高考生物一轮复习（抓纲扣本+剖题探法）专题二 微生物的培养与应用课件 新人教版选修1.ppt

专题二微生物的培养与应用 1 培养基 1 概念 人们按照微生物对的不同需求 配制出供其生长繁殖的营养基质 抓纲扣本 夯实基础 一 微生物的实验室培养 营养物质 3 营养构成 各种培养基一般都含有水 氮源和无机盐 不同培养基还需满足不同微生物对ph 特殊营养物质以及o2的要求 碳源 液体培养基 琼脂 等凝固剂 2 无菌技术 1 常用的灭菌方法有 灼烧灭菌 干热灭菌 2 消毒方法有 酒精擦拭双手和用消毒水源等 3 实验后 所有用过的培养基 培养液等都要统一进行后再丢弃 否则会造成生物污染 高压蒸汽灭菌 煮沸消毒法 氯气 灭菌 3 实验操作 1 牛肉膏蛋白胨固体培养基的制备计算 溶化 灭菌 2 微生物的接种方法 平板划线法 通过接种环在琼脂固体培养基表面的操作 将聚集的菌种逐步分散开来 稀释涂布平板法 将菌液进行一系列的梯度稀释 然后将不同稀释度的菌液分别涂布到 表面 进行培养 称量 倒平板 连续划线 1 分离原理 土壤中细菌之所以能分解尿素 是由于它们能合成 这种物质在把尿素分解成无机物的过程中起作用 以尿素为唯一氮源的培养基能促进分解尿素的细菌的生长和繁殖 并抑制或阻止其他微生物的生长 从而将目的菌分离 二 土壤中分解尿素的细菌的分离和计数 脲酶 催化 2 统计菌落数目 统计样品中的活菌一般用法 3 实验流程 土壤取样 制备 微生物的培养与观察 细菌的计数 稀释涂布平板 培养基 1 纤维素酶是一种复合酶 包括c1酶 cx酶和葡萄糖苷酶 前两种酶使纤维素分解成纤维二糖 第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖 三 分解纤维素的微生物的分离 2 纤维素分解菌的筛选原理 1 可以与纤维素形成红色复合物 但并不与发生这种反应 2 纤维素分解菌能产生纤维素酶分解纤维素 从而使菌落周围形成透明圈 3 土壤中纤维素分解菌的筛选方案土壤取样 培养 稀释 将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上 挑选产生的菌落 刚果红 纤维二糖和葡萄糖 选择 梯度 透明圈 典例1 细菌培养过程中 分别采用了高压蒸汽 酒精 火焰灼烧等几种不同的处理方法 这些方法可依次用于消灭或杀灭哪些部位的杂菌 剖题探法 突破考点 考点一培养基的种类及配制 a 接种针 手 培养基b 培养基 手 接种针c 手 接种针 培养基d 培养基 接种针 手 解析 高压蒸汽 酒精 火焰灼烧的处理方法可依次用于消灭或杀灭培养基 手 接种针等处的杂菌 答案 b 考点突破 1 培养基类型 特别提醒 1 加入培养基中的凝固剂 如琼脂 一般不能被微生物利用 只起到凝固作用 2 选择培养基一般只生长具有特定目的的微生物 鉴别培养基可以存在其他微生物 而且能鉴别特定的微生物 2 配制牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤及注意事项 1 步骤 计算 称量 溶化 灭菌 倒平板 2 注意事项 倒平板的温度一般在50 左右适宜 温度过高会烫手 过低培养基又会凝固 平板需倒置 这样既可使培养基表面的水分更好地挥发 又可防止皿盖上的水珠落入培养基 造成污染 3 消毒与灭菌 变式训练 1 如表所示为某微生物培养基的配方 请回答相关问题 1 该培养基按物理性质分属于 培养基 无论配制何种培养基 在原料称量 溶解之后要 然后分装 包扎并灭菌 常用的灭菌方法是 2 根据培养基的成分判断 该培养基能否用于分离土壤中分解尿素的细菌 原因是 3 为检测尿素分解菌是否存在 还应加入 如果存在 将出现 反应 4 微生物常用的接种方法有 答案 1 固体调ph高压蒸汽灭菌 2 不能培养基中含有nh4no3 尿素不是唯一氮源 3 酚红红色 4 平板划线法或稀释涂布平板法或稀释混合平板法 考点二微生物的纯化培养技术 典例2 平板划线法和稀释涂布平板法是纯化微生物的两种常用方法 下列描述正确的是a 都不需用到固体培养基b 都可以不用进行无菌操作c 都要将菌液进行一系列的梯度稀释d 都会在培养基表面形成单个菌落 解析 两种操作方法都要用到固体培养基 并进行无菌操作 最终在培养基的表面会形成单个菌落 稀释涂布平板法需要将菌液进行一系列的梯度稀释 而平板划线法不需要 答案 d 考点突破 1 原理 在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞 使其长成单个的菌落 这个菌落就是一个纯化的细菌菌落 2 方法 平板划线法 稀释涂布平板法 1 平板划线法 平板划线法中细胞的分离和稀释过程发生在接种环在固体平板表面上的移动划线过程中 在线的开始部分 微生物往往连在一起生长 随着线的延伸 菌数逐渐减少 最后可能形成纯种的单个菌落 如下图 特别提醒 第一次划线及每次划线之前都需要灼烧接种环灭菌 灼烧接种环之后 要冷却后才能伸入菌液 以免温度太高杀死菌种 划线时最后一区域不要与第一区域相连 划线用力大小要适当 防止用力过大将培养基划破 2 稀释涂布平板法 系列稀释操作 图1 a 将分别盛有9ml水的6支试管灭菌 并按101 106的顺序编号 b 用移液管吸取1ml培养的菌液 注入101倍稀释的试管中 用手指轻压移液管上的橡皮头 吹吸3次 使菌液与水充分混匀 c 从101倍稀释的试管中吸取1ml稀释液 注入102倍稀释的试管中 重复b步混匀操作 以此类推 直到完成最后1支试管的稀释 特别提醒 移液管需要经过灭菌 操作时 试管口和移液管应在离火焰1 2cm处 涂布平板操作如图2所示 特别提醒 稀释涂布平板操作复杂 各个细节均应保证 无菌 具体如下 1 酒精灯与培养皿的距离要合适 2 吸管头不要接触任何其他物体 3 吸管要在酒精灯火焰周围使用 变式训练 2 尿素是一种重要的农业肥料 需经细菌的分解才能更好地被植物利用 生活在土壤中的微生物种类和数量繁多 请分析回答下列从土壤中分离分解尿素细菌的有关问题 1 图中是利用 法进行微生物接种 把聚集的菌种逐步 到培养基的表面 除此方法外 常用的微生物接种方法还有 写一种 2 如果要对培养的菌落进行纯化 在培养基上划线操作中 操作的第一步及每次划线之前都要灼烧接种环 目的是对接种环进行 灼烧的接种环冷却后才能接种的原因是 3 下面是两种培养基配方 表1a培养基配方表2b培养基配方 配制培养基的操作步骤是 用字母顺序回答 a 倒平板b 计算c 溶化d 称量e 灭菌 通常培养基采用 法灭菌 在倒平板操作时 平板冷凝后 应将平板倒置 目的是 如果要分离土壤中能分解尿素的细菌 应选择上述 a b 培养基配方 在该培养基中加入 指示剂 可初步鉴定出该种细菌能否分解尿素 据b培养基的成分 所培养微生物的同化作用类型是 4 如果进一步从尿素分解菌中提取出dna 利用pcr技术扩增 则每次循环复制可为 三步 尿素分解菌能分解尿素的直接原因是它们能合成 该物质被提取出后的纯化方法通常是 答案 1 平板划线稀释 分散 分离 稀释涂布平板法 2 灭菌防止高温杀死需接种的微生物 3 bdcea 高压蒸汽灭菌防止培养皿内壁上出现的冷凝水圬染培养基 a酚红 异养型 4 变性 复性 延伸脲酶凝胶色谱法 典例3 下列关于微生物分离和培养的叙述 不正确的是a 分离土壤中不同微生物 要采用不同的稀释度b 测定土壤样品中的活菌数目 常用显微镜直接计数法c 提纯和分离严格厌氧型微生物 一般不用稀释涂布平板法d 分离能分解尿素的细菌 要以尿素作为培养基中唯一氮源 考点三微生物的筛选与计数 解析 显微镜直接计数法计数的是活菌和死菌的数目 测定土壤样品中的活菌数目常用平板计数法 答案 b 考点突破 1 筛选菌株 1 原则 人为提供有利于目的菌生长的条件 同时抑制或阻止其他微生物的生长 2 菌株筛选原理的比较 2 统计菌落数目的方法 1 显微镜直接计数法 原理 利用特定细菌计数板或血细胞计数板 在显微镜下计算一定容积的样品中微生物的数量 方法 用计数板计数 缺点 不能区分死菌与活菌 2 间接计数法 活菌计数法 原理 当样品的稀释度足够高时 培养基表面生长的一个菌落 来源于样品稀释液中的一个活菌 通过统计平板上的菌落数 就能推测出样品中大约含有多少活菌 计算公式 每克样品中的菌株数 c v m 其中 c代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数 v代表涂布平板时所用的稀释液的体积 ml m代表稀释倍数 操作 设置重复组 增强实验的说服力与准确性 同时为了保证结果准确 一般选择菌落数在30 300的平板进行计数 变式训练 3 生产实践中应用的菌种主要来自土壤 从土壤中分离微生物的实验流程如下 土壤取样 选择培养 梯度稀释 鉴别培养 请回答下列有关问题 1 将土壤浸出液接种到特定培养基上 可以将酵母菌从混杂的微生物群体中分离出来 获得纯种酵母菌 这一过程叫做 在培养酵母菌的过程中 对培养基 接种环常采用的灭菌方法分别是 2 在使用酵母菌发酵生产酒精的过程中 影响酵母菌酒精发酵的主要因素有 常使用 的方法从发酵液中提取纯酒精 3 从土壤中分离纤维素分解菌 最好选择在 环境中采集土样 所选择的培养基应以 作为唯一碳源 4 纤维素分解菌能够合成纤维素酶 为了使纤维素酶反复使用 可以对纤维素酶进行 处理 处理的方法有吸附法 共价键结合法和 法 解析 1 在微生物培养过程中 培养基常用高压蒸汽