血红蛋白病初稿分生讨论ppt课件.ppt

血红蛋白病,第三组,世界卫生组织估计，全球约有15亿人携带血红蛋白病基因，并已将血红蛋白病列为严重危害人类健康的6种常见病之一。,是常见的遗传病之一，从分子结构到发病机理研究的均较清楚，是研究人类分子病的最好模型。,血红蛋白病Hemoglobinopathy：由于珠蛋白分子结构异常或合成量异常所引起的疾病。,原因：1）红细胞取材方便，来源丰富2）血红蛋白浓度高，不需纯化3）网织红细胞含有、珠蛋白mRNA，便于克隆其cDNA4）血红蛋白异常引起的疾病种类很多,2,异常血红蛋白病（血红蛋白分子结构异常）,珠蛋白生成障碍性贫血（珠蛋白肽链合成速率异常）,临床表现：溶血性贫血、高铁血红蛋白血症或因血红蛋白氧亲和力增高或减低而引起组织缺氧或代偿性红细胞所致紫绀。,3,血红蛋白简介hemoglobin(HGB),血红蛋白是一种结合蛋白四个亚基组成=2个亚基和2个亚基一个亚基=一条肽链+一个血红素,4,血红蛋白的一级结构：氨基酸排列顺序多肽链螺旋,二级结构：类链：（、）141个氨基酸类链:（、）146个氨基酸,5,三级结构,四级结构,6,肽链类型,链，由141个氨基酸残基构成，含较多组氨酸，其中87位（即F8）组氨酸与血红素铁的结合,类链，有、（结构与链相似）及5种,血红素：具有卟啉结构，卟啉分子中心与亚铁离子配位结合,7,正常人出生后三种正常Hb,血红蛋白A（HbA），由一对链和一对链组成（22），为正常人主要血红蛋白95以上,胎儿血红蛋白（HbF）由一对链和一对链组成（22）1左右,血红蛋白A2（HbA2），由一对链和一对链组成（22）23,8,链基因位于第16号染色体，、链基因位于第11号染色体，呈连锁关系,珠蛋白基因突变而致肽链的单个或多个氨基酸替代或缺如，导致珠蛋白分子结构改变，称为异常血红蛋白,珠蛋白基因的缺失或缺陷，导致珠蛋白链合成减少或缺乏，称为海洋性贫血,珠蛋白基因缺陷，导致珠蛋白链合成减少或缺乏，称为海洋性贫血,9,异常血红蛋白病,异常Hb病：基因突变导致珠蛋白结构改变例如：镰状细胞贫血,地中海贫血：基因突变导致珠蛋白肽链合成缺乏或合成量异常如、地贫,10,异常血红蛋白病,由于珠蛋白基因突变导致珠蛋白肽链结构异常，如有临床表现者称为异常血红蛋白病。,主要类型：（1）镰状细胞病（2）不稳定血红蛋白病（3）血红蛋白M病（4）氧亲和力改变的血红蛋白病,11,镰状细胞病,临床表现：血管阻塞的继发症状：一过性剧痛（腹痛、关节痛）急性大面积组织损伤：心梗，肺、肾脏损伤；慢性溶血性贫血,12,镰状红细胞贫血分子基础,G,13,14,限制性酶切图谱分析,15,PCR分析,设计引物PCR扩增珠蛋白基因第6密码子区域110bp，再用限制性内切酶MstII消化，进行琼脂糖凝胶电泳,正常：产生54bp和56bp两个片段,异常：DNA片段不被酶切，仍为110bp,16,PCR-ASO探针杂交,17,二、地中海贫血珠蛋白链合成数量不平衡,最初发现在地中海地区居住的人群发病率特别高而得名，实际上世界各地都有发生，非洲和东南亚也比较常见。,珠蛋白基因缺失/突变导致某种珠蛋白链合成障碍造成链和链合成数量不平衡，引起的溶血性贫血称为地中海贫血。,18,地中海性贫血,19,地中海贫血,地中海贫血由于珠蛋白基因的缺失或缺陷使链的合成受到抑制而引起的溶血性贫血。,地中海贫血由于珠蛋白基因的缺失或缺陷使链的合成受到抑制而引起的溶血性贫血。,基因突变是引起地中海贫血的主要原因,基因缺失是引起地中海贫血的主要原因,20,地中海贫血,珠蛋白基因点突变（单个碱基取代、插入或缺失）（绝大多数）,转录受阻、mRNA剪切加工错误、翻译无效,合成不稳定珠蛋白,珠蛋白链不平衡，溶血性贫血,21,患儿颅骨及面颊部骨骼增大，头颅变大，额部隆起，颧高，鼻梁塌陷，两眼距离增宽，眼睑浮肿，形成地中海贫血的特殊面容。,22,基因检测方法及分子基础,-140473nt，第17位碱基17AT突变时中国人一种常见突变类型,PCR-RFLP,613bpDNA片段,正常：可产生455bp片段,异常：产生72bp和373两个片段,MaeI酶切,产生新的MaeI酶切位点,23,1.未酶解片段2.A/A3.A/T4.T/T,出现373bp片