1 2 只，雌雄不限，体重2 o 埏2 5 埏。 1 1 2 氟乙酰胺 北京市公安局法医检验鉴定中心提供 1 1 3t i s a b 溶液配制 总