血液学一般检查实验课PPT课件.ppt

血液学一般检查,1,【目的】掌握显微镜红细胞(redbloodcellcount,RBC)计数的原理及操作方法。【原理】用等渗稀释液将血液以一定倍数(200倍)稀释并充入计数池，在显微镜下计数一定区域内的红细胞数量，经换算求出每升血液中的红细胞数量。,2,【器材】试管、试管架。2ml吸管、吸耳球。微量吸管、胶吸头、干脱脂棉。玻璃棒。改良Neubauer计数板、盖玻片、绸布。显微镜。,3,Micropipettes,Markers:10ul20ulWarningline,4,【试剂】红细胞稀释液：枸椽酸钠1.0g，36%甲醛液1.0ml，氯化钠0.6g，加蒸馏水至100ml，混匀，过滤两次后备用。【标本】EDTA-K2抗凝静脉血或末梢血。,5,【操作】1加稀释液红细胞稀释液2ml于小试管。2采血及加血颠倒混匀样本，用微量吸管吸取全血10l，擦去管尖外部余血。将吸管插入小试管中红细胞稀释液的底部，轻轻放出血液，并吸取上层红细胞稀释液清洗吸管23次。3充池充入计数池，放置23min。4计数将光圈调到最小，光线调暗，用低倍镜找到计数区和格子线，用高倍镜计数中央大方格内4角和正中，共5个中方格内的红细胞数。5计算,6,7,8,9,红,红,红,红,红,10,11,12,13,红细胞数/L=N/5*25*201*10*10E6=(N/100)*1012【参考值】成年人：男性（4.095.74）1012/L，女性(3.685.13)1012/L。新生儿：(5.26.4)1012/L。婴儿：(4.04.3)1012/L。儿童：(4.04.5)1012/L。,五个中方格计数和求均值乘以中方格数量乘以稀释倍数,将0.1微升体积内的细胞数换算成升,14,【注意事项】,1器材2试剂3标本4稀释液及稀释倍数5采血6充池7计数,15,白细胞计数,【目的】掌握显微镜法白细胞计数（whitebloodcellcount）的方法。【原理】采用白细胞稀释液将血液稀释一定的倍数，同时破坏溶解红细胞。将稀释的血液注入血细胞计数板，在显微镜下计数一定体积内的白细胞数，经换算即可求出每升血液中的白细胞数量。,16,【器材】同红细胞计数,0.5ml吸管【试剂】白细胞稀释液：2冰乙酸溶液【标本】EDTA-K2抗凝静脉血或末梢血。,17,【操作】,1加稀释液吸取白细胞稀释液0.38ml小试管中。2采血及加血颠倒混匀样本，用微量吸管吸取全血20l，擦去管尖外部余血。将吸管插入小试管中白细胞稀释液的底部，轻轻放出血液，并吸取上层白细胞稀释液清洗吸管23次。3混匀待细胞悬液完全变为棕褐色。4充池再次将小试管中的细胞悬液混匀。吸取细胞悬液1滴，注入计数板的计数池中，室温下静置23min，待白细胞完全下沉后再做白细胞计数。5计数将光圈调到最小，光线调暗，用低倍镜找到计数区和格子线，用低倍镜（或高倍镜）下计数四角4个大方格内的白细胞总数。,18,19,6计算白细胞数/L=（N/4）*20*10*10E6=(N/20)*109【参考值】成人：（410）109/L儿童：（1520）109/L；6个月2岁：（1112）109/L。新生儿：（1520）109/L,四个大方格计数和求均值后乘以稀释倍数,将0.1微升体积内的细胞数换算成升,20,【注意事项】,类似于红细胞计数。应注意白细胞较红细胞少，因此充池更加注重均匀。稀释倍数，因细胞多少而异。,21,试验结束后,将用过的标本、盖玻片、微量吸管和纸屑等丢到大垃圾桶将玻