（分析化学专业论文）基于聚合物生物纳米复合材料的电化学生物传感研究.pdf

摘要 生物活性分子的固定是研制生物传感器的关键环节，寻找简便有 效的固定方法以及研制具有高生物兼容性的固定材料，对改善生物传 感性能至关重要。随着纳米技术的迅速发展，各种纳米材料已广泛用 于生物传感器的研制。制备多功能纳米复合材料，并藉此研制具有高 灵敏度、高选择性的生物传感方法备受关注。本文中我们制备了几种 金属金属氧化物聚合物酶纳米复合材料，并成功用于高敏葡萄糖生 物传感和凝血酶适配体传感研究。主要工作如下： 1 对电化学生物传感器的分类、生物活性物质的固定方法、纳 米材料的分类和特性及其在生物传感中的应用进行了简要综述，并在 此基础上提出了本论文的基本构思。 2 采用一锅原位化学氧化法在含葡萄糖氧化酶( g o x ) 、f e 3 0 4 一a u 纳米复合材料和1 , 6 己二硫醇( h d t ) 的水相悬浊液中，通过对苯醌( b q ) 的氧化作用制备了f e 3 0 4 - a u - p o l y ( h d t ) ( p h d t ) 一g o x 新型磁性聚合 物生物纳米复合材料( m p b n c s ) ，可高活性、高负载量地固定g o x 。 采用透射电子显微镜、扫描电子显微镜和紫外可见分光光度法表征了 所制m p b n c s 。采用简便有效的磁性分离固定法将m p b n c s 固定于 金磁电极上，所制备的葡萄糖生物传感器灵敏度高( 1 1 0 衅c m - 2 删订1 ) ，检测限低( o 3 3 州，s n = 3 ) ，响应时间短( 5s ) ，抗干扰能力 强，稳定性好。该生物传感器的性能优于常规电聚合法和化学预氧化 电聚合单体法所制备的传感器。 3 采用一锅原位化学氧化法制备聚多巴胺( p d a ) - g o x 纳米复合 物，通过生化原位合成法在所制p d a - ：g o x 纳米复合物表面修饰金纳 米粒子( a u n p s ) ，再藉a u n p s 的表面催化作用，以抗坏血酸( a a ) 作还 原剂还原h 2 p t c l 6 为铂纳米粒子( p t n p s ) ，制备了新型双金属聚合物生 物纳米复合材料：p d a - g o x - a u n p s - p t n p s 纳米复合物。将此复合 物滴干在金电极表面制备了灵敏度高( 1 9 5 衅c m - 2 神汀1 ) 、检测限低 ( 0 2 1 州，s n = 3 ) 、响应时间短( 5s ) 、抗干扰能力强和稳定性好的 葡萄糖安培传感器。 4 利用原位化学氧化生物化学合成法制备p d a g o x - a u n p s 纳米复合物，将巯基化凝血酶适配体组装固定于该复合物修饰的金电 极表面，研制了凝血酶适配体传感器。其基本检测原理是基于凝血酶 与其适配体的特异性结合可抑制该g o x 电极的响应电流。该传感器 的线性范围宽( 1 - 4 0r i m ) ，检测限低( o 1 2 5n m ，s n = 3 ) ，响应时间短( 1 0 s ) 。 关键词：电化学生物传感，聚合物生物纳米复合材料( p b n c s ) ，磁性 纳米粒子，1 , 6 - 己二硫醇( h d t ) ，多巴胺( d a ) ，葡萄糖氧化酶( g o x ) ， 凝血酶适配体( t b a ) ，对苯醌( b q ) ，葡萄糖安培传感器，适配体传感 器 i i a b s t r a c t t h ei m m o b i l i z a t i o no fb i o m o l e c u l e si st h ek e ys t e pi n c o n s t r u c t i n ga b i o s e n s o r i m m o b i l i z a t i o no fb i o m o l e c u l e sw i t he f f e c t i v em e t h o d sa n d h i 曲l yb i o c o m p a t i b l em a t e r i a l si s e s s e n t i a lt oi m p r o v et h eb i o s e n s i n g p e r f o r m a n c e w i t ht h er a p i dd e v e l o p m e n to fn a n o t e c h n o l o g y , av a r i e t yo f n a n o m a t e r i a l sh a v e b e e nu s e dt oc o n s t r u c tv a r i o u sb i o s e n s o r s p r e p a r a t i o no fm u l t i f u n c t i o n a ln a n o c o m p o s i t em a t e r i a l si si m p o r t a n tt o d e v e l o pab i o s e n s o rw i t hh i g hs e n s i t i v i t ya n ds e l e c t i v i t y i nt h i st h e s i s ，w e p r e p a r e ds e v e r a lm e t a l ( o rm e t a lo x i d e ) - p o l y m e r - e n z y m en a n o c o m p o s i t e m a t e r i a l sf o r h i g hp e r f o r m a n c eg l u c o s eb i o s e n s i n g a n dt h r o m b i n a p t a s e n s i n g t h em a i nc o n t e n t sa r ea sf o l l o w s ， 1 t h ec l a s s i f i c a t i o no fe l e c t r o c h e m i c a lb i o s e n s o r s ，t h ei m m o b i l i z a t i o n m e t h o do ft h eb i o m o l e c u l e s ，t h ec l a s s i f i c a t i o na n dc h a r a c t e r i s t i c so f n a n o - m a t e r i a l s ，a sw e l la st h e i ra p p l i c a t i o ni nb i o s e n s i n g ，h a v eb e e n r e v i e w e d 2 o n e p o tc h e m i c a lo x i d a t i o no f1 , 6 - h e x a n e d i t h i o l ( h d t ) i ni t s a q u e o u ss u s p e n s i o nc o n t a i n i n gg l u c o s eo x i d a s e ( g o x ) a n df e 3 0 4 - a u n a n o c o m p o s i t e sb y1 , 4 - b e n z o q u i n o n ey i e l d sn o v e lf e 3 0 4 - a u - p o l y ( h d t ) ( p h d t ) - g o xm a g n e t i cp o l y m e r i cb i o n a n o c o m p o s i t e s ( m p b n c s ) w i t h g o xi m m o b i l i z e da th i g hl o a da n dh i g ha c t i v i t y t r a n s m i s s i o n s c a n n i n g e l e c t r o n m i c r o s c o p y a n du v - s s p e c t r o p h o t o m e t r y a r eu s e dt o c h a r a c t e r i z et h e p r e p a r e d m p b n c s af e 3 0 4 - a u - p h d t - g o x a u e l e c t r o d eh a sb e e n p r e p a r e db y f a c i l ea n de f f i c i e n t m a g n e t i s m s e p a r a t i o n i m m o b i l i z a t i o n o ft h em p b n c so n t oa na u m a g n e t i s m e l e c t r o d ef o rb i o s e n s i n go fg l u c o s e ，w h i c he x h i b i t sh i 曲 d e t e c t i o ns e n s i t i v i t y ( 110 肚c m - - 2m 盯1 ) ，l o wd e t e c t i o nl i m i t ( o 3 3 州， s n = 3 ) ，r a p i dr e s p o n s et i m e ( 5s ) ，a n de x c e l l e n ta n t i i n t e r f e r e n ta b i l i t y 1 1 i a n ds t a b i l i t y t h eb i o s e n s o rp e r f o r m sb e t t e rt h a nt h o s eb a s e do nt h e e x i s t i n gp r o t o c o l so fc o n v e n t i o n a le l e c t r o p o l y m e r i z a t i o na n dc h e m i c a l p r e o x i d a t i o n e l e c t r o p o l y m e r i z a t i o no fm o n o m e r 3 n o v e lb i m e t a l l i c p o l y m e r i cb i o n a n o c o m p o s i t e s ( p b n c s ) o f p o l y d o p a m i n e ( p d a ) ，a u n p s - p t n p s b i m e t a l l i c n a n o p a r t i c l e s w e r e p r e p a r e d f i r s t ，w ep r e p a r e d p d a g o x n a n o c o m p o s i t e s w i t h h i g h - l o a d a c t i v i t yg o xe n t r a p p e dv i ao n e p o tc h e m i c a lp r o t o c o l ，n a m e l y ， m i x i n gb i o g e n i cd o p a m i n e ( d a ) a sam o n o m e r ，g o xa s am o d e l m o l e c u l e ，a n db qa sa no x i d i z i n gr e a g e n tt ot r i g g e rd ap o l y m e r i z a t i o n t oa l l o wo n e p o tc h e m i c a ls y n t h e s i s ；s e c o n d ，a un a n o p a r t i c l e s ( a u n p s ) w a s g e n e r a t e d v i ai ns i t ub i o c h e m i c a l g e n e r a t i o np r o t o c o l ，y i e l d e d p d a - g o x - a u n p sn a n o c o m p o s i t e s ；t h e l a s t ，w es y n t h e s i z e d t h e p d a - g o x - a u n p s - p t n p sn a n o c o m p o s i t e sb yh 2 p t c l 6r e d u c t i o no n t o t h ea u n p ss u r f a c e sw i t ht h ea u n p so fp d a - g o x _ a u n p sa st h es e e d a n da s c o r b i ca c i da st h er e d u c t a n t t h ep b n c sb a s e db i o s e n s o rv i a d i p - d r ym e t h o de x h i b i t sh i g hd e t e c t i o ns e n s i t i v i t y ( 19 5 衅c m - zm m - - 1 ) ， l o wd e t e c t i o nl i m i t ( o 21 “m ，s n = 3 ) ，r a p i dr e s p o n s et i m e ( r s a t r a 伊d a g o x a l 】卜】_ p s a u 4 8 基于聚合物生物纳米复合材料的电化学生物传感研究 t h r o m b i n b s a t b a p d a g o x - a u n p s a u ，表明我们成功实现了每步 修饰，且各步修饰物均对界面电子传递有阻碍作用。 f i g 4 4 c y c l i cv o l t a m m e t r yi nap b ss o l u t i o n ( p h7 4 ) c o n t a i n i n g1 0 0 m mi ( 3 f e ( c n ) 6 - t - 1 0 0m mk 4 f e ( c n ) 6 】a tv a r i o u ss u r f a c e s ，n a m e l y , p d a - g o x - a u n p s( c u r v e1 ) ，t b a p d a g o x a u n p s ( c u r v e2 ) b s a t b a p d a g o x a u n p s ( c u r v e 3 1a n d t h r o m b i b s a t b a p d a - g o x - a u n p s ( c u r v e4 、m o d i f i e da ue l e c t r o d e s s c a nr a t e ：1 0 0m v s 4 3 3 适配体传感器的性能 图4 5 是将b s a t b a p d a g o x - a u n p s a u 电极置于不同浓度 的凝血酶溶液中培育2h 后对2m m 葡萄糖的电流响应曲线。图4 - 6 是电极在凝血酶溶液中培育前后电流响应的差值( a 0 对凝血酶浓度的 标准曲线。从图中可以看出，该适配体传感器的线性范围较宽( 1 n m 4 0r i m ) ，检测限较低( 鲫= 3 ) 达到o 1 2 5n m ，响应时间短( 1 0s ) ， 与采用其他方法研制的凝血酶适配体传感器相比具有一定的优势【2 ，2 3 , 1 4 1 - 1 4 5 。 4 9 硕士学位论文 弹 e q 鼍 ： t ，s f i g 4 - 5 c h r o n o a m p e r o m e t r i c r e s p o n s e s o f b s a 1 7 b a p d a g o x a u n p s a ue l e c t r o d ea f t e ri n c u b a t ew i t hv a r i o u s c o n c e n t r a t i o n so ft h r o m b i ni np b s1s o l u t i o na t0 7vt o2m m g l u c o s e n e o 、 习 c 价m m 晰n m f i g 4 - 6c a l i b r a t i o nc u r v ef o rt h r o m b i na p t a s e n s o r 5 0 基于聚合物生物纳米复合材料的电化学生物传感研究 为了说明凝血酶在电极表面的非特异性吸附情况，我们制备了无 t b a 存在时的b s a p d a - g o x - a u n p s a u 电极，并将它在10 0n m 的 凝血酶溶液中培育2h ( n = 3 ) 。a i 仅为t b a 存在时 b s t b a p d a - g o x - a u n p s a u 电极的0 6 5 ，实验结果说明凝血 酶主要是通过与t b a 的特异性作用结合到电极表面的，并且它在电 极表面的非特异性吸附可予忽略。 n e o 司 f i g 4 - 7 t h ec h a n g e s o ft h e r e s p o n s ec u r r e n t ( a 0 o ft h e b s a t b a p d a g o x - a u n p s a ue l e c t r o d ei np b s1s o l u t i o na t0 7v t o2m m g l u c o s e ，b e f o r ea n da f t e ri n c u b a t i o n 、i t l l10p mb s a ，10p m h s a ，1o p mf i b r i n o g e n , 10 mi g ga n t i b o d y , a n d10 0n mt h r o m b i n , r e s p e c t i v e l y 为考察凝血酶适配体传感器的选择性， t b a p d a - g o x - a u n p s a u 电极置于1 0 0 倍于凝血酶浓度的各种蛋白 质中。图4 7 是t b a p d a - g o x - a u n p s a u 电极在b s a 、h s a 、i g g 、 纤维蛋白原和凝血酶溶液中培育前后对2m m 葡萄糖电流响应的差值 ( a i ) 。从图中可以看出异种蛋白的z 均低于凝血酶的8 ，这说明该 凝血酶适配体传感器对b s a 、h s a 、i g g 和纤维蛋白原的非特异性吸 附作用不明显，但对凝血酶有很高的选择性。这主要是由于凝血酶适 硕士学位论文 配体能够高特异性、高亲和性的结合凝血酶目标分子，极大的阻碍了 葡萄糖催化氧化反应的传质过程，以及采用b s a 有效的封闭了电极 表面的非特异性吸附位点，防止了蛋白质在电极表面的非特异性吸 附。 本章提出了研制凝血酶适配体传感器的新方法。利用原位化学氧 化生物化学合成法制备p d a g o x a u n p s 纳米复合物，将巯基化凝 血酶适配体组装固定于该复合物修饰的金电极表面，研制了信号衰减 型的凝血酶适配体传感器，得到了令人满意的效果。这种方法有望广 泛用于生物传感、生物电子和临床检测等领域。 5 2 基丁聚合物生物纳米复合材料的电化学生物传感研究 结论和展望 本文在综述国内外有关电化学生物传感器和纳米技术方面文献 的基础上，制备了几种金属金属氧化物聚合物一酶纳米复合材料，并 成功用于高敏葡萄糖生物传感和凝血酶适配体传感研究。主要结论如 下： 1 采用一锅化学氧化法制备了f e 3 0 4 叫札一p h d t g o x 新型磁性 聚合物生物纳米复合材料( m p b n c s ) ，可高活性、高负载量地固定 g o x 。并采用简便有效的磁性分离固定法将m p b n c s 固定于金磁电 极上，所制备的葡萄糖生物传感器灵敏度高( 11 0 心c m 2m m - 1 ) ，检 测限低( o 3 3l a m ，s n = 3 ) ，响应时间短( 5s ) ，抗干扰能力强，稳定 性好。 2 制备了基于金纳米粒子( a u n p s ) 铂纳米粒子( p t n p s ) 的新型 p d a g o x a u n p s p t n p s 双金属聚合物生物纳米复合材料。将此纳米 复合材料在金电极表面滴干成膜制备的葡萄糖生物传感器灵敏度高 ( 1 9 5 衅c m - 2i n d 汀1 ) ，检测限低( 0 2 1g m ，s n = 3 ) ，响应时间短( 5s ) ， 抗干扰能力强，稳定性好。 3 利用原位化学氧化生物化学合成法制备了p d a g o x a u n p s 纳米复合物，将巯基化凝血酶适配体组装固定于该复合物修饰的金电 极表面，研制了信号衰减型的凝血酶适配体传感器。该传感器的线性 范围宽( 1n m 4 0n m ) ，检测限低( o 1 2 5n m ，s n = 3 ) ，响应时间短( 1 0 s ) 。 综上所述，采用原位化学氧化合成法制备聚合物生物纳米复合材 料，制备过程简单，可高活性、高负载量地固定酶分子，并可通过生 物、化学的方法进行后续修饰。以此为基础所制备的生物传感器，性 硕士学位论文 能优越。这种聚合物生物纳米复合材料有望在生物传感、生物催化和 生物燃料电池等领域获得广泛应用。 【2 】 【3 】 【4 】 【5 】 【6 】 【7 】 【8 】 【9 】 参考文献 l c c l a r k , c l y o n s e l e c t r o d es y s t e m sf o rc o n t i n u o u sm o n i t o r i n gi n c a r d i o v a s c u l a rs u r g e r y 【j 】a n n n e wy o r ka c a d s c i ，1 9 6 2 ，1 0 2 ：2 9 4 5 r p o l s k y , r g i l l ，l k a g a n o v s k y , i w i l l n e r n u c l e i ca c i d f u n c t i o n a l i z e dp t n a n o p a r t i c l e s ：c a t a l y t i cl a b e l sf o rt h ea m p l i f i e de l e c t r o c h e m i c a ld e t e c t i o no f b i o m o l e c u l e s 【j 】a n a l c h e m ，2 0 0 6 ，7 8 ( 7 ) ：2 2 6 8 2 2 7 1 l b a h s h i ，m f r a s c o n i ，r t v e r e d ，0 y e h e z k e l i ，i w i l l n e r f o l l o w i n gt h e b i o c a t a l y t i ca c t i v i t i e so fg l u c o s eo x i d a s eb ye l e c t r o c h e m i c a l l yc r o s s l i n k e d e n z y m e p tn a n o p a r t i c l e sc o m p o s i t ee l e c t r o d e s j 】a n a l c h e m ，2 0 0 8 ，8 0 ： 8 2 5 3 8 2 5 9 m k k u m a r , s r a m a p r a b h u n a n o s t r u c t u r e dp tf u n c t i o n l i z e dm u l t i w a l l e d c a r b o nn a n o t u b eb a s e dh y d r o g e ns e n s o r 阴j p h y s c h e m b ，2 0 0 6 ，110 ： 1 1 2 9 1 1 1 2 9 8 yf u ，pl i ，q x i e ，x x u , l l e i ，c c h e n ，c z o u , w ：d e n g ，s y a o o n e - p o t p r e p a r a t i o no fp o l y m e r - e n z y m e - m e t a l l i cn a n o p a r t i c l ec o m p o s i t ef i l m s f o r 1 1 i g h p e r f o r m a n c eb i o s e n s i n go fg l u c o s ea n dg a l a c t o s e 叨a d v f u n c t m a t e r ， 2 0 0 9 ，1 9 ( 11 ) ：17 8 4 1 7 9 1 h g u ，k x u , c x u ，b 。x u b i o f u n c t i o n a lm a g n e t i cn a n o p a r t i c l e sf o rp r o t e i n s e p a r a t i o na n dp a t h o g e nd e t e c t i o n j 】c h e m c o m m u n ，2 0 0 6 ：9 4 1 - 9 4 9 y c f u ，c c h e n ，q j x i e ，x h x u , c z o u , q m z h o u ，l t a n ，h t a n g ，y yz h a n g s z y a o i m m o b i l i z a t i o no fe n z y m e st h r o u g ho n e - p o tc h e m i c a l p r e o x i d a t i o na n de l e c t r o p o l y m e r i z a t i o n o fd i t h i o l si n e n z y m e c o n t a i n i n g a q u e o u ss u s p e n s i o n st od e v e l o pb i o s e n s o r s 谢t hi m p r o v e dp e r f o r m a n c e j 】 a n a l c h e m ，2 0 0 8 ，8 0 ( 15 ) ：5 8 2 9 5 8 3 8 y c f u ，c z o u ，q j x i e ，x h x u ，c c h e n ，w ：f d e n g ，s z y a o h i g h l y s e n s i t i v eg l u c o s eb i o s e n s o rb a s e do no n e p o tb i o c h e m i c a lp r e o x i d a t i o na n d e l e c t r o p o l y m e r i z a t i o n o f 2 , 5 d i m e r c a p t o l ，3 ，4 - t h i a d i a z o l e i n g l u c o s e o x i d a s e c o n t a i n i n ga q u e o u ss u s p e n s i o n 川j p h y s c h e m 、b ，2 0 0 9 ，l l3 ( 5 ) ： 1 3 3 2 1 3 4 0 h p a t e l ，x l i ，h i k a r a n a m p e r o m e t r i cg l u c o s es e n s o r sb a s e do nf e r r o c e n e c o n t a i n i n gp o l y m e r i ce l e c t r o nt r a n s f e rs y s t e m s ap r e l i m i n a r yr e p o r t 【j 】b i o s e n s 5 5 【1 0 】 1 1 】 【1 2 】 1 3 】 1 4 】 【1 5 】 【1 6 】 【1 7 】 【1 8 】 【1 9 】 【2 0 】 b i o e l e c t r o n ，2 0 0 3 ，1 8 ：1 0 7 3 - 1 0 7 6 s k o i d e ，k y o k o y a m a e l e c t r o c h e m i c a lc h a r a c t e r i z a t i o no fa l le n z y m e e l e c t r o d eb a s e do naf e r r o c e n e c o n t a i n i n gr e d o xp o l y m e r 【j 】j e l e c t r o a n a l c h e m ，1 9 9 9 ，4 6 8 ：1 9 3 2 0 1 d p a n ，j c h e n ，l n i e ，w t a o ，s y a o a na m p e r o m e t r i cg l u c o s eb i o s e n s o r b a s e do np o l y ( o a m i n o p h e n 0 1 ) a n dp r u s s i a nb l u ef i l m sa tp l a t i n u me l e c t r o d e 叨 a n a l b i o c h e m ，2 0 0 4 ，3 2 4 ：11 5 - 1 2 2 r g a r j o n y t e ，a m a l i n a u s k a s a m p e r o m e t r i cg l u c o s eb i o s e n s o r sb a s e do n p r u s s i a nb l u e a n dp o l y a n i l i n e g l u c o s eo x i d a s em o d i f i e de l e c t r o d e s 【j 】b i o s e n s b i o e l e c t r o n ，2 0 0 0 ，15 ：4 4 5 4 51 yl y a o ，k k s h i u l o wp o t e n t i a ld e t e c t i o no fg l u c o s ea tc a r b o nn a n o t u b e m o d i f i e dg l a s s yc a r b o ne l e c t r o d e 、析t l le l e c t r o p o l y m e r i z e dp o l y ( t o l u i d i n eb l u e o ) f i l m 【j 】e l e c t r o c h i m a c t a , 2 0 0 7 ，5 3 ：2 7 8 - 2 8 4 c c a i ，j c h e n d i r e c te l e c t r o nt r a n s f e ro fg l u c o s eo x i d a s ep r o m o t e db yc a r b o n n a n o t u b e s 【j a n a l b i o c h e m ，2 0 0 4 ，3 3 2 ：7 5 - 8 3 ep a l m i s a n o ，pc tz a m b o n i n ad i s p o s a b l e ，r e a g e n t l e s s ，t h i r d g e n e r a t i o n g l u c o s e b i o s e n s o rb a s e do no v e r o x i d i z e d p o l y ( p y r r o l e ) t e t r a t h i a f u l v a l e n e t e t r a c y a n o q u i n o d i m e t h a n ec o m p o s i t e 们a n a l c h e m ，2 0 0 2 ，7 4 ：5 9 1 3 5 9 18 c r u a n ，l y a n g ，yl i i m m u n o b i o s e n s o rc h i p sf o rd e t e c t i o no fe s c h e r i c h i a c o l i0 15 7 ：h 7u s i n ge l e c t r o c h e m i c a li m p e d a n c es p e c t r o s c o p y 叨a n a l c h e m ， 2 0 0 2 ，7 4 ( 18 ) ：4 814 4 8 2 0 h d o n g ，c m l i ，w ：c h e n ，q z h o u , h x z e n g ，j h t l u o n g s e n s i t i v e a m p e r o m e t r i ci m m u n o s e n s i n gu s i n gp o l y p y r r o l e p r o p y l i c a c i df i l m sf o r b i o m o l e c u l ei m m o b i l i z a t i o n 【j 】a n a l c h e m ，2 0 0 6 ，7 8 ( 2 1 ) ：7 4 2 4 7 4 3 1 a p r e e c h a w o r a p u n ，t a i v a n d i n i ，a s u z u k i ，a f u ji s h i m a , o c h a i l a p a k u l ，y e i n a g a d e v e l o p m e n to fa m p e r o m e t r i ci m m u n o s e n s o ru s i n gb o r o n d o p e d d i a m o n d 埘t hp o l y ( o a m i n o b e n z o i ca c i d ) 叨a n a l c h e m ，2 0 0 8 ，8 0 ( 6 ) ： 2 0 7 7 - 2 0 8 3 d t a n g ，j r e n i ns i t ua m p l i f i e de l e c t r o c h e m i c a li m r n u n o a s s a yf o r c a r c i n o e m b r y o n i ca n t i g e nu s i i l gh o r s e r a d i s hp e r o x i d a s e e n c a p s u l a t e dn a n o g o l d h o l l o wm i c r o s p h e r e sa sl a b e l s 【j 】a n a l c h e m ，2 0 0 8 ，8 0 ：8 0 6 4 8 0 7 0 y w u , c c h e n , s l i u e n z y m e - f u n c t i o n a l i z e ds i l i c an a n o p a r t i c l e sa ss e n s i t i v e l a b e l si nb i o s e n s i n g j 】a n a l c h e m ，2 0 0 9 ，8 1 ：1 6 0 0 1 6 0 7 5 6 【2l 】gl a i ， f y a h ， h j u d u a l s i g n a la m p l i f i c a t i o n o f g l u c o s e o x i d a s e f u n c t i o n a l i z e dn a n o c o m p o s i t e sa sat r a c el a b e lf o ru l t r a s e n s i t i v e s i m u l t a n e o u sm u l t i p l e x e de l e c t r o c h e m i c a ld e t e c t i o no ft u m o rm a r k e r s 【j a n a l c h e m ，2 0 0 9 ，81 ( 2 3 ) ：9 7 3 0 9 7 3 6 2 2 】r c u i ，h h u a n g ， z n ，d g a o ， j j z h u h o r s e r a d i s h p e r o x i d a s e - f u n c t i o n a l i z e dg o l dn a n o p a r t i c l e l a b e lf o r a m p l i f i e d i m m u n o a n a l y s i sb a s e do ng o l dn a n o p a r t i c l e s c a r b o nn a n o t u b c sh y b r i d s m o d i f i e db i o s e n s o r j 】b i o s e n s b i o e l e c t r o n ，2 0 0 8 ，2 3 ：16 6 6 16 7 3 【2 3 】yw a n g ，b l i u c o n j u g a t e dp o l y e l e c t r o l y t e s e n s i t i z e df l u o r e s c e n td e t e c t i o no f t h r o m b i ni nb l o o ds e r u mu s i n ga p t a m e r - i m m o b