（食品科学专业论文）柑橘采后新型杀菌剂的防腐效果及其残留降解动态.pdf

摘要 摘要 本文开展了柑橘中嘧菌酯，咯菌腈和抑霉唑农药残留检测方法、三种农药对柑橘贮藏病 害防治效果及其残留降解动态的研究。以期为制定嘧菌酯、咯菌腈农药残留检测标准和柑橘 贮藏期病害防治提供一定的理论依据和技术支撑。主要研究结果如下： 1 建立了气相色谱一电子捕获检测器( g c ：e c d ) 测定柑橘中嘧菌酯残留的检测方法。样 品采用乙酸乙酯+ 正己烷( 1 ：1 ，v v ) 振荡提取，不需净化。提取液经浓缩定容后直接测定，毛细 管柱为d b 5 m s 。样品前处理方法简单，嘧菌酯在o 1 0 、0 , 5 0 、1 0 0 m g k g 添加浓度下，果皮和 果肉中的平均回收率分别为8 1 6 坤o 2 、7 8 4 9 0 - 8 6 4 ，变异系数( r s d ) 分别为4 3 一1 3 9 、 1 7 - 4 5 ，果皮、果肉样品嘧菌酯的最低检出浓度均为0 0 0 1 m g k g ，符合农药残留检测要求。 2 建立了柑橘中抑霉唑残留的气相色谱一电子捕获检测器( g c , - e c d ) 检澳9 方法。样品采 用乙酸乙酯，正己烷( 1 ：l ，蝴荡提取，不需净化，提取液经浓缩定容后直接测定，毛细管柱 为d b l 7 0 1 。样品前处理方法简单，抑霉唑在0 1 0 、0 5 0 、1 0 0 m g k g 添加浓度下果皮和果肉 中的平均回收率分别为8 3 5 9 6 2 、8 7 6 - 1 0 2 2 ，r s d 分别为2 3 一1 4 5 ，4 3 - 7 6 ， 果皮、果肉样品抑霉唑的最低检出浓度均为0 0 1 m g k g ，符合农药残留检测要求。 3 建立了高效液相色谱一紫外检测器( i i p l c - u v ) 测定柑橘中咯菌腈残留的检测方法。 采用2 8 0 r a n 的扫描波长，甲醇：水( 7 5 ：2 5 ，v v ) 为流动相洗脱，略菌腈保留时间为5 1 0 m i n 。 样品采用丙酮振荡提取两次，正己烷液一液分配萃取，f l o r i s i l - - s p e 柱净化咯菌腈加标浓度 为1 0 、5 0 m g k g 时，在果皮中的平均回收率为8 1 7 - 8 9 0 ，r s d 为2 2 巧3 ，果肉中的平 均回收率为8 5 7 9 0 , 9 3 o ，r s d 为3 2 - 5 8 在果肉、果皮中略菌腈的最低检出浓度均为 0 0 2 m g k g ，符合农药残留检测要求 4 抑菌试验结果表明，供试的三种药剂，对柑橘青，绿霉病菌均有不同程度的抑制作用， 并且随着浓度的增加抑菌活性相应增强咯菌腈与咯菌腈嘧菌酯混剂对两种病原菌的抑制效 果明显优于抑霉唑和嘧菌酯。1 0 0 m g l 略菌腈、2 5 0 m g l 咯菌腈、1 0 0 m g i 咯菌腩嘧菌酯 ( 1 ：l , v v ) 混合溶液、2 5 0 m g l 略菌腈俺菌酯( 1 ：l ，v 加) 混合溶液可以完全抑制绿霉菌的的菌 落生长，抑制率达到1 0 0 。在2 5 0 日删浓度下，咯菌腈、嘧菌酯，咯菌腈混剂对青霉菌的抑 菌圈直径最大，均为4 5 6 m m ，其次是抑霉唑，嘧菌酯再次之。 5 分别用不同浓度咯菌腈、嘧菌酯和抑霉唑三种杀菌剂浸泡处理4 4 7 锦橙，于改良通风 库贮藏1 0 0 d ，试验结果表明，瞌菌酯、咯菌腈在供试浓度下对4 4 7 锦橙都有较好的防腐效果， 嘧菌酯的适宜浓度为2 5 0 m g l ，咯菌腈的适宜浓度为5 0 0 或0 m g l 。研究也表明，贮藏1 0 0 d 时，5 0 0 m g l 和s 0 0 m g l 咯菌腈处理，褐腐、蒂腐等一类病害的发病率分别占总发病率的3 9 2 8 和5 9 8 9 ，均低于其它药剂处理的发病率，可见，咯菌腈对蒂腐、褐腐病等一类病害具有较 好的防治效果。 6 残留动态研究结果表明，嘧菌酯和抑霉唑这两种农药均能通过果皮渗入到果肉中，且 果皮中的农药残留量均高于果肉，而果肉中未检出咯菌腈残留，这可能是与咯菌腈的非内吸 性有关；贮藏1 0 0 天后检测，可食部分的最终残留水平均很低，均分别未超过国外橙中规定的 最大残留限量( m r l s ) ，可以安全食用。果皮中的嘧菌酯、咯菌腈最终残留水平也未超标， 适宜用作皮渣综合加工利用的原料 西南大学硕十学位论文 m m 7 嘧团酯、抑霉唑农药在果皮和果肉中以及咯曲腈在果皮表面的农纳残留量均随着时间 的延长呈不同程度的缓慢降解趋势。三种农药在果皮中的降解半衰期。抑霉唑降解半衰期最 长，其次为咯菌腈，嘧菌酯，分别为5 5 d 、5 0 6 d 、3 3 6 d 。而嘧菌酯、抑霉唑在果肉中的降解 半衰期分别为3 6 9 d ，2 6 8 d 。 关键词：柑橘残留检测抑菌作用防腐效果残留降解 a b s t r a c t a b s t r a c t t h ed e t e r m i n a t i o no fa z o x y s t r o b i n f l u d i o x o n i la n dj n m z a i i lr e s i d u e si nc i t r u sf i u i t , d e c a yc o n t r o l a n dr e s i d u el e v e l sd u r i n g4 4 7j i n c h e uo r a n g ef r u i tw i t ht h et r e a t m e n to ft h r e ef u n g i c i d e sw c r e c o n d u c t e di nt h i sp a p e ri no r d e rt op r o v i d eat h e o r e t i c a lb a s i sf o rt h es t a n d a r d - s e t t i n go fa z o x y s t r o b i n a n df l u d i o x o n i la n dp e s t i c i d es t o r a g ec i t r u sd i s e a s ep r e v e n t i o n , t h em a i nf i n d i n g sa r ea sf o l l o w s ： 1 ag a sc h r o m a t o g r a p h y - e l e c t r o nc a p t u r ed e t e c t i o n ( o c - e c d ) m e t h o df o rd e t e r m i n i o n g a z o x y s t r o b i nr e s i d u ei nc i t r u si sh e r ep r e s e n t e d a z o x y s t x o b l nr e s i d u ew a se x t r a c t e db yo s c i l l a t i o n f r o mc i t r e ss a m p l e sa d d e dn - h e x a n e e t h y la c e t a t e ( 1 ：l , v v ) , w i t h o u tp u r i f i c a t i o n , e x t r a c ts o l u t i o n b e i n gc o n c e n t r a t e dw a si n j e c t e di nt h eg cc o l u m n ，q u a r t zc a p i u a r yc o l u md b - 5 m sw a su s e da s s e p a r a t i o nc o l u m n s a m p l ep r e - t r e a t m e n tm e t h o di ss i m p l e ，t h ea v e r a g er e c o v e r yi no r a n g ep u l pa t f o r t i f i c a t i o nl e v e l so f0 1 - 1 0 m g k ga z o x y s t r o b i nw e l fi nt h er a n g e7 8 4 - 8 6 4 w i t hr e l a t i v e s t a n d a r dd e v l a t i o n s ( r s d ) b e t w e e n1 7 a d d4 5 i no r a n g ep e 吐始a v e r a g er e c o v e r yw c i c 8 1 6 - 9 0 2 ，r s d4 3 - 1 3 9 ，t h em i n i m u md e t e c “b i ec o n c e n t r a t i o no fa 2 0 x y s 舡o b i nw 罅 o 0 0 1 m g k gi no r a n g es a m p l e s , t h em e t h o da c c o r d sw i t ht h es t a n d a r d so fd e t e r m i n a t i o no fp e s t i c i d e r e s i d u e s 2 ag a sc h r o m a t o g r a p h y - e l e c t r o nc a p t u r ed e t e c t i o n ( g c e c d ) m e t h o df o rd e m r m i n i o n g i m a z a l i lr e s i d u ei nc i t r u si sh e r ep r e s e n t e d i m a z a l i lr e s i d u ew a se x 口a c t e db yo s c i l l a t i o nf r o mc i t r u s s a m p l e sa d d e dn - b e x a n e e t h y la c e t a t e ( 1 ：1 v v ) , w i t h o u tp u r i f i c a t i o n , c x 昀d s o l u t i o nb e i n g c o n c e n t r a t e dw a si n j e c t e di nt h e0 cc o l u m n , q u a r t zc a p i l l a r yc o l u md b l 7 0 1w a su s e d 硒 唧m r i o nc o l ls a m p l ep r e - u e a t m e mm e t h o di ss i m p l e ，t h ea v e r a g er e c o v e r yi no r a n g ep u l pa t f o r t i f i c a t i o nl e v e l so f0 1 ，0 5 ，1 0 m g k gi m a z a l i w e r ei nt h er a n g e8 7 6 - - 1 0 2 , 2 w i t hr e l a t i v e s t a n d a r dd e v i a t i o n s ( r s d ) b e t w e e n4 3 - 7 6 i no r a n g ep e e l , t h ea v e r a g er e c o v e r yw 翻 5 - 9 6 2 。r s d2 3 - 1 4 5 。t h cm i n i l l l u md c t e c t a b l e c o n c e n t r a t i o no fi m a z a l i lw a l l 0 0 1 m g k gi no r a n g es a m p l e s , t h em e t h o da c c o r d sw i t ht h es t a n d a r d so fd e t e r m i n a t i o no fp e s t i c i d e r e s i d u e a i 。 3 al i q u i dc h r o m a t o g r a p h i cm e t h o dw i t hu l t r a v i o l e td e t e e t o r ( m t c - u v ) m e t h o dh a sb e e n e s t a b l i s h e df o rt h ed e t e n n i n a t i n no ff l u d i o x o n i lr e s i d u ei nc i t m s t h ed e t e r m i n a t i o no ff l o d i o x o n i l r e t e n t i o nt i m cw a s5 1 0 m i nu s i n gh i g h - p e f f o r m a n e el i q u i dc h r o m a t o g r a p h yw i t hu v 函：c c t i 蛐a t 2 s o n m , t h em o b i l ep h a s ew a sm e t h a n o l w a t e r ( 7 5 ：2 5 , v v ) w i t hg r a d i e n te l u f i o n s a m p l e sa d d e d a 【t n c t c da c e t o n ew e r es h a k e dt w i c e a f t e rb e x a n ef i q u i d - f i q u i de x t r a c t i o n , t h ee x t r a c tw a sp u r i f i e d t h r o u g hf l o r i s i l - s p ec o l u m n t h er e c o v e r i e si no r a n g ep e e l , a ts p i k e dc o n c e n t r a t i o n sb e t w c e n l 0 a n d5 0 m g k g , w e r eb e t w e e n6 9 7 a n d7 8 0 w i t hr e l a t i v es t a n d a r dd e v i a t i o n sr a n g i n gf r o m2 2t o 6 3 t h ea v e r a g er e c o v e r yi no r a n g ep u l pw a s6 5 7 - 7 3 0 。r s d3 2 - 5 8 t h em i n i m u m d e t e c t a b l e c o n c e n t r a t i o n o f f l u d i o x o n i l i n o r a n g e f l e s ha n d o r a n g e p e e l w a s 0 0 2 m g k g t h e a e c u n e y o ft h em e t h o di sh i g h e r , t h em i n i m u md e t e c t i o nl i m i to ft h er e q u i r e m e n t si nl i n ew i t hd e m a n d sf o r t h ed e t e r m i n a t i o no fp e s t i c i d er e s i d u e s 4 t h ef u n g i s t a t i ct e s tr e s u l t si n d i c a t et h a tt h ec o n c e n t r a t i o n2 5 - 5 0 0 m e 扎p i l o t , t h es t r o n g e s t m 西南大学硕十学位论文 f u n g i c i d e sa g a i n s tc i t r u sb l u ea n dg r e e nm o l dw a sf l u d i o x o n i la n da z o x y s t r o b i n f l u d i n x o n i lm i x l t t r e t h e i n h i b i t o r y r a t eo f 1 0 0 m r l , 2 5 0 m g l f l u d i n x o n i l a n d 1 0 0 m g l 2 5 0 m g l a z o x y s t r o b i n f l u d i o x o n i lm i x t u r et oc i t r u sg r e e nm o l da l la m o u n t e dt o1 0 0 ，a z o x y s t r o b i n ，l m a z a l i l ， s e c o n d u n d e rt h es a m ec o n c e n t r a t i o n2 5 0m r l , t h ei n h i b i t i n ge f f e c to ff l u d i o x o n i la n d a z o x y s t r o b i n f l u d i o x o n i lm i x t u r et oc i t r u sb l u em o l da i mt h eb e s t , i m a z a l i l ，s e c o n d ，a z o x y s t r o b i n ， a g a i n 5 4 4 7o r a n g es e p a r a t e l ys o a k e dw i t hd i f f e r e n tc o n c e n t r a t i o n sf l u d i o x o n i i ，a z o x y s l r o b i n , i m a z a l i l f u r i g i c i d e sw e r es t o r e di nv e n t i l a t e ds t o r a g eh o u s em o r et h a nt h r e em o n t h s ，t e s tr e s u l t si n d i c a t e d t h a t2 5 0 m g la z o x y s t r o b i n ，5 0 0 m g lo r8 0 0 m g lf l u d i o x o n i li m m e r s i o nt r e a t m e n tc a np r e f e m b l y c o n t r o lt h eo c c 蚵c n o eo f4 4 7o r a n g er o td i s e a s e ；t h cd i s e a s ei n c i d e n c eo fs t e me n dr o ta n db r o w n r o t ，e t c f o r5 0 0 m g lo rs o o m g lf l u d i o x o n i li m m e r s i o nt r e a t m e n ta r or e s p e c t i v e l y3 9 2 8 ，5 9 8 9 ， t h e ya l ll o w e rt h a nt h a to fo t h e rt r e a t m e n t i t i sv i s i b i l et h a tf l u d i o x o n i lo nh a v eb e t t e rc o n t r o le f f e c t o os t e m - r o t , b r o w nr o t ，e t c 6 t h er e s i d u e - d y n a m i c sr e s u l t so ft h i sf u n g i c i d e si n d i c a t e dt h a ta z o x y s t r o b i na n di m a z a l i lc a n i n t a k ei n t ot h ep u l pt h r o u g ht h ep e e l , a n dt h er e s i d u a ll e v e l so np e e li sh i g h e rt h a nt h ef l e s h ； f l u d i o x o n i lr e s i d u ew a sn o td e t e r m i n e di np u l p ，i ti sp r o b a b l yr e l a t e dw i t hn o n - s y s t e mo ff l u d i o x o n i l t h eu l t i m a t er e s i d u a ll e v e l so ft h ee d i b l ep a r ta l ea l lv e r yl o wa f a rs t o r a g ef o r1 0 0d a y s , i ti ss a f e t y t oe a t a z o x y s l r o b i na n df l u d i o x o n i lr e s i d u el e v e l si n4 4 7o r a n g ep e e la l s od on o ta 嵋dt h e 弛 o ff o r e i g no r a n g e s , a n dt h ep e e lm a t e r i a l sa l es u i t a b l ef o rp e e li n t e g r a t e dp r o c e s s i n gf o rr a w m a t e r i a l s 7 f u n g i c i d er e s i d u ed e g r a d a t i o nd y n a m i c sr e s u l t si no r a n g es t o r a g es h o wt h a ta z o x y s t m b i n a n di m a z a l i lr e s i d u ei nc i t r u sp e e la n df l e s h ，f l u d i o x o n i lr e s i d u ei np e e lo v e r a l ls l o wd e c r e a s e d 砒 d i f f e r e n td e g r e e sw i t ht h ep r o g r e s so ft h et i m e n eh a l f - l i f ef o ri m a z a l i li np u l p ，t h el o n g e s t , w a g 5 5 d ，f l u d i o x o n i la n da z o x y s t r o b i n ，t h es e c o n d ，i sr e s p e c t l y5 0 6 d 、3 3 6 d t h eb a l l - l i f ef o ri m a z a m a n df l u d i o x o n i li np u l pw a sr e s p e c a y3 6 9 d , 2 6 8 d k e yw o r d s ：o r a n g e d e t c m i n a t i o nm e t h o d so ff u n g i c i d er e s i d u e s f u n g i s t a t i e a c t i o n p r e s e r v a t i v ee f f e c t r e s i d u e sd e g r a d a t i o n i v 独创性声明 本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作 及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方 外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为 获得西南大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一 同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明 并表示谢意。 学位论文作者；栖砂粒 签字日期：2 0 0 ) z n 日 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解西南大学有关保留、使用学位论文的规 定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允 许论文被查阅和借阅。本人授权西南大学研究生院可以将学位论文的 全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫 描等复制手段保存、汇编学位论文。 ( 保密的学位论文在解密后适用本授权书，本论文：日不保密，口 保密期限至年月止) 。 学位论文作者签名：扬参拉 签字日期：却哆年么月多日 学位论文作者毕业后去向： 工作单位： 通讯地址： 导师签名：焦，芦多 签字日期：娜年占月7 日 邮编： 第一章文献综述 !,i i 一l i _第一章文献综述 1 1 新型杀菌剂嘧菌酯、略菌腈的研究进展 睦菌酯和咯菌睛是两种新型、高效、低毒、低残留的仿生生物源杀菌剂。嘧萤酯 ( a z o x y s t r o b i n ) 商品名阿米西达，是一种嗜球果伞素( 曲岫妇嘲盼) 和小奥德蘑素 ( o l 如m 4 m 融) 真菌代谢物的合成类似物。它以源于食用蘑菇的天然抗菌素为模板。经人工 仿生合成，属甲氧丙烯酸酯类强内吸性杀菌剂它具有广谱杀菌作用，可以有效抵抗卵菌纲 ( o o m y c 嘲) 、子囊菌( a s c o m y c e t e s ) 、半知菌门( d e u t e r o m y c e t e 目) 、担子菌类( b a s 城o m y c e t e s ) 真菌病原体目前，嘧菌酯已在全球7 2 个国家，多种作物病害上获得登记 、 咯菌腈( f l u d i o x o n i l ) 是一种新型的非内吸性苯基毗咯类杀菌剂，商品名为适乐时( c e l e s t 0 2 s f s ) ，商品编码号为c g a1 7 3 5 0 6 它是假单胞菌属蚴础m 铆甜s p p ) 的不同种 ( p a e u d o m o n a s p y r r o c n a ) 产生的次生代谢物硝毗咯菌素( p m o 姗i n ) 的类似物。由于它比天 然产物硝吡咯菌素抗光降解，能专性地抑制霉菌而广泛地应用于防治农业生产中的真菌性病 害 1 1 1 嘧菌酯、咯菌聩的结构与性质 袭1 嘧茁酯和咯菌腈的结构与性质1 】 t a b l e1 t h es t r n c t u t ea n dp r o p e a yo f a z o x y s t r o b i na n df l u d i o x o n f l l 西南大学硕+ 学位论文 分配系数 k o 矿 h e m y 常数 溶解度 稳定性 2 5 ( 2 0 )4 1 2 ( 2 0 ) 7 3 1 0 4 p am 3t o o l 。1 ( 计算值) 2 0 时，水中溶解度为6 0 r a g l ， 微溶于己烷、正辛醇，溶于甲醇、甲 苯和丙酮，易溶于乙酸乙酯、乙腈、 二氯甲烷中溶解度较高 水溶液中光解半衰期为2 周。对水解 稳定 5 4 x 1 0 - s p aom o l 1 ( 计算值) 2 5 时，水中溶解度为1 8 m g l ，其它溶剂溶 解度( g 几，2 5 ) ：丙酮1 9 0 ，乙酸乙醣8 6 ， 甲醇“，乙醇4 4 ，正辛烷2 0 ，甲苯2 7 p h 5 - 9 条件下不发生水解电离常数：p k t 5 0 0 0 m g k g ，大鼠急性经皮l d s o 2 0 0 0 m g k g ，对兔眼睛和皮肤 无刺激作用大鼠急性吸入i , c e o ( 4 h ) 2 6 m g l 。n o a e l 数据m g k g d - 大鼠4 0 ( 2 a ) ，小 鼠1 1 2 ( 1 5 a ) ，狗3 3 ( 1 a ) 。a d i 值：0 0 3 3 m g k g d 。 1 1 4 嘧菌酯、咯菌腈的色谱分析方法进展 嘧菌酯、咯菌腈残留的检测方法主要有气相色谱( g c ) 法、高效液相色谱( h p l c ) 法及 2 第一章文献综述 其色谱联片 法。这些色谱分析方法是根据嘧曲酯、咯曲腈的理化性质，利用有效的前处理技 术将其从复杂的样品中提取出来，并除去影响色谱分析的干扰物质，从而在现代色谱仪器上 准确地定性和定量分析目标化合物的含量。 1 1 4 1 嘧菌酯、咯菌腈残留的气相色谱法( g c ) 根据表1 嘧菌酯在有机溶剂中的溶解性质，嘧菌酯残留的g c 分析法所用的萃取剂主要 有二氯甲烷、丙酮【3 l 、乙酸乙酯或乙酸乙酯+ 正己烷【4 l 、丙酮+ 乙酸乙酯 5 1 、二氯甲烷+ 丙酮等 混合溶剂。g c 法所用的检测器主要是氮磷检测器( n p d ) 、微池电子捕获检测器( p - e c d ) 。 g i z a 等【6 j 以硅胶6 0 作固体填料，二氯甲烷丙酮( 9 ：1 ，v v ) 为洗脱剂，进行基质固相分 散萃取，分离苹果中的嘧菌酯( a z o x y s l r o b n ) 和肟菌酯( t r i f l o x y s t m b i n ) ，采用a g i l e n t 6 8 9 0 g c - - 一e c d ，配3 0 m x 0 3 2 m m ( l d ) 的l i p 1 柱检测其残留量。肟菌酯在0 0 1 一l n g 之间，嘧菌酯 在0 0 2 - 1 n g 之间的线性相关系数分别为0 9 9 9 5 和0 9 9 9 8 ，回收率为7 0 一1 0 0 ，肟菌酯检 出限c l o d ) 为0 0 1 m g k g ：嘧菌酯检出限( l o d ) 为0 0 2 m g k g 。薄海波r 7 l 等建立了甜瓜和 苹果中嘧菌酯残留量的气相色谱氮磷检钡u ( n p d ) 和气相色谱一微池电子捕获检测( - e c d ) 快速分析方法。因不存在干扰峰，样品不需净化，方法回收率均在8 5 7 一1 1 0 5 之间；苹 果在n p d 上的最低检出浓度为0 0 0 1 m g k g ，在# - e c d 上和甜瓜在两种检测器上均为 0 0 0 2 m g k g ，经t 检验统计分析，两种检测方法定量结果无显著性差异尹丰平等嗍报道了 。掣肿( 火焰热离子检测器) 测定嘧菌酯在黄瓜及土壤中残留的分析方法，样品用丙酮提取， 二氯甲烷萃取，硅胶和酸洗活性碳混合柱净化，用二氯甲烷，乙酸乙酯混合液( 7 ：3 ，v m 淋洗 最小检出浓度：黄瓜为0 0 0 1 2 5 m g k g ，土壤为0 0 0 2 8 3 m g k g 当添加浓度在0 0 1 一l m g k g 之 间，其回收率：黄瓜在8 9 2 6 - 9 5 6 9 之间，土壤在8 6 6 5 一1 0 1 6 8 之间。 由于咯菌腈较易溶于丙酮。g c 检测法所用的提取剂为丙酮+ 正己烷( 1 ：1 ，v v ) 、丙酮+ 石油醚p l 等混合提取剂，采用振荡或超声提取法，加正己烷可以降低溶剂的极性。2 0 世纪9 0 年代所用的检测器主要是氢火焰离子化检测器( f i d ) ，但需要添加1 ，3 ，5 - 三苯基苯或邻苯 二甲酸二辛酯等内标物，柱子用大内径厚膜毛细管柱，定量结果不够准确目前，g c 法通 常采用氮磷检测器o q p d ) 和质量选择检测器( m s d ) f l 田，利用n il ) 对含氮化合物高选择 性和m s 低灵敏度、高选择性的特点，只需对样品进行简单提取，不必净化就可以直接进样 检测【1 l j 1 1 4 2 嘧菌酯、咯菌腈残留的气相色谱一质谱联用法c g c - m s ) 利用质谱法的高鉴定能力和高选择性，g c - m s 联用法可以同时测定嘧菌酯或咯菌腈等多 残留杀菌剂。c h ux i a o - g a n g 等i l 列综合常规基质固相分散萃取和液液萃取的优点。建立了一 种大基质固相分散萃取、g c - m s 法同时测定苹果汁中嘧菌酯和咯菌腈在内的2 6 6 种农药残留 的检测方法该方法采用l o g 样品与2 0 9 硅藻土混合，混合物转入玻璃柱。用1 6 0 m i 正己烷 ，二氯甲烷( 1 ：1 ，v v ) 以5 m i m i n 的流速淋洗玻璃柱，在选择离子监控模式下检测。嘧菌 酯目标离子3 4 4 ，定性离子( m z ) 3 8 8 ，加标浓度0 0 4 m g k g 的平均回收率为1 0 5 2 ，r s d 为4 3 。最低检出限为8 舭g k g ：咯菌腈目标离子2 4 8 ，定性离子( m z ) 1 2 7 ，加标浓度0 0 1 m g k g 的平均回收率为9 7 0 ，r s d 为6 9 ，最低检出限为4 p g k g 。该多残留分析方法灵敏度高， 两南大学硕十学位论文 回收率好，可以快速分析人量样品。s 诅j n b a h e r 等l i ”研究j g c m s 同时测定果蔬中9 0 种不 同农药的多残留分析方法，前处理用丙酮涡流混合快速、微量提取，聚苯乙烯二乙烯基苯交 联固相萃取柱净化，毛细管柱为d b 一3 5 m s ( 3 0 m x o 2 5 n u n x o 2 5 m m ) 。嘧菌酯目标离子3 4 4 ， 定性离子( m z ) 3 8 8 ，4 0 3 = 咯菌腈目标离子2 4 8 ，定性离子( m z ) 1 5 4 ，1 8 2 ，橙中咯菌腈 加标0 0 2 ，0 2 ，0 5 m g k g 的回收率分别为9 8 + 4 ，9 2 3 ，9 7 2 。 c a b r a s 等【1 4 j 用g c - m s 测定葡萄汁、葡萄酒中咯菌腈等4 种农药时建立了一种简单快速 的在线微萃取法一步提取、分离，不需要净化，提取液浓缩5 倍，咯菌腈的检测限为0 0 1 m g k g ， 回收率为9 3 1 1 0 。而g o n z a l e z 等【l ”采用二氯甲烷，乙腈( 7 5 - 2 5 ，栅取，g c ：m s 法检测 白葡萄酿造中l o 种杀菌剂可以避免基质效应，检测限降低到1 - 1 阻g k g ，r s d 8 1 o ，与传统的h i l c 相当 1 4 柑橘采后杀菌剂残留降解动态研究进展 巴西人j o r 咎闻等研究了采后橙中浸泡或喷洒噻菌灵和抑霉唑的残留降解动态杀菌剂 处理前，先将橙分成两组。在2 5 0 c + _ 2 a c 8 5 + _ 5 r i - l 下贮藏3 天，期间第一组用乙烯处理， 另一组打蜡处理。在艄一+ 字a 5 r i i 条件下贮藏2 8 天，分别用g g 即d 、g c - f i d 检 测其中的杀菌剂残留含量浸泡处理后的橙中嚷菌灵、抑霉唑的残留水平分别为 0 1 0 - 0 7 6 m g k g ，3 6 5 - 1 3 8 5 m g k g ，喷洒处理的橙中噻菌灵、抑霉唑的残留水平分别为 1 5 7 5 6 0 m g k g 。0 9 7 - 1 7 1 m g k g 。乙烯和打蜡两个处理在贮藏期间没有发现有显著差异。所 有经噻菌灵、噻菌灵+ 抑霉唑( 1 0 0 0 + 1 0 0 0 m g k g ) 浸泡和喷洒处理的样品均符合杀菌剂残留 1 3 西南大学硕十学位论文 的法定最大限量值。金仁耀h 等通过柑橘园田间降解动态试验得出，多菌灵在柑橘中降解较 土壤中缓慢，半衰期可达3 5 d ，3 0 d 后采收，橘肉中的最高残留量为0 3 6 m g k g ，橘皮中为 1 7 1 9 m g k g 。欧盟规定多菌灵在柑橘上的最高残留限量值为5 0 m g k g ，而我国国家标准 g b l 4 8 7 0 1 9 9 4 限定多菌灵在蔬菜、水果中的最大残留限量为0 5 m g k g 。因此，多菌灵按推 荐剂量使用，对橘肉是安全的，可以食用，而橘皮则不宜食用或做饲料。贮藏柑橘上所用的 杀菌剂如施保克( 咪鲜胺) 5 7 1 、噻菌灵l s s l 、抑霉唑和双肌辛胺【5 9 i 残留降解的研究也有报道， 它们在柑橘果肉中的残留浓度对人体均是安全的。 s c h i r t a i ”l 等比较了用常规杀菌剂抑霉唑( i m z ) 浸泡处理与咯菌腈( f i 脚) 浸泡处理柑 橘控制青绿霉菌的效果，分析了浸泡水温度与果实上表皮超结构变化对杀菌剂残留累积的影 响，通过模拟无损伤塔罗克橙在1 3 2 条件下贮藏3 个星期，然后8 贮藏6 个星期，最后模拟 在2 0 ，2 个星期的模拟销售期( s m p ) 的试验，结果表明，f l u 控制腐烂的最佳处理条件 为5 0 3 2 ，1 0 0 m g l 浸泡或2 0 3 2 ，4 0 0 m g l 浸泡，果肉中的残留量仅为0 8 m g k g ，明显低于 u s a 制定的柑橘中m r l ( 1 0 m g k g ) 值。 s c h i m l 4 l 等研究了2 0 3 2 ( 2 或5 0 ，2 5 、5 0 或1 0 0 m g l 嘧菌酯( a z x ) 浸泡处理c v s t a r r u b y 柚，在2 3 2 ，9 0 - 9 5 相对湿度条件下贮藏3 个星期，再在8 ，- 8 5 相对湿度条件下贮藏 2 个星期，在8 0 相对湿度下模拟2 个星期销售期( s l v f l ) 研究发现，使用2 0 3 2 ，2 5 m g l a z x 浸泡处理，平均残留水平为0 1 1 m g 似全果) ，当a z x 浸泡浓度分别从2 5 到5 0 或1 0 0 m g l ， 残留浓度分别增加5 0 ，7 5 通过分析检测发现5 0 处理与2 0 处理后，a z x 的残留降 解动态模式相似。5 0 处理后a z x 的残留水平要比2 0 处理的残留水平提高6 3 一8 4 由 此他们建议，由于a z x 抗病原菌的机理与t b z 和i m z 不同，交替使用这些杀菌剂( t b z 。 m i z ，a z x ) 可以克服青绿霉菌对t b z 和i m z 的抗药性。 o r e n w l 等报道了采前使用嘧菌酯能有效控制某些柑橘病害。已发现嘧菌酯可有效预防盆 栽柠檬幼苗上的柑橘疮痂症和柚子幼苗上褐色蒂腐病菌( d a p o r t h ec t r ) 引起的黑心病 s c h i r r a t 4 l 等已经报道了采后s t a r r u b y 葡萄柚经嘧菌酯处理后的残留水平和防腐效果。国外已 有葡萄和莴苣田间试验和冷藏过程中咯菌腈的降解动态的研究【6 “。g a r a u l 9 1 等已经使用模型系 统阐明了温室西红柿中咯菌腈的降解机制为光解，且咯菌腈残留量低于意大利m r l 。 1 4 第二章引言 第二章引言 柑橘是世界第一大水果、我国第二大水果，柑橘采收后常由于操作粗放或贮藏管理不当， 造成损失约为2 0 - 3 0 ，多数是由于微生物侵染而腐烂。侵染柑橘果实的微生物多达1 0 余种， 但主要是柑橘青霉菌( p e n i c i l l i u mi t a l i c u mw e h m e r ) 和绿霉菌( p e n i c i l l i u md i g i t a t u ms a e c ) ，约占 柑橘果实总腐烂的7 0 - 8 0 因而控制柑橘青、绿霉菌的侵染及其发展对减少柑橘果实的 采后损失具有积极的作用。 柑橘青、绿霉病是青、绿霉菌从各种果实伤口侵入引起的，控制青、绿霉病的根本措施 是减少果实损伤和采果后及时使用杀菌剂处理。我国柑橘采后贮藏传统上采用多菌灵、托布 津和甲基托布津、仲丁胺、抑霉唑、噻菌灵等咪唑类杀菌剂，但长期使用发现霉菌对噻菌灵 和抑霉唑有抗药性或混用这些杀菌剂存在交互抗性作用。目前，实际生产中仍在使用传统的 抑霉唑、噻菌灵等杀菌剂。因此能够筛选出有效防治柑橘贮藏期病害的杀菌剂具有十分重要 意义。 嘧菌酯又名阿米西达是一种超广谱杀菌剂，对4 大类真菌所引起的霜霉病、