（食品科学与工程专业论文）奶制品中邻苯二甲酸酯增塑剂的检测方法研究.pdf

上海海洋大学硕士学位论文 奶制品中邻苯二甲酸酯增塑剂的检测方法研究 摘要 邻苯二甲酸酯( p h t h a l i ca c i de s t e r s ，p a e s ) 在塑料工业中常用作 增塑剂和软化剂，用来增大塑料的可塑性和韧性。目前，保存奶制品 的有效方法是进行各种包装处理，如塑料包装等。但包装材料直接与 奶制品接触，p a e s 可迁移到奶制品中成为污染源；另外，在使用p v c 软管进行机械采奶和加工过程中，也存在p a e s 对奶制品的污染问题。 因此，奶制品在生产过程、加工过程或包装环节都有可能受到p a e s 的 污染，引起奶制品的饮用安全问题。 p a e s 是一种内分泌干扰( e n d o c r i n ed i s r u p ti n g ，e d ) 物质，含有 雌激素活性成分，我国将这类物质称为“环境激素类污染物”，有些 p a e s 还具有“三致”作用。欧盟指令2 0 0 7 1 9 e c 中规定6 种p a e s 最大残 留限量值( m r l ) 为：邻苯二甲酸丁苄酯( b b p ) 3 0m g k g 、邻苯二甲 酸二丁酯( d b p ) 0 3m g k g 、 邻苯二甲酸二( 2 一乙基己基) 酯 ( d e h p ) 1 5m g k g ，邻苯二甲酸二正辛酯( d n o p ) 、邻苯二甲酸二异壬酯( d i n p ) 和邻苯二甲酸二异癸酯( d i d p ) 9m g k g 。 关于奶制品中p a e s 的分析方法在国内外还没有现行的检测标准发 布，国外文献报道不多，测定对象多为牛奶，其它奶制品如奶粉和乳 酪均未见有报道。而国内仅见一篇气相色谱法测定进口奶粉中p a e s 的 上海海洋大学硕士学位论文 报道，测定对象仅涉及d b p 和邻苯二甲酸二乙酯( d e p ) 两种物质，说明 奶制品中p a e s 的污染问题和相关的检测研究在国内还没有引起足够的 重视。因此，建立奶制品中p a e s 残留量的测定方法对于食品安全及保 护消费者的健康而言很有必要，同时为标准的建立及进出口贸易提供 技术保障。 本研究在参考国内外文献的基础上，在样品前处理和检测方法方 面加以改进。试验采用液液萃取和固相萃取的方法对提取液进行样品 浓缩、净化，满足残留检测的要求。在分析方法选择方面，采用液相 色谱和液相色谱一串联质谱，前者为筛选法，后者为确证法。 本方法重点开展欧盟指令2 0 0 7 1 9 e c 中禁止与食品接触的6 种邻 苯二甲酸酯( b b p 、d b p 、d e h p 、d n o p 、d i n p 和d i d p ) 的测定研究。样 品用甲醇、正己烷一甲基叔丁基醚( 1 ：1 ，v v ) 提取，冷冻去脂，液液 萃取和固相萃取净化后，用o d s 柱( 2 5 0 4 6 m m ，5 w n ) 分离，以乙腈一 水( 9 9 ：1 ，v v ) 为流动相，紫外波长为2 2 4 n m ，6 种组分在2 5 m i n 内完全 出峰。b b p 和d b p 在o 0 5ug m e 一8 0ug m l 、d e h p 和d n o p 在0 1ug m l 一8 0 ug m l 、d i n p 和d i d p 在0 5ug m l 一8 0l ig m l 的质量浓度范围内，峰面 积与质量浓度呈线性关系，相关系数( 丫2 ) 均大于0 9 9 8 。方法检测限： b b p0 1 5pg g 、d b p0 1ug g 、d e h p 矛i d n o p0 21 1g g 、d i n p 和d i d p 0 6ug g ；6 种p a e s 在三种不同添加水平的平均回收率为8 1 1 一9 9 0 ， 准确度高，相对标准偏差为1 5 一7 3 ，精密度较好。所建立的h p l c 方 法适用于牛奶样品的测定，所需设备相对简单，定量准确可靠，且其 l i 上海海洋大学硕士学位论文 最低检测限( l o d ) 低于欧盟m r l 值1 到3 个数量级，满足欧盟限量的检 测要求。 但对于其他奶制品( 奶粉和乳酪) 以及含酯量较高的黄油，用所 建立的h p l c 方法因受到检测限的限制，并不能完全满足添加回收试验 的指标要求。因此，试验考虑提高方法的灵敏度，采用质谱检测器， 以满足不同测定对象的分析要求。 为进一步提高灵敏度，试验采用h p l c - m s m s 方法，在样品前处理 基础上，试验做了部分改进，在前处理过程中加入各自对应的同位素 ( d i n p 和d i d p 以d n o p o 。作为内标) 作为内标，将6 种p a e s 同时过固相萃 取柱进行净化，实现了6 种组分的同时检测，大大缩短了分析时间。待 测物用a t l a n t isc 1 8 柱( 1 5 0 2 i n u n ，5 l m ) 分离，以乙腈一水( 9 5 ：5 ，v v ) 含0 0 1 的c h a c o o n h 4 为流动相，质谱部分的毛细管电压为3 0 0 0k v ，离 子化模式为e s i 正离子，碰撞能量为8 2e v 。和h p l c 方法相比， h p l c - m s m s 方法可以降低杂质的干扰，降低检测限，更有利于基体复 杂样品的分析，同时也可进行确证分析，防止假阳性的出现。结果表 明，6 种p a e s 在三种不同添加水平的平均加标回收率为8 3 4 一1 0 0 5 ， 准确度高，相对标准偏差r s d 均小于1 0 ，精密度较好，满足欧盟限量 的检钡嵝求，且灵敏度比h p l c 方法更高，更适合于痕量检测要求。此 方法满足牛奶、奶粉、乳酪和黄油中6 种p a e s 的测定。 课题建立的h p l c 方法适用于牛奶中p a e s 的测定，满足欧盟m r l 值的 限量要求，而建立的h p l c - m s m s 方法则适用于四类制品( 牛奶、奶粉、 i i l 上海海洋大学硕士学位论文 乳酪和黄油) 中6 种p a e s 的同时检测，扩大了方法的应用范围。从样品 分析的结果来看，奶制品中普遍存在d b p 和d e h p 这两种残留物。 本课题完成的同时，应用h p l c - m s m s 方法制定了一项检验检疫行 业标准进出口奶制品中邻苯二甲酸酯残留量的测定。 关键字：奶制品，邻苯二甲酸酯，增塑剂，检测方法 i v 上海海洋大学硕士学位论文 s t u d i qo nd e t e r m i n a t i o no fp h t h a l i ca c i destersstudies0 nd e t e r m i n a t i o no fp h t h a l i ca c i de s t e r s p l a s t i c i z e ri nd i a r yp r o d u c t s a b s t r a c t p h t h a l i ca c i de s t e r s ( p a e s ) a r eo f t e nu s e da sp l a s t i c i z e ra n ds o f t e n e rt o e n h a n c et h ep l a s t i c i t ya n dt e n a c i t yo fp l a s t i c si np l a s t i ci n d u s t r y n o w a d a y s ， p a c k a g i n gi sa ne f f e c t i v ew a yt op r e s e r v et h ed i a r yp r o d u c t s ，s u c ha sp l a s t i c p a c k a g e h o w e v e r , p a c k a g i n g m a t e r i a li s d i r e c t l yt o u c h e dw i t hd i a r y p r o d u c t s ，c a u s i n gt h em i g r a t i o no fp a e si n t od i a r yp r o d u c t s ，w h i c h c o n t a m i n a t et h ed i a r yp r o d u c t s b e s i d e s ，t h ec o n t a m i n a t i o nt a k e sp l a c e d u r i n gm e c h a n i c a lm i l k i n ga n dp r o c e s s i n gu s i n gp v ct u b e h e n c e ，t h e d i a r yp r o d u c t sa r ec o n t a m i n a t e dd u r i n gp r o d u c t i o n ，p r o c e s s i n g ，a sw e l la s p a c k a g i n g ，c a u s i n gs a f e t yp r o b l e m p a e sa r ek i n do fe n d o c r i n e d i s r u p t i n g s u b s t a n c e st h a tc o n t a i n e s t r o g e na c t i v ei n g r e d i e n t s p a e sa r ec a l l e d “p o l l u t i o no fe n v i r o n m e n t a l h o r m o n e ”i nc h i n a p a e sc o u l dc a u s em a l f o r m a t i o n ，c a n c e ra n dm u t a t i o n t h em r lo fs i xp a e sa r es p e c i f i e di ne u r o p e a nu n i o nc o m m i s s i o n d i r e c t i v e2 0 0 7 19 e c ：b b p3 0m g k g 、d b p0 3m g k g 、d e h p1 5m g k g ， d n o p 、d i n pa n dd i d p9m g k g n oc u r r e n ts t a n d a r dd e t e r m i n a t i o no fp a e si n d i a r yp r o d u c t s i s v 上海海洋大学硕士学位论文 a v a i l a b l ei nd o m e s t i co ro v e r s e a s f e wa r t i c l e so v e r s e a sa r er e l a t i v et o d e t e r m i n a t i o no fp a e si nm i l k n oa r t i c l e sa r er e l a t i v et om i l kp o w d e ro r c h e e s e o n l yo n ea r t i c l ei nd o m e s t i ci sr e l a t i v et ot h ed e t e r m i n a t i o no f p a e s ( d b pa n dd e p ) i ni m p o r tm i l kp o w d e ru s i n gg cm e t h o d s o ，t h e p o l l u t i o no fp a e sa n dr e l a t i v ed e t e r m i n a t i o nr e s e a r c hh a v en o ta t t r a c t e n o u g ha t t e n t i o n h e n c e ，i ti sn e c e s s a r yt o e s t a b l i s had e t e r m i n a t i o n m e t h o do fp a e sr e s i d u ei nd i a r yp r o d u c t st h a tp r o t e c t sf o o ds a f e t ya n d p e o p l e sh e a l t h ，a s w e l la s s u p p l y i n g t e c h n i c a le n s u r a n c ef o rt h e e s t a b l i s h m e n to fs t a n d a r da n di m p o r ta n d e x p o r tc o m m e r c e p r e t r e a t m e n ta n dm e t h o do fd e t e r m i n a t i o nw e r ei m p r o v e db a s e do n a r t i c l e si nd o m e s t i ca n do v e r s e a s l l ea n ds p ew a su s e dt oc o n c e n t r a t e a n dp u r i f i e dt h ee x t r a c t ，w h i c hm e tt h er e q u i r e m e n t so fr e s i d u ed e t e c t i o n a sf o rd e t e r m i n a t i o nm e t h o d ，h p l ca n dh p l c - m s m sw e r eu s e d t h e f o r m e rw a ss c r e e n i n gm e t h o d ，t h el a t t e rw a si d e n t i f i c a t i o nm e t h o d t h er e s e a r c hc o n c e m e dt h ed e t e r m i n a t i o no fs i xp a e st h a tf o r b i d d e n t o u c hw i t hf o o db ye uc o m m i s s i o nd i r e c t i v e2 0 0 7 19 e c ( b b p 、d b p 、 d e h p 、d n o p 、d i n pa n dd i d p ) t h ep a e sw e r ee x t r a c t e dw i t hm e t h a n o l a n dh e x a n e m e t h y l t e r t - b u t y le t h e r ( 1 ：1 ，v v ) ，t h e f a tw a sr e m o v e db y c r y o a p p l i c a t i o n e x t r a c t s w e r e p u r i f i e db yl l ea n ds p ec a r t r i d g e s e p a r a t i o n w a sc a r r i e d o no d s c o l u m n ( 2 5 0 x 4 6 m m ，5 9 m ) ， a c e t o n i t r i l e - w a t e r ( 9 9 ：1 ，v v ) w a su s e da sm o b i l ep h a s e ，c o u p l e dw i t hu v a t v i 上海海洋大学硕士学位论文 2 2 4 n m ，t h ec o m p o u n d sw e r ee l u t e dw i t h i n2 5 m i n t h el i n e a rr a n g ew a s o v e r0 0 5 - 8 0 m lf o rb b pa n d d b p ，o 1 - 8 0 “e g m lf o rd e h pa n dd n o p ， 0 5 8 0 i t e g r n lf o rd i n pa n dd i d p 舻 o 9 9 8 ) t h el o d sw e r e ：b b po 15 g g g ，d b po 1 鹇儋，d e h pa n dd n o p 0 2i _ t g g ，d i n pa n dd i d p0 6i t g g t h ea s s a yw a sv a l i d a t e db ya n a l y z i n gs a m p l e ss p i k e dw i t ht h r e ed i f f e r e n t l e v e l s ，t h ea v e r a g er e c o v e r i e sa n dt h er s d sw e r ei nt h e r a n g e o f 81 1 - 9 9 o a n d1 5 一7 3 t h em e t h o dw a sa p p l i e df o rm i l ks a m p l e s t h em e t h o dr e q u i r e ds i m p l ee q u i p m e n ta n ds u p p l i e da c c u r a t er e s u l t s ，t h e l o dw a so n et ot h r e et i m e sl o w e rt h a nt h a to fm r l ，w h i c hm e tt h ec r i t e r i a o fe u r o p e a nu n i o n f o rt h eo t h e rd i a r yp r o d u c t s ( m i l kp o w d e ra n dc h e e s e ) a n db u t t e r , t h e h p l cm e t h o dw a sn o ts u i t a b l eb e c a u s eo ft h ed i s a b i l i t yo fs u p p l y i n gl o w e r l o dt om e e tt h en o r mo fs p i k e de x p e r i m e n t h e n c e ，e n h a n c i n gt h e s e n s i t i v i t yw a sn e c e s s a r y t h em a s ss p e c t r o g r a mw a su s e dt om e e tt h e r e q u i r e m e n t so fd i f f e r e n td i a r yp r o d u c t s i no r d e rt oe n h a n c et h es e n s i t i v i t y , h p l c m s m sm e t h o dw a su s e d b a s e do np r e t r e a t m e n t ，s o m ei m p r o v e m e n t sw e r em a d e d u r i n gt h ep r o c e s s ， t h er e s p e c t i v ei s o t o p e sw e r ea d d e da si n t e m a ls t a n d a r d ( d n o p - d 4w a s u s e da si n t e m a ls t a n d a r df o rd i n pa n dd i d p ) a l lt h es i xp a e sw e r e c a r r i e do ns p ec a r t r i d g et ob ep u r i f i e d ，w h i c hm a d et h es i m u l t a n e o u s e d e t e r m i n a t i o no fs i xc o m p o u n d sa n ds a v e da n a l y t i c a lt i m e t h es e p a r a t i o n v 上海海洋大学硕士学位论文 w a sc a r r i e do na t l a n t i sc i s c o l u m n ( 1 5 0 2 1 m m ，5 i ，t m ) ， a c e t o n i t r i l e - w a t e r ( 9 5 ：5 ，v v ) c o n t a i n i n go 01 c h 3 c o o n h 4w a su s e da s m o b i l ep h a s e a sf o rm a s ss p e c t r o m e t r yp a r t ，c a p i l l a r yv o l t a g ew a s3 0 0 0 k vi o n i z a t i o nm o d ei se l e c t r o s p r a yi o n i z a t i o np o s i t i v e ( e s i + ) a n dt h e c o l l i s i o ne n e r g yw a s8 2e v c o m p a r e dw i t hh p l cm e t h o d ，h p l c m s m s m e t h o dl o w e r e dt h ei n t e r f e r e n c eo fi m p u r i t i e sa n dl o d t h i sm e t h o dw a s a p p l i c a b l et oa n a l y s i sf o rc o m p l i c a t e ds a m p l ea n di d e n t i f i c a t i o na n a l y s i s ， p r e v e n t i n gf a l s ep o s i t i v e t h er e s u l ts h o w e dt h a tt h ea v e r a g er e c o v e r i e s w e r e8 3 4 一10 0 5 w h e ns p i k e dw i t ht h r e ed i f f e r e n tl e v e l sa n dh a dg o o d r s do fl o w e rt h a n1o ，m e e t i n gt h er e q u i r e m e n t so ft h ee um r l t h e s e n s i t i v i t yw a sm u c hh i g h e rt h a nt h a to fh p l cm e t h o d h e n c e ，t h em e t h o d w a sm o r ea p p l i c a b l ef o rt r a c ea n a l y s i s t h eh p l c - m s m sm e t h o dc o u l d b eu s e df o rt h ed e t e r m i n a t i o no fs i xp a e si nm i l k ，m i l kp o w d e r , c h e e s ea n d b u r e r t h eh p l cm e t h o dw a sa p p l i c a b l et ot h ed e t e r m i n a t i o no fp a e si n m i l ka n dm e tt h er e q u i r e m e n t so fe um r l h o w e v e r , t h eh p l c - m s m s m e t h o dw a sa p p l i c a b l et ot h es i m u l t a n e o u sd e t e r m i n a t i o no fp a e si nm i l k , m i l kp o w d e r , c h e e s ea n db u r e r ，w h i c he n l a r g e dt h es c o p eo fa p p l i c a t i o n j u d g ef r o mt h er e s u l t so f t e s ts a m p l e s ，d b pa n dd e h pr e s i d u ew e r ew i d e s p r e a di nd i a r yp r o d u c t s m e a n w h i l e ，t h e t r a d es t a n d a r do f i n s p e c t i o n a n d i n s p e c t i o n v i i i 上海海洋大学硕士学位论文 d e t e r m i n a t i o no fp h t h a l i ca c i de s t e r si nm i l kp r o d u c t sf o ri m p o r ta n d e x p o r tw a sw r i t t e nu s i n gh p l c m s m sm e t h o d k e yw o r d s ：d i a r y p r o d u c t s ，p h t h a l i c a c i d e s t e r s ，p l a s t i c i z e r , d e t e r m i n a t i o n i x 上海海洋大学学位论文原创性声明 本人郑重声明：我恪守学术道德，崇尚严谨学风。所呈交的学 位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。 除文中已经明确注明和引用的内容外，本论文不包含任何其他个人 或集体已经发表或撰写过的作品及成果的内容。论文为本人亲自撰 写，我对所写的内容负责，并完全意识到本声明的法律结果由本人 承担。 学位论文作者签名：箱沟年 日期：2 碑，2 ，月烨日 上海海洋大学学位论文版权使用授权书 学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定， 同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子 版，允许论文被查阅或借阅。本人授权上海海洋大学可以将本学位 论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、 缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。 本学位论文属于 ， 不保密叫 学位论文作者签名：徐向华 指导教师签名：丁率平 日期：加a 8 年j 1 月砷侣 日期：如劳肛月印 上海海洋大学硕士学位论文 引言 食品安全是国家中长期科学和技术发展规划纲要( 2 0 0 6 - 2 0 2 0 年) 的重点领域和优先主题。奶制品作为日常生活的重要营养品，其 品质与食品安全有密切的关系。近年来，奶制品来自生产过程或包装 材料的污染问题越来越受到人们的重视，并在很多国家已经作为研究 热点。 邻苯二甲酸酯( p h t h a l i ca c i de s t e r s ，p a e s ) 又称酞酸酯，其化 学结构是由1 个刚性平面芳烃$ a 2 个可塑的非线性脂肪侧链组成n 1 。p a e s 是一类化合物的总称，该类化合物从邻苯二甲酸二甲酯( d m p ) 到十三 烷基酯共有2 0 多种，为无色透明的油状液体，无味或略带气味，难溶 于水，易溶于有机溶剂。p a e s 在塑料工业中常用作增塑剂和软化剂，用 来增大塑料的可塑性和韧性，其含量有时可达高聚体本身的6 0 ，用来 增大塑料的可塑性和韧性眩1 。 目前保存奶制品的有效方法是进行各种包装处理，如塑料包装袋 等。但目前市场上众多的食品包装材料难以符合国家对食品安全、卫 生方面的要求，包装材料直接与奶制品接触，p a e s 可迁移到奶制品中 成为污染源。另外，在使用p v c 软管机械采奶和加工过程中，也存在p a e s 对奶制品的污染问题。因此，除了塑料包装材料中的p a e s 会迁移到奶 制品中外，奶制品在源头上也会受至u p a e s 的污染。总之，奶制品在生 产过程、加工过程或包装环节都有可能受至i j p a e s 的污染，引起奶制品 上海海洋大学硕士学位论文 的饮用安全问题。因此，开展奶制品中邻苯二甲酸酯的检测方法研究， 可对奶制品受p a e s 的污染程度进行监测和控制，保证消费者的健康。 一、p a e s 的外迁作用 塑料制品中的增塑齐u p a e s 是一类内分泌干扰( e n d o c r i n e d i s r u p t i n g ，e d ) 物质，含有雌激素活性成分口q 3 ，我国将这类物质称 为“环境激素类污染物川别。自2 0 世纪中叶聚氯乙烯工业化以来，塑料 尤其是p v c 带i j 品的生产急速发展，目前全世界p a e s 的产量在2 0 0 万吨以 上。由于p a e s 与塑料基质不形成共价键，而是以氢键和范德华力连接， 彼此保持独立的化学性质，因而在接触到包装食品中所含的水、油脂 等时，便会溶出嘲。而且，p a e s 随着时间的推移可由塑料中迁移到大气 飘尘、工业废水、河流、城市污泥、固体废弃物和食品中，而p a e s 在 环境中稳定持久，短时间内无法完全降解，具有生物累积和放大效应， 最终通过食物链而危及人类健康。实际上，与人们日常生活密切相关 的塑料制品如保鲜膜、一次性纸杯、超市方便袋、塑料饭盒、塑料水 壶等的大量使用为p a e s 迁移到食品中打开了很大的通道。 二、p a e s 的安全性评价 据报道，p a e s 具有生殖毒性、胚胎毒性和遗传毒性口3 。现在，越来 越多的权威科学家和国际研究小组已认定，过去几十年来男性精子数 量持续减少、生育能力下降与吸收越来越多的p a e s 有关阳1 ，有些p a e s 具有“三致”( 致癌、致畸、致突变) 作用，1 9 8 2 年美国国家毒理规划 署的实验报告确认高剂量的d e h p 可引起肝癌阳1 。德国埃朗根一纽伦堡大 上海海洋大学硕士学位论文 学进行的专项研究结果表明，人体对p a e s 的摄入量远比原先预测的多， 儿童尤其如此，这与儿童长期接触p v c 玩具有关。事实上，p a e s 已成为 全球最普遍的污染物之一，其污染程度超过了d d t 和b h c ( 有机氯农药) n 训，被人们称为第二个全球性“p c b ”污染物。在环境介质中，p a e s 的 降解主要有生物降解和非生物降解两种途径，但其半衰期很长，在短 时间内无法完全降解。 三、各国对p a e s 的监控措施 基于p a e s 在环境中的富集作用对人类健康造成的严重危害，美国 国家环保局( e p a ) 将6 种p a e s y l j 为优先控制污染物：即邻苯二甲酸二甲 酯( d m p ) 、邻苯二甲酸二乙酯( d e p ) 、d b p 、d e h p 、邻苯二甲酸二正辛酯 ( d o p ) 矛i b b p 1 ；8 种p a e s 被列入w w f ( 世界野生动物保护基金会) 的环境 激素名单中n 副。而在我国，d m p 、d b p 矛i d o p 这3 种物质被列入“中国环 境优先污染物黑名单”n 引。 p a e s 的污染对奶制品的影响主要有两方面：食品安全：有害物 质进入奶制品中，将会对人体健康造成巨大的危害；食品质量：进 入奶制品的迁移物有可能影响其原有的感官性质和风味。 最近，欧盟研发出了一种新的增塑剂替代品，安全性方面得到了 认证，以期最终全面禁用邻苯- - e f 酸酯。2 0 0 5 年4 月欧盟立法决议，对 儿童玩具和护理品而言，当p a e s 含量超过o 1 时被完全禁止，设立此 限量实际上是完全禁用p a e s ，因为实际生产中的使用量大大超过这一 限量。另外，从2 0 0 6 年1 月起欧盟禁止销售和进口含p a e s 的奶制品。纵 上海海洋大学硕士学位论文 观欧盟现行规定的出台，这是发达国家利用自身的技术优势，设置的 技术性贸易壁垒来限制输出国的出口。2 0 0 7 年3 月3 1 日，欧盟在其官方 刊物上公布了欧盟指令2 0 0 7 1 9 e c n 4 1 ，规定6 种p a e s 最大残留限量值 7 ( m r l ) 为：b b p3 0m g k g 、d b p0 3m g k g 、d e h p1 5m g k g ，d n o p 、 d i n p 和d i d p9m g k g 。 四、p a e s 的检测方法 p a e s 的检测方法主要有分光光度法、薄层色谱法( t l c ) 、气相色 谱法( g c ) 和高效液相色谱法( h p l c ) 等。p a e s 检测的e p a 标准方法是 。g c - m s 法，至于在奶制品中p a e s 统一的检测标准，在国内外都未发布。 ( 1 ) 气质联用的选择离子监测( g c - m s - s i r ) 技术测定p a e s 蔡智鸣等n 副采用g c m s - s i r 技术测定市售畜禽内脏食品中的p a e s 。 以h e 为载气，流量为0 8m l m i n ；色谱柱：h p - 5 m s 毛细管柱( 3 0 m x 0 2 5 m m x 0 2 5um ) ；不分流进样，进样量为1ul 。质谱采用e i 离子化方式， 离子化能量为7 0 e v 。结果测得猪与鸡心、肝、肾样品中酞酸二丁酯( d b p ) 和酞酸二异辛酯( d e h p ) 的含量分别为0 6 9ug g - - - 9 9 1ug g 矛1 1 5 5 - 3 0 8ug g 。猪肝和鸡肝样品的加标回收率分别为：d b p9 8 1 ，d e h p 9 5 4 ，两者的变异系数分别为5 4 6 和7 3 2 ，该方法具有较小的仪器 噪音和较高的柱效。 h a o - y us h e n n 6 3 采用g c - m s 方法对2 5 种食品用塑料制品( 包装袋、 包装膜、塑料容器、微波用容器、吸管、塑料匙、塑料杯和塑料碟子 等等) 中所含的p a e s 进行检测。待测样品在萃取前用液氮处理5 1 0 秒， 上海海洋大学硕士学位论文 再用正己烷进行超声萃取。g c - m s 条件：h p - 5 m s ( 3 0 m 0 2 5 m mi d ，0 2 5 l am ) 毛细管柱，以h e 为载气，流量为1 o m l m i n ，不分流进样1 0l al ； 质谱采用s i m 模式，以e i 为离子源，7 0 e v 。该方法的检测限达n l o 0l a g k g ，各物质的回收率为8 2 - 1 0 6 ，r s d 为3 8 - 1 0 2 ，结果发现2 5 个 样品中只有塑料碟子没有检测出p a e s ，其它2 4 种样品至少含3 种或3 种 以上p a e s ，含量最高的是d e h p ，其中塑料杯和饼干袋中的d e h p 含量高 达11 9 3 5 m g k g 和1 7 6 3 8 m g k g 。 ( 2 ) 气相色谱法测定p a e s n 力 采用超声波萃取一气相色谱法测定经塑料食品袋盛装后食品( 烧 饼、麻花和馒头) 中p a e s 的含量。以n ：为载气，色谱柱为s p b t m - 5 c a p i l l a r yc o l u m n ( 3 0 m x 0 3 2 m m 0 2 5um ) ，进样量1 0l al ，分流 比为1 ：5 。3 种样品的回收率为8 4 1 一1 0 7 8 ，r s d 在1 6 一6 7 。结果 表明：经塑料食品袋盛装后食品中p a e s 的含量有不同程度的升高，p a e s 对温度高的食品污染程度大，且p a e s 对油脂含量高的食品污染程度比 油脂含量低的污染程度大，p a e s 对食品表面的污染程度大于内部。 气相色谱法和薄层色谱法测定p a e s 1 。建立了毛细管柱气相色谱 法和薄层色谱法测定5 种p a e s ( d m p 、d e p 、d b p 、d o p 和d e h p ) 的方法。 气相色谱条件：载气为n ：；流量：0 8m l m i n ；色谱柱：h p - 5 m s 毛细管 柱( 3 0 o mx3 2 0l am r0 2 5um ) ，不分流进样1 - 5ul ，f i d 检测器。薄层 色谱条件：在硅胶g 薄层板上，以v ( 乙酸乙酯) ：v ( 异辛烷) = 1 ：9 为 展开剂，在测定波长2 7 5 n m 、参比波长3 4 0 n m 的条件下进行双波长反射 上海海洋大学硕士学位论文 吸收飞点扫描测定。样品回收率：8 8 8 5 - 1 2 0 1 9 9 6 ，r s d 为i 6 一3 2 。 d m p 、d e p 、d b p 、d o p 和d e h p 的检出限分别为2 0 、1 8 、2 6 、3 2 和3 1 n g 。 两种方法均样品用量少，分离效果好。区别在于前者灵敏度、回收率 高，后者样品前处理简单、费用低，更适合含量较高、最高允许量较 大的污染物分析。用该方法测定食堂就餐用塑料食品袋，结果样品中 检测出d b p 和d e h p ，其总量大于0 1 5 ，超过了欧盟( 1 9 9 9 8 1 5 e c 指令) 对塑料玩具中p a e s 总量的规定( 小于等于0 1 ) ，这与我国邻苯二甲酸 酯生产应用中以d b p 和d e h p 为主( 大于9 0 ) 有关。 ( 3 ) 反相高效液相色谱( r p - h p l c ) 法测定p a e s n 阳 采用反相高效液相色谱( r p - h p l c ) 一二极管阵列检测法同时测定食 品中5 种p a e s ( d m p 、d e p 、d b p 、d e h p 和d o p ) 的残留。流动相为甲醇一 水梯度洗脱，在l o m i n 内甲醇由8 0 线性变化为i 0 0 ，流速为i m l m i n ， 进样量：5ul ，d a d 扫描波长范围：1 9 0 n m 一3 7 0 n m ，检测波长：2 2 4 n m 。5 种p a e s 的线性相关系数r o 9 9 7 ，r s d 在i 2 一9 3 之间，回收率在 8 0 9 一1 1 9 8 之间。该法用于测定3 8 种食品中p a e s 的残留，检出率为 1 8 4 ，5 种p a e s 均有检出，含量在1 0 3 9 k g - 1 8 9 6 9 k g 之间，定性检 出限为0 7 9l ag l 一4 1 9l ag l ，定量检出限为2 6 3ug l 一1 3 9 6ug l 。 ( 4 ) 顶空固相微萃取( h s s p m e ) 结合g c - m s 的方法测定p a e s n 们 加拿大学者r o b e r ts e n s e n s t e i n 等采用h s - s p m e 结合g c - m s 的方法 对牛奶在使用p v c 挤乳软管进行机械采集过程中受到的p a e s 污染进行 了检测。s p m e 的优化条件：5 9 牛奶中加入2 5 9n a t l ，采用p d m s - 1 0 0u 上海海洋大学硕士学位论文 m 钎维头，纤维萃取头悬空于牛奶液面1 5 c m 处，萃取温度为9 0 0 ，萃 取时间为6 0 m i n ，在进样口的热解析温度为2 8 0 ，解析l o m i n 。采用d b - 5 毛细管柱( 3 0 m x0 2 5 m m ，0 2 5um ) ，质谱扫描采用s i m 模式。d m p 、d e p 、 d b p 、b b p 、d e h p 和d o p 的平均检测限( 含脂量为0 - 1 0 8 的5 组样品) 分别为0 9 3 6 、0 3 1 、0 2 4 、2 、1 5 1 、2 3 2 n g g ：除d m p 夕b ，回收率均 在9 0 以上：除d m p 和d e h p 外，r s d 均小于等于1 0 。该方法显示d e h p 在 使用p v c 管采集的牛奶样品中的含量为2 1 5 3 6 n g g ，而未使用p v c 管的 样品中d e h p 的含量仅为1 6 0 4 n g g ，说明t p v c 管中p a e s 向牛奶迁移的 主要是d e h p ，这与d e h p 是塑料工业中最广泛使用的增塑剂有关。此外， 陈文锐等心们采用简化的样品前处理技术结合g c 方法，测定了来自欧盟 国家的1 9 种奶粉中的p a e s 。结果显示有7 种奶粉含有p a e s ，阳性率为 3 6 8 ，均为d b p ，平均含量为0 9 m g k g 。这个方法对于大批量样品的 处理显得特别有用。 ( 5 ) 微滴液相微萃取( s d m e ) 技术结合g c - m s