（参考课件）血液检测原理.ppt

血液检测原理,Sysmex学术应用部曹文静,2,Sysmex血液分析仪家族,XE-2100,XE-2100D/L,KX-21N,K-4500,pocH-100i,XT-1800i,XT-2000i,3-partDiff,Lowend5-partDiff,Mid-end5-partDiff,High-end5-partDiff,XE-alpha,HST,XS-800i,XE-5000,XN,五分类仪器归总：,3,规格：尺寸（机组）,：搭载ON：软件控制下的选择方式：“选择”OFF：软件控制下的选择方式：“无选择”：作为参考参数汇报,WB:wholeblood,PD:prediluted,BF:bodyfluid,灵活地适应顾客的要求准备分析功能不同的2种型号（XN-10、XN-20）采用设备时，通过软件的变更，可将XN-20设定为2组机型XN-10设定为4组机型,搭配原则：遵循左高右低,4,XN2000/3000机型搭配要求,XN9000机型搭配原则,可搭配机型,不可搭配机型,要符合左高右低搭配的原则，同类型配置原则,5,吸样量所需血液量全血模式低值白细胞模式稀释模式4体液模式,进样器检测定1手动测定微量测定2微量测定3（微量采血管测定）微量测定2微量测定4（微量采血管测定）手动测定微量测定2微量测定3（微量采血管测定）,88L88L88L88L70L70L88L88L88L,1mL1mL0.3mL160L0.3mL140L（稀释后）1mL0.3mL160L,1进样器测定：试管架自动传送的进样器测定。2微量测定：为了减少最低体积（deadvolume）、打开采血管盖进行的手动测定。3微量测定（微量采血管测定）：使用微量采血管进行的检测。开盖测定。4稀释模式：将血液7倍稀释后进行测定的模式。,规格：吸样量所需血液量,6,以XE2100为例，检测原理、通道、参数信息,检测模块,检测原理,检测通道,检测信息,RBC/PLT,WBC,鞘流原理-DC检测-,流式细胞原理,RBC/PLT通道,PLT直方图,RBC直方图,WBC散点图,检测参数,PLT,RBC,WBC/Ba通道,HPC,HGB,HGB通道,比色法,HGB,全血标本,IMI通道,DIFF通道,NRBC通道,RET通道,DIFF散点图,WBCBaso,NRBC,RETPLT-OIRF,NRBC散点图,RET散点图,LymphMonoNeut+BaEo,RET,流式细胞原理,RF/DC,7,检测通道,RBC/PLT,XN仪器检测通道的改善,RET,DIFF,IMI,WNR,PLT-F低值血小板,WPC,8,1.半导体激光+流式细胞,半导体激光提供的细胞信息FSC前向散射光：细胞大小SSC侧向散射光：细胞内容物复杂程度SFL侧向荧光：细胞内核酸含量,主要原理WNRWDFRET/PLT-OPLT-F激光633nm荧光染色聚次甲基噁嗪流式,9,2.阻抗+射频,主要原理RBC/PLT-I鞘流阻抗法,10,前鞘流：避免多颗粒同时通过宝石孔少计数避免颗粒侧流多计数后鞘流：避免颗粒回流多计数,血细胞通过电阻值发生变化脉冲被检测当血细胞通过检测部小孔时，电阻信号信号的大小与通过的细胞体积呈正比电阻变化的次数细胞数,3.SLS-血红蛋白法,HGB通道,十二烷基磺酸钠：无氰无毒,11,IGHPC,NRBCRETRET-HEIRF,IPF,幼稚细胞和异常标本的检出,粒系,红系,巨核系,12,0.7%,添加实验,幼稚细胞灵敏度高达,13,各通道检测原理,XE系列,XN系列,和XE相比较，LYMPH和MONO的散点群更加明确地得以划分。,原理：WDF通道,15,病例未分类样本改善,XE5000,XN2000,报警信息：原始细胞？异淋?有核红？白细胞散点图异常核左移？单核细胞增加？嗜碱细胞增加？幼稚细胞？,5分类NRBC0.9%,未分类NRBC?,报警信息：原始细胞？白细胞散点图异常核左移？单核细胞增加？幼稚细胞存在？,16,WDF通道中，对白细胞进行计数并分类为中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞以及嗜酸性粒细胞,同时定量检出幼稚粒细胞(IG%，#）以及异型淋巴细胞（,HFLC%，#）等的异常细胞。对相关异常参数的复检规则制定更具定量化。,1.WDF通道：IG和HFLC的定量参数,检测参数：NEUT,LYMPH,MONO,EO,IG,17,病例：IG增高病例,18,镜检图片：,Sysmex仪器对于异常细胞检出的灵敏度为0.7%,19,WDF通道的要点,散点图基本上和XE系列的DIFF通道无区别。试剂得以改良（溶血剂的作用较XE系列稳定。）新的SFLAS算法应用，使得LY和MO间距拉宽，除散点位置外还综合散点重心、形态等，使得得以更加明确地划分。,20,FSC：前向散射光,溶血剂：LysercellWNR染色液：FluorocellWNR,WNR散点图,SFL：侧向荧光,BASO,WBC,NRBC,Debris,2.WNR：有核红细胞计数为常规报告参数,New,嗜碱性粒细胞,淋巴细胞,单核细胞粒细胞（中性粒细胞嗜酸性粒细胞等）,有核红细胞红细胞,中,弱极弱,中,中极弱,(SFL)强,侧向荧光前向散射光,(FSC)强,项目：WBC,NRBC,BASO报警信息PLTClumps?,NRBCPresent,WBCAbnormalScattergram细胞膜通过,溶血,荧光,病例：外周血有核红病例,22,NRBC升高见于：,有效降低推片复检率,23,WNR通道WBC总数：9.67*109/L,24,WDF通道WBC总数：9.51*109/L,正常情况，两个通道WBC总数相差不大,25,由于在CBC模式下该通道用于WBC测定，因此可以在全体样本中测得NRBC计数，以及由NRBC数修正过的WBC数据。由于采用荧光染色进行检测，红细胞没有被染色，所以不存在红细胞溶血不良所造成的影响。（仪器评估检测时也未出现溶血不良的例子）删除“RBCLyseResistance?”的报警。,2.WNR通道要点：,26,SFL：侧向荧光,FSC：前向散射光,试剂溶血剂：LysercellWPC染色液：FluorocellWPC,SSC：侧向散射光,WBC,BlastWBCAbnLymph,Blast,WPC散点图AbnLymph,报警信息Abnormallymph?,Blasts?,Atypicallymph?,异常淋巴细胞原始细胞成熟白细胞,溶血,染色,侧向荧光前向散射光侧向散射光(SFL)(FSC)(SSC),中强弱中中,弱强弱强,弱弱弱强,HPC,HPC,3.WPC：通过REFLEX设置选择性检测,New,主界面,研究界面,HPC散点图,HPC通道测定时，HPC区域中出现的粒子显示为紫红色。(全血模式时显示为红色)。,HPC,28,外周血中，可见白细胞数增加、贫血，成熟淋巴细胞增加（93）。淋巴细胞的体积大约是红细胞体积的2倍左右，细胞质面积小，嗜碱性弱。核为类圆形，核染色质浓缩。核仁不显眼。另外，在标本上可见大量的破碎细胞核的轮廓。,病例（一）：(B-CLL)淋系白血病,29,外周血中，可见白细胞数增加、贫血、血小板数减少。原始细胞的形态为中型，核质比较低。核为类圆形，或可见切迹。核染色质为较大，且纤细，可观察到明显的核仁。零散地可见有Auer小体（）的原始细胞。另外，在核和细胞质中可观察到空泡。,病例（二）：(AML-M2)髓系白血病,30,使用WPC通道进行复检，可降低推片率,31,3.WPC通道要点：,选择性使用：通过reflex对怀疑类报警追加WPC检测在WPC通道，采用荧光染色可以检出类似AbnormalLymph和Blast的异常细胞。试剂无臭味：通过试剂的改良，区别与原先IMI通道。特异性高：在保持高灵敏度前提下，不仅区分髓系还能区分淋系。降低推片率，缩短TAT。异常淋巴细胞(AbnormalLymph)：易着色，体积较小。原始细胞(Blast)：不易被染色，体积较大。,32,4.原理：RET通道,稀释剂：CELLPACKDFL染色液：FluorocellRET,RET散点图,SFL：侧向荧光,FSC：前向散射光,项目RET,RET-He标志RETAbnormalscattergram,Fragments?,33,RET参考范围-卫生部正在操作。建议实验室也可建立自己的参考范围。,34,网织红细胞检测参数,RET-He:网织红细胞血红蛋白含量,LFR:低荧光强度网织红细胞比率,MFR：中荧光强度网织红细胞比率,HFR:高荧光强度网织红细胞比率,IRF：未成熟网织红细胞百分比,RET#%网织红细胞计数的绝对值和百分比,网织红检测参数,35,RET通道小结：,1.XN校准品种还有RET参数，具有溯源性。2.IRF：IRF是反映红系增生减低比较敏感的指标，IRF对肾性贫血的疗效判断具有重要价值。3.RET-HE:缺铁性贫血的鉴别诊断，IDA时，明显减低肾性贫血：建议EPO+铁剂治疗，同时检测RET-HE的变化,36,稀释剂：CELLPACKDFL染色液：FluorocellPLT,PLT-F散点图,SFL：侧向荧光,FSC：前向散射光,项目PLT,IPF标志PLTAbnormalscattergram,PLTClumps?,5.原理：PLT-F通道,37,SFL,PLT-O：颗粒,PLT-F：线粒体DNA,XN-3种检测通道检测PLT,PLT-I：颗粒大小,DC,低值血小板检测更加准确,38,一例烧伤患者的XNPLT-F散点图,Fragmentated,一例烧伤患者的XEPLT-O散点图,ErythrocytErythrocytFragmentated,erythrocytes,erythrocytesPlateletsPlatelets使用试剂的区别：,PLT-O、PLT-F染色试剂的区别,39,低值血小板重复性,显微镜见极少量RBC碎片,显微镜见1%RBC碎片,显微镜见极少量RBC碎片,显微镜见少量RBC碎片,PLT-F通道检测低值血小板的重复性最佳。,40,以PLT-F结果为准,病例：红细胞碎片对血小板计数的干扰,41,5.PLT-F通道要点：,在PLT-F通道，使用了不同于RET通道的荧光染料噁嗪，而PLT-O的荧光染料是聚次甲基+噁嗪。噁嗪对DNA极其敏感由于选择性染色血小板，故网织红细胞难以染色。另外，也不易受到红细胞碎片的影响。血小板低值样本，5倍计数，提高精密度的同时保证了检测的准确度。,42,XE/XT体液模式界面及散点图,BF报告参数,BF研究参数,43,WDF:主画面,WDF(EXT):服务画面,体液BF模式：散点图,WDF散点图,WDF(EXT)散点图,WDF散点图,WDF(EXT)散点图,44,InternationalBusinessManagement,XN/XE体液功能的变化,45,统一、完整的质控校准体系,完整的质