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(食品科学与工程专业论文)魔芋葡甘聚糖螺旋微观构象及性质研究.pdf.pdf 免费下载
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p h dd i s s e r t a t i o nf o rf u ji a na g r i c u l t u r ea n df o r e s t r yu n i v e r s i t y s t u d yo nh e l i c a lm i c r o s c o p i c c o n f o r m a t i o na n d p r o p e r t yo fk o n j a c g l u c o m a n n a n c l a s so f d i s c i p l i n e :e n g i n e e r i n gs c i e n c e f i r s tg r a d ed i s c i p l i n e :f o o ds c i e n c ea n de n g i n e e r i n g s e c o n dg r a d ed i s c i p l i n e :p r o c e s s i n ga n ds t o r a g eo f a g r i c u l t u r ep r o d u c t s r e s e a r c hf i e l d :f o o dn u t r i t i o na n ds a f e t y p o s t g r a d u a t e :j i a nw e n j i e s u p e r v i s o r :p r o f p a n g j i e s u b m i t t e dt i m e :m a r c h ,2 011 c o l l e g eo f f o o ds c i e n c e f u j i a na g r i c u l t u r ea n df o r e s t r yu n i v e r s i t y f u z h o u3 5 0 0 0 2 p r c h i n a 独创性声明 本人声明,所呈交的学位( 毕业) 论文,是本人在指导教师的指导下独立完成 的研究成果,并且是自己撰写的。尽我所知,除了文中作了标注和致谢中已作了答 谢的地方外,论文中不包含其他人发表或撰写过的研究成果。与我一同对本研究做 出贡献的同志,都在论文中作了明确的说明并表示了谢意,如被查有侵犯他人知识 产权的行为,由本人承担应有的责任。 学位。毕业,论文作者亲笔签桶乏岳日期:力c 论文使用授权的说明 本人完全了解福建农林大学有关保留、使用学位( 毕业) 论文的规定,即学校 有权送交论文的复印件,允许论文被查阅和借阅;学校可以公布论文的全部或部分 内容,可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文。 保密,在年后解密可适用本授权书。 口 不保密,本论文属于不保密。 学位c 毕业,论文储亲笔签诵也啸列一_ 指导教师亲笔签名: 日期: 福建农林大学博士学位论文魔芋葡甘聚糖螺旋微观构象与性质研究 目录 第一章引言l 1 1 本课题的研究背景、意义及主要工作1 1 2 多糖构象及其研究方法4 1 3 分子模拟概述1 4 1 4 葡甘聚糖结构与溶液构象研究进展”2 4 1 5 超高静压在生物大分子领域上的应用3 l 第二章葡甘聚糖分子螺旋结构形成机理及稳定性研究;3 4 0 前言m 3 4 1 0 材料与方法3 4 1 1 利料3 4 1 2 方法:3 4 1 2 1l m 的纯化”3 4 1 2 2k g m 溶液旋光性分析:3 5 1 2 3 分子模型的建立”3 5 1 2 4 分子模型的预优化“3 5 1 2 5 真空中分子动力学模拟3 5 1 2 6 周期边界条件下分子动力学模拟m 3 5 2 0 结果与分析“3 6 2 1 聚合度对分子链形状的影响3 6 2 2 不同聚合度下葡甘聚糖链的能量变化曲线3 8 2 3 乙酰基对单链形态和稳定性的影响3 9 2 4 分子链的非键合作用力分析一t ”4 0 2 5 温度对螺旋构象的影响- 4 2 3 0 讨论4 3 4 0 参考文献”4 4 第三章脱支链葡甘聚糖单链螺旋构象的研究4 6 0 前言4 6 1 0 方法4 6 1 1 分子模型的建立一4 6 1 2 分子模型的预优化叩一:4 7 1 3 真空中分子动力学模拟4 7 1 4 周期边界条件下分子动力学模拟4 7 2 0 结果与分析“4 7 2 1 支链对分子链构象的影响4 7 2 2 支链对分子构象能量的影响:4 9 2 3 聚合度对分子链形状的影响5 0 2 4 不同聚合度下葡甘聚糖链的能量变化曲线5 l 2 5 动力学模拟过程构象变化趋势5 2 2 6 分子链的非键合作用力分析5 3 2 7 温度对构象的影响;j 5 5 3 0 讨论“”:“5 6 4 0 参考文献3 :5 7 j 福建农林大学博士学位论文魔芋葡甘聚糖螺旋微观构象与性质研究 第四章葡甘聚糖单螺旋分子链水化膜研究5 9 0 前言5 9 1 0 方法5 9 1 1 分子模型的建立:6 0 1 2 模型优化。6 0 1 2 1 溶剂环境能量优化,6 0 1 2 2 系统能量优化6 0 1 2 3 位置限制分子动力学模拟6 0 1 2 4 全系统分子动力学模拟“6 0 1 3 数据处理方法6 0 2 o 结果与分析6 0 2 1 体系均方根位移一6 0 2 2 水分子径向分布函数6 2 2 3 不同构象体系势能6 3 2 4 氢键位点及数量“6 3 3 0 讨论:”6 5 4 0 结论6 5 5 0 参考文献”6 5 第五章水溶液中葡甘聚糖硼复合物形成的分子模拟6 8 0 前言6 8 1 0 方法6 8 1 1k g m 分子模型的建立6 8 1 2 硼酸根分子模型的建立与优化7 0 1 3 分子对接7 l 1 4 分子动力学模拟- 7 2 1 5k g m - :硼砂复合物溶液的制备“7 2 1 6k g m - :硼砂复合物溶液旋光性分析,7 3 1 7k g m - 硼砂复合物溶液圆二性分析7 3 2 0 结果与分析7 3 2 1 复合物体系的能量变化7 3 2 2 复合物体系回转半径一7 4 2 3 硼酸根离子均方根位移7 5 2 4 硼酸根离子与k g m 分子间的径向分布函数”7 5 2 5 复合物微观形态与分子间作用力分析7 6 2 6 温度对复合物构象的影响一7 7 3 0 结论与讨论:- 8 0 4 0 参考文献o ”:”:8 0 第六章不同溶液中k g m 螺旋构象研究一8 2 0 前言一8 2 1 0 方法“”8 2 1 1k g m 模型的建立与预优化:厶n8 2 1 2 溶液分子动力学模拟_ 8 3 1 3k g m - 金属离子溶液的制各8 4 1 4 不同p h 值k g m 溶液的制备一8 4 n 福建农林大学博士学位论文魔芋葡甘聚糖螺旋微观构象与性质研究 1 5k g m 溶液圆二色谱的测定8 5 1 6k g m 溶液旋光性分析8 5 2 0 结果与分析8 5 2 1 金属离子溶液中k ( 瓤分子均方根位移”8 5 2 2 酸碱性溶液中k c m 分子均方根位移8 8 2 3 金属离子溶液中k g m 分子回转半径”8 9 2 4 酸碱性溶液中k g m 分子回转半径9 l 2 5 溶液体系势能”9 2 2 6k o m 微观构像及非键合作用力分析一9 2 2 7k g m 圆二色谱9 7 2 8k g m 溶液旋光度1 0 1 3 ,0 讨论1 0 2 4 0 参考文献1 0 4 第七章微波处理对k g m 溶液行为及凝胶性能的影响”1 0 5 0 前言1 0 5 1 o 材料与方法1 0 5 2 o 结果与讨论1 0 6 2 1 微波辐照对k g m 凝胶强度的影响一1 0 6 2 2 微波辐照对k g m 特性粘度的影响一1 0 7 2 3 微波辐照对k g m 胶液收缩率的影响1 0 7 2 4 微波辐照对k c m 凝固点的影响一”1 0 8 2 5 微波辐照对l m 旋光度的影响1 0 8 2 6 微波辐照对圆二色性的影响,“1 0 9 3 0 总结与讨论1 1 0 4 0 参考文献o ”11 0 第八章超高静压处理对k g m 螺旋结构与性质的影响”11 2 0 前言”11 2 1 0 材料”j 11 2 2 o 方法1 1 2 2 1 刚果红实验方法一11 2 2 2 圆二色谱测定:1 1 2 2 3 拉曼图谱测定一厶1 1 2 2 4 凝胶样品质构测定,1 1 2 2 5 样品超高静压处理j 一 ”11 3 3 , 0 结果与分析“11 3 3 1 刚果红实验”1 1 3 3 2 圆二色谱图:“11 7 3 3 拉曼光谱118 3 4 质构仪数据分析m 一一11 8 4 0 总结与讨论一”1 2 2 5 0 参考文献_ 1 2 2 第九章结论,一1 2 4 福建农林大学博士学位论文魔芋葡甘聚糖螺旋微观构象与性质研究 摘要 葡甘聚糖( k o n j a cg l u c o m a n a n ,简称k g m ) 是魔芋植物中存在的一种水溶性极好的、高 分子量多糖,具抗肿瘤、提高机体免疫力等功能。螺旋结构是多糖性能与生物活性的基石, 螺旋微观构像变化是其性能与生物活性变化的原因。国内外关于k g m 螺旋结构的研究,仅 发现了螺旋结构的存在而没有深入分析其形成规律及稳定机理,更没有深入探讨不同外场条 件下螺旋微观构像的变化,对不同外界条件下k g m 螺旋微观构像及溶液行为认识的块乏已成 为制约k c m 深加工及生物活性调控的瓶劲。 本文尝试通过现代分析手段结合分子模拟等方法研究k g m 分子螺旋形成机理、稳定性 及其氢键位点,单螺旋分子链水化膜特点,不同外场如离子离场、微波场、超高静压场下k g m 螺旋微观构像的变化规律,初步探索其螺旋结构及其形成机理,旨在为解决k g m 生物功能活 性调控提供结构基础,特别是一些有关天然生物大分子螺旋结构形成原因的科学问题提供新 的方法。 主要研究结果: 1 葡甘聚糖分子螺旋结构形成机理 k g m 分子构象是一种非典型的螺旋结构,乙酰基是维持k g m 分子螺旋结构的重要基团, k g m 分子聚合度显著影响其螺旋结构的形状与稳定性,真空中对分子链构象影响最大的非键 合作用力是静电作用,而水溶液中氢键对分子链构象的影响最大,温度对螺旋结构具有一定 的可逆破坏作用,至3 4 1 k 时螺旋结构完全消失,分子链呈现无规线团结构。温度降低时, 螺旋结构部分恢复。 2 脱支链葡甘聚糖单链螺旋构象 为研究支链对k 叫分子螺旋结构的影响规律,及脱支链k g m 分子链构象形态。采用分子 动力学模拟的研究方法发现支链是影响k g m 分子螺旋结构特征的重要基团,脱支链k g m 分子 链的螺旋构象是由局部的折叠片段组合而成;脱除支链后的k g m 的构象更稳定,且真空中对 分子链构象影响最大的非键合作用力仍是静电作用,水溶液中氢键能对分子链构象的影响最 大? 当温度高于3 4 3 k 时脱支链k g m 的螺旋构象消失,分子链呈现直链伸展状态。 3 葡甘聚糖单螺旋分子链水化膜 为研究水溶液中葡甘聚糖单链螺旋分子链周围的水分子分布及其在水溶液中的优势构象,采 用分子动力学模拟方法对左、右螺旋分子链的水化膜、势能值、氢键网络进行研究对比。结 果表明左旋单螺旋分子链的水化膜、k g m 势能值及与水分子形成的氧键网络均优于右旋单螺 福建农林大学博士学位论文魔芋葡甘聚糖螺旋微观构象与性质研究 旋分子链,左旋单螺旋分子链是葡甘聚糖在水溶液中的优势构象。 4 葡甘聚糖硼砂复合物构象 利用分子动力学模拟与实验相结合的方法从分子水平上研究了水溶液中葡甘聚糖 衅q 田与硼酸根离子复合物的形成对分子内配合物进行了模拟研究,体系的能量、径向分 布函数和均方根位移变化的结果表明,k g m 与b o r a t e 离子可形成分子内螺旋型配位复合物, 硼酸根离子通过与k g m 中的m a l l 、g l u 中c 6 上的o h 及0 5 形成氢键形成复合物,氢键是维持 复合物稳定的主要非键合作用力;温度对复合物的螺旋构象影响较小,复合物可能通过螺旋 链聚集排列方式形成凝胶。 5 不同溶液环境下k g m 螺旋构象 采用分子动力学模拟与圆二色性、旋光性相结合的研究方法研究不同碱土金属离子、p h 值溶液对魔芋葡甘聚糖( k g m ) 分子螺旋结构的影响规律及稳定性机理。结果表明金属离子 溶液中l 【g m 分子链形成的螺旋腔增大,但仍保持了完整的螺旋构像,h + 对k g m 构像的影响 较小,而o h 使l | m 部分螺旋分子链解开,呈直链伸展构像。金属离子通过改变溶液体系的 静电势分布,而对k g m 螺旋微观构像进行调节,矿对k g m 分子链的非键合作用力没有显著影 响,而碱性溶液中o r 显著增强了氢键对分子链构象的影响程度。采用分子动力学模拟与圆 二色性、旋光性相结合的方法是研究溶液中k g m 螺旋结构的一种有效手段。 6 微波处理对k g m 溶液行为及凝胶性能的影响 探讨微波处理条件对k g m 凝胶强度、凝固点、特性粘度、胶率收缩率和旋光性的影响。 结果表明,在3 3 输出功率,l m i n 微波辐照后,k g m 的凝胶强度和特性粘度略有上升,随着时 间的延长,开始呈直线下降趋势。而6 6 、1 0 0 输出功率下,各项物理指标均随时间呈直线 下降趋势。微波处理使部分螺旋结构被破坏,微波对k g m 的溶液行为及凝胶性能具有显著 影响 7 超高静压处理对k g m 螺旋结构与性质的影响 研究超高静压压处理对k 1 3 m 冈0 果红络合物、圆二色谱、拉曼光谱、质构性质如粘附力。 凝胶强度及粘性的影响。研究结果表明高压处理有助于k g m 与刚果红的络合,处理后k g m 与刚果红的特异性氢键结合作用显著增强,经高压处理后络合物的a m 戤与k ( 3 m 浓度仍里 一元二次方程关系,高压处理保留了k g m 的螺旋结构,同时高压处理对k g m 的凝胶性能 没有显著改变,即k g m 对高压处理有显著的稳定性。 n 望垄奎签盔兰苎主堂垡垒茎 一 魔芋葡甘聚糖螺旋微观构象与性质研究 二二= 二= - = ,二:= := : 关键词:葡甘聚糖;螺旋结构;机理;支链;分子动力学模拟; 氢键位点;分子对接; 复合物;微观构象;溶液行为;凝胶性能 t i t 福建农林大学博士学位论文魔芋葡甘聚糖螺旋微观构象与性质研究 e n v i r o n m e n t sa l s oh 、恤,tb 僦咖d i e d li th a sb e c ;o 小a 蛔妇细d e 叫yd e v e l 删a n d b i o l o g i c a lf u n c t i o nr e g u l a t i o no f k o n j a cg l u c o m a n n a n 1 i nt h i sw o r k , w ed i s c l o s ef o r m a t i o ns i t e s ,p a r a m e e r s ,h y d r o g e nb o n ds i t e so ft h eh e l i c a l 蝴e s p i 她t h e 漱。fi o 地,二c 硼上d 二趾dh 灿s t a 如p 懈啪吼h e l i c a l m i c r o s c o p i cc o n f o r m a t i o nw i t he x p e r i m e n t a la n dt h e o e t i c a lm e t h o & f u r t h e r m o r e , t h eh e l i c a l s t r u o t u ma n df o r m a t i o nm e c h a n i s mw a sr e s e a r c h e d ,;o 嬲t op r o v i d et h es t r u c t u r a lb a s i sf o r r e g u l a t i o no fb i o l o g i c a lf u n c t i o no fk g m ,w h i c hw i l lp a v ean o ww a yf o rt h es t u d yo fl m t u r a l b i o l o g i c a lm o l e e u l e m a i nr e s u l t s 1f o r m a t i o nm e c h a n i s mo f k o n j a og l u c o m a n n a nh d i c els t r u c t u r e t h em o l e c u l a rc o n f o r m a t i o no fk g mi san o n - t y p i c a lhe l i c a ls 缸 u c t u r e i nd e t a i l ,h e l i c a ls t r u c t u r e o fk g mi sm a i n l ys u s t a i n e db ya c e t y lg r o u p ,w h o s ej出a n ds t a i l i t yi sa f f e c t e db ym o l e c u l a r p o l y m e r i z a t i o nd e g r e eo fk g m i nv a o u ma m o n gt tl en o n - b o n d i n gi n t e r a c t i o n s ,e l e c t r o s t a t i c f o r c ei st h eg r e a t e s tf a c t o ra f f e c t i n gi t sh e l i c a ls t r u c t 删e ,b u ti nw a t e rs o l u t i o n , h y d r o g e nb o n d a f f e c t st h eh e l i c a la r r a n g e m e n tg r e a t l y t oo u ri n t ,:r e s t , t e m p e r a t u r ee x h i b i t sar e v e r s i b l e d e s t r o y i n ge f f e c tt os o m ee x t e n t ;t l i eh e l i c a ls l r u o t u r ew i l ld i s a p p e a rc o m p l e t e l ya n dp r e s e n ta r u l o l e s sc l e w - l i k ea r r a n g e m e n tf i l l3 4 1 i c 2s i n g l eh e l i c a lc o n f o r m a t i o no f k o n j a cg h c o m a n n a nw i t h o u ts i d ec h a i n t oi n v e s t i g a t et h ee f f e c to fs i d ec h a i no nh e 1 i c a ls t r u c t u reo fk o n j a cg l u c o m a n n a n ( g g m ) a n dt h e c o n f o r m a t i o no fd e - s i d eo h a i nk o n j a cg l u c o m a n n a n ,n o l e c u l a rd y n a m i s i m u l a t i o nw 鹋u s e d t h er e s e a r c hi n d i c a t e dt h a tt h es i d eo h a i ng r e a t l ya蕾e c t e dt h ec h a r a c t e r i s t i c so ft h eh e l i c a l c o n f o r m a t i o no fk g m ,a n di t sc o n f o r m a t i o nw a s 珥o s e do fs e v e r a lp a r t i a lf o l d i n gf r a g m e n t s i v 福建农林大学博士学位论文魔芋葡甘聚糖螺旋微观构象与性质研究 1 1 地c o n f o r m a t i o no f d e - s i d ec h a i nk ( mw a sm o s t a b l et h a nk g mw i t hs i d ec h a i n e l e c t r o s t a t i c w a st h em o s ti m p o r t a n tn o n - b o n d e df u n c t i o na f f e c t i n gm o l e c u l a rc h a i ni nv a c u u m , a n dh y d r o g e n b o n di ns o l u t i o n ;w h e nt e m p e r a t u r ei n c r e a s e dt o3 4 3 k , t h eh e l i c a ls t r u c t u r ed i s a p p e a r e df u l l y , a n d t h em o l e c u l a rc h a i nw a si ne x t e n s i o n a ls t r a i g h tc h a i n 3h y d r a t i o ns h e ho fs i n g l e - h e l i c a lo f k o n j a cg l u c o m a n n a n t h el o c a lm a x i n l a o fw a t e rd e n s i t yn e 暂k o n j a cg l u c o m a n n a n , a sw e l la st h ed o m i n a n t c o n f o r m a t i o no ft h es y s t e mw e r es t u d i e db ym o l e c u l a r d y n a m i c su n d e rt h ew a t e re n v i r o n m e n t t h er e s u l t si n d i c a t et h a tt h eh y d r a t i o ns h e n ,p o t e n t i a le n e r g y , a n di t sh y d r o g e nb o n dn e t w o r k 谢t h w a t e rb r i d g e so ft h el e f t - h a n d e ds i n g l e - h e l i xc o n f o r m a t i o nw a sf a v o r e dc o m p a r e dt ot h o s eo f f i g h t - h a n d e ds i n g l e - h e l i xc o n f o r m a t i o n t h i sw o r ks u g g e s t st h a tt h el e f t - h a n d e ds i n g l e - h e l i x c o n f o r m a t i o nw a s t h ed o m i n a n tc o n f o r m a t i o no f k g mi nw a t e re n v i r o n m e n t 4c o m p l e xo fk o n j a cg l u c o m a n n a nw i t hb o r a t ei nw a t e r t h ec o m p l e xo fk o n j a og l u c o m a n n mw i t hb o r a t ei nw a t e rw a si n v e s t i g a t e db ym o l e c u l a r d y n 呦i cs i m u l a t i o na n de x p e r i m e n t a lm e t h o d t h ee n e r g y , r a d i c a ld i s t r i b u t i o nf u n c t i o no fb o r a x i o n , a n dn m 粗s q u a r ed i s p l a c e m e n to ft h ec o m p l e xw a ss t u d i e dd u r i n gt h es i m u l a t i o n t h er e s u l t s i n d i c a t et h a tt h eh d i c a l c h a i no fk g ma n db o r a t ei o nf o r m e dc o m p l e xw h i c hh a sh e l i c a l c o n f o r m a t i o n 髓eh y d r o g e nb o n d si nt h ec o m p l e xc a nb ef o u n da t - 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